银杏提取物对自身免疫性脑脊髓炎小鼠脱髓鞘免疫炎性病变的影响

目的探讨银杏提取物(GBE)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠脱髓鞘免疫炎症病变的影响。方法将小鼠分为EAE模型组(腹腔注射生理盐水)和GBE组[腹腔注射GBE 70 mg/(kg.d)],应用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白33-55(MOG33-55)配以完全弗氏佐剂(CFA)免疫小鼠,诱发EAE模型。通过神经功能评分、免疫组化染色以及酶联免疫吸附实验(ELISA),观察GBE对EAE小鼠的影响。结果 GBE组小鼠发病潜伏期[(12.5±0.64)d]较EAE组[(10.7±0.47)d]显著延长(P<0.05),并且GBE组发病高峰期(CFA免疫后第21天)神经功能评分较EAE组显著降低(P<0.05)。海马伞矢状切片免疫组化染色结果证实GBE组CD4+T淋巴细胞较EAE组明显减少,仅可见CD4+T淋巴细胞散在分布。ELISA检测结果显示发病高峰期GBE组TNF-α含量较EAE组明显降低(P<0.05)。结论 GBE可能通过抑制CD4+T淋巴细胞激活、减少炎症介质释放,从而保护延缓EAE小鼠脱髓鞘病变进程。     

α-硫辛酸对大鼠腹膜纤维化的作用及机制

目的 观察α-硫辛酸(α-LA)对高糖腹膜透析液诱导大鼠腹膜纤维化(PF)的作用及机制。方法 30只SD大鼠随机均分为空白对照组、模型组、α-LA腹腔注射高剂量组(400μmol/L)、α-LA腹腔注射中剂量组(300μmol/L)、α-LA腹腔注射低剂量组(200μmol/L)、α-LA灌胃组(300μmol/L),空白对照组大鼠腹腔注射生理盐水、后5组大鼠腹腔注射高糖腹膜透析液制作PF模型、后4组大鼠同时按分组设计给予相应药物,连续4周。取各组大鼠腹膜组织,苏木素伊红(HE)、Masson’s染色观察腹膜组织学形态及纤维化,免疫组化染色检测α-平滑机动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测转化生长因子β1(TGF-β1)、磷酸化Smad2(p-Smad2)及p-Smad3蛋白表达。结果 处理前各组大鼠体质量组间差异均无统计学意义(P> 0.05),处理后α-LA高剂量腹腔注射组较对照组、模型组和α-LA灌胃组体质量低(P <0.05);纤维化表达面积百分比、腹膜组织α-SMA、CollagenⅠ表达、腹膜...     

腺苷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中低氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察腺苷预处理对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨腺苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 Sprague-Dawley大鼠72只随机分为假手术组(F组)、腺苷预处理假手术组(AF组)、缺血再灌注组(IR组)、腺苷预处理缺血再灌注组(AR组),每组18例。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。IR组和AR组大鼠于手术前3 d每日腹腔注射1.5 mg·kg-1腺苷(溶于2 mL生理盐水中),F组和AF组大鼠于手术前3 d每日腹腔注射2 mL生理盐水,连续3 d。各组大鼠进行神经功能缺损评分,免疫组织化学方法观察大鼠脑组织中HIF-1α的表达。结果 F组和AF组大鼠术后无神经功能缺损体征,IR组和AR组大鼠再灌注6、12、24 h后均出现明显神经功能缺损体征。IR组和AR组大鼠神经功能缺损评分显著高于F组和AF组,AR组大鼠神经功能缺损评分显著低于IR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。AF组大鼠脑组织中HIF-1α的表达与F组比较差异无统计学意义(P>0.05);缺血再灌注后6、12、24 h,IR组大鼠脑组织中HIF-1α的表达显著高于F组和AF组(P<0.01);AR组大鼠脑组织中HIF-1α的表达显著高于IR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论腺苷预处理可增加局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织中HIF-1α的表达,从而发挥保护作用。     

