脓毒症患者外周血淋巴细胞自噬相关基因 Beclin-1和LC3的变化研究

目的 观察脓毒症患者外周血淋巴细胞自噬的变化,并探讨其临床意义。 方法 选取10例健康人、20例普通感染患者和20例脓毒症患者,分别设为H组、I组和S组,根据预后再将S组亚组分析分为存活组(14例)和死亡组(6例),收集年龄、性别、感染部位、原发病、白细胞(WBC)、血小板(PLT)、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、白蛋白、血糖和APACHEⅡ评分等资料,同时抽取外周血分离淋巴细胞,检测Beclin-1和LC3 mRNA相对表达量。 结果 3组年龄、性别、原发病和感染部位比较差异无统计学意义(均P>0.05),3组WBC、PLT、ALT、Cr、白蛋白和血糖比较差异有统计学意义(均P<0.01);I组和S组APACHEⅡ评分比较差异有统计学意义(P<0.01);3组外周血淋巴细胞中Beclin-1和LC3 mRNA的相对表达量比较差异有统计学意义(均P<0.01),存活组和死亡组之间Beclin-1和LC3 mRNA的相对表达量比较差异有统计学意义(均P<0.01);APACHEⅡ评分与Beclin-1具有线性负相关(r=-0.452,P<0.001),APACHEⅡ评分与Beclin-1之间的线性模型方程式:Y=-20.83+41.67X;APACHEⅡ评分与LC3具有线性负相关(r=-0.641,P<0.001),APACHEⅡ评分与LC3之间的线性模型方程式:Y=-6.25+62.5X。在诊断脓毒症方面,Beclin-1:ROC曲线下面积为0.791,标准误为0.070,P<0.001,LC3:ROC曲线下面积为0.851,标准误为0.066,P<0.001。 结论 脓毒症外周血淋巴细胞自噬水平明显降低,可以反映脓毒症的免疫状态,并且在临床上可以作为普通感染和脓毒症的判断指标,为脓毒症诊断提供新思路。      

大鼠急性肾损伤后自噬相关蛋白Beclin-1的表达

目的研究自噬相关蛋白Beclin-1在大鼠急性肾损伤伤后肾组织中的表达情况,并探讨其意义。方法选用24只雄性大鼠sD大鼠,体重250±30g,按随机数字表法分为两组,假手术组（Sham组）和缺血-再灌注组（I／R组）;各组于再灌注后12、24、48h3个相应时间点收获肾脏标本。HE染色观察肾脏病理变化,免疫组化法测定自噬相关蛋白Beclin-1的表达情况,透射电镜观察。肾脏组织自噬现象。结果与假手术组比较,大鼠急性肾损伤48h,肾小管细胞Beclin-1蛋白的表达最强（P〈0．05）,再灌注损伤后48h,自噬体数量显著增多,细胞内出现染色质块状边集,核形态不规则的明显凋亡现象。结论大鼠急性肾损伤后自噬相关蛋白Beclin-1的表达上调,说明大鼠肾急性。肾损伤后肾脏组组织自噬活性上调。     

自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中的表达及其相关临床意义,并分析其与根治性前列腺切除术后生化复发的相关性.方法 采用免疫组化Super Vision两步法检测132例前列腺癌组织及癌旁组织中Beclin-1的表达,并分析其与相关临床因素的关系.结果 在前列腺癌组织及癌旁组织中Beclin-1的表达率分别为38.6％及54.5％,差异有统计学意义(P=0.01).Beclin-1在Gleason评分中表现为评分越高,阳性表达率越低(P=0.011).前列腺癌组织中Beclin-1的表达与不同年龄(P=0.138)、家族史(P=0.686)及是否患者前列腺炎病史(P=0.895)等临床因素比较,差异无统计学意义.但在有无淋巴结转移(P =0.017)、有无骨转移(P =0.002)及行根治性前列腺切除术后有无生化复发(P =0.024)间差异均有统计学意义.结论 自噬基因Beclin-1在前列腺癌组织中表达下调,并与淋巴结转移、骨转移及生化复发有关,其表达下调可能参与前列腺癌的发生、发展.     

