牛黄解毒颗粒剂制备工艺中雄黄的炮制方法及其可溶性砷盐的含量测定

牛黄解毒颗粒剂制备工艺中雄黄的炮制方法及其可溶性砷盐的含量测定裴月梅,杨士友,顾家华(安徽省药物研究所合肥230022)牛黄解毒颗粒剂是在牛黄解毒片基础上研制而成的新剂型,原片剂制备工艺中雄黄是粉碎或水飞成极细粉与其他药物一起压片,且质量标准中无砷盐的检查￣[1]。雄黄中夹杂的三氧化二砷(俗称砒霜)为剧毒成分,其小鼠口服LD_(50)为1.51～39.4mg/kg,是造成其常量应用时中毒的主要成分。因此,我们在新剂型的研制过程中,对.…     

水飞法炮制对朱砂中可溶性硫和汞的影响

目的:研究朱砂水飞法炮制前后可溶性硫和汞的含量。方法:采用硫离子选择性电极法和氢化物发生-原子吸收法分别测定朱砂中可溶性硫离子和汞的含量。结果:炮制前朱砂中可溶性硫离子含量为0.851 8mg/g,汞含量为1.923 1 mg/g,3份不同朱砂炮制品中可溶性硫离子含量分别为1.382 7、1.399 4、1.430 7 mg/g,汞含量分别为1.473 5、1.482 7、1.532 0 mg/g。炮制前后朱砂中可溶性硫、汞含量均存在明显差异。结论:建立的硫离子选择电极法及氢化物发生-原子吸收法操作简单、快捷、灵敏、准确、回收率高,适用于朱砂中硫离子和汞的检测。初步揭示朱砂水飞后硫离子水平升高及汞水平的降低是朱砂炮制减毒增效的原因。     

不同产地雄黄及其炮制品中二硫化二砷和可溶性砷含量比较

目的:比较研究不同产地雄黄及其炮制品中主成分As2S2及可溶性砷盐As2O3的含量差异。方法:采用2010年版《中国药典》雄黄项下的滴定法测定不同产地雄黄及其炮制品中As2S2的含量,采用AFS-230E型原子荧光光度计检测上述样品中可溶性砷盐As2O3含量。结果:不同产地的雄黄及其炮制品中As2S2,As2O3含量存在显著差异。雄黄炮制后,炮制品中As2S2含量均提高,As2O3含量均明显降低。除吉林和江苏2个产地的的雄黄及其炮制品中As2S2含量<90.0%,其余样品均符合药典规定;且雄黄炮制品中As2O3含量均能控制在1.7 mg.g-1以下。结论:研究结果可为指导雄黄临床合理用药提供参考依据。     

雄黄可溶性砷和价态砷与小鼠急性毒性关系的研究

目的:观察单次ig给药不同批号的雄黄混悬液后小鼠的中毒反应及死亡情况,用于初步评价受试物毒性,探讨不同批号的雄黄中可溶性砷和价态砷与小鼠急性毒性间的关系。方法:对3个不同批号的雄黄进行总砷含量、可溶性砷和价态砷的测定,根据预试验结果确定不同批号雄黄的最高剂量。将不同批号的雄黄混悬液分别按0.85依次递减的比例单次ig给药,观察给药后各组小鼠中毒反应及死亡情况,连续观察14 d,通过SPSS统计软件分析得半数致死量(LD50)及其95%的可信区间。结果:3个批号的雄黄总砷含量分别为95.5%,96.0%,94.8%,可溶性砷分别为3.32%,5.23%,6.73%,价态砷分别为1.39%,3.26%,4.36%,测得LD50分别为2.069 g·kg-1,1.319 g·kg-1,1.100 g·kg-1。用2倍LD50的雄黄上清液给药,结果小鼠全部死亡。结论:雄黄的毒性存在于可溶性部分,可溶性砷和价态砷含量与小鼠急性毒性间呈高度相关关系,LD50与可溶性砷和价态砷呈负相关关系,即可溶性砷和价态砷含量越高毒性越大,与总砷含量的相关性差。     

