转化生长因子-β1与IgA肾病

转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)是由Assoian等[1]首次从血小板中提取出来的,它是一类多功能的细胞生长因子,能够抑制多类细胞的增殖、分化、促进细胞间质的形成.IgA肾病又称Berger's病,是以肾小球系膜区IgA免疫复合物沉积为特征的一类肾小球肾炎,病理改变以系膜增殖为基本组织学改变,临床上以血尿为主要表现.我国为IgA肾病高发地区,约占原发性肾小球肾炎的26%～34%,其预后较差,在确诊后5～25年内约20%～40%的患者发展为终末期肾脏疾病,这些引起了国内外学者的广泛关注,近年来发现TGF-β1的表达在IgA肾病中显著增高,与IgA肾病的转归密切相关.现将这一领域的有关研究进展作一概要综述.     

蛋白激酶A、信号转导分子和转录激动子3调节转化生长因子-β1诱导的细胞凋亡和上皮细胞间质转化

细胞凋亡和上皮细胞间质转化（EMT）对于正常发育和机体自稳非常重要。凋亡和上皮细胞间质转化这些事件的改变常与一些病理过程相关，比如肿瘤形成和转移、肝脏与肾脏的纤维化疾病、胚胎发育异常等。TGF-β1诱导凋亡和EMT同时发生的机制尚未完全明了。作研究了TGF—G1诱导细胞凋亡和EMT的潜在机制。TGF—β1诱导细胞凋亡和EMT与蛋白激酶A、信号转导分子、转录激活子3（STAT3）的活化相关。     

转化生长因子-β1介导的足细胞损伤

肾小球足细胞既是免疫介导,也是非免疫介导损伤耙点,足细胞的损伤是导致大量蛋白尿和肾小球硬化的关键,机制十分复杂.转化生长因子-β1是多功能的细胞因子,近年来的研究发现其在介导足细胞凋亡、脱落及功能异常等方面发挥着重要作用.     

尿转化生长因子-β1和细胞外基质在慢性肾小球肾病中的变化

目的：探讨尿中转化生长因子-β1（TGF-β1）和细胞外基质（ECM）在各种慢性肾小球肾病患者中的变化及其临床意义。方法：将105例慢性肾小球患者进行临床和病理分组,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测各组的尿TGF-β1水平,同时采用放射免疫分析法（RIA）检测尿中的各种ECM,所有检测值均用尿肌酐（Cr）浓度进行校正。结果：在不同临床分组中,尿TGF-β1/Cr和LN/Cr、PCⅢ/Cr、Ⅳ-C/Cr水平明显高于对照组（P〈0.05）,尿HA/Cr水平则在Ⅲ、Ⅳ组中出现下降。而在不同的病理分组中,肾小球轻微病变（GML）组尿中TGF-β1、ECM与对照组比较无统计学意义,其他各病理分组则出现不同的变化。相关性分析尿TGF-β1/Cr与LN/Cr、PCⅢ/Cr、Ⅳ-C/Cr正相关,与HA/Cr无相关性。结论：通过尿TGF-β1和ECM在慢性肾小球肾病患者中的联合检测,对评价慢性肾小球肾病的进展和预后判断提供一定的临床价值。     

脑胶质瘤增殖活性与转化生长因子-β1的关系

目的 探讨胶质瘤中转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白与增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白在胶质瘤中的表达及相互关系。方法 根据WHO标准进行分类，采用免疫组织化学方法对35例胶质瘤和7例正常脑组织石蜡标本中TGF-β1与PCNA蛋白的表达水平进行检测，并比较两者的相关性。结果 TGF-β1和PCNA蛋白在胶质瘤细胞中有不同程度的表达，两者呈正相关（r=0．78，P＜0．01），且它们在正常脑组织，低、高级别胶质瘤之间两两比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论 人脑胶质瘤TGF-β1蛋白的阳性表达与细胞增殖活性和组织学分级密切相关，它可能参与了人脑胶质瘤细胞的恶性转化。     

转化生长因子-β1诱导肝星状细胞间质上皮转化研究

目的 检测转化生长因子(TGF)-β1对肝星状细胞(HSCs)间质上皮转化的作用。方法 用人重组TGF-β1及其中和抗体孵育原代人肝星状细胞48 h,以Western blot检测肝星状细胞间质标记Vimentin、desmin和上皮标记CK18及白蛋白(Albumin)的表达,并分析其迁移能力和形态变化。结果 TGF-β1可显著下调肝星状细胞表达Vimentin和desmin,而使其表达CK18及Albumin,同时其迁移能力显著下降(3083±629,P＜0.05),细胞形态由星芒状向铺路石样转化。在同时接受TGF-β1中和抗体孵育的肝星状细胞中,上述标记表达,迁移力(9250±1146,P＞0.05)和形态变化不明显。结论 TGF-β1可显著诱导肝星状细胞向肝上皮细胞转化,提示其可能是肝细胞重要再生来源之一。     

