基质金属蛋白酶-2在胃癌中的表达及与侵袭、转移的关系

我们应用免疫组织化学技术 ,以基质金属蛋白酶 2(ＭＭＰ 2 )为检测指标 ,对胃癌的发生、侵袭和转移进行研究 ,以探讨其在胃癌侵袭转移中的作用。材料和方法一、临床病理资料从本院 1997年 1～ 12月间手术切除的胃癌病例中选择诊断明确、病历完整者 71例。其中男 5 4例 ,女 17例。年龄为 34～ 78岁 ,平均 5 9.31岁。同时选择 2 0例正常胃黏膜组织。所有标本均经 10 %甲醛溶液固定 ,石蜡包埋 ,常规连续切片 ,分别作苏木精 伊红、免疫组化染色。二、试剂及方法鼠抗人ＭＭＰ 2抗体 (英国Ｂｉｏｖａｔｉｏｎ公司 ) ,Ｓ -Ｐ试剂盒和ＡＥＣ(美国Ｚ…     

基质金属蛋白酶与消化道肿瘤的侵袭和转移

基质金属蛋白酶（MMPs）是一类结构中含Zn^2＋和Ca^2＋的蛋白水解酶类,大量研究发现,MMPs在许多肿瘤组织中活性增强,与肿瘤的侵袭和转移及预后有关。     

基质金属蛋白酶-9表达与非小细胞肺癌侵袭和转移的关系

非小细胞肺癌( NSCLC)占肺癌80％以上,常常在病变后期才被诊断出,大部分已发生浸润、转移,预后极差.细胞外基质(ECM)降解是引起肺癌侵袭、转移发生的主要因素.基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)是一大族对ECM成分有特异降解作用的蛋白酶,通过降解ECM在NSCLC浸润和转移中起重要作用.MMP-9在体内、外多种恶性肿瘤中呈过表达,且可特异性降解基底膜,已成为MMP家族在恶性肿瘤进展方面的研究热点.     

基质金属蛋白酶与肿瘤侵袭转移的关系

恶性肿瘤的侵袭和转移的分子调控机制是目前肿瘤分子生物学研究的热点课题，众多研究表明，肿瘤细胞侵袭转移能力与其产生或诱导产生基质金属蛋白酶的能力密切相关。基质金属蛋白酶(MMPs)是一个由多个成员组成的蛋白水解酶家族，是丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天门冬氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶4类蛋白水解酶中较为重要的一类，它们几乎能降解细胞外基质的所有成分。     

桂枝茯苓对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移及MMP-2、MMP-9表达的影响

目的研究桂枝茯苓对宫颈癌侵袭和转移的影响,并初步探讨其作用机制。方法选用Transwell侵袭系统,观察桂枝茯苓对宫颈癌细胞侵袭转移的影响;用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Westernblot法检测桂枝茯苓对宫颈癌细胞MMP-2、MMP-9mRNA及蛋白表达的影响。结果桂枝茯苓100mg／ml组、50mg／ml组穿过的细胞数分别为9．00±1．58、9．60±2．07,较空白对照组的40．00±3．81明显减少（P〈0．05）。桂枝茯苓能够明显降低宫颈癌细胞MMP-2、MMP-9mRNA及蛋白表达水平（P均〈0．05）。结论桂枝茯苓能有效抑制宫颈癌侵袭和转移,其作用机制可能与降低宫颈癌细胞运动能力,抑制MMP-2、MMP-9的表达水平有关。     

慢病毒介导的ADAM8基因沉默对胃癌MKN45细胞EMT、侵袭和迁移的影响

目的 研究慢病毒介导的解整合素和金属蛋白酶(ADAM)8基因沉默对人胃癌MKN45细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移能力的影响.方法 采用慢病毒转染技术沉默MKN45细胞中ADAM8基因,构建稳定沉默ADAM8的MKN45细胞株,转染空载作为阴性对照组(sh-NC组),转染ADAM8 shRNA为实验组(sh-AD...     