蒙药炮制法对硫黄中硫及砷盐含量影响的研究

蒙药炮制法对硫黄中硫及砷盐含量影响的研究白明纲(内蒙古蒙医学院通辽028041)牛斯日古冷(内蒙古哲盟医院通辽028000)硫黄蒙古名音译为呼呼日,是较常用蒙药材,具“燥脓血、燥黄水、止痒、杀虫”的功能,“有毒”[1]。有毒成分主要为三氧化二砷[2],有的砷含量高达0.01%～0.1%[3],故临床内服须炮制使用。见于古文献记载的蒙药炮制法主要有“用白茅根与水菖蒲汤浸一日去毒气后,再煮沸三次即可”[4];“于山羊脂油中微火熔化再三,不致.…     

基于毒性视角考察水飞雄黄的质量情况及其影响因素

对收集到的市售3个生产厂家的水飞雄黄采用HPLC-ICP-MS分析其砷的形态及不同形态砷的含量。结果发现,3家企业游离As(Ⅲ)均未超过药典限值,但按游离砷[As(Ⅲ)+As(Ⅴ)]的总值计算,1家企业超出药典限值。现有药典游离砷检定方法为古蔡氏检砷法,存在一定局限性,未能有效规避三价砷以外的其余价态砷伴生的毒性风险。随后考察了水分和温度对水飞雄黄中可溶性砷的含量及形态的影响。结果表明:(1)水分对水飞雄黄中可溶性砷的含量有显著影响,随着水分的含量的增加,可溶性砷的含量呈上升趋势,形态未发生改变,仅有As(Ⅲ)和As(Ⅴ);(2)单纯性的温度因素,样品中可溶性砷的含量变化存在增多趋势,最大增量分别是As(Ⅲ)2.489 mg·g~(-1),As(Ⅴ)0.546 mg·g~(-1);(3)当水分与温度共同作用时,样品中可溶性砷的增加量发生显著变化,最大增量分别是As(Ⅲ)23.690 mg·g~(-1),As(Ⅴ)0.468 mg·g~(-1)。综合分析认为:雄黄质量容易受到水分和温度的影响,单纯的水分,以及水分和温度共同作用均能显著改变雄黄中可溶性砷的含量,水分为高危因素。现行《中国药典》2015年版中游离砷的检测方法存在局限性,新的技术应当被引进;于此同时,现行药典中雄黄药材项下未设置水分检查项,应当补足。     

采用扫描电镜-能谱仪比较水飞法、水洗法及干研法对雄黄饮片质量的影响

目的:比较雄黄水飞品、水洗品及干研品中二硫化二砷及各元素的含量,以阐明水飞法、水洗法及干研法对雄黄饮片质量的影响,并对雄黄水飞品、水洗品及干研品进行快速鉴别。方法:依据2015年版《中国药典》(一部)雄黄项下规定对3种炮制品进行含量测定;采用扫描电镜-能谱仪对雄黄3种炮制品进行形貌观察,对3种炮制品中的元素种类及含量进行分析。结果:3种炮制品的二硫化二砷含量排序为水飞品水洗品干研品;水飞品及水洗品的形貌相似,而干研品的形貌与其他2种炮制品不同;3种炮制品的氧元素含量排序呈现干研品水洗品水飞品的趋势。结论:采用扫描电镜-能谱仪可以对雄黄水飞品和干研品进行快速鉴别,为鉴别雄黄不同炮制品提供了一定的技术支持。水飞法的除杂减毒效果最好,水飞品质量优于水洗品和干研品,说明水飞法炮制雄黄具有一定的科学依据。     

雄黄中砷对大鼠脑组织能量代谢的影响

目的:探讨雄黄中砷对大鼠脑组织能量代谢的影响。方法:将96只大鼠随机分成12组,每组8只,以0.5%CMC-Na水溶液为混悬介质,雄黄低、中、高剂量组分别按0.3、0.9、2.7 g/kg灌胃给予雄黄,对照组给予等体积0.5%CMC-Na,分别连续给药2、4、6 w。采用氢化物发生原子吸收法测定脑组织中砷含量,高效液相色谱法测定三磷酸腺苷二钠(ATP-2Na)含量。结果:随着雄黄剂量的增加和给药时间的延长,大鼠脑组织中砷含量逐渐增加,说明雄黄中的砷可通过血脑屏障在脑组织蓄积。给予雄黄2 w后,脑组织中ATP-2Na含量与对照组无明显差异;给予雄黄4 w后,脑组织中ATP-2Na含量与对照组比较显著增加;给予雄黄6 w后,脑组织中ATP-2Na含量与对照组比较显著降低。不同剂量组间无显著差异。结论:雄黄中砷可在脑组织蓄积,对大鼠脑组织能量代谢产生影响。     

