健脾补土法对大鼠脑缺血再灌注后层黏连蛋白降解的影响

目的探讨健脾补土法对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞周围层黏连蛋白(LN)的降解机制及其脑保护作用。方法 38只大鼠随机分为:假手术组8只,模型组10只,健脾补土传统汤剂组10只,健脾补土超微剂型组10只,大脑中动脉栓塞再通法建立脑缺血再灌注模型。进行神经功能症状评分,脑组织病理形态学观察,采用TUNEL法检测凋亡神经元,免疫组织化学法检测LN和基质金属蛋白酶9(MMP-9)阳性表达。结果与假手术组比较,模型组神经功能症状评分、细胞凋亡指数、MMP-9阳性细胞表达数明显升高,LN表达明显降低(P0.01)。与模型组比较,健脾补土传统汤剂组和健脾补土超微剂型组神经功能症状评分、细胞凋亡指数、MMP-9阳性细胞表达数明显降低,LN表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论 LN降解在脑缺血再灌注损伤中起重要作用,健脾补土法可能通过抑制MMP-9和减少LN降解减轻缺血再灌注所致神经元损伤。     

丁苯酞对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障的影响

目的探讨丁苯酞对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障的保护作用机制。方法 72只雄性成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组(丁苯酞80mg/kg),每组24只。模型组和治疗组采用线栓法制作脑缺血再灌注损伤模型,缺血2h、再灌注24h,测定脑组织含水量和伊文思蓝(EB)含量,透射电镜下观察血脑屏障病理形态学变化,实时荧光定量PCR法检测基质金属蛋白9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)mRNA表达的变化。结果与假手术组比较,模型组脑组织含水量明显增多[(79.14±1.65)%vs(73.06±0.68)%,P<0.01],EB含量明显增加[(9.45±0.94)μg/g vs(3.45±0.45)μg/g,P<0.01],MMP-9mRNA表达上调,TIMP-1mRNA表达少量增加(P<0.01);与模型组比较,治疗组脑组织含水量明显减轻,EB含量显著减少,血脑屏障损伤减轻,MMP-9mRNA表达下调,TIMP-1mRNA表达上调(P<0.01)。结论丁苯酞可减轻脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障损伤程度,可能与调整MMP-9/TIMP-1的表达有关。     

阿托伐他汀预处理对脑缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶9表达的影响

目的观察阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法选择SD大鼠96只,随机分为:假手术组16只,脑缺血再灌注组40只,阿托伐他汀组40只。建立大脑中动脉缺血2h再灌注模型。阿托伐他汀组在建立模型前21d予以阿托伐他汀灌胃。假手术组分为24h和48h,每个时间点8只。缺血再灌注组和阿托伐他汀组根据缺血再灌注时间分为3、12、24、48、96h,每个时间点8只。于各个时间点进行神经行为学测试;TTC染色测定缺血体积;免疫组织化学SABC法测定MMP-9蛋白的表达变化;RT-PCR法对各组脑组织中MMP-9mRNA表达进行分析。结果与缺血再灌注组比较,阿托伐他汀组3、12、24、48、96h神经功能评分明显降低,梗死体积明显减小[(102.37±10.31)mm3 vs(135.26±12.16)mm3,(105.78±9.23)mm3 vs(155.07±14.12)mm3,(110.56±13.45)mm3 vs(162.47±11.41)mm3,(119.71±10.01)mm3 vs(180.27±14.27)mm3,(121.63±11.23)mm3 vs(193.41±11.56)mm3,P<0.05];12、24、48、96h MMP-9蛋白、mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑卒中前预服用阿托伐他汀可能通过降低MMP-9水平来达到脑保护的效果。     