蛋白酶激活受体2激动剂对食管癌EC109细胞侵袭转移的促进作用

目的:探讨人食管癌细胞株EC109蛋白酶激活受体-2(PAR-2)的表达,以及内源性PAR-2激动剂胰蛋白酶和PAR-2激动肽SLIGKV对该细胞侵袭转移的影响及其可能的分子机制.方法:采用RT-PCR法和免疫细胞化学染色法检测EC109细胞中PAR-2 mRNA及蛋白的表达情况;胰蛋白酶和SLIGKV对细胞施加干预后,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力的变化,RT-PCR法检测PAR-2、MMP-2/MMP-9 mRNA表达的变化,明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9明胶酶活性的变化.结果:食管癌细胞EC109在胰蛋白酶和SLIGKV刺激后,PAR-2 mRNA表达较对照组显著上调(0.781±0.045、0.653±0.029 vs0.491±0.032,均P<0.01);胰蛋白酶在1-10nmol/L、SLIGKV在1-50 μmol/L时可促进细胞增殖(P<0.01或0.05),呈剂量依赖性;Transwell 小室实验中胰蛋白酶组及SLIGKV组的细胞侵袭和迁移能力显著高于对照组及反肽组(72.5±9.2、59.4±8.7 vs 31.6±6.6、36.2±9.8,均P<0.01):胰蛋白酶及PAR-2激动肽作用后细胞MMP-9 mRNA的表达量明显高于对照组及反激动肽组(0.719±0.034、0.466±0.042 vs 0.341±0.032、0.370±0.021,均P<0.01),细胞水解明胶的能力也明显高于对照组及反激动肽组(75.6±6.1、60.4±4.6 vs 44.9±4.2、39.3±5.2,均P<0.01).而对MMP-2的mRNA表达和水解明胶的能力无明显影响(P>0.05).结论:食管癌EC109细胞表达PAR-2受体,且内源性PAR-2激动剂胰蛋白酶和PAR-2激动肽SLIGKV可能通过激活PAR-2受体上调MMP-9表达,进而促进食管癌细胞侵袭转移.     

胰星状细胞对胰腺癌细胞株Patu8988侵袭和转移的影响

目的:探讨永生化人胰星状细胞(IPSC)对胰腺癌细胞株Patu8988侵袭和转移的影响.方法:制备IPSC上清,用IPSC上清和Patu8988共培养,以单独培养的Patu8988为对照,比较实验组与对照组细胞的增殖、黏附能力.侵袭、迁移能力,克隆形成以及抵抗H2O2诱导的Patu8988凋亡能力.结果:与单独培养的胰腺癌细胞株Patu8988相比,IPSC上清对胰腺癌细胞株Patu8988细胞的增殖、黏附、迁移、侵袭能力及克隆形成能力有促进作用(均p<0.05),并能抑制H2O2诱导的Patu8988的凋亡(P<0.05).结论:胰星状细胞可能通过增强胰腺癌细胞株Patu8988的增殖、黏附、迁移、侵袭能力及克隆形成能力,并抑制其的凋亡,在胰腺癌的发展和转移中起重要作用.     

膜型基质金属蛋白酶-1与肿瘤的侵袭和转移的研究进展

基质金属蛋白酶在肿瘤侵袭和转移中起着非常重要作用,而膜型基质金属蛋白酶是一类基质金属蛋白酶家族的新成员,其中膜型基质金属蛋白酶-1是研究最深、意义极为重要的一种,它直接或间接降解细胞外基质中的多种成分,通过调节多种细胞效应分子,影响肿瘤细胞的浸润、转移以及血管生成等过程,在肿瘤的浸润和转移的过程中有重要作用.     

维甲酸对肺腺癌细胞凋亡的影响

维甲酸对肺腺癌细胞凋亡的影响司斌张世明柳河刘志遐王雄彪细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是一种生理性的、高度程序化的、自动的细胞死亡过程，在维持机体组织细胞的数目平衡上起重要作用。已经证明，生物体中细胞死亡通路的紊乱与肿瘤的形成密切相关，促进肿瘤细胞凋亡...     

明胶酶A mRNA表达对胃癌侵袭和转移的影响

目的 探讨明胶酶AmRNA表达与胃癌侵袭和转移的关系。方法 采用Northemblot技术检测32例胃癌组织中明胶酶AmRNA表达。结果 正常胃、癌旁和胃癌组织明胶酶 A mRNA表达阳性率分别为10．0％、28．6％和84．4％。早期胃癌不表达，进展期胃癌高表达。有浆膜侵袭和淋巴结转移的胃癌组织，明胶酶A mRNA显著高表达。结论 明胶酶A mRNA高表达促进胃癌的侵袭和转移，检测明胶酶A mRNA表达可作为判断胃癌侵袭和转移指标。     

细胞间黏附分子与胃癌侵袭、转移关系的研究进展

细胞间黏附分子-1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)是体内重要的细胞活性分子,不仅参与了机体免疫过程及炎症反应,而且还通过与其相应配体的结合,介导癌细胞与不同细胞、基质的黏附,最终使癌细胞逃避免疫监视,利于侵袭转移.近年来,对ICAM-1与恶性肿瘤侵袭转移关系的研究已成为研究热点,其在肿瘤侵袭转移中的作用日益受到众多学者的重视.现就其近年的文献从ICAM-1的结构、生物学特征、在胃癌组织中的表达及作用机制等几个方面作一综述.     

