左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓单核/巨噬细胞破骨分化的影响

目的 基于AMPK/mTOR信号通路研究左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓单核/巨噬细胞(bone marrow-derived macrophage, BMMs)破骨分化的作用及机制。方法 将60只雌性大鼠随机分为6组,分别为空白组(KB)、假手术组(SHAM)、模型组(OVX)、补佳乐组(BJL)、右归丸组(YGW)和左归丸组(ZGW)。KB组不做处置,SHAM组模拟卵巢切除手术过程,后4组均将双侧卵巢切除。各组分别灌胃蒸馏水(SHAM、OVX)、补佳乐(BJL)、右归丸(YGW)和左归丸(ZGW)。12周后取大鼠股骨和胫骨骨髓,用差时贴壁法获得大鼠BMMs并进行破骨分化诱导。用抗酒石酸酸性磷酸酶活性检测试剂盒检测TRAP活性;qrt-PCR法检测TRAP基因的表达;Western blotting法检测TRAP、RANKL、AMPKɑ、p-AMPKɑ、mTORC1、p-mTORC1蛋白的表达。结果 左、右归丸能显著降低去卵巢大鼠BMMs破骨诱导后TRAP活性,降低TRAP基因和蛋白的表达,降低与RANK结合的RANKL蛋白的表达。与KB组比较,OVX组AMPKɑ蛋白磷酸化水平降低,mTO...     

基于AMPK/mTOR信号通路探讨左、右归丸对绝经后骨质疏松症大鼠骨吸收的影响

目的:观察左、右归丸对绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠骨组织AMPK/mTOR基因与蛋白表达影响,并基于此信号通路对PMOP大鼠骨吸收进行实验研究,探索其防治PMOP的作用机制.方法:将60只SD大鼠随机分为空白(KB)组、假手术(SHAM)组、模型(OVX)组、左归丸(ZGW)组、右归丸(YGW)组、补佳乐(BJL)...     

左归丸与右归丸及其拆方对去卵巢大鼠脂质代谢的影响

目的探讨左归丸与右归丸及其拆方对去卵巢大鼠脂质代谢的影响。方法将90只2月龄雌性SD大鼠随机分为正常组(Control),假手术组(SHAM),模型组(OVX),补佳乐组(BJL),左归丸组(ZGW),右归丸组(YGW),共同药组(GTY),滋阴药组(ZYY),补阳药组(BYY),每组10只。除正常组、假手术组外,其他组手术摘除SD大鼠双侧卵巢制备去卵巢大鼠模型,给药治疗12周。取大鼠血清和肝脏,用酶联免疫吸附测定法检测血清雌激素(E2)的含量,全自动生化分析仪进行血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量的测定,用油红O染色方法观察肝脏脂肪堆积。结果与模型组相比,归丸与右归丸及其拆方均可显著升高血清E2水平(P0.01或P0.05),右归丸组、共同药组、滋阴药组、补阳药组升高E2水平不及左归丸组(P0.05),归丸与右归丸均可显著降低TC、TG(P0.01或P0.05),左、右归丸及其拆方均可显著降低LDL-C,升高HDL-C(P0.01或P0.05),降低肝脏的脂肪含量。结论左、右归丸及其拆方均可明显改善去卵巢大鼠E2水平降低,其中滋阴补肾填精的左归丸治疗效果较好;左、右归丸对去卵巢大鼠脂质代谢紊乱有一定的改善作用,且二者效果无显著性差异。     

左、右归丸对去卵巢大鼠BMSCs成骨、成脂分化后Caspase-3/Bcl-2的影响

目的观察左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及成骨、成脂分化后凋亡蛋白表达的影响。方法 60只雌性SD大鼠,取40只切除双侧卵巢制备模型,随机均分为模型组(1.0 g/kg蒸馏水)、左归丸组(9.45 g/kg左归丸)、右归丸组(10.26 g/kg右归丸)和补佳乐组(0.09 mg/kg戊酸雌二醇),另取10只作为空白组(1.0 g/kg蒸馏水),10只双侧切除卵巢周围少量脂肪作为假手术组(1.0 g/kg蒸馏水),各组灌胃给药12周后,处死大鼠,取股骨和胫骨体外培养BMSCs,采用MTT法检测细胞增殖,Western blot法观察半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的蛋白表达。结果 MTT法显示,左、右归丸对BMSCs增殖有促进作用,左归丸效果更佳。成骨分化后,与空白组相比,模型组Caspase-3蛋白表达上调(P0.05,P0.01),Bcl-2蛋白表达下调(P0.01);与模型组相比,左归丸组、右归丸组Caspase-3蛋白表达下调而Bcl-2蛋白上调(P0.05,P0.01)。成脂分化后,与空白组比较,模型组、左归丸组和右归丸组Caspase-3蛋白表达显著上调,Bcl-2蛋白下调(P0.05),成骨、成脂分化后左归丸组与右归丸组比较均有显著性差异(P0.05)。结论左、右归丸均能抑制去卵巢大鼠BMSCs成骨、成脂分化后的凋亡,且左归丸有益于成骨分化,右归丸有益于成脂分化。     