金纳多对脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-9活性和血脑屏障通透性的影响

目的探讨金纳多对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,将成模大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、金钠多治疗组,各组按缺血再灌注6、12、24 h三个时间点分为3个亚组,每组10只。用RT-PCR方法测定损伤侧脑组织中MMP-9活性变化,用伊文思蓝方法测定同侧脑组织血脑屏障通透性。结果 (1)随缺血再灌注时间延长,MMP-9含量、EB含量开始逐渐增加,各组之间表达差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)金纳多治疗组MMP-9活性及EB含量各个时间点明显低于缺血再灌注组(P<0.05)。结论金纳多通过抑制脑缺血再灌注大鼠MMP-9的活性,减轻血脑屏障通透性,可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

大鼠缺血再灌注心肌基质金属蛋白酶不同时程的表达

目的:探讨大鼠心肌缺血再灌注不同时间点基质金属蛋白酶(MMP)-1,2,9的表达及其意义。方法:建立大鼠在体心肌缺血再灌注损伤模型,采用免疫组化法检测心肌组织中MMP-1,2,9的表达,以四通道电生理仪检测心功能,比色法测定血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)和髓过氧化物酶(MPO)活性。结果:与假手术组相比缺血再灌注组心功能明显降低,CK、LDH和MPO活性显著增高,呈明显的时间依赖性,于再灌注2 h达到峰值(P<0.01)。缺血再灌注后大鼠心肌中MMP-1的表达水平明显高于假手术组和缺血组(P<0.05),以再灌注1 h最为明显(P<0.01),且与心功能的改变呈负相关(r=-0.503~-0.748,P均<0.01);MMP-2没有表达;MMP-9的表达于再灌注1 h开始增强,再灌注2 h达到高峰(P<0.01),与心功能呈负相关(r=-0.732~-0.855,P均<0.01)。结论:MMPs可能参与心肌缺血再灌注损伤过程。     

丁苯酞预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1和血脑屏障的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)预处理对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-9、基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1和血脑屏障的影响。方法 90只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、NBP预处理组低剂量组(NBPⅠ组)、NBP预处理组中剂量组(NBPⅡ组)、NBP预处理组高剂量组(NBPⅢ组),每组18只。采用线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,缺血2 h再灌注24 h后以干湿重法测定脑组织含水量,收集脑血管外伊文思蓝(EB)含量来评估血脑屏障的破坏程度,q PCR法检测MMP-9及TIMP-1 mRNA的表达水平。结果脑缺血再灌注后,脑组织含水量及EB含量明显增加,MMP-9和TIMP-1表达均增强,与假手术组比较有显著差异(P0.01)。NBP预处理各组脑组织含水量及EB含量较模型组明显下降,MMP-9表达显著减少,TIMP-1表达明显增加(P0.01),NBPⅡ、Ⅲ组无显著差异(P0.05)。结论 NBP预处理对CIRI大鼠可通过调节MMP-9/TIMP-1的表达,降低血脑屏障通透性,减轻脑水肿,发挥预防性保护作用。     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注损伤的抑制作用

目的观察促红细胞生成素(EPO)在脑缺血再灌注模型大鼠中对转化生长因子(TGF)-β1、基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法将90只健康雄性大鼠平均分为5个实验组(n=18):假手术组、缺血再灌注组和EPO低剂量组(1 000 U/kg)、EPO中剂量组(3 000 U/kg)及EPO高剂量组(5 000 U/kg),相应处理后,予神经行为学评分,标本组织通过TTC染色、免疫组织化学、蛋白质印迹法分析大鼠海马组织中TGF-β1、MMP-9的表达差异。结果缺血再灌注组与假手术组比较梗死体积较大,TGF-β1及MMP-9的表达显著升高(P0.01);EPO 3个剂量组较缺血再灌注组大脑梗死体积显著减小,TGF-β1表达显著升高,MMP-9表达显著降低(P0.01);EPO中、高剂量组较低剂量组比较脑梗死体积显著减小,TGF-β1表达显著升高,MMP-9表达显著降低(P0.01),EPO中、高剂量组间无明显差异(P0.05)。结论 EPO可以通过促进TGF-β1的表达以修复脑组织损伤,抑制MMP-9的表达以减轻细胞外基质破坏,起到减轻脑缺血再灌注损伤的作用。     