人骨髓间质干细胞治疗实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠的实验研究

目的:研究尾静脉注射入骨髓间质干细胞(hMSCs)移植治疗实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠的疗效及移植后hMSCs在EAE大鼠体内的状况.方法:分离和纯化hMSCs.用豚鼠脑脊髓匀浆免疫Wistar大鼠制备EAE大鼠模型,分别在免疫后10、15、21天经尾静脉注射移植未分化的hMSCs入大鼠体内,通过电镜,动物模型神经功能评分,病理观察hMSCs对EAE大鼠的疗效,利用免疫组化方法观察移植后的hMSCs在EAE大鼠体内存活、迁徙、分化的状况.结果:免疫后10天和15天hMSCs移植组大鼠自移植后10天起其神经功能评分显著低于对照组(P＜0.05);在电镜下治疗组髓鞘超微结构改变明显轻于对照组;病理上各移植组在移植后10、30天脑内脱髓鞘病灶数目明显少于对照组(P＜0.05).hMSCs移植组各时间点大鼠脑组织切片中均可见Brdu、NSE、GFAP、CNPase染色阳性细胞,CNPase( )的少突胶质细胞比例随时间的延长而逐渐增多.结论:hMSCs移植能有效改善EAE动物的神经功能评分,减少脱髓鞘病灶数目,并且在体内微环境改变信号的影响下分化成神经元、星型胶质细胞、少突胶质细胞.     

山茱萸新苷抑制EAE模型大鼠中枢神经系统免疫细胞浸润及VCAM-1表达的研究

目的明确山茱萸新苷是否可以抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型大鼠中枢神经系统免疫细胞浸润及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达。方法 Lewis大鼠32只,随机分为正常对照组、模型组、强的松组以及山茱萸新苷组,各8只。除正常对照组外,均制作EAE模型。每天评定各组大鼠神经功能缺损症状评分,当症状达到高峰期时处死所有大鼠,比较各组大鼠脊髓炎性病灶数以及VCAM-1 mRNA、VCAM-1蛋白表达。结果正常对照组、模型组、强的松组以及山茱萸新苷组大鼠第14d神经功能缺损症状评分分别为0分、(3.83±0.98)分、(0.67±0.82)分、(1.67±1.75)分,脊髓炎性病灶个数分别为0个、(8.75±2.23)个、(2.33±1.03)个、(4.83±1.47)个,VCAM-1mRNA的相对表达量分别为(5.602±0.761)、(37.762±4.560)、(17.143±1.521)、(28.042±3.147),VCAM-1蛋白相对表达量分别为(7.958±2.265)、(22.433±1.829)、(15.725±1.338)、(18.625±0.874)。与模型组比较,山茱萸新苷组大鼠神经功能缺损症状评分较低,脊髓炎性病灶个数较少,VCAM-1mRNA相对表达量及VCAM-1蛋白的相对表达量较低(P0.05,P0.01)。结论山茱萸新苷可以改善EAE模型大鼠神经功能缺损症状,抑制免疫细胞浸润EAE模型大鼠中枢神经系统及中枢神经系统VCAM-1 mRNA及蛋白质表达。     

减毒百日咳杆菌对实验性变态反应性脑脊髓炎大鼠模型诱导的影响

目的:探讨在不同部位加用减毒百日咳杆菌对EAE非敏感品系Wistar大鼠EAE模型诱导影响.方法:免疫组除常规免疫外在足背皮下或腹腔注射减毒百日咳杆菌0.05 ml/只(含5.0×1010个菌体).结果:足背皮下注射百日咳组发病率为87.5%,发病时间为免疫后(10.25±1.67)d,而腹腔组分别为35.7%和(14.8士1.79)d.结论:足背皮下注射百日咳毒素诱导EAE模型适合在国内开展.     