SCI大鼠脊髓前角细胞自噬相关蛋白Beclin-1表达的变化

目的：：观察脊髓全横断损伤对脊髓前角细胞Beclin-1表达的影响。方法：雄性Wistar大鼠随机分为模型组和假手术组,建立大鼠第2腰髓全横断损伤模型,分别于损伤后6h、1d、3d、7d、14d、21d取3-4腰髓,采用免疫荧光染色法观察大鼠脊髓前角细胞自噬相关蛋白Beclin-1的表达情况。结果：与假手术组相比,模型组损伤后各时间点大鼠脊髓前角Beclin-1免疫阳性细胞数明显升高(P＜0.01,P＜0.05）。脊髓损伤后3d脊髓前角细胞Beclin-1免疫阳性细胞数达到高峰,21d最低。结论：Beclin-1可能参与了神经元自噬状态的改变。     

外周血自噬基因Benlin-1表达联合APACHEⅡ评分预测脓毒症患者28 d病死的研究

目的 研究外周血自噬基因Benlin-1表达联合急性生理和慢性健康评分Ⅱ(Acute Physiology and Chronic Health EvaluationⅡ,APACHEⅡ)评分预测脓毒症患者28 d病死的价值。方法 选取脓毒症患者238例作为脓毒症组,同期体检的健康者104例作为对照组,采用Western blot检测外周血淋巴细胞中Beclin-1的表达。根据脓毒症患者28 d病死情况分为存活患者和病死患者,采用Kaplan-Meier曲线和ROC曲线分析Beclin-1表达及APACHEⅡ评分对28 d病死的预测价值,采用COX回归模型分析脓毒症患者28 d病死的影响因素。结果 脓毒症组外周血中Beclin-1的表达水平低于对照组(P<0.05);脓毒症组中病死患者外周血中Beclin-1的表达水平低于存活患者,APACHEⅡ评分高于存活患者(P<0.05);经Kaplan-Meier曲线和ROC曲线分析,Beclin-1表达、APACHEⅡ评分对脓毒症患者28 d病死具有预测价值;经COX分析,Beclin-1表达、APACHEⅡ评分是脓毒症患者28 d...     

Beclin-1调控DNA损伤反应的作用机制

Beclin-1是一种成熟的核心哺乳动物自噬蛋白,在DNA损伤反应中起重要作用.然而近年来越来越多的研究表明,Beclin-1通过非自噬依赖通路调控细胞凋亡、细胞周期检查点、DNA损伤修复,进而参与调控DNA损伤反应.尽管许多研究报道了Beclin-1参与DNA损伤反应,但确切的调控机制尚不清楚.本文对Beclin-1...     

Beclin-1在非小细胞肺癌中的表达与意义

目的 探讨白噬重要调控因子Beclin-1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其临床意义.方法 收集150例非小细胞肺癌患者的癌组织及癌旁组织并制成组织芯片,应用免疫组化的方法检测Beclin-l在肺癌组织及癌旁组织中的表达情况.分析Beclin-1的表达与肺癌不同临床参数之间的关系并对病例进行生存分析.结果 Beclin-1在肺癌组织的阳性表达率(26.00％)显著低于癌旁组织(82.00％)(P＜0.05);肺鳞癌组织中Beclin-1的阳性表达率(34.66％)显著高于肺腺癌(17.34％)(P＜0.05);Beclin-1的表达率在不同性别、年龄、分化程度、淋巴结转移、远处转移组间无显著差异(P＞0.05);Beclin-1阴性表达的非小细胞肺癌患者的生存率显著低于阳性表达的患者(P＜0.05).结论 Beclin-1可能是一个非小细胞肺癌治疗的新的靶点,有可能成为非小细胞肺癌病理类型判断的辅助指标和预后评估候选指标之一.     