骨碎补水煎液经Wnt/β-catenin通路对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的影响

目的:观察骨碎补水煎液经Wnt/β-Catenin信号通路对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)向脂肪细胞分化的调节作用及大鼠体质量、骨密度、股骨骨髓脂肪细胞变化的影响。方法:24只6月龄雌性SD大鼠随机分为SHAM(假手术)、OVX(去势)、OVXDF(去势灌服骨碎补水煎液)3组并手术造模。适应性饲养4周后,灌胃12周,检测比较各组大鼠BMSCs成脂能力、Wnt通路和成脂分化相关mRNA表达水平及大鼠体质量、骨密度、股骨骨髓脂肪细胞等指标。结果:OVXDF组大鼠的体质量及其BMSCs成脂能力、PPARγ、LPL mRNA表达水平均低于OVX组,且高于SHAM组(P0.05)。相反,其骨密度与BMSCs中Wnt10b、β-catenin、LRP5mRNA表达水平均高于OVX组,但低于SHAM组(P0.05)。股骨骨髓切片显示,OVX组脂肪空泡数量、直径、面积比较SHAM组分别增高96.18%、58.44%、391.06%,差异有统计学意义;OVXDF组比OVX组分别降低28.79%、22.52%、53.47%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:灌服骨碎补水煎液可以抑制去卵巢大鼠BMSCs成脂分化,提高去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度,缓解大鼠去卵巢后的体质量增加,同时能够减轻去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨髓腔内脂肪细胞数量及体积,起到抗骨质疏松的作用,其机制可能与激活Wnt/β-catenin经典信号通路,抑制PPARγ、LPL mRNA的表达相关。     

左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肝脏LPL、PPAR-γ基因与蛋白表达的影响

目的:研究左、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠肝脏LPL、PPAR-γ基因与蛋白表达的影响,从而在分子水平说明其影响脂质代谢的机制。方法:90只2月龄SD大鼠,随机分为正常组(Control),假手术组(SHAM),模型组(OVX),补佳乐组(BJL),左归丸组(ZGW),右归丸组(YGW),共同药组(GTY),滋阴药组(ZYY),补阳药组(BYY),每组10只,正常组不做处理,假手术组麻醉后开腹切除卵巢周围适量脂肪组织,其余各组常规切除双侧卵巢。手术后1周,分别以蒸馏水、蒸馏水、蒸馏水、阳性对照药戊酸雌二醇片混悬液、左归丸、右归丸、两方共同药、滋阴药、补阳药的水煎液给各组大鼠灌胃。12周后处死大鼠,取大鼠肝脏,用实时荧光定量PCR技术检测脂蛋白酯酶(LPL)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的mRNA表达,用免疫组化方法检测大鼠肝脏LPL、PPAR-γ的蛋白表达。结果:与模型组比较,左、右归丸及其拆方均能上调LPL、PPAR-γmRNA的表达水平(P0.01),上调LPL、PPAR-γ蛋白的表达水平。结论:左、右归丸及其拆方均可上调肝脏中LPL、PPAR-γ基因与蛋白的表达水平,这可能是其调节脂质代谢的机制之一。     