维甲酸对人肝癌细胞凋亡的影响及临床意义

目的：观察全反式维甲酸（ATRA）对肝癌细胞凋亡的作用并探讨ATR的作用机制。方法：在肝癌细胞株SMMC－7721细胞加入ATRA,使终浓度为0．5μg/ml,对照组加等剂量的0．02％DMSO,培养4d,ATRA对SMMC－7721细胞的影响通过苏木精－伊红染色,在光镜下进行细胞形态学观察;通过细胞计数绘制生长曲线及计算细胞生长抑制率,流式细胞术分析不同DNA含量的细胞分布,计算细胞凋亡百分率,凋亡相关基因Fas,p53,Bcl-2蛋白表达的检测亦采用流式细胞仪检测。结果：苏木精－伊红染色可见较多细胞核碎裂,胞浆浓缩,染色质深染,聚集于核膜下,部分细胞膜突起呈小泡样,小泡脱落形成凋亡小体,而对照组无明显的形态学改变,作用4d生细胞生长抑制率为47．5％,与对照组比较,差异显著（P＜0．05）,流式细胞仪分析在G1期前出现亚二倍体凋亡峰;凋亡细胞百分比为16．0％,与对照的6．9％比较有显著性差异（P＜0．01）。观察发现,ATRA对SMMC－771细胞Fax,P53的表达明显增加,并下调Bcl-2的表达,结论：0．5μg/ml的ATRA对肝癌细胞的生长有显著抑制效果,并可见癌细胞凋亡形态改变,ATRA促进SMMC－721肝癌细胞凋亡的机制之一可能是通过调控Fas,P53及Bcl-2的表达。     

西咪替丁对人胃癌细胞MKN45的生长抑制和促凋亡的研究

目的 探讨西咪替丁对胃癌细胞MKN45生长的抑制和凋亡作用。方法 采用MTT比色法测定不同浓度西咪替丁作用下胃癌细胞MKN45培养液的OD值，并用流式细胞仪测定西咪替丁对MKN45的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果 西咪替丁作用72小时，抑制胃癌细胞。MKN45的生长并呈剂量依赖趋势。胃癌细胞MKN45细胞周期发生改变，G1期百分比减少，S期百分比增加，并出现明显的细胞凋亡峰。结论 西咪替丁可能通过诱导胃癌细胞。MKN45凋亡从而抑制其细胞增殖。     

川芎嗪对人肝癌HepG-2细胞体外侵袭和迁移的影响

目的 探讨中药川芎有效成分川芎嗪（TMP）对人肝癌HepG-2细胞体外侵袭和转移的影响。方法 取对数生长期的HepG-2细胞,分别给予50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L TMP和未加药物的阴性对照处理,采用基质粘附实验、Transwell小室迁移和侵袭实验测定HepG-2细胞活动能力,使用流式细胞仪检测HepG-2细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP2）蛋白表达情况,并计算MMP-2/TIMP2比值。结果 随着TMP浓度的加大,HepG-2细胞的粘附、侵袭和迁移数逐渐降低, 50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L TMP处理组HepG-2细胞粘附率分别为（56.2±5.1）%、（36.9±4.2）%、（22.1±3.2）%,明显低于阴性对照组的【（89.4±4.6）%,P<0.05】; 100 mg/L和200 mg/L TMP 处理组HepG-2细胞迁移细胞数分别为（196.6±10.6）个/视野、（182.2±12.4）个/视野,明显低于阴性对照组的（234.6±8.7）个/视野（P<0.05）;100 mg/L和200 mg/L TMP组HepG-2细胞侵袭细胞数分别为（145.9±9.8）个/视野和（123.5±9.3）个/视野,明显低于阴性对照组的（166.3±10.2）个/视野（P<0.05）;随着TMP浓度的加大,细胞MMP-2蛋白表达量逐渐降低,而TIMP2蛋白表达量逐渐升高,与阴性对照组比,实验组细胞MMP-2蛋白表达量和MMP-2/TIMP2比值明显降低,而TIMP2蛋白表达量明显升高（P<0.05）。结论 TMP可有效抑制肝癌HepG-2细胞的粘附、侵袭和迁移能力,其作用机制可能与其能明显下调细胞MMP-2而上调TIMP2蛋白表达有关。     