老龄大鼠脑缺血再灌注损伤与明胶酶系基因表达的关系

目的研究老龄大鼠脑缺血再灌注不同时期微血管基底膜损伤与明胶酶系基因表达的关系。方法制备SD雄性大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将56只青年大鼠分为青年假手术组、青年模型组,56只老龄大鼠分为老龄假手术组、老龄模型组,其中青年与老龄模型组又分缺血3h和再灌注6、12、24h,3、6天时间点。观察脑微血管结构基底膜病理形态变化和明胶酶系的基因表达变化。结果老龄假手术组大鼠脑皮质微血管结构基本正常,老龄模型组与同时间点青年模型组比较病理损伤较重。随再灌注时间的延长,基质金属蛋白酶-2(MMP-2)mRNA表达递增,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA和金属蛋白酶组织抑制-1(TIMP-1)mRNA表达呈先增强后降低趋势。与青年模型组相同时间点比较,老龄模型组MMP-2、MMP-9mRNA表达水平增强;TIMP-1mRNA仅在再灌注24h表达水平降低,差异均有显著性。结论随着增龄,大鼠脑微血管基底膜损伤改变与MMPmRNA、TIMPmRNA的变化有关。老龄大鼠较青年大鼠病理损伤严重。     

白藜芦醇对大鼠脑缺血基质金属蛋白酶-9及其组织抑制因子-1表达的影响

目的探讨白藜芦醇在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中对脑水肿的影响,及对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法将健康雄性Wistar大鼠105只,随机分为假手术组(5只)、缺血再灌注组(对照组,50只)和白藜芦醇药物干预组(药物组,50只)。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型,使用干湿重法测定脑含水量,免疫组织化学法观察MMP-9和TIMP-1的表达。结果药物组与对照组比较,脑组织含水量在缺血再灌注1、2、3天明显减轻,MMP-9和TIMP-1的表达在缺血再灌注1、2、3天明显减少,TIMP-1在再灌注6 h时亦减少,两组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论在缺血再灌注所致的血管损伤中白藜芦醇具有脑保护作用,通过抑制MMP-9的表达而减轻脑水肿,调节MMP-9和TIMP-1的活性可能是其作用机制之一。     

高血压对脑缺血再灌注后大鼠脑组织中MMP-2、MMP-9表达的影响

用肾血管性高血压大鼠（RHR,A组）和正常血压SD大鼠（B组）复制大脑中动脉缺血模型,分别于大脑中动脉缺血3h（A2、B2组）、6h（A3、B3组）后再灌注,1d后处死,假手术组（A1、B1组）不阻塞大脑中动脉。常规病理检查,并应用免疫组织化学和原位杂交方法检测脑组织中的基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9蛋白及其mRNA。结果显示,A组存在脑血管的基础病理损害,小动脉透明变性,偶有微动脉瘤形成,缺血再灌注后多见红细胞漏出,在A1组出现了MMP-2和MMP-9的阳性表达。脑缺血再灌注后,各组MMP-2和MMP-9均表达增加,不同血压和缺血时间对MMP-2表达无明显影响,A3组MMP-9和A组MMP-9mRNA、MMP-2mRNA的表达均较相应B组明显增加（P〈0.05）,且随缺血时间延长,A组MMP-9mRNA的表达明显增加（P〈0.05）。认为高血压可以造成对脑血管的基础损伤并引起脑组织MMP-2和MMP-9的表达,在缺血再灌注后高血压可以增加MMP-9和MMP-9mRNA、MMP-2mRNA的表达,这可能是高血压引起血管再通后出血和损伤的机制。     