转化生长因子β1对大鼠原代肾小球系膜细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨原代培养的大鼠肾小球系膜细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达及转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）对其表达的影响。方法：采用RT-PCR和Westernblot方法检测大鼠原代培养的肾小球系膜细胞VEGF表达及不同浓度、不同时间的TGF-β1刺激对VEGF表达的作用。结果：原代培养的大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF164、120mRNA，TGF-β1呈时间依赖性增加其表达，在12h表达最高，分别为刺激前3．17、2．925倍，有统计学差异（P〈0．001）。在剂量反应曲线上，2ng／ml TGF-β1刺激作用最强，VEGF164、120mRNA表达分别为未刺激组的2．82、2．45倍，有统计学差异（P〈0．001）。与VEGF mRNA表达一致，大鼠原代肾小球系膜细胞仅见VEGF164蛋白表达，2ng／ml TGF-β1呈时间依赖性的增加VEGF 164蛋白表达，24h达高峰，为刺激前的2．37倍。结论：促进肾小球系膜细胞VEGF表达可能是TGF-β1介导肾脏损害发生、发展的机制之一。     

白藜芦醇对TGF-β1诱导的足细胞凋亡及骨架分子损害的干预作用

目的:探讨白藜芦醇对肾足细胞凋亡和骨架蛋白异常的干预作用。方法:体外分化条件下培养小鼠足细胞10d,用转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta,TGF-β1)诱导作为研究模型,白藜芦醇干预,肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor hepatocyte,HGF)作为对照。流式细胞术检测足细胞线粒体膜电位以及Vimentin、Nestin等蛋白表达,采用western-blotting技术检测骨架蛋白α-actinin-4蛋白表达。用蛋白滤过试验检测单层足细胞的蛋白滤过功能。结果:TGF-β1可诱导足细胞线粒体膜电位显著降低,骨架蛋白Vimentin、α-actinin-4等表达水平显著下调,而Nestin表达显著增高。白藜芦醇干预可增高足细胞线粒体膜电位以及Vimentin、α-actinin-4等表达,对Nestin表达则差异无统计学意义;HGF对线粒体膜电位、Vimentin、α-actinin-4等差异无统计学意义,但可显著降低Nestin表达;白藜芦醇和HGF干预均可显著降低透过单层足细胞的蛋白滤过量。结论:白藜芦醇抑制TGF-β1诱导的足细胞骨架系统蛋白表达异常和细胞凋亡的作用,可能是其维持足细胞滤过屏障完整性的机制之一,HGF对足细胞损害的干预作用与白藜芦醇不同,机制尚不明确。     

足细胞转分化的研究进展

足细胞是肾小球滤过屏障最外层的独特的肾小球上皮细胞,其在肾小球滤过作用的调节中扮演着重要的作用。有研究表明,当足细胞受到不同的损伤（如TGF-β、高糖、阿霉素等刺激）时可以发生上皮-间充质细胞转分化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）。EMT是指极化的上皮细胞经历许多生化的改变过程从而获得间充质细胞表型。足细胞发生EMT后将会导致肾小球滤过屏障受损,出现蛋白尿;严重时可导致足细胞从肾小球基底膜上脱离或者是凋亡,     

补肾方对慢性肾小球肾炎患者尿中转化生长因子β1的影响

转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)是一种具有多种生物学活性的细胞因子,在调节细胞外基质代谢、参与炎症反应和间质纤维化等方面起着重要作用.近年研究表明,TGF-β1的过度表达是构成肾组织纤维化的病理学基础,对肾脏纤维化的发生发展起着重要作用[1].本研究主要观察补肾方对慢性肾小球肾炎患者尿中TGF-β1水平的影响,并进行临床随机对照研究,现报道如下.     

LeftyA真核表达载体的构建及其对转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响

目的 构建pcDNA3.1-LeftyA真核表达载体,观察其对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化(EMT)的影响.方法 基因克隆技术构建pcDNA3.1-LeftyA真核表达载体,将其瞬时转染HK-2细胞,TGF-β1(10μg/L)刺激后,观察细胞形态变化,检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)基因及蛋白的表达.结果 TGF-β1刺激后HK-2细胞内E-cadherin mRNA和蛋白时间依赖性表达下调,α-SMA mRNA和蛋白时间依赖性表达上调,同时E-cadherin表达变化早于α-SMA;LeftyA蛋白可以显著抑制E-cadherin蛋白的下调表达(P＜0.05),其表达比同时间点单纯刺激组高17.6%;同时可逆转α-SMA蛋白的上调表达(P＜0.05),其蛋白表达比单纯刺激组低14.0%.结论 LeftyA蛋白可以抑制TGF-β1所致的EMT.