食管鳞癌组织中PLK1表达变化及其对食管癌细胞侵袭迁移的影响

目的观察食管鳞癌组织中Polo样激酶1(PLK1)的表达变化,及其对食管癌细胞侵袭迁移能力的影响。方法采用免疫组化SP法检测80例食管鳞癌及癌旁组织中的PLK1,分析其与食管鳞癌临床病理参数及患者生存期的关系。将对数生长期的人食管癌EC9706细胞分为两组,观察组转染PLK1 siRNA,对照组转染ScrambledsiRNA;用Transwell小室观察两组食管癌细胞侵袭及迁移能力,Western blot法检测两组食管癌细胞中的PLK1、MMP-2、MMP-9。结果食管鳞癌组织中PLK1阳性表达53例(66.3%),癌旁组织中PLK1阳性表达27例(33.7%);两者比较,P<0.05。PLK1表达与食管鳞癌淋巴结转移及临床分期有关(P均<0.05)。PLK1阴性者5年生存率为62%,高于PLK1阳性者的39%(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,临床分期、淋巴结转移、病理分级、PLK1表达均为食管癌预后的独立危险因素。观察组EC9706侵袭迁移个数分别为(120±6)、(269±8)个/HP,对照组分别为(468±11)、(780±12)个/HP;两组比较,P均<0.05。观察组EC9706中PLK1、MMP-2、MMP-9灰度比值分别为0.1±0.03、0.40±0.02、0.87±0.05,对照组分别为0.96±0.05、0.98±0.07、0.89±0.06;两组PLK1、MMP-2灰度比值比较,P均<0.05。结论食管鳞癌组织中PLK1表达增加,其在食管鳞癌的发生发展中起重要作用;敲降PLK1表达可降低食管癌细胞的侵袭迁移能力,该作用与MMP-2的表达下调有关。     

人类真核翻译延长因子1A2过表达对胰腺癌SW1990细胞体外侵袭及体内转移的影响

目的 探讨人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)过表达对人胰腺癌SW1990细胞体外侵袭和肺转移潜能的影响.方法 通过携带EEF1A2的慢病毒感染人胰腺癌SW1990细胞建立EEF1A2稳定过表达的SW1990/EEF1A2细胞株及空质粒对照的SW1990/GFP细胞株,并以亲本SW1990细胞作为空白对照.采用实时PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞EEF1A2mRAN和蛋白的表达.应用Transwell小室检测细胞的体外侵袭能力.通过裸鼠尾静脉注射癌细胞方法构建肺转移模型,8周后观察并计数肺表面的转移结节.结果 SW1990/EEF1A2细胞EEF1A2 mRNA相对表达量为3.252±0.344,显著高于SW1990/GFP细胞的1.000±0.060及亲本细胞的0.944±0.041(t值分别为2.255、2.305,P值均＜0.01);EEF1A2蛋白表达量为0.833±0.050,显著高于SW1990/GFP细胞的0.247±0.035及亲本细胞的0.273 ±0.041(t值分别为0.572、0.559,P值均＜0.01);穿膜细胞数为(60 ±4)个,显著多于SW1990/GFP细胞的(33 ±4)个和亲本细胞的(26 ±3)个(t值分别为31.33、34.78,P值均＜0.01);裸鼠肺转移结节显著多于SW1990/GFP细胞及亲本细胞组(5/5比1/5、1/5,P值均＜0.05).结论 EEF1A2过表达可以明显增强胰腺癌SW1990细胞的体外侵袭和肺转移能力.     

ERK1／2抑制剂PD98059对大肠癌细胞侵袭和转移的影响

目的观察细胞外信号调节蛋白激酶（ERK1／2）抑制剂PD98059对大肠癌细胞侵袭和转移的影响,探讨其可能机制。方法PD98059不同浓度（0、10、20、40μmo1／L）干预大肠癌细胞24h。用Boyden小室检测其体外运动和侵袭能力,Western blot法检测ERK1／2磷酸化蛋白和ERK1／2蛋白表达情况。结果随着PD98059剂量增大,大肠癌细胞穿膜数逐渐减少（P〈0．05）,磷酸化ERK1／2蛋白水平逐渐降低（P〈0．05）,ERK1／2蛋白水平无明显变化（P〉0．05）。结论PD98059能抑制大肠癌细胞的运动和侵袭力;其机制与PD98059抑制磷酸化ERK1／2有关。