改良SDMC-2液对离体犬肺保存-移植的研究

目的在山东医科大学心脏液2号（SDMC-2）的基础上，开发有利于肺保存的器官保存液。方法30条Beagle犬随机分为3组，每组供、受体各5条，供体左肺经3种保存液于4℃保存12h；然后行受体左肺移植，测定并比较再灌注后的平均肺动脉压力（MPAP）及动脉血氧分压（PaO2）；对保存末及再灌注后肺组织标本进行电镜观察。结果（1）保存-移植再灌注后，3组与正常对照组比较：MPAP升高，PaO2降低（P〈0．01）；超微结构均不同程度损伤。（2）改良SDMC-2液保存组再灌注后即刻、0．5、1h的MPAP无明显变化，均低于相应时间的低钾保存液（LPD液）、SDMC-2液保存组（P〈0．05）；PaO2则高于相应时间的LPD液、SDMC-2液保存组（P〈0．05）。电镜显示：改良SDMC-2液保存组肺组织超微结构损伤最轻。结论改良SDMC-2液具有优良的保存效果及抗再灌注损伤能力。     

硝酸甘油对移植犬肺的保护作用

目的评价硝酸甘油对犬肺的保护作用。方法将24只犬随机分为实验组和对照组两组,每组供、受体各6只。实验组用含硝酸甘油的低钾右旋糖酐(low potassium dextran,LPD)灌注液灌注供肺,对照组仅用LPD灌注液灌注供肺,留取供犬右肺继续于灌注液中保存至4h,修剪左肺作移植肺,两组受体犬均行左肺移植术。比较两组供体肺组织不同时间的髓过氧化酶(myeloperoxi-dase,MPO)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和湿/干重量比(W/D),比较两组受体犬移植前后不同时间肺血流动力学参数以及血气分析指标,并比较病理结果。结果与对照组相比,实验组肺组织灌注后各时间段的MPO活性、丙二醛含量均较低(均为P(0.05),两组W/D差异无统计学意义。实验组受体犬移植后的平均肺动脉压(mean pulmonary arterial pressure,MPAP)低于对照组而动脉血氧分压(PaO2)高于对照组(均为P(0.05)。移植后供肺肺组织的病理学结果显示,实验组肺组织水肿、炎性细胞浸润、损伤等病理变化较对照组减轻。结论在本实验条件下,在灌注液中加入硝酸甘油可以在犬肺移植过程中起到保护肺组织的作用。     

抑肽酶-低钾-右旋糖酐保存液对兔肺缺血再灌注损伤的影响

目的探讨抑肽酶-低钾-右旋糖酐保存液对常温兔肺缺血再灌注损伤的影响。方法成年新西兰大白兔18只,体重0．9～1．5kg,雌雄不拘,随机分为3组（n=6）：对照组（C组）、低钾-右旋糖酐（LPD）组（L组）、抑肽酶＋LPD组（A组）。C组直接阻断左肺门,不灌注肺保存液,L组和A组阻断左肺动脉,待肺膨胀后分别经左肺动脉导管灌注LPD保存液或抑肽酶＋LPD保存液30ml/kg（含抑肽酶150kIU/ml）,灌注结束后阻断左肺静脉,在肺膨胀一半时阻断左主支气管,2h后依次开放左肺静脉、动脉和左主支气管,再灌注90min后处死动物取出左肺,测定肺组织丙二醛（MDA）含量及髓过氧化物酶（MPO）活性,计算肺组织干湿重比（D/W）,观察肺组织病理学变化；分别于缺血前及再灌注15、60、90min检测动脉血氧分压（PaO2）及血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度。结果与缺血前比较,3组再灌注期间血清TNF-α浓度升高,PaO2下降（P＜0．01）；与C组比较,L组、A组再灌注期间肺组织MDA含量、MPO活性降低,D/W升高,血清TNF-α浓度降低,PaO2升高（P＜0．05或0．01）；与L组比较,A组肺组织MDA含量、MPO活性降低,D/W升高,血清TNF-α浓度降低,PaO2升高（P＜0．01）。A组肺组织水肿、渗出、损伤等病理变化较C组和L组减轻。结论抑肽酶-LPD保存液可减轻兔常温肺缺血再灌注损伤,改善肺功能。     

保存液中加入硝酸甘油提高离体犬肺的保存效果

在研究不同器官保存液的基础上，我们先后开发了SDMC-1、2液，可有效应用于离体心脏的保存。为了提高肺保存的效果，我们将保存液中加入硝酸甘油（NTG），用于供肺的灌洗及保存，取得了较好的效果，报道如下。     