Beclin-1、LC3-Ⅱ在宫颈病变组织中的表达及意义

目的 检测Beclin-1、LC3-Ⅱ在宫颈病变组织及HPV感染中的表达, 并探讨其临床意义。方法选取昆明医科大学第二附属医院妇科2014年10月至2016年6月的行宫颈癌筛查 (HPV、TCT) 的患者, 筛查结果任意一项异常患者均行宫颈活检, 最终选取病检结果为正常的宫颈组织40例 (其中HPV感染20例, 无HPV感染20例) ;CINⅠ30例;CINⅡ/Ⅲ30例;年龄范围为25～55岁;妊娠及已行宫颈治疗过的患者不纳入研究范围。用Western Blot法检测正常宫颈组织、CINⅠ及CINⅡ/Ⅲ组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ相对表达量。结果 (1) Beclin-1在正常的宫颈组织、CINⅠ及CINⅡ/Ⅲ组织中的相对表达量分别为 (0.561±0.041) 、 (0.421±0.018) 、 (0.351±0.016) ;LC3-Ⅱ在正常宫颈组织、CINⅠ及CINⅡ/Ⅲ组织中的相对表达量为 (0.683±0.027) 、 (0.435±0.029) 、 (0.325±0.017) ;Beclin-1、LC3-Ⅱ在3组间的相对表达量差异有统计学意义 (P <0.001) ;Beclin 1, LC3-Ⅱexist in the relative expression between the 3 group were statistically significant (P <0.001) (2) 病检结果为正常的宫颈组织中HPV感染组中Beclin-1和LC3-Ⅱ的相对表达量均显著低于无HPV感染组 (P <0.05) 。结论随着宫颈病变级别的增加, 自噬相关基因Beclin-1、LC3-Ⅱ的相对表达量呈下降趋势, 提示自噬基因活性下降或缺失可能参与宫颈癌的进展。     

自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3表达与口腔癌生物学特征的关系

目的:研究自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3表达与口腔癌生物学特征的关系。方法:取口腔癌组织和癌旁组织,检测Beclin-1和MAP1LC3的mRNA表达量;培养舌癌细胞株CTST-2和正常颊粘膜的原代上皮细胞,检测自噬标志分子(Beclin-1、MAP1LC3)以及促凋亡基因(P53、Caspase-3)、抗凋亡基因(生存素、Bcl-2、Bmi-1)的mRNA表达量。结果:舌癌、颊粘膜癌、牙龈癌、口底癌组织中Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量显著低于相应的癌旁组织;舌癌细胞CTST-2中Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量均低于正常粘膜细胞;舌癌细胞CTST-2中P53、Caspase-3的mRNA含量均低于正常粘膜细胞,与Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量呈正相关;CTST-2中生存素、Bcl-2、Bmi-1的mRNA含量均高于正常粘膜细胞,与Beclin-1、MAP1LC3的mRNA含量呈负相关。结论:口腔癌中自噬相关基因Beclin-1和MAP1LC3的表达量异常降低且与癌细胞的促凋亡基因、抗凋亡基因的表达具有显著相关性。     

老年脓毒症患者早期炎症因子水平及预后的相关性分析

目的：分析老年脓毒症患者早期炎症因子指标改变与病情严重程度及预后的相关性。方法：回顾性分析南京医科大学第一附属医院2020年9月—2022年3月入住老年重症监护病房的135例脓毒症患者的临床资料,根据年龄将患者分为老年组(≥65岁)和青壮年组(<65岁)。对其中年龄≥65岁的老年脓毒症患者,根据是否为脓毒症休克分为脓毒症休克组与脓毒症组,根据28 d病死率分为存活组及死亡组。分别比较以上各分组间的炎症因子指标;用Spearman相关分析法分析老年脓毒症患者白细胞计数(white blood cell,WBC)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白介素(interleukin,IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、干扰素(interferon,IFN)-γ、血小板(platelet,PLT)、淋巴细胞(lymphocyte,Lym)与APACHEⅡ评分的相关性;绘制受试者工作特征(receiver operating charact...     