人服用含雄黄中成药后尿中砷含量的动态研究

<正> 雄黄是一种具有燥湿、杀虫、抑菌作用的矿物药。中国药典1985年版中不少中成药含雄黄、但雄黄含有害元素砷和剧毒物质A_(S2)O_3,其量大时对人体有一定的毒害。目前雄黄在人体内的吸收和代谢情况尚未见报道。因此,本文对健康男性服用含雄黄中成药牛黄解毒片后尿中砷含量的动态变化进行了研究,为保证用药安全提供参考。     

中药中可溶性砷盐的检查及含量测定的研究进展

含有可溶性砷盐的中药材及中成药制剂可分为两类.一类是含有可溶性砷盐杂质的一般中药材及中成药,这些砷盐杂质常常是在种植、加工、制剂制造过程中,通过各种原因污染而进入成品中.一般按照药典规定方法进行砷盐检查即可,如中药材石膏、芒硝中的砷盐检查,在此不再赘述.另一类是以砷化合物入药的矿物类中药材及其制剂,包括雄黄、雌黄及砒石(信石)等.对于砷化合物类中药材及其制剂,除了要求对砷的主要化合物(如雄黄中的二硫化二砷As2S2)进行含量测定外,还应对其中的剧毒成分三氧化二砷(As2O3)进行检查或含量测定.     

雄黄水飞法炮制工艺探讨

目的:优选雄黄水飞炮制方法的最佳工艺条件.方法:以加水量、操作次数和干燥温度为因素水平,用L9(3)4正交设计对炮制条件进行优选.采用离子交换高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光度法测定雄黄中可溶性砷盐As(Ⅲ)的含量.结果:雄黄水飞的最佳炮制工艺为加15倍量水、操作8次、干燥温度40℃.结论:此法准确、可靠,为雄黄炮制品的制备工艺和质量评价提供了一定的科学依据.     

高效毛细管电泳法测定雄黄微生物炮制液中砷的形态成分

目的建立一种中药复杂体系中砷形态的分离分析方法,确定雄黄炮制液中砷的形态种类和含量。方法以常规炮制雄黄为对照,采用毛细管电泳法测定了3种雄黄微生物炮制液中(iAsⅢ、iAsV、MMAV和DMAV)的含量,其优化条件为:BGE:PDC/10 mmol.L-1和CTAOH/1 mmol.L-1。分离条件:电压25 kV,温度25℃,pH11.0,紫外检测波长设定在216nm。结果雄黄炮制液中4种形态砷能实现完全分离,4种成分的线性范围分别为:iAsⅢ:1.03~513.0 mg.ml-1(r=0.999 8),iAsV:20~430.2 mg.ml-1(r=0.999 1),MMAV:1.08~310.3 mg.ml-1(r=0.999 2),DMAV:1.14~150 mg.ml-1(r=0.999 3)。日内迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.61%~0.82%,1.26%~3.12%。回收率范围为97.8%~103.2%。结论该方法较为简便、快速、准确、重现性好,适用于分离测定雄黄炮制液中砷的形态成分分析和其炮制质量控制。.     

炮制对雄黄毒性与药效影响的研究

本文在雄黄炮制方法 及饮片质量标准的研究基础上,对新法(酸洗)及传统法(干研)的雄黄炮制品进行了毒性及药效方面的比较研究,结果 显示新法炮制品不仅可降低毒性,且药效有所提高.     