卡托普利在肺保存中的作用

目的 研究卡托普利在肺保存中的作用及可能的作用机制。方法 将猪分为2组，对照组用4℃改良的Euro-Colling液（E－C液）对供肺进行灌洗和保存，实验组用4℃含卡托普利（500μmol/L)的E－C液对供肺进行灌洗和保存，然后进行左肺移植。在再灌注后0．5、1和2h采血及肺组织，测定血氧分压、肺血管阻力、NO2^-/NO3^－含量、超氧化物歧化酶（SOD）的活性以及脂质过氧化产物丙二醛（MDA）的含量。结果 实验组的左肺氧合功能明显好于对照组，肺循环阻力及肺含水量也较对照组相应时间低，差异均有显著性；实验组在此期间的NO2^-/NO3^-含量较对照组有明显高（P＜0．01），但肺组织中的SOD活性及MDA含量变化不大。结论 卡托普利对供肺有较好的保护作用，能降低移植后肺循环阻力及肺含水量，对NO升高有一定作用，但对氧自由基的形成及消除效果不理想。     

保存温度对大鼠肝脏功能的影响

目的 研究温度对大鼠肝脏功能的影响,以确定大刀肝脏的是适保存温度。方法 采用单纯低温保存方法及建立大鼠原位肝移植模型研究保存温度对大鼠肝脏功能的影响。实验对0℃、4℃、8℃、12℃进行研究,保存时发为6,18及30h,保存18h后行肝移植术,检测指标包括肝脏酶学、能量指标及组织形态学改变。结果 ①保存18,30h的灌出液及移植后2h血清中AST、LDH水平为4℃＜0℃＜8℃＞12℃（P＜0.01或P＜0.05）。②保存18、30h及移植后20min的肝脏能量指标ATP、EC为4℃＞0℃＞8＞12℃（P＜0.01或P＜0.05）。③肝脏形态学示4℃组损害较其它组轻。结论 4℃对于大鼠肝脏是是适保存温度,它能够明显减轻大鼠肝脏的冷损伤程度。     

肺泡内不同氧浓度对供肺保存效果的影响

目的：研究低温保存期间肺泡内不同充气成份（纯氧和空气）对供者肺保存效果的影响。方法：实验分为3组,A组为新鲜正常对照组,B组为保存期间肺泡内充入空气组,C组为保存期间肺泡内充入纯氧组,将B,C两组的心肺组织浸于10度低钾右旋糖酐液中保存18h,取出后用温静脉血连续灌注左肺30min,结果：C组流出血氧分压（PO2）显著高于B组,与A组近似;二氧化碳分压（PCO2）显著低于A组和B组,肺动脉平均压明显低于A组和B组,再灌注后再二醛含量显著低于组,与A组近似。结论：供肺低温保存期间（18h)肺泡内充入纯氧的保护效果显著优于空气。     

保存温度对移植胰腺功能影响的实验研究

目的探讨保存温度对移植胰腺功能的影响,确定大鼠胰腺的最适保存温度。方法采用原位灌注、单纯低温保存及建立同系大鼠异位全胰十二指肠移植模型,按不同保存温度(0℃、4℃、8℃、12℃)进行分组,保存6h后进行移植,通过光镜观察胰腺组织结构变化,高压液相色谱法检测保存6h后移植物ATP和总腺苷核苷酸(TAN)含量。移植24h后,检测血糖、血清中脂肪酶及淀粉酶含量,测定移植胰腺组织中髓过氧化酶(MPO)活性,并进行组织学观察。结果4℃组保存6h后和移植24h后的胰腺组织结构损伤明显轻于其它组。保存6h后胰腺组织中ATP和TAN水平在4℃组、0℃组、8℃组和12℃组依次降低,差异有显著性意义(P<0.05)。移植24h后血糖、血清脂肪酶及胰腺组织中MPO水平在4℃组、0℃组、8℃组和12℃组依次增高,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论4℃对大鼠胰腺是最适保存温度,它能够明显减轻大鼠胰腺的冷损伤程度。     

黄芪在犬肾离体灌注保存中的作用

目的研究黄芪提取液对犬肾离体低温灌注及保存中缺血再灌注损伤的影响。方法以常规的HC-A保存液为对照组,以高渗枸橼酸盐嘌呤溶液(HC-A)添加黄芪提取液为实验组,分别对离体犬肾进行低温灌注保存24、48、72 h。通过光镜、电镜观察肾组织结构变化,建立犬肾移植模型,检测移植前后生化指标变化,综合分析。结果实验组保存的犬肾组织超微结构损伤明显轻于对照组。病理组织检查评分,实验组低于对照组(P<0.05)。移植肾早期功能指标检测,移植后2 h实验组血肌酐值(98.25±36.76)μmol/L明显低于对照组(147.26±59.67)μmol/L;移植后24 h血肌酐值(221.55±62.13)μmol/L明显低于对照组(316.12±74.31)μmol/L,而内生肌酐清除值实验组(1.91±0.76)ml·min-1·kg-1明显高于对照组(0.87±0.82)ml·min-1·kg-1,差异均具有显著性(P<0.05)。结论黄芪用于肾脏低温灌注保存中,对缺血再灌注损伤的肾脏有一定保护作用。     