血清sRAGE、HbA1C表达与脓毒症患者应激性高血糖及其预后相关性

目的 探究血清可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)、糖化血红蛋白(HbA1C)水平与脓毒症患者并发应激性高血糖(SHG)及其预后的关系。方法选取诊治的135例脓毒症患者为研究对象,按脓毒症患者发病24 h内是否发生SHG将其分为SHG组(56例)和正常血糖组(79例)。比较两组一般资料;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清sRAGE水平;采用高效液相色谱法检测血清HbA1C水平;比较两组患者28 d死亡率;比较不同预后脓毒症并发SHG患者血清sRAGE、HbA1C水平;利用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清sRAGE、HbA1C水平对脓毒症并发SHG患者死亡的预测价值。结果与正常血糖组相比,SHG组患者急性生理与慢性健康评定量表Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分、血清sRAGE、HbA1C水平、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、28 d死亡率均明显升高(P<0.05);与存活组相比,死亡组脓毒症并发SHG患者血清sRAGE、HbA1C水平均明显升高(P<0.05);血清sRAGE、HbA1C预测脓毒症并发SHG患者死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.826、0.859,截断值分别为1.70 ng/mL、9.47%,相应敏感度分别为76.7%、73.3%,特异度分别为80.8%、84.6%;两者联合预测脓毒症并发SHG患者死亡的AUC为0.904,其敏感度、特异度分别为86.7%、80.2%。结论血清sRAGE、HbA1C水平升高均与脓毒症并发SHG患者不良预后关系密切,检测血清sRAGE、HbA1C水平有利于临床判定脓毒症并发SHG患者的预后。     

老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤标志物、炎症因子与预后的相关性分析

目的 探讨老年脓毒症合并心肌损伤患者心肌损伤标志物、炎症因子变化及其与急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ）、序贯器官衰竭评估（sequential organ faiure assessment,SOFA）评分的相关性。方法 选取浙江省立同德医院2018年2月至2021年2月收治的66例老年脓毒症患者纳入研究,将合并心肌损伤者纳入观察组（n=33）,无心肌损伤者纳入对照组（n=33）。比较两组患者的心肌肌钙蛋白I（cardiac troponin I,cTnI）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzymes,CK-MB）、肌红蛋白（myoglobin,Mb）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、APACHEⅡ评分、SOFA评分情况,采用Pearson相关分析法分析血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分的相关性。结果 观察组患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平、APACHEⅡ评分、SOFA评分均明显高于对照组（P<0.05）。Pearson相关分析结果显示,血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平与APACHEⅡ评分、SOFA评分均呈正相关（P<0.05）。结论 老年脓毒症合并心肌损伤患者的血清cTnI、CK-MB、Mb、IL-6、CRP、TNF-α水平升高,可直接反映患者的病情和预后。     