左归丸、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成脂诱导的影响

目的:研究左归丸、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)成脂诱导的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:将90只SD雌性大鼠,随机选取10只作为正常组,其余80只再随机选取10只经双侧腰背部切口切除卵巢周围少量脂肪组织作为假手术组,其余70只以相同切口切除双侧卵巢作为模型组,分别以正常组,假手术组,模型组,左归丸组(18.9 g·kg~(-1)),右归丸组(20.52 g·kg~(-1)),共同药组(15.12 g·kg~(-1)),滋阴药组(12.96 g·kg~(-1)),补阳药组(8.1 g·kg~(-1))和戊酸雌二醇片组(0.36 mg·kg~(-1))共9组,对BMSCs进行干预,流式细胞仪鉴定BMSCs,用油红O检测脂滴的形成;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ),脂蛋白脂肪酶(lipoprotein,LPL),脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)mRNA的表达;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组BMSCs明显向脂肪细胞分化,PPARγ,LPL,FABP4 mRNA表达及C/EBPβ蛋白的表达明显升高(P0.05);与模型组比较,左归丸、右归丸及其拆方均可抑制BMSCs向脂肪细胞分化,其中右归丸组可明显下调PPARγ,LPL,FABP4 mRNA,降低C/EBPβ的蛋白的表达(P0.05)。结论:左归丸、右归丸及其拆方均能抑制BMSCs的成脂分化,且右归丸抑制成脂分化的作用优于左归丸,以及补阳药及二者的共同药组。     

Zuogui(左归丸)and Yougui pills(右归丸)improve perimenopausal syndrome via regulation of apoptosis in mice

OBJECTIVE: To examine, dissect, and understand the molecular mechanisms and combinatorial effects of Zuogui(左归丸, ZGP) and Yougui pills(右归丸, YGP) in 4-vinyl cyclohexene diepoxide(4-VCD)-induced Perimenopausal syndrome(PMS). METHODS: Using the 4-VCD-induced PMS mouse model, uterine and ovary index were measured, and serum sex steroidal hormone levels were evaluated after treatment with ZGP, YGP, ZGP + YGP, estradiol valerate(EV), and Gengnian An(更年安, GNA). Histopathological examinations, ingredien...     

黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠骨髓间充质干细胞增殖、凋亡、迁移及神经分化的影响

目的观察黄芪甲苷(ASTIV)配伍三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺后再复糖复氧(OGD/R)大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、凋亡、迁移及神经分化的影响。方法全骨髓贴壁法分离、培养、扩增、纯化BMSCs,流式细胞仪检测BMSCs表面标志物CD29、CD90、CD34、CD45阳性表达率。取第3代BMSCs,采用AST IV与PNS高(100μmol/L+60μmol/L)、中(50μmol/L+30μmol/L)、低(25μmol/L+15μmol/L)剂量配伍预处理24 h,以OGD/R建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组和模型组。CCK-8法测定细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移,巢蛋白(Nestin)/神经元特异性烯醇化酶(NSE)、Nestin/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光双标观察BMSCs向神经元及星形胶质细胞分化情况。结果成功培养分离BMSCs,流式细胞仪检测CD29、CD90阳性率分别为94.23%、94.69%;而CD34、CD45阳性表达率分别为5.76%、5.31%;与对照组比较,模型组细胞存活数量明显减少(P0.05)、细胞凋亡率显著增加(P0.05),与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍均能促进BMSCs增殖(P0.05、0.01),并抑制细胞凋亡(P0.05、0.01);与对照组比较,模型组、AST IV与PNS不同剂量配伍均能促进BMSCs迁移(P0.05),与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍组的迁移细胞数量明显增加(P0.05);与对照组比较,模型组与AST IV与PNS不同剂量配伍组均能促进BMSCs向神经元及星形胶质细胞分化(P0.01),与模型组比较,ASTIV与PNS不同剂量配伍组的Nestin/NSE、Nestin/GFAP阳性表达率明显增高(P0.01)。结论 ASTIV配伍PNS在体外能促进缺血再灌注模型BMSCs增殖、迁移,抑制其凋亡,并诱导其向神经元、星形胶质细胞定向分化。     

补肾填精方对去卵巢骨质疏松模型大鼠胶原代谢的影响

目的通过对比观察补肾填精方左归丸和左归丸去补阳药对去卵巢骨质疏松模型大鼠胶原代谢的影响,探讨左归丸阳中求阴法防治骨质疏松症的作用机制。方法取雌性SD大鼠32只,采用双侧卵巢摘除术建立骨质疏松模型,随机分为假手术组(Sham)、模型对照组(OVX)、左归丸组(ZGP)、左归丸去补阳药组(ZGPQ),每组8只。灌胃给药12周后收集各组大鼠血清和股骨组织,采用ELISA法检测血清中PICP和ICTP水平,采用Masson染色法检测股骨组织胶原纤维形态,采用免疫组织化学染色法检测股骨组织ColⅠ蛋白表达水平。结果与Sham比较,OVX血清PICP和ICTP水平显著升高(P0.01)、股骨组织ColⅠ蛋白表达显著降低;与OVX比较,补肾填精方下调血清PICP和ICTP水平(P0.05,P0.01)、上调股骨组织ColⅠ蛋白表达。结论补肾填精方左归丸对去卵巢引起的骨质疏松症具有一定的防治作用,其作用机制可能与其干预胶原代谢有关,全方效果较为明显。     