L－精氨酸在离体肺保存中的作用

目的：研究一氧化氮前体L－精氨酸（L-Arg)在离体兔肺保存中的保护作用。方法：将14只新西兰兔随机分为2组,对照组以改良的Euro-Collins(ECS)液灌注及保存供肺,实验组以L－精氨酸（3mmol/L)加入改良的ECS液中灌注及保存供肺。冷保存6h。以自体血再灌注1h后,做肺静脉血气分析（PvO2),并测定血及肺组织中一氧化 氮（NO）,超氧化物歧化酶（SOD）,脂质过氧化物（LPO）含量及肺组织的超微结构以评价肺保护的效果。结果：再灌注后,实验组比对照组血氧分压显著提高（P＜0．05）。实验组血及肺组织中NO及SOD含量较对照组高（P＜0．05）,LPO含量较对照组低（P＜0．05）,透射电镜检查实验组损伤轻于对照组,结论：肺保存不超过6h时,在改良的ECS液中加入L-Arg用于离体肺的灌注和保存,能减轻肺损伤。     

温度对WMO-1号液保存犬肾的影响

目的 探讨温度对ＷＭＯ－１号液保存犬肾的影响。方法 采用保存－自体移植模型,比较了不同温度条件下ＷＭＯ－１号液保存犬肾２４小时后的肾功能和形态学变化。结果 保存肾的损害程度与保存温度有关。１５℃保存２４小时不足以防止肾脏缺血损害。５－８℃组术后最大血肌酐值和平均血肌酐值均显著低于１－４℃组和９－１２℃组,形态学变化亦较轻。结论 ＷＭＯ－１号液保存犬肾的最适宜保存温度为５－８℃,保存温度过低或过高均     

Ischemic preconditioning enhances donor lung preservation in the rabbit

Objective: Ischemic preconditioning achieved by brief periods of ischemia followed by reperfusion before a prolonged period of ischemia, is well known to reduce myocardial damage. We investigated whether ischemic preconditioning of the lung could also attenuate ischemia-reperfusion injury following pulmonary preservation. Methods: Transient ischemia of the right lung was achieved in rabbits (n=4 in each group) by occluding the main bronchus and pulmonary artery, followed by reperfusion according to a protocol that differed between study groups: group 1 (control), 45 min ventilation; group 2, 30 min ventilation, 5 min ischemia and 10 min reperfusion; group 3, three periods of 5 min ischemia and 10 min reperfusion; group 4, five periods of 3 min ischemia and 6 min reperfusion. Donor lungs were then flushed with a crystalloid solution followed by inflated storage at 37°C for 2 h. The function of the right lung was assessed during reperfusion for 2 h with homologous, diluted and deoxygenated blood in an isolated, pressure-limited, and room-air ventilated model. Results: Significant differences (P<0.0001) were observed between groups 1 and 2 vs. groups 3 and 4 in veno–arterial oxygen pressure gradient (29±6 and 24±6 mm Hg vs. 124±24 and 132±14 mm Hg, respectively), and in weight gain (88±13 and 98±13% vs. 44±9 and 29±3%, respectively) after 1 h of reperfusion, and in wet-to-dry weight ratio (15.5±1.5 and 14.3±0.4 vs. 10.1±1.6 and 9.0±0.8, respectively) at the end of reperfusion. No significant differences in any of these parameters were observed between group 1 vs. group 2 neither between group 3 vs. group 4. Conclusions: These data suggest: (1) That 15 min, but not 5 min of transient ischemia prior to pulmonary preservation can significantly reduce edema in the lung graft upon reperfusion, thus improving oxygenation capacity and (2) although not significant, this beneficial effect seems to be slightly better with more repetitive periods of transient ischemia. Further research is warranted to investigate whether ischemic preconditioning in the human organ donor may become a new strategy to protect lung tissue during a planned ischemic event as in pulmonary transplantation.     