动态血磷水平对老年脓毒症病情严重程度及预后的评估价值探讨

目的：探讨动态血磷水平与老年脓毒症患者病情严重程度的关系以及对预后的预测价值。方法：采用回顾性分析,根据纳入及排除标准选择2014年9月—2018年6月南京医科大学附属老年医院重症医学科（ICU）收治的老年（年龄≥60岁）脓毒症患者,收集患者的一般资料,监测入ICU第1、3、7天的血清磷水平。根据脓毒症严重程度分为脓毒症组、严重脓毒症组及脓毒症休克组,评估不同病情严重程度的3组间动态血磷水平的差异。根据28 d预后将患者分为存活组和死亡组,评估不同预后的两组患者动态血磷水平的差异。以APACHE Ⅱ评分和第1、3、7天的血清磷水平绘制受试者工作特征（ROC）曲线,以曲线下面积（AUC）评估其对老年脓毒症28 d预后的预测价值。结果：本研究共入组104例老年脓毒症患者,比较不同病情严重程度的3组间动态血磷水平,入ICU第1天血磷水平差异无统计学意义（P > 0.05）,第3、7天血磷水平在脓毒症休克组明显低于脓毒症组与严重脓毒症组（P < 0.05）。存活组与死亡组入ICU第1、3天血磷水平差异无统计学意义（P > 0.05）,而死亡组第7天血磷水平明显低于存活组（P < 0.05）。ROC曲线显示APACHE Ⅱ评分（AUC=0.679）和入ICU第7天血磷水平（AUC=0.641）对老年脓毒症患者预后预测价值高于入ICU第1天血磷水平（AUC=0.601）及入ICU第3天血磷水平（AUC=0.616）。结论：动态血磷水平对老年脓毒症患者病情严重程度及预后的评估具有一定意义,入ICU第7天血磷水平对老年脓毒症患者预后有较好的预测价值,死亡组第7天血磷水平明显低于存活组。     

细胞趋化因子受体5在病毒性肝炎患者外周血单核细胞中的表达

目的研究细胞趋化因子受体5（CCR5）在乙型病毒性肝炎（HB）免疫发病机制中的作用。方法用流式细胞仪对20例正常人（NC）及20例HB患者外周血单核细胞（PBMC）水平进行检测，并比较其经植物凝血素（PHA）培养前后的变化。结果培养前NC与HB患者PBMC的CCR5的表达无明显差异（P〉0．05）；培养后HB患者CCR5表达水平高于NC（P〈0．05）；NC的CCR5表达均较培养前明显减少（P〈0．05），而HB患者的CCR5表达虽较培养前减少，但无统计学意义（P〉0．05）；急性乙型肝炎（AHB）、慢性乙型肝炎（CHB）、肝硬化（LC）患者的CCR5的表达有一定的差别：AHB〉CHB〉LC，但无统计学意义（P〉0．05）。病毒复制指标阳性组CCR5的表达明显低于阴性组（P〈0．05）。结论HB患者PBMC的CCR5的表达水平与HB的临床转归可能有一定的关系，高水平的CCR5患者预后较好；PMBC高水平CCR5的表达可能不利于乙型肝炎病毒（HBV）的复制。     

降钙素原联合激活素A评估老年重症脓毒症患者预后的价值

目的观察老年重症脓毒症患者降钙素原(PCT)和激活素A水平动态变化及其在预后和病情评估中的价值。方法对66例老年重症脓毒症患者随访28d,根据预后分为存活组48例和死亡组18例,比较两组患者入院时急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APACHEⅡ）和序贯器官衰竭（SOFA）评分,检测入院时、入院第3、5、7天CRP、乳酸、PCT和激活素A水平,分析两者与SOFA评分、APACHEⅡ评分的相关性及其预测预后的价值。结果两组入院时及入院第3天血清PCT水平和入院时激活素A水平分别比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）;死亡组入院时C反应蛋白（CRP）、乳酸、SOFA评分和APACHEⅡ评分均明显高于存活组（均P＜0.05）;死亡组入院第5、7天PCT水平和入院第3、5、7天激活素A水平均明显高于存活组（均P＜0.05）,与同组入院时比较差异无统计学意义（P＞0.05）;存活组入院后第5、7天PCT和激活素A水平较同组入院时明显下降（P＜0.05）;入院第5、7天PCT水平和入院第3、5、7天激活素A水平分别与SOFA评分、APACHEⅡ评分均呈正相关;PCT和激活素A预测死亡的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.815和0.826。结论血清PCT和激活素A水平可评估老年重症脓毒症患者预后,两者持续保持高水平提示预后不良。     