真菌性鼻窦炎大鼠鼻窦黏膜组织Maspin、IKKα表达水平及意义

目的探讨真菌性鼻窦炎(FRS)大鼠鼻窦黏膜组织Maspin、IKKα表达水平及意义。方法 40只SD级大鼠建立真菌性鼻窦炎模型,按照随机数字表法分为鼻塞组、FRS组、免疫抑制剂组、侵袭性FRS组,每组各10只,另选择10只健康大鼠作为空白对照组;对照组正常喂养;鼻塞组仅鼻腔塞入止血棉,腹腔与鼻腔内给予等体积0.9%Na Cl注射液;FRS组腹腔注射等量0.9%Na Cl注射液,鼻腔注射烟曲霉菌孢子悬液;免疫抑制剂组腹腔注射环磷酰胺,鼻腔内注射等量0.9%Na Cl注射液;侵袭性FRS组腹腔注射环磷酰胺、鼻腔注射烟曲霉菌孢子悬液建立侵袭性FRS大鼠模型。采用酶联免疫吸附试验检测血清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平;免疫组织化学染色法检测各组大鼠鼻腔组织Maspin、IKKα蛋白表达水平,荧光定量PCR法检测各组大鼠鼻腔组织Maspin mRNA、IKKαmRNA表达水平。结果各组大鼠血清IL-6、TNF-α表达水平比较差异有显著性(P0.05),其中FRS组血清IL-6、TNF-α显著高于对照组、鼻塞组、免疫抑制剂组和侵袭性FRS组【(69.3±10.9)ng/L vs(45.2±7.1)ng/L,(46.4±6.7)ng/L,(21.3±4.5)ng/L,(20.9±4.3)ng/L;(30.4±4.8)ng/L vs(14.8±2.7)ng/L,(13.9±1.4)ng/L,(7.9±0.6)ng/L,(7.8±0.4)ng/L】(P0.05),对照组血清IL-6、TNF-α又显著高于免疫抑制剂组和侵袭性FRS组(P0.05),免疫抑制剂组、侵袭性FRS组间血清IL-6、TNF-α表达水平比较差异无显著性(P0.05)。免疫组织化学染色结果显示FRS组、侵袭性FRS组Maspin蛋白表达水平显著低于对照组、鼻塞组、免疫抑制剂组,IKKα蛋白表达水平显著高于对照组、鼻塞组、免疫抑制剂组(P0.05);其中侵袭性FRS组Maspin蛋白表达显著低于FRS组,IKKα蛋白表达则显著高于FRS组(P0.05)。FRS组、侵袭性FRS组Maspin mRNA表达水平显著低于对照组、鼻塞组、免疫抑制剂组,IKKαmRNA表达水平显著高于对照组、鼻塞组、免疫抑制剂组(P0.05);其中侵袭性FRS组Maspin mRNA表达显著低于FRS组,IKKαmRNA表达显著高于FRS组(P0.05)。结论 IKKα活化后下调Maspin表达是导致FRS发病的主要原因,这一过程可能也是侵袭性FRS分子作用机制之一。     

Purα对匹罗卡品致痫大鼠海马DNA损伤的保护作用

目的 探讨Purα蛋白对匹罗卡品诱导癫痫大鼠海马所致DNA损伤的保护作用,以及Purα蛋白在DNA损伤修复中的作用.方法 将Purα蛋白过表达的慢病毒和Purα siRNA慢病毒在立体定位仪指导下注入大鼠海马组织.注入后14 d通过荧光切片和免疫印迹证实病毒已经在海马组织表达,然后用匹罗卡品腹腔注射诱导癫痫发作.癫痫发作1h后处死动物,分别取样进行免疫组织化学和免疫印迹检测与DNA损伤和修复.结果 免疫组织化学结果表明,DNA损伤标志性蛋白γH2AX在大鼠CA1区的表达,各组选20张相同背景色的海马CA1区通过图像分析软件iPP6.0测定阳性细胞的平均光密度值;与空载组(0.40 ±0.11)和对照组(0.42±0.05)相比,Purα过表达组(0.15±0.10)免疫着色阳性细胞数目明显减少(P＜0.01);而在Purα沉默组(0.68±0.06)明显增高(P＜0.01).免疫印迹结果表明,在DNA损伤修复相关蛋白Parp-1的表达上:与空载组(0.93±0.11)和对照组(1.00±0.00)相比,Purα过表达组(0.17±0.09)的表达明显降低(P ＜0.01);Purα沉默组的表达明显增高(P＜0.01).结论 癫痫发作早期可引起明显的DNA损伤,Purα蛋白对癫痫引起的DNA损伤有明显的保护作用.     

NT-3基因修饰的嗅鞘细胞移植对自身免疫性脑脊髓炎大鼠神经修复及功能恢复的影响

目的 探讨神经营养因子-3(NT-3)基因修饰的嗅鞘细胞(OECs)对自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠神经修复及运动功能恢复的促进作用.方法 构建Lewis大鼠EAE模型,采用完全随机化法分为对照组、OECs组及OECs-NT-3组,每组20只,分别将生理盐水、OECs、OECs-NT-3移植入大鼠侧脑室内,每日进行神经功能缺损评分(NDS)评估大鼠肢体功能恢复情况,应用免疫组织化学检测及辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪技术对EAE神经纤维修复进行形态学观察.结果 细胞移植后,OECs-NT-3组大鼠神经功能评分明显低于OECs组,差异有统计学意义(P＜0.05);第28天,大鼠体内OECs-NT-3存活数量较多,可向病灶远端扩散、迁徙;OECs-NT-3组单位面积内的神经纤维数目[第28天,(38.8±3.4)个]明显高于OECs组[第28天,(32.5±2.8)个](P＜0.05);OECs-NT-3组HRP标记的神经元数目多于OECs组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NT-3基因修饰的OECs可在EAE大鼠体内存活、迁移,并可促进神经纤维再生,减轻皮质神经元的逆行性损伤,改善EAE大鼠的运动功能.     