Abstract：

Objective To construct the eukaryotic expression vector for LeftyA and study the effects of LeftyA on epithelial to mesenchymal transition of human proximal tubular epithelial cells induced by transforming growth factor-β1 ( TGF-β1 ). Methods The pcDNA3. 1-LeftyA was constructed by recombinant DNA technique. After transfection with pcDNA3. 1-LeftyA HK-2 cells were stimulated by TGF-β1( 10 μg/L). The morphological changes, and the expression of E-cadherin, α-SMA and LeftyA mRNA and protein were observed and detected, respectively. Results TGF-β1 could markedly decrease the expression of E-cadherin mRNA and protein in HK-2 cells induced, and dramatically increase the expression of α-SMA mRNA and protein in a time-dependent manner. Forced expression of exogenous LeftyA led to a blockage of TGF-β1 -induced E-cadherin ( 17.6% ) suppression and α-SMA induction ( 14. 0% ). Conclusion Disruption of cell adherence is the beginning stage of EMT, and overexpression of LeftyA can suppress EMT induced by TGF-β1, which suggests a alprostadil role for LeftyA in TGF-β1-induced tubular EMT and renal fibrosis.     

转化生长因子-β1在脑血管畸形中的表达

转化生长因子 β(TGF β)具有细胞生长与分化、细胞黏连与细胞外基质的形成、修复损伤、免疫调节以及胚胎发育等多种生物学功能[1,2 ] 。小鼠体内实验显示TGF β能快速诱导血管形成,在体外实验中也观察到促进胶原蛋白的形成[3 ] 。我们采用TGF β1RNA狭缝杂交观察TGF β1在脑血管畸形(AVMs)中的作用。一、材料和方法1.标本来源:取自我院和华山医院神经外科(陈衔成教授提供部分标本)手术切除14例脑AVMs及其周围脑组织标本和8例正常脑血管和脑组织标本液氮速冻,-70℃保存。2 .总RNA提取、RNA电泳:用Trizol试剂提取总RNA电泳…     

大鼠原位移植肝脏中细胞凋亡与转化生长因子-β1 mRNA表达的实验研究

本实验旨在探讨大鼠原位肝移植免疫特惠的机制 ,研究肝脏移植移植物中肝实质细胞和浸润细胞凋亡及肝脏移植移植物中转化生长因子 β1 (ＴＧＦ β1 )ｍＲＮＡ的表达变化。一、材料与方法1 .实验动物分组 :肝移植模型用改良Ｋａｍａｄａ[1 ] 方法进行。Ａ组ＳＤ大鼠原位肝移植假手术对照组 ,(ｎ =30 ) ;Ｂ组Ｗｉｓｔａｒ→ＳＤ原位肝移植组 ,(ｎ =30 )。肝脏移植大鼠分别于术后 1、3、5、7、1 4ｄ各引颈处死 6只 ,获取移植物 ,迅速用液氮降温 ,- 80℃低温冰箱保存备用。2 .细胞凋亡的动态检测 :用ＴＵＮＥＬ法标记过氧化物酶显色检测细胞凋亡…     

转化生长因子-β1基因修饰未成熟树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受

目的 观察转化生长因子-β1 (TGF-β1)基因转染未成熟树突状细胞(imDC)对大鼠肝移植免疫耐受的诱导作用.方法 利用大鼠骨髓细胞诱导培养imDC,以脂质体介导的pIRES2-EGFP-hTGF-β1转染imDC,于移植前5d输注受体Lewis大鼠体内,移植后分别于3、7、10d抽血检测肝功能[总胆红素( TBIL)和谷丙转氨酶(ALT)]、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-12(IL-12)水平、肝组织苏木素-伊红(HE)染色急性排斥反应病理评分、原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测肝脏淋巴细胞的凋亡及观察各组大鼠肝移植后的生存时间.结果 TGF-β1组移植后肝功能(TBIL和ALT)优于各对照组(P＜0.05);TGF-β1组移植后3、7d血清IL-12浓度分别为71.03±10.70、80.88±14.23均低于各对照组(P＜0.05);TGF-β1组移植后7d出现交界性排斥反应,移植10 d后出现轻度排斥反应(P＜0.05);TGF-β1基因转染组移植后3、7、10d汇管区淋巴细胞凋亡指数分别为6.75±1.93、14.00±2.19、18.25±1.38,较各对照组均明显增高(P＜0.05);TGF-β1组大鼠移植后中位生存期为58 d,明显长于各对照组.结论 TGF-β1基因改造的imDC能诱导大鼠移植免疫耐受,在诱导器官移植耐受中有良好的应用前景.     