姜黄素对脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-2活性和血脑屏障通透性的影响

目的探讨姜黄素降低脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性及减轻脑水肿的作用及机制。方法将90只SD大鼠随机分为假手术组(n=30)、缺血再灌注组(n=30)、姜黄素治疗组(n=30)。以线栓法制备局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,腹腔注射姜黄素,各组于脑缺血再灌注后24 h、48 h、96 h用免疫组织化学方法观察损伤侧脑组织基质金属蛋白酶(MMP)-2活性及层黏连蛋白表达的变化。比色法测定损伤侧脑组织含有伊文思蓝(EB)的量,动态观察该侧血脑屏障通透性变化。结果随着缺血再灌注时间逐渐延长,MMP-2表达能力、EB含量均逐渐增加,48 h达峰,层黏连蛋白的表达逐渐下降,各组之间表达具有统计学差异(P0.05);姜黄素治疗组MMP-2表达、EB含量在各个时间点明显低于缺血再灌注组,同时层黏连蛋白的表达增加(P0.05)。结论姜黄素可抑制脑缺血再灌注损伤大鼠MMP-2的表达,增加层黏连蛋白的表达,降低血脑屏障通透性,从而减轻脑水肿。     

有氧运动对大鼠急性心肌梗死后心脏功能的改善性研究

目的观察有氧运动对大鼠急性心肌梗死后心脏功能的改善性研究。方法实验大鼠24只,随机分为假手术组,梗死模型组、有氧运动组,每组8只。各组大鼠10周后进行血流动力学指标检测,左心室压力最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室压力最大下降速率(-dp/dtmax),左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、白细胞介素6(IL-6)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达。结果与假手术组比较,梗死模型组和有氧运动组大鼠LVEDP、AngⅡ、IL-6明显升高,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax明显降低(P0.05,P0.01)。与梗死模型组比较,有氧运动组大鼠+dp/dtmax、-dp/dtmax明显升高,LVEDP、AngⅡ、IL-6明显降低[(20.5±3.5)mm Hg vs(25.8±4.0)mm Hg,P0.05,1 mm Hg=0.133kPa;(1176.7±140.9)ng/L vs(1436.7±230.2)ng/L,P0.05;(123.0±28.7)ng/L vs(161.8±14.3)ng/L,P0.01]。与假手术组比较,梗死模型组MMP-2、MMP-9、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达明显增加(P0.01)。与梗死模型组比较,有氧运动组MMP-2、MMP-9、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达明显降低(P0.01)。结论有氧运动可以通过抑制血中AngⅡ、IL-6水平的增加以及抑制MMP-2、MMP-9、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达改善心肌梗死大鼠的心脏功能。     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织CD40L、MMP-3的表达

目的探讨大鼠脑组织中CD40L和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在脑缺血再灌注损伤中的表达。方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO)。将Wistar大鼠随机分组,假手术组(sham组)、缺血再灌注组(IR组,又分为6h、24h、48h、72h、7d亚组)。采用免疫组化法检测大鼠脑组织中CD40L、MMP-3的表达。结果CD40L、MMP-3在假手术组不表达,再灌注6h后CD40L和MMP-3开始表达,24h表达明显增加,48h达高峰,72h开始下降,7d时有微量表达。神经功能评分与脑含水量变化与其一致。结论大鼠脑组织中的CD40L、MMP-3参与了脑缺血再灌注损伤。     

东菱克栓酶对大鼠脑缺血再灌注损伤后基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨东菱克栓酶(DF-521)对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组及DF-521低(4 BU/kg)、中(8 BU/kg)、高(16 BU/kg)剂量组,用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。观察再灌注48 h后脑梗死的面积,通过HE染色观察脑组织病理学改变,通过免疫组化法观察MMP-9的表达情况。结果 DF-521高剂量及中剂量组大鼠脑组织正常细胞较模型组明显增多,仅少数细胞出现核固缩样改变。与模型组比较,DF-521高剂量及中剂量组的脑梗死面积明显减少(P<0.01;P<0.05),MMP-9的表达量明显降低(P<0.01;P<0.05),且DF-521高剂量组效果较低剂量组更明显(P<0.05)。结论 DF-521能明显减少缺血再灌注损伤大鼠脑组织病理损伤及梗死面积,降低MMP-9的表达,减轻脑损伤,其效应具有剂量依赖性。     