黄体酮对大鼠实验性变应性脑脊髓炎的治疗作用

目的 研究黄体酮对实验性变应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)大鼠的治疗作用.方法 采用注射豚鼠脊髓匀浆的方法 制作雄性Wistar大鼠EAE模型.当EAE大鼠出现神经症状后,开始在治疗组腹腔内注射溶于2.5 ml芝麻油中的黄体酮(4 mg·kg~(-1)·d~(-1),连续注射4 d),模型组注射等量的芝麻油.分别对两组大鼠进行运动功能评分和脑组织的电镜检查、LFB染色、锇酸Marchi's染色.染色结果 采用IPP图像分析软件计算光密度(OD)值.结果 治疗组和模型组神经功能评分无明显区别,但是在开始治疗后第6、10、25天,治疗组正常髓鞘的积分光密度值明显高于模型组,而退变髓鞘的积分光密度值明显低于模型组.结论 黄体酮有利于EAE大鼠中枢神经系统的髓鞘再生,促进髓鞘修复.     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠视网膜 VEGF 表达的影响及机制

目的：研究α-硫辛酸(α-LA)对糖尿病大鼠视网膜病变及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及机制。方法选择72只健康的雄性 Wistar 大鼠作为实验材料,将72只大鼠分为4组：空白对照组(A 组)12只,糖尿病模型组(B 组)24只,α-LA治疗组(C 组)24只,葡萄糖干预组(D 组)12只,B~D 组大鼠按照60 mg/kg 的剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ),C 组用100 mg/kg 的α-LA 灌胃,D 组用5.0%的葡萄糖溶液灌胃。比较各组大鼠的体质量、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),稳态胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、VEGF 表达、超氧化钠歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和 IL-6水平,比较 B~D 组大鼠的 GR 分期。结果72 h 后,B~D 组大鼠模型构建成功,A 组大鼠 FPG 为(4.57±0.15)mmol/L,B 组为(21.72±4.28)mmol/L,C 组为(21.54±4.96)mmol/L,D 组为(21.83±4.77)mmol/L,A 组与 B、C 组比较差异有统计学意义(P <0.05);A 组大鼠体质量(210.5±5.2) g,B 组(211.2±5.7)g,C 组(209.8±5.8)g,D 组(208.7±3.4)g,4组的差异无统计学意义(P >0.05)。4组大鼠4、8、12周的体质量、FPG、FINS、HOMA-IR、VEGF 表达、SOD、GSH 和 IL-6水平差异有统计学意义(P <0.05)。12周后,B 组、C 组和 D 组大鼠的眼底镜检查 GR 分期差异有统计学差异(P <0.05)。结论α-LA 的应用可以有效抑制大鼠视网膜 VEGF 的表达,这一作用可能与改善胰岛素抵抗、抑制慢性炎症和氧化应激多个环节相关。     

超大剂量甲泼尼龙治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的疗效分析

目的 研究超大剂量甲泼尼龙(MP)对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠的治疗作用,探讨超大剂量MP能否提高疗效.方法 构建EAE大鼠模型,分为超大剂量组、小剂量组和模型对照组,分别予以尾静脉注射MP 100 mg/kg、25 mg/kg、等体积生理盐水;另取正常大鼠为正常对照组,给予等体积生理盐水注射.连续给药5 d,处死大鼠,采血检测血浆白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.取脑、脊髓组织行HE染色及髓鞘染色.对临床评分、炎性病灶计数、髓鞘脱失评分、细胞因子含量等进行综合评价.结果 超大剂量组和小剂量组大鼠经MP治疗前后临床评分差异均有统计学意义(P<0.05),组织炎性病灶数、髓鞘脱失评分及血浆IL-2、TNF-α含量均较模型对照组低.而超大剂量、小剂量组间在临床评分、炎性病灶数、髓鞘脱失评分、细胞因子含量等方面比较均无统计学差异.结论 两种剂量MP均能缓解EAE症状,改善病情,但临床疗效并不与剂量呈依赖性,在一定的有效剂量范围内,超大剂量MP并不能提高疗效.     