左归丸与六味地黄丸的评价

左归丸出自张景岳的《景岳全书·新方八阵》 ,具有滋阴补肾的功效 ,主治真阴不足 ,表现为头晕目眩 ,腰膝腿软 ,遗精滑泄 ,自汗盗汗 ,口燥咽干 ,渴欲饮水 ,舌光少苔 ,脉细或数。全方由熟地、山药、枸杞、山茱萸、川牛膝、菟丝子、鹿胶、龟胶等八药组成。方中重用熟地功能滋肾益精以填真阴为君 ,山茱萸养肝滋肾 ,涩精敛汗 ,山药补脾益阴 ,滋肾固精 ;鹿角胶偏于补阳 ,龟胶着重滋阴 ,两胶合用 ,能通任督二脉 ,益精填髓 ,枸杞补肾益精 ,养肝明目 ,均为臣药。菟丝子、川牛膝益肝肾、强腰膝、健筋骨、俱为佐药 ,诸药合用共奏滋阴补肾 ,填精益髓之效…     

固精丸合缩泉丸治疗小儿尿床病24例

目的 :观察固精丸合缩腺丸中成药治疗小儿尿床病的疗效。方法 :采用固精丸合缩腺丸加减 (沙苑蒺藜、芡实、莲须、龙骨、牡蛎、益智仁、天台乌药、桑螵蛸、山药、补骨脂等 )治疗 2 4例。结果 :总有效率 92 %。提示 :补肾固涩法是治疗小儿尿床病的有效方法。     

从肾气丸、地黄丸谈补肾之法

肾气丸载于<金匮要略>,即该书"中风历节篇"中的"崔氏八味丸",由干地黄、山药、山茱萸、泽泻、茯苓、牡丹皮、桂枝、附子8味药物组成,被后世作为治疗肾阳虚的代表方.宋代医家钱乙将此方减去桂、附,名曰地黄丸(或六味地黄丸),一变而成为治疗肾阴虚的代表方.勿庸置疑,二者均为补肾名方,但细察所用药物,揣摩所司功能,又觉得其补肾之法值得考究.     

六味地黄丸、金匮肾气丸的免疫调节作用研究进展

六味地黄丸与金匮肾气丸分别是补益剂中补阴、补阳的常用方。现代研究表明,二者均具有免疫调节作用。本文从正常机体、老龄机体、虚证机体、荷瘤机体以及其他方面,将两首补益方剂的免疫调节作用进行整理。目的是为寻找出两首补益方剂对机体免疫调节作用的靶点,进一步研究经典补益剂延缓衰老免疫学机制做出理论指导。     

HS-GC联用法测定速效救心丸和华佗再造丸中冰片

目的 建立静态顶空-气相色谱法进行速效救心丸和华佗再造丸中冰片测定的方法.方法 HP-5毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm ×0.25 μm);采用程序升温模式:初始温度为80℃,以每分钟5℃的速率升温至160℃.顶空进样器:温度80℃,定量环温度90℃,传输线温度100℃,瓶平衡时间为25 min,加压压力为103.4 kPa,进样时间1 min.结果 龙脑在0.05 ～1.00 mg/mL范围内具有较好的线性关系,平均回收率为89.12％,RSD为1.91％;异龙脑在0.05 ～1.00mg/mL范围内具有较好的线性关系,平均回收率为93.34％,RSD为2.67％.讨论 该方法快速、简单、可靠,因此可为速效救心丸和华佗再造丸的质量控制研究奠定基础.     