基质金属蛋白酶抑制剂对肺缺血再灌注损伤炎性反应的影响

目的:探讨外源性基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)抑制剂强力霉素对肺缺血再灌注损伤炎性反应的影响。方法:建立大鼠肺缺血再灌注模型,测定肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage,BAL)中明胶酶即MMP-2、MMP-9活性,白细胞计数(WBC);肺组织中MMP-2、MMP-9分布及含量,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)含量及病理学改变。结果:肺缺血再灌注后,MMP-2、MMP-9分泌及活性显著提高,BAL中WBC、肺组织TNF-α、MDA显著升高;应用强力霉素后,MMP-2、MMP-9分泌及活性有显著抑制,BAL中WBC、肺组织TNF-α含量显著降低,肺组织病理改变显著减轻。结论:肺缺血再灌注损伤实质是一种炎症损伤,强力霉素主要通过抑制MMPs的分泌及激活,减轻肺缺血再灌注损伤炎性反应程度,达到肺保护作用。     

银杏叶提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注组织中缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时银杏叶提取物(EGB)对缺氧诱导因子(HIF)-1α表达的影响。方法随机将大鼠分为假手术组、模型组和EGB治疗组,用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型。观察局灶性脑缺血2 h再灌注24 h后大鼠神经病学行为、神经元病理学变化及HIF-1α表达。结果与模型组相比,EGB治疗组神经行为学评分改善;神经元损伤减轻;假手术组未见HIF-1α表达,EGB治疗组较模型组HIF-1α表达明显增多(P0.05)。结论 EGB可能通过增加HIF-1α表达减轻局灶性脑缺血再灌注组织神经元损伤从而发挥保护作用。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后肿瘤坏死因子表达的变化及三七总皂苷的作用研究

目的研究三七总皂苷（PNS）对局部脑缺血再灌注后脑组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）的影响,探讨PNS对缺血再灌注后神经元的保护作用。方法参照Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型（MCAO）,100只SD大鼠随机分成假手术组、缺血再灌组和PNS治疗组。每组大鼠再随机分成4组,分别在再灌注后6h,24h,48h,96h处死。用免疫组化法检测缺血脑组织冷冻切片TNF-α的阳性表达。结果假手术组脑内有极少量表达;缺血再灌组与PNS治疗组各时间点表达明显强于假手术组（P〈0.01）,PNS治疗组各时间点表达弱于缺血再灌组,阳性细胞数亦明显减少（P〈0.01）。结论三七总皂苷对脑缺血再灌注后TNF-α的表达有降低趋势。     

丁苯酞对大鼠基质金属蛋白酶及淀粉样前体蛋白表达的影响

目的探讨分子水平丁苯酞对慢性低灌注大鼠基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP-9及淀粉样前体蛋白(β-APP)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠72只随机分为假手术组、缺血组、丁苯酞组,每组24只。缺血组和丁苯酞组按不同时间分为7、14、30和60d时间点,每时间点6只。用Western blot法分析各组β-APP、MMP-2和MMP-9表达的变化。结果与7d组比较,14、30、60dβ-APP表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与14d比较,30、60dβ-APP表达明显升高(P<0.01);与30d比较,60dMMP-2表达明显升高(P<0.01),丁苯酞组仅30d与60d比较,差异有统计学意义(P<0.01)。与假手术组比较,缺血组和丁苯酞组β-APP和MMP-2表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与缺血组比较,丁苯酞组β-APP和MMP-2表达明显降低(P<0.01)。结论 MMP-2与β-APP变化趋势一致,可能参与了血脑屏障的破坏以及淀粉样物质的沉积。丁苯酞可能通过减少MMP-2及β-APP表达干预淀粉样物质的沉积。     