PDTC对大鼠急性肺损伤肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨核因子-κB 抑制剂PDTC在脂多糖(LPS)所致大鼠急性肺损伤(ALI)时血浆及BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化.方法 雄性大鼠54只,对照组(N组)6只,腹腔注射生理盐水8 mL/kg.ALI组(L组)24只,腹腔注射LPS 8 mg/kg.PDTC干预组(P+L组)24只,先腹腔注射PDTC 120 mg/kg,半小时后再腹腔注射LPS 8 mg/kg.后两组分别于腹腔注射 LPS后2、4、8、12 h作为观测时间点.观察血浆及BALF中TNF-α的变化.结果 L组各时相肺血浆及BALF中TNF-α较N组显著升高(P<0.01),且随着时间延长增加明显,但P+L组TNF-α与L组比较显著减少(P<0.05).结果 LPS引起血浆及BALF中TNF-α大量释放,NF-κB参与炎症的调控,在ALI中起重要作用.PDTC通过调控炎性介质的表达和释放,可有效地减轻LPS所致大鼠ALI.     

RGMa通过Rho激酶调控EAE小鼠IL-27的表达和神经功能

目的 探讨排斥性导向分子a(RGMa)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠神经功能的影响,以及RGMa调控IL-27的相关分子机制.方法 C57BL/6小鼠分为正常对照组,EAE模型组,RGMa RNAi组(rAd5-shRNA-RGMa重组腺病毒),空载体对照组(空载体rAd5-HK重组腺病毒),Rho激酶抑制剂组和PBS组,每组10只.除正常对照组外均构建EAE小鼠模型,每天行神经功能评分评价小鼠神经功能,造模当天记做免疫第0天,免疫12 d后对RGMa RNAi组、空载体对照组、Rho激酶抑制剂组及PBS组分别给予rAd5-shRNA-RGMa重组腺病毒[(2.51×1010)pfu/mL,6μL]、空载体rAd5-HK重组腺病毒[(2.51×1010)pfu/mL,6μL]、Rho激酶特异性抑制剂Y-27632(按体质量10 mg/kg)、等体积PBS干预,正常对照组及EAE模型组无其他干预.免疫18 d后行Western blot检测血清RGMa及Rho激酶的表达水平,ELISA检测血清IL-27的表达.结果 Western blot结果显示RGMa RNAi组小鼠RGMa及Rho激酶表达较EAE模型组显著降低(0.07±0.01 vs.0.58±0.09,P<0.001;42.98±5.69 vs.66.74±8.35,P=0.027).神经功能评分示RGMa RNAi组小鼠起病时间较EAE模型组及空载体对照组明显推迟,神经功能损伤明显减轻(P<0.05或P<0.01).ELISA结果显示,与EAE模型组(1145.36±134.45)比较,RGMa RNAi组(658.46±83.41,P=0.004)及Rho激酶抑制剂组(804.45±133.90,P=0.019)IL-27表达水平显著降低,与PBS组(1060.73±104.54)比较,Rho激酶抑制剂组IL-27表达水平显著降低(P=0.022).结论 特异性抑制EAE小鼠RGMa可显著缓解其神经功能损伤,抑制IL-27的表达水平,这一作用可通过Rho激酶介导.     

脑出血大鼠脑组织MDA、TNF-α含量变化及其依达拉奉干预效应的研究

目的 观察3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮(MCI-186,商品名为依达拉奉)对出血性脑组织的保护作用和可能机制.方法 将96只Sprague-Dawley大鼠按随机数字表法分为假手术组、脑出血模型组、依达拉奉治疗组,每组32只.采用自体血脑内注入法制作大鼠脑出血模型,假手术组只进针不注血.依达拉奉治疗组大鼠腹腔注射依达拉奉(3 mg/kg),分别于造模前30 min及造模后1次/12 h.于6、24、72、168 h分别用Longa标准测定神经功能缺损;干、湿重法检测脑含水量;酶联免疫吸附法(ELISA)和硫代巴比妥酸法测定血肿周围组织中脑组织TNF-α和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量.结果 与假手术组相比,脑出血模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、TNF-α和MDA含量均显著增高(P＜0.05);与脑出血模型组相比,依达拉奉治疗组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、TNF-α和MDA含量显著下降(P＜0.05).结论 依达拉奉对出血后脑组织具有保护作用,其机制可能与抑制MDA和TNF-α的活性有关.     