老年脓毒症患者单核细胞人白细胞抗原DR表达的变化及意义

目的 探讨老年脓毒症患者外周血单核细胞(PBMC)人白细胞抗原DR(HLA-DR)表达的变化及临床意义.方法 213例老年住院患者按美国胸科医师协会/危重病医学会的定义分为非脓毒症组(A组)、脓毒症组(8组)、严重脓毒症组(C组)、脓毒症休克组(D组),另设60例健康体检者为对照组;用流式细胞仪检测每个人的PBMC表面HLA-DR分子的表达,并比较各组之间的差别.结果 A组及D组患者PBMC表面HLA-DR阳性率与健康体检者相比,A组明显偏高,D组明显偏低,差异均具有统计学意义;B组及C组患者HLA-DR阳性率与健康体检者相比.差异无统计学意义;A组、B组、C组、D组四组之间相比,其PBMC表面HLA-DR阳性率的差异有统计学意义(P＜0.01),按各组HLA-DR阳性率由低奎高排序:D组(32.74±13.4)%＜C组(61.9±14.29)%＜B组(69.99±12.8)%＜A组(85.06±15.37)%.结论 ①非脓毒症老年患者,尽管伴有多器官疾病以及反复或长期住院,其PBMC表面HLA-DR的表达并不降低;②在脓毒症及严重脓毒症老年患者中,HLA-DR的监测不是敏感指标;③HLA-DR的表达明显降低,可作为老年脓毒症休克期患者的特异性指标.     

银屑病性关节炎患者血清因子与外周血T细胞的表达及相关性分析

目的:分析银屑病性关节炎(psoriasis arthropathica,PsA)患者血清因子与外周血T细胞的表达及相关性.方法:选择2010年3月～2013年3月在我院接受治疗的PsA患者55例作为研究对象,纳入观察组.另选同期在我院接受健康体检的志愿者55例作为对照组.对比两组患者血清因子水平,两组Th细胞表达水平,分析外周血T细胞表达与血清因子的相关性.结果:观察组的类风湿因子(rheumatoid factor,RF)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及抗链球菌溶血素O(antistreptolysin O,ASO)水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.05).观察组的Th1及Th17表达水平均显著高于对照组,Treg表达水平显著低于对照组,差异均有统计学意义(P均＜0.05).根据Spearman法分析相关性可知,Th1与RF及CRP呈正相关;Th2与CRP呈正相关;Th17与RF及ASO呈正相关;Treg与RF、CRP及ASO均无明显的相关性.结论:PsA患者机体血清因子与其外周血T细胞的表达具有比较紧密的联系.临床治疗时可对此类指标进行深入研究,从而进一步分析其中的作用机制.值得重视.     

326例老年急性肺血栓栓塞症患者外周血白细胞升高的相关因素及预后分析

目的：通过探讨老年急性肺血栓栓塞症（acute pulmonary thromboembolism,APTE）患者外周血白细胞（peripheral blood leukocytes,PBL）升高的相关因素及其预后意义,提高临床医生对APTE的认识。方法：收集南京医科大学第一附属医院2016年1月—2019年6月60岁以上老年住院APTE患者326例,分析患者PBL升高的原因及预后意义。采用Logistic回归方法,比较分析PBL升高组（n=78）和PBL正常组（n=248）患者的年龄、性别、D?二聚体水平、肺动脉栓塞部位、近端深静脉血栓（deep vein thrombosis,DVT）、远端DVT、基础疾病、深静脉置管、吸烟史、糖皮质激素的应用。结果：下肢近端、远端均存在DVT患者的PBL显著高于无DVT组和仅下肢远端DVT组（P < 0.05）。统计学分析显示,心力衰竭、近期（<30 d）骨折、间质性肺病和D?二聚体水平是老年APTE患者PBL升高的相关因素（P < 0.05）。PBL升高组溶栓比例、在院死亡、血管活性药物使用、机械通气使用、心肺复苏率均高于PBL正常组（P < 0.05）。结论：PBL升高的老年APTE患者预后较差,需要重点关注心肺功能不全、下肢近端及远端均存在DVT的老年APTE患者。