雄黄中砷对大鼠新事物识别能力的影响

目的 使用氢化物发生-冷阱捕集-原子吸收光谱法（HG-CT-AAS）测定大鼠大脑组织和血中无机砷（iAs）,一甲基砷酸（MMA）和二甲基砷酸（DMA）的含量,研究雄黄对大鼠中枢神经系统的毒性影响。方法 将96只Wistar大鼠随机分为正常组,0.3,0.9,2.7 g·kg^-1雄黄组,分别连续灌胃14,28,42 d,正常组灌胃相同剂量的羧甲基纤维素钠（CMC-Na）水溶液,共12组,每组8只。采用HG-CT-AAS测定血和大脑组织中iAs,MMA和DMA的含量,新事物识别实验观察大鼠的新事物识别能力,透射电镜观察海马神经元超微结构的变化。结果 实验动物生长发育、体质量及海马系数变化各组之间均无差异。HG-CT-AAS测定大鼠大脑及血中各形态砷含量的方法线性、精密度、准确度与回收率良好;在雄黄组大鼠大脑中检测到MMA,DMA,且呈时间-剂量-效应关系;在雄黄组大鼠血中检测到iAs,MMA和DMA;大鼠海马神经元内核膜、线粒体及内质网等随着雄黄暴露剂量以及时间的增加,逐渐出现损伤;雄黄暴露14 d后,与正常组比较,各雄黄组新事物识别指数差异无统计学意义;暴露28 d后,仅2.7 g·kg^-1雄黄组与正常组比较有统计学意义（P<0.05）;暴露42 d后,与正常组比较,0.9,2.7 g·kg^-1雄黄组大鼠的新事物识别指数明显降低（P<0.05）。结论 雄黄在大鼠体内的代谢产物为iAs,MMA,DMA。MMA和DMA可通过血脑屏障在脑组织中蓄积,引起新事物识别能力下降,造成海马神经元细胞损伤。     

雄黄中砷的不同形态及其毒性研究进展

对雄黄中不同形态砷的毒性及其毒性机制进行文献整理和分析。查阅了国内外有关文献28篇,进行归纳整理并分析汇总。首先介绍了其对肝、肾、膀胱、神经、皮肤、胎儿发育等的毒性损伤情况及损伤机制,砷在生物体内以无机砷和有机砷等不同形态存在,依形态不同毒性有较大差异:三价砷(AsⅢ)可引起肝细胞的凋亡和灶状坏死,五价砷(AsⅤ),五价甲基砷酸(MMAⅤ),五价二甲基砷酸(DMAⅤ)可引起肝细胞肿胀和灶状炎症。DMAⅤ的毒性较MMAⅤ大,若长期接触DMAⅤ和MMAⅤ可引起动物膀胱和皮肤组织肿瘤。MMAⅤ和DMAⅤ对调节神经丝蛋白基因的毒性较亚砷酸盐(iAsⅢ)和砷酸盐(iAsⅤ)强,能明显改变细胞骨架基因的表达水平。此外,iAsⅢ和MMAⅢ对人造血干细胞也能产生明显的毒性。这些总结将为系统探究雄黄不同形态砷与毒性的相关性提供基础。     

雄黄炮制新工艺的探索

通过对不同粒度和不同水、酸洗次数的雄黄样品、醋煮、醋洗雄黄样品及部分地区的雄黄炮制品等进行As₂O₃、As₂S₂含量测定、微量元素分析和急性毒性实验,探索既能达到传统炮制目的,又能适应工业化生产的雄黄炮制新工艺的可能性。     

雄黄灌胃给药后砷在孕大鼠脏器内的分布及排泄途径研究

目的研究口服雄黄后砷在孕大鼠体内的分布和排泄途径。方法结合生殖毒性Ⅱ段试验,雌性SD大鼠交配后随机分成高、中、低（550、250、125 mg/kg）剂量组和阴性对照组（0.5%羧甲基纤维素钠）4组,妊娠第6-15日每日1次用雄黄悬浊液连续灌胃10 d,于妊娠第20日处死。每组10只,取孕大鼠各主要脏器（心、肝、脾、肺、肾、脑、子宫）和全血、胎盘、胎仔及不同给药时间点的尿液和粪便,运用电感耦合等离子体质谱法（ICP-MS）、电感耦合等离子体发射光谱法（ICP-OES）分别测定砷含量,分析砷在各脏器的分布情况以及排泄途径。结果各脏器中砷含量均显著高于阴性对照组,全血砷含量最高,并随剂量的增加而增加;与其他脏器比较,脑和胎仔组织内各剂量组的砷含量最低。给药第2日粪便中即出现大量砷,日排泄量折合成雄黄约占摄入量的69.5%～80.2%;而给药第10日排泄量上升到85.2%～96.2%;停药第4日粪便中雄黄排泄量急剧下降。尿液中排泄的砷微量,并有剂量依赖性,停药第4日排泄量仍在较高水平。结论砷在不同脏器内蓄积与给药剂量有关,其中以全血、脾、胎盘、肺内砷含量较高;口服雄黄主要经肠道排泄,而组织内蓄积的砷可能经肾脏排泄。     

炮制对磁石中毒性成分砷含量的影响

对5种磁石进行了炮制前后砷含量的测定比较。结果表明,砷含量生品比煅品高约5～25倍,说明磁石经炮制后可除去或降低其毒性。