干扰素-α对CCl4诱导的大鼠肝纤维化疗效研究

目的:观察干扰素-α (interferon α,IFN-α)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗效果,并探讨其可能的机制.方法:45只Wistar大鼠随机分为正常组(n=15)、模型组(n=15)、IFN-α治疗组(n=15).正常组大鼠予以橄榄油2 mL/kg腹腔注射,每周注射2次,共8周;模型组及IFN...     

氟西汀治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用

目的 初步探讨盐酸氟西汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠的干预作用和发病过程中不同时间点血清脑源性神经营养因子(BDNF)的表达.方法 将Wistar大鼠随机分为3组:溶媒对照组(n=6)、模型对照组(n=10)和氟西汀组(10mg/kg,n=10);采用自制豚鼠脊髓匀浆足垫注射免疫动物制作EAE模型,每天观察各组大鼠神经功能缺损评分;采用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测大鼠免疫前、免疫后第16天及免疫后第25天血清BDNF的表达.结果 1、模型对照组及氟西汀组大鼠在免疫后第4天开始出现毛发无光泽及脱毛,在免疫后第8天开始出现鼠尾下垂,并逐渐发展至不同程度的肢体无力,在免疫后第16天动物发病达到高峰;溶媒对照组大鼠无发病.2、氟西汀显著促进了大鼠神经功能恢复,在免疫后第18天开始氟西汀组[(3.27±0.33)分]与模型对照组[(4.66±0.55)分]的临床神经功能缺损评分开始出现显著性差异(P＜0.05),并持续至实验结束.3、氟西汀组与模型对照组大鼠相比血清中BDNF的表达差异无显著性[氟西汀组(62.27±0.43)ng/L;模型对照组(61.67±0.85)ng/L,P＞0.05].结论 氟西汀显著促进了EAE大鼠的神经功能恢复,提示其具有治疗EAE动物的作用;氟西汀并不能通过促进EAE大鼠血清中BDNF的表达参与保护作用.

Abstract：

Objective To investigate whether fluoxetine has therapeutic effect of clinical score and brain derived neurotrophic factor (BDNF) expression in serum of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE)model. Methods Rats were randomly divided into solvent control group (n=6) ,model control group ( n= 10)and fluoxetine group ( n= 10). The EAE model was prepared by injecting guinea pig spinal cord homogenate subcutaneously. The clinical score was daily measured according to the sign and symptoms of rats in the behavior examination. The serum BDNF level was measured by EL1SA. Results 1. Except for the solvent control group,the first sign of EAE(Piloerection) was detected on 4th day after immunization of rats from both model control group and fluoxetine group,then EAE rats had distal tail weakness on 8th day, and gradually developed into completely tail paralysis and limb paralysis. EAE rats' clinical score reached the peak on 16th day after immunization. 2. The clinical score of fluoxetine group became scientifically lower than model group since 18th day after immunization ( Fluoxetine group :3.27 ± 0. 33; Model control group :4.66 ± 0. 55, P ＜ 0. 05 ). 3. Compared with the model control group,fluoxetine did not significantly increase the expression of serum BDNF in EAE model ( Fluoxetine group:62.27 ± 0.43; Model control group :61.67 ± 0.85, P ＞ 0.05 ). Conclusion Fluoxetine reduced the clinical score of EAE since 18th day after immunization,which indicates fluoxetine could promote the recovery of neurological function in EAE rats. BDNF may not contribute to protective effect of fluoxetine in EAE animal.     