二种不同成份灌洗液肺保存效果的对比

目的 比较2种不同成份肺灌洗液的肺保存效果.方法 将犬分成2组,一组供肺采用改良的Euro-Collins液(含高钾,钾浓度108mmol/L)灌洗,另一组用低钾葡萄糖液(LPG液,钾浓度4 mmol/L)灌洗.4℃保存6小时后行异体左肺移植,保留受体的右肺.术后10分钟～72小时定时阻断右肺动脉血流,采股动脉血作血液气体分析,并作病理检查.结果 改良的Euro-Collins液和LPG液灌洗的肺移植后即刻受体动脉血氧分压(PaO2)分别为(17.3±6.2)kPa和(19.7±7.0)kPa.CO2分压(PaCO2)分别为(5.28±1.17)kPa和(4.8±0.7)kPa,两组比较,P>0.05,移植后72小时的PaO2分别为(14.6±6.1)kPa和(18.4±7.6)kPa,PaCO2分别为(4.2±0.9)kPa和(4.6±0.7)kPa,两组比较,P>0.05.移植肺组织光镜和电镜观察发现,灌洗后即刻及保存6小时的组织学改变主要表现为肺泡上皮及毛细血管上皮细胞肿胀、肥大、变性,移植后72小时可见肺泡内有渗出、淋巴细胞浸润及血管壁增厚,2个组的病理改变相似.结论 含高钾的改良Euro-Collins液及含低钾的LPG液肺保存效果相似,灌洗液中的K+浓度并非影响移植肺功能的关键因素.     

冷浸泡法保存犬心3 h后原位心脏移植的实验研究

目的 探讨Ｓｔ Ｔｈｏｍａｓ仿细胞外液、Ｃｏｌｌｉｎｓ仿细胞内液及两种液体联合应用在冷浸泡法供心保存中的心肌保护效果。方法 １２只供犬随机平均分为３组;第１组：以Ｓｔ Ｔｈｏｍａｓ液作为停跳液、灌注冲洗液和保存液;第２组：以Ｃｏｌｌｉｎｓ液作为停跳液、灌注冲洗液和保存液;第３组：以ＳｔＴｈｏｍａｓ液作为停跳液、Ｃｏｌｌｉｎｓ液作为灌注冲洗和保存液。将离体共心放入４℃灌注冲洗液中保存３ｈ。观察指标：     

长征-1号多器官保存液低温保存大鼠肺脏并移植的实验研究

目的 通过大鼠原位肺移模型,研究长征－１号多器官保存液保存肺的效果。方法 将大鼠随机分为３组;对组照;以平衡液灌洗供肺,并立即移植;ＣＺ－１液组;以ＣＺ－１液灌洗供肺,保存８小时后移植;Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液组,以Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ液灌洗供肺,保存８小时后移植。     

HOE-642联合改良K/Mg冷血心麻液对犬供心的保护作用

目的探讨HOE-642联合改良K／Mg冷血心麻液提高犬供心的保存效果的作用。方法雄性成年杂种家犬32只，随机分为整合组和常规组（每组16只，供、受者各8只）。（1）整合组：供心保护采用HOE-642联合改良K／Mg冷血心麻液的“整合策略”；（2）常规组：供心保护采用临床上常规方法。所有动物的供心均冷浸浴保存4h，心脏移植用原位标准法。记录不同时段的心功能指标；实验结束后观察心肌超微结构并测定心肌含水量。结果每组各1例主动脉开放后因主动脉吻合口漏血，失血陛休克死亡，剔除出实验；其余动物均成功脱离体外循环。整合组的移植心脏左心室收缩功能和舒张功能恢复指标显著优于常规组（P〈0．05）；整合组心肌组织含水量显著小于常规组（P〈0．05）；整合组心肌细胞亚细胞结构的保存亦优于常规组。结论临床常规方法和HOE-642联合改良K／Mg冷血心麻液的“整合策略”，均可安全冷保存供心4h，但后者能进一步减轻心肌水肿、维持心肌细胞结构完整、促进缺血／再灌注损伤后心功能的恢复，具有更佳的心肌保护效果。     

Heart and lung preservation using a new solution; UCLA Formula

Heart and lung preservation is a significant barrier in clinical heart and lung transplantation. In a previous study, we have shown that UCLA Formula, modified from cardioplegic solution, has a favorable effect on lung preservation. In this study, we evaluated the effect of the simultaneous flushing method using UCLA Formula alone on both heart and lung preservation. We conducted six experiments using 18 mongrel dogs, weighing 20–28 kg. In the donor animals, the heart and lungs were each flushed with 500 ml of cold UCLA Formula, using two catheters, one inserted into the ascending aorta and the other into the main pulmonary artery. After the heart and lung block was trimmed, orthotopic cardiac transplantation and single left lung transplantation were independently performed on different recipients following preservation for 4.3 h in the case of the heart and 7.5 h in the case of the lung. Thus, the function of the preserved organs was independently assessed using cardiac output and left ventricular end-diastolic pressure (LVEDP) with constant central venous pressure (CVP) in heart transplantation, and arterial gas analysis and the relationship between inspiratory pressure and expiratory tidal volume in lung transplantation. These measurements were performed before harvesting and 1 h and 4 h after transplantation, After heart transplantation cardiac output showed no significant deterioration. No significant differences in gas analysis and the pressure-volume curve were seen after lung transplantation. In conclusion, the simultaneous flushing method using the UCLA Formula may offer reliable preservation for both heart and lung in preparation for transplantation.