同仁安神丸的安全性评价

目的:通过对同仁安神丸长期用药的安全性评价,明确其潜在的毒性作用及可逆性、毒性靶器官、无不良作用剂量及用药时间,为临床安全用药提供依据。方法:SD大鼠随机分为4组,正常组(每日灌胃给予饮用水)和同仁安神丸高、中、低剂量组(含生药6.4,3.2,1.6 g·kg~(-1))。每日灌胃1次,连续给药3个月。分别于给药1,3个月和停药2个月后解剖并分析血液生化、血液细胞、尿常规、脏器系数和组织形态学等指标。结果:给药1个月,除高剂量组体重降低、饲料消耗量减少外,血液细胞、生化、尿常规、脏器系数等指标及脏器组织病理学检查等均未见明显与毒性相关的变化。给药3个月,高剂量组雌性动物的天门冬氨酸氨基转换酶(AST),肌酸激酶(CK)较正常组显著增高;病理检查可见肝细胞、肾小管轻度变性和肾间质炎性浸润等病理变化,其他血液生化学指标及血液学、尿常规、脏器系数等指标均在该品系动物的正常值范围内,故不认为有毒性学意义。停药2个月后,高剂量组上述肝功能指标和肝、肾组织形态学基本恢复正常。结论:高剂量组大鼠长期给药时,可见轻度肝肾毒性损伤。给予同仁安神丸3个月的无明显不良作用剂量(NOAEL)为3.2 g·kg~(-1)·d-1,相当于临床剂量的29倍。临床上服用该药时,应严格控制剂量,服药时间不宜过长。     

胃肠安丸抗炎活性研究

目的 研究胃肠安丸抗炎活性,初步分析其活性成分.方法 采用HPLC法对胃肠安丸甲醇提取物进行成分分析;采用二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀、冰醋酸致小鼠毛细血管通透性增加3种急性炎症模型以及大鼠棉球肉芽肿慢性炎症模型,研究胃肠安丸甲醇提取物对急慢性炎症的作用.结果 胃肠安丸甲醇提取物中有12个主要成分,分别为来源于木香中的木香烃内酯、去氢木香内酯,来源于厚朴中的厚朴酚、和厚朴酚,来源于枳壳中的柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷,来源于大黄中的芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚.胃肠安丸甲醇提取物800 mg/kg时,对小鼠耳肿胀的抑制率达39.46％,对冰醋酸所致小鼠毛细血管通透性增加的抑制率为35.37％;并对角叉菜胶致炎大鼠足趾致炎后1h显现抗炎活性;对大鼠棉球肉芽肿显示抑制活性.结论 胃肠安丸对动物急慢性炎症均具有较好的抗炎作用.     

平安丸的质量控制研究

目的：提高和完善平安丸的质量标准。方法：采用薄层色谱法对处方中母丁香、枳实进行了薄层色谱鉴别;采用高效液相色谱法对处方中木香的有效成分木香烃内酯、去氢木香烃内酯进行了含量测定。结果：薄层色谱斑点清晰、分离度好,阴性无干扰;木香烃内酯、去氢木香烃内酯进样量分别在0.103 4-1.033 5 μg（r=0.999 9）,0.110 1-1.100 5 μg（r=0.999 7）范围内线性关系良好,平均回收率（n=6）分别为95.1%、98.6%,RSD分别为2.62%、2.84%。结论：本研究中的定性及定量方法简便准确、专属性强,能有效控制平安丸的质量。     

加味益气丸定性鉴别与含量测定

目的:提高加味益气丸的质量标准体系.方法:采用薄层色谱法对处方中当归、防己、陈皮进行定性鉴别研究;采用高效液相色谱法对柴胡皂苷a、d进行含量测定研究.结果:薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰;柴胡皂苷a在0.0504 ～0.3526 g·L-1线性关系良好(r=0.9997),平均回收率96.17％,RSD 0.18％.柴胡皂苷d在0.0346 ～ 0.2423 g·L-1线性关系良好(r =0.9993),平均回收率96.22％,RSD 0.16％.结论:建立的薄层色谱法和高效液相色谱法专属性强、准确度高、重复性好,可用于加味益气丸的的质量控制.     

野菊花滴丸制备工艺研究

目的：研究了野菊花滴丸（野菊花）制备的影响因素，确立了最佳制备工艺条件。方法：以丸重差异、综合质量和溶散时限为评价指标，采用正交设计试验对各影响因素进行考察。结果：以聚乙二醇6000：聚乙二醇400=54：6为基质，二甲基硅油为冷凝剂，滴头口径（内-外径）为6．2～9．0mm，药物与基质比例为1：3，药液温度为70℃、滴速为30d／min。制得的滴丸丸重差异小、综合质量好、溶散时限短，与颗粒剂比较更便于服用，吸湿性小。结论：该滴丸质量稳定，重现性好，设备简单，适于工业化生产。