salusin-α的中枢降血压机制研究

目的 通过侧脑室给药的方法探讨salusin-α的中枢心血管效应及其机制.方法 雄性SD大鼠50只,腹腔注射氨基甲酸乙酯1.0g/kg麻醉,人工通气,股动脉、静脉插管,固定于立体定位仪.其中25只大鼠随机分为对照组[侧脑室注射人工脑脊液(artificial cerebrospinal fluid, aCSF),n=4],salusin-α100pmol 组(n=7)、200pmol 组(n=7)、400pmol 组(n=7).给药后观察大鼠血压和心率.其余25只大鼠为预先给予阻断剂组,随机分为对照组aCSF+salusin-α组(n=4)、N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801+salusin-α组(n=7)、内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)+salusin-α组(n=7)、γ-氨基丁酸(GABA)受体阻断剂荷包牡丹碱(Bic)+salusin-α组(n=7).先分别侧脑室给药MK-801等阻断剂,10min 后待血压平稳再分别侧脑室注射salusin-α,观察给药后大鼠血压和心率的变化.结果 侧脑室注射salusin-α100pmol(给药前:99±11mmHg 比给药后:83±13mmHg, P＜0.05)200pmol(给药前:99±17mmHg 比给药后:87±21mmHg, P＜0.05)或400pmol(给药前:91±9mmHg比给药后:85±12mmHg, P＜0.05),各剂量salusin-α均降低麻醉大鼠血压,但对心率无影响.侧脑室注射等量的aCSF对麻醉大鼠的心血管活动不产生显著作用.侧脑室预先注射MK-801(0 5μmol)、L-NAME(1.15μmol)或Bic(0.3nmol)均不影响侧脑室注射salusin-α产生的降血压效应(P>0.05).结论 侧脑室注射salusin-α显著降低麻醉大鼠的血压,侧脑室注射salusin-α的降压作用可能不是通过NMDA、NO或γ-氨基丁酸通路介导.     

卡巴胆碱对大鼠腹腔粘连形成和粘连组织TGF-β1表达的影响

目的 研究卡巴胆碱对大鼠腹腔粘连的干预作用及其对粘连组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 22只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(n=6)、腹腔粘连组(n=8)、卡巴胆碱干预组(n=8,50μg/kg).采用开腹后无菌干纱布摩擦大鼠盲肠蚓突盲端、并损伤侧腹壁法制作大鼠腹腔粘连动物模型.各组于术后第14天处死动物,参考Phillips 5级分类法评估大鼠腹腔粘连程度.取粘连盲肠组织切片行HE染色观察粘连组织病理变化,免疫组织化学法观察粘连组织TGF-β1表达变化情况.结果 卡巴胆碱干预组腹腔粘连组织面积明显减少.粘连程度评分(O.874±0.641)明显低于腹腔粘连组(3.125±0.641),P＜0.01;卡巴胆碱干预组与腹腔粘连组比较,粘连组织HE染色显示炎症反应轻,偶见增生纤维结缔组织;免疫组织化学染色示假手术组与卡巴胆碱干预组TGF-β1表达水平均显著低于腹腔粘连组.结论 卡巴胆碱可能通过抑制大鼠腹腔粘连组织炎症反应和TGF-β1表达影响腹腔粘连的形成.     

己酮可可碱对染汞大鼠脊髓及背根神经节TNF-α表达的影响

目的 观察己酮可可碱对大鼠脊髓和背根神经节(DRG)肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响.方法 雄性SD大鼠40只,体重180-220g,分为7组.对照组(10只)经口灌胃生理盐水(NS)2mL/次,每天1次;A、B、c组(各5只)按17mg/kg;D、E、F组(各5只)按8.5mag/kg经口灌胃HgCl_2溶液,每天1次.7组均连续灌胃18～22d.染汞组动物出现汞中毒症状后,处死A、D组大鼠和对照组5只大鼠.随后B、E组用二巯丙磺钠注射液(DMPS)按28 mg/kg腹腔注射驱汞2个疗程(驱汞3 d,休息4 d为1个疗程):C组用DMPS+己酮可可碱(按29.22 mg/kg经口灌胃,每天1次,共14 d);F组腹腔注射Ns 1 mL/次,方法同DMPS.实验结束后处死全部动物,灌注固定取出脊髓L5-6节及L5、L6两侧DRG并制成病理切片.用免疫组织化学SABC法测定DRG和脊髓TNF-α表达水平.结果 染毒组大鼠DRG和脊髓TNF-α平均灰度均显著低于对照组;阳性反应物平均面积均显著高于对照组(P<0.05);B、E组用DMPS驱汞2个疗程及F组腹腔注射NS 2周期后,均未见TNF-α表达显著减弱,C组(DMPS+己酮可可碱)DRG和脊髓TNF-α平均灰度显著提高.平均面积减少(P<0.05).结论 亚急性HgC1_2中毒大鼠DRG和脊髓TNF-α表达显著增强,己酮可可碱联合αDMPS能够有效抑制TNF-α表达.