转化生长因子-β1对肾小球系膜细胞TRPC6表达的影响

目的：观察转化生长因子-β1（TGF-β1）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（GMC）瞬时受体势C6（TRPC6）表达的影响,并探讨糖尿病肾病（DN）的发病机制。方法：GMC予TGF—β1 10ng／ml刺激24h后,间接免疫荧光法检测GMC TRPC6的表达;免疫印迹法观察TRPC6的表达。结果：GMC存在TRPC6的表达,以细胞膜表达为主;TGF-β1刺激GMC可有TRPC6表达下调（P〈0．05）。结论：肾小球系膜细胞存在TRPC6的表达,TGF-β1刺激后TRPC6表达下调;TGF-β1可能通过下调TRPC6参与了DN的发病。     

转化生长因子-β1和结缔组织生长因子在慢性胰腺炎组织中的表达及其意义

我们通过建立大鼠慢性胰腺炎 (CP)模型 ,用免疫组织化学技术 ,对转化生长因子 β1(TGF β1)和结缔组织生长因子(CTGF)在CP形成过程中的表达进行动态观察 ,探讨其作用。一、材料和方法1.试剂与仪器 :三硝基苯磺酸Sigma公司产品 ,恒流静脉泵TE 3 11型 ,Teru mo公司产品 ,兔抗大鼠TGF β1单克隆抗体 ,兔抗大鼠Ⅰ型胶原多克隆抗体SantaCruz公司产品 ,兔抗大鼠CTGF单克隆抗体和EnVisionTM试剂盒购自Dako公司。2 .模型制备[1] :48只SD大鼠 (必凯公司 ) ,体重 2 5 0～ 3 0 0 g ,随机分为两组 :(1)CP组 (n =2 4)。氯胺酮 (10 0mg/kg)…     

血清转化生长因子-β1与肾小球病理损害相关性研究

目的：探讨血清转化生长因子-β1（TGF-β1）判断肾小球病理损害的价值。方法：肾穿刺病理按照Katafu-chi积分法评价肾小球损伤。A组为肾小球损害积分0分～2分,B组为〉2分～4分,C组为〉4分。同时测定血清TGF-β1。结果：（1）C组血清TGF-β1水平显著高于A组、B组（2.59±1.16）vs（1.65±0.59）、（1.86±0.77）,P〈0.01;（2）血清TGF-β1与肾小球增生积分、肾小球节段损伤积分、肾小球硬化积分之偏相关系数=0.038、0.381、0.184,P=0.636、0.000、0.022。（3）肾小球节段损伤乙组血清TGF-β1明显高于甲组（2.09±0.96）vs（1.61±0.59）,P=0.000。结论：血清TGF-β1是判断肾小球损害尤其是肾小球节段损伤的有用指标。     

转化生长因子-β1在慢性同种移植肾病大鼠早期中的表达

慢性同种移植肾病(chronic allograft nephropathy,CAN)是肾移植一年后晚期移植物丢失的主要原因,但其精确的发病机制并不清楚.近年来有研究发现转化生长因子-β1(TG F-β1)直接参与CAN的发病过程[1～3].但关于TGF-β1在CAN发病早期的表达情况报道甚少.我们利用国际标准CAN大鼠模型观察TGF-β1在CAN发病早期中的表达情况.     

胎儿和少儿皮肤内转化生长因子-β1和β3基因表达的变化

目的　探讨转化生长因子 β1(TGF β1) ,TGF β3及其Ⅰ 型和Ⅱ 型受体 (TBRⅠ ,TBRⅡ )在胎儿和少儿皮肤中表达的特征。方法　提取 18例不同胎龄的胎儿皮肤和 6例少儿皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)方法检测这 4种基因的表达。结果　在早期妊娠胎儿的皮肤中 ,TGF β1,TBRⅠ和TBRⅡ基因表达较弱 ,随着胎龄的增加 ,这 3种基因表达逐渐增强。在少儿皮肤内 ,这 3种基因的表达量分别为妊娠早期皮肤的 1.3 ,1.3和 1.2倍 ,基因表达显著升高 (P <0 .0 5 )。在早期胚胎的皮肤中 ,TGF β3基因表达较强 ,而在少儿皮肤内 ,该基因表达低下。结论　在早期胚胎皮肤中 ,TGF β1,TBRⅠ和TBRⅡ基因低表达 ,TGF β3基因的高表达可能与胎儿皮肤创面无瘢痕修复密切相关。