人参皂甙Rg1对脑缺血-再灌注大鼠基质金属蛋白酶2和9表达的影响

目的探讨人参皂甙Rg1对脑缺血-再灌注大鼠脑组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的影响。方法取健康雄性SD大鼠60只。将其随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组,人参皂甙Rg110、20、40mg/kg组,每组10只。采用线栓法栓塞2h制作大脑中动脉模型。4个药物组于术前5d至取材当日,每日清晨于腹腔注射人参皂甙Rg1（10、20、40mg/kg）及尼莫地平1mg/kg（均溶于1.5ml的等渗盐水中）,其余各组于同一时间点注射1.5ml等渗盐水,1次/d。观察再灌注24h后神经功能缺损评分;应用免疫组化、免疫印迹法检测海马CA1区MMP-2、MMP-9的表达情况。结果①假手术组、模型组,尼莫地平组和人参皂甙Rg110、20、40mg/kg组神经功能缺损评分,分别为0、2.8±0.9、1.5±0.7、2.1±0.9、1.5±0.7及1.3±1.1,差异均有统计学意义（P〈0.05）。人参皂甙Rg120、40mg/kg组与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。人参皂甙Rg110、20、40mg/kg组与尼莫地平组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。②免疫组化和免疫印迹结果显示各组均有MMP-2、MMP-9的表达,其中假手术组仅有少量表达,模型组表达量最多。与模型组比较,人参皂甙Rg110、20、40mg/kg组及尼莫地平组MMP-2、MMP-9的表达量减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;与尼莫地平组比较,人参皂甙Rg110mg/kg组的MMP-2、MMP-9表达量显著增高,40mg/kg组显著降低（P〈0.05）,而20mg/kg组则差异无统计学意义（P〉0.05）。结论人参皂甙Rg1防治大鼠脑缺血-再灌注损伤的机制可能与抑制脑组织MMP-2、MMP-9表达有关,且以高剂量组效果较好。     

红细胞生成素对脑缺血再灌注大鼠大脑皮质基质金属蛋白酶-9和BCL-2表达的影响

目的 通过研究重组人红细胞生成素(recombinant human etythropoietin,rhEPO)对局灶性脑缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteimse-9,MIMP-9)和BCL-2表达的影响,探讨EPO脑保护作用的可能机制.方法 应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞冉灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型,腹腔注射rhEPO进行干预,通过旺染色光镜观察组织病理学变化,应用免疫组化技术检测缺血侧大脑皮质MMP-9和BCL-2的表达.结果 HE染色:在各时间点,rhEPO组存活神经细胞数量显著较多,损伤程度显著较轻.MMP-9免疫组化染色:正常对照组和假手术组偶见阳性细胞;生理盐水对照组缺血侧脑组织MMP-9阳性细胞在再灌注后6 h开始出现,24 h达高峰,72 h开始减少;rhEPO组MMP-9阳性细胞变化趋势与生理盐水对照组相似,但在同一时间点显著少于生理盐水对照组(t分别为12.023 6、12.635 0和12.779 6,P均<0.01).BCL-2免疫组化染色:对照组和假手术组未见阳性细胞;生理盐水对照组缺血侧脑组织BCL-2阳性细胞数在再灌注后6 h达高峰,24 h数量减少,72 h进一步减少;rhEPO组BCL-2阳性细胞变化趋势与生理盐水对照组相似,但在同一时间点显著多于生理盐水对照组(t分别为5.763 1、8.110 1和5.798 7,P均<0.01).结论 rhEPO可能通过抑制MMP-9表达和上调BCL-2表达抑制缺血侧皮质神经细胞凋亡而发挥保护作用.