镇江地区流感哨点对新甲型H1N1流感的预警作用

目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)快速检测技术对镇江地区流感哨点医院流感样病例定期检测,为预警疫情提供科学依据。方法每周采集镇江市3家哨点医院的流感样病例和暴发疫区现患病例的咽拭子标本以及部分流感样病例血清标本。应用实时荧光定量PCR方法进行核酸检测,对部分流感样血清标本用血凝抑制试验方法进行H1亚型抗体检测,并对检测结果进行趋势分析。结果 2229份哨点医院采集的标本中检测出流感核酸阳性标本750例,其中423份为新甲型H1N1,293份为H3N2,8份为H1N1,26份为B型;356份暴发疫情采集的标本中检测出流感核酸阳性标本165例,其中112份为新甲型H1N1,51份为H3N2,2份为B型。哨点医院流感时间趋势,2009年6～7月以B型流感为主,8～9月转变为H3N2型流感流行,10～12月新甲型H1N1普遍流行。暴发疫情6月份出现首例新甲型H1N1,7月和8月新甲型H1N1呈现局部暴发,9～12月新甲型H1N1病例显著增加。362份流感样病例检测出H1亚型抗体阳性标本85例,阳性率为23.48%。结论应用哨点医院的流感样病例检测结果,可预测流感的变化趋势,提前采取控制...     

天津地区2009年流感病原学监测分析

目的:观察2009年天津市流感流行趋势、流感样病例群体暴发和甲型H1N1重症病例病原学监测情况。方法:对2009年国家级流感样病例监测哨点医院采集的流感样病例(ILI)咽拭子标本,采用病毒分离鉴定和real-time PCR检测。对疑似甲型H1N1流感病毒感染的重症病例、集中暴发病例及散发病例的呼吸道标本进行real-time PCR检测。同时对2009年5月-7月的ILI散发病例进行RT-PCR和Real-time PCR法检测,比较两种方法检测结果。对2009年9月份国家哨点医院采集标本进行核酸检测和病毒分离两种方法进行。结果:2009年共采集国家级哨点医院流感样病例标本3264份,970份流感病毒阳性,总检出率为29.7%,其中甲型H1N1亚型占55.9%(542/970株),季节性H3占26.5%(257/970株),季节性H3占26.5%(257/970株),季节性H1占7.9%(77/970),B型占0.9%(9/970株)。10月甲型H1N1明显上升,11月达高峰(91.1%),15～岁年龄段阳性率最高(72.7%)。650份疑似甲型H1N1流感重症病例中,196例(30.2%)为阳性,25～岁年龄组阳性数最高(106例),男女比例相似。321份暴发疫情标本中,190份为流感病毒阳性(59.2%)。其中甲型H1N1占44.5%(143/190),季节性H3占12.8%(41/190),B型占1.9%(6/190),未检出季节性H1。4、5月以B型为主,9～12月以甲型H1N1为主。主要为5～25岁学生。对129例散发ILI病例同时进行RT-PCR和Real-time PCR法检测,结果完全一致,均为18例流感病毒阳性。对9月份采集的474份标本进行核酸检测和病毒分离,178份核酸检测阳性,其中107例分离出毒株。结论:2009年天津地区同时存在甲型H1N1、季节性H1、H3和B型流感病毒,甲型H1N1流感病毒为优势流行型。重症病例中30.2%是由甲型H1N1流感病毒引起。暴发疫情以甲型H1N1流感病毒为主。RT-PCR和Real-time PCR法均可用于检测流感病毒。ILI核酸检测阳性率高于病毒分离阳性率。     

玉溪市2009年流感监测分析

目的了解玉溪市流感流行动态,揭示玉溪市流感流行及病原学的变化,为更好地做好流感预防控制工作。方法按全国流感监测方案,对暴发疫情和哨点医院采集流感样病例咽拭子标本,用Real-time RT-PCR方法检测。结果 2009年玉溪市流感网络实验室共检测流感样病例标本980份,甲型H1N1核酸阳性143份,阳性率14.59%,甲型H1阳性11份,阳性率1.33%;甲型H3阳性80份,阳性率8.16%;B型核酸阳性6份,阳性率0.61%。结论玉溪市的流感病原,季节性H1、H3、B型和甲型H1N1流感同时存在,但甲型H1N1逐步成为流行的优势毒株。     

惠州市2009年流感监测结果分析

目的了解惠州市2009年度流感的流行特征,探索流行规律,为流感的防治提供科学依据。方法采集哨点医院和暴发疫情流感样病例咽拭子标本,用MDCK细胞进行流感病毒分离,采用实时荧光定量PCR进行流感病毒分型。结果从哨点医院采集的1 482例标本中共分离271份流感病毒,其中A型265株,B(Victoria)型6株;在22起流感样病例暴发疫情中,由新甲型H1N1引起的有16起,86.4%都集中在中小学学校。结论 2009年惠州市流感监测医院的流感样病例全年均有发生,以秋、冬季为高发季节。2009年主要流行毒株为新甲型H1N1毒株。     

江苏省连云港市2009～2010年流感监测分析

目的监测流感流行趋势,了解连云港市流感病毒的活动特点,为制定流感防治策略提供科学依据。方法用实时荧光定量RT-PCR方法对流感样病例标本进行核酸检测分型,并对连云港市2009～2010年的流感样病例监测资料进行描述分析。结果 2009年7月～2010年12月,从哨点医院采集的2008份疑似流感样病例标本中,检测流感病毒核酸阳性530份,阳性率为26.39%,其中新甲型H1N1型263份,H1型7份,H3型222份,B型38份。2009年8月出现新甲型H1N1疫情,9月为高峰期。2010年高峰月出现在3月和9月。结论连云港市可能存在春季和秋季两个流感流行高峰,应进一步加强对流感的监测。     

2012-2016年黔西南州流行性感冒监测结果分析

目的 对2012-2016年黔西南州流感监测资料进行分析,为流感防控提供科学依据。方法 在中国流感监测信息管理系统收集黔西南州流感监测哨点医院2012-2016年流感样病例(ILI)监测数据、病原学监测数据、暴发和聚集性流感疫情监测数据进行描述性分析。结果 2012-2016年流感监测哨点医院共报告流感样病例17 665例,ILI%为2.01%。采集鼻咽拭子标本4 485份,流感病毒核酸阳性753份,平均阳性率为16.79%;2012年以流感病毒B型和季H3为主,2013年以BY型和甲型H1N1为主,2014年以季H3和甲型H1N1为主,2015年以季H3为主,2016年以季H3和BV型为主;2012-2016年黔西南州共发生ILI暴发疫情2起,聚集疫情8起,采集标本94份,阳性52份,阳性率55.32%;暴发及聚集性疫情阳性标本型别与当年病原学检测主要型别一致;全州80%的ILI暴发和聚集性疫情发生在中小学校。结论 2012-2016年黔西南州监测的ILI病例中5～14岁年龄组和15～24年岁龄组流感病毒检测阳性率较高;春季、秋季和冬季流感病毒阳性率较高;流感暴发和聚集性疫情主要发生在中小学校。     

上海市奉贤区2011年-2013年流感监测结果分析

目的分析奉贤区2011年-2013年流感监测结果,了解流感病毒的流行趋势。方法对奉贤区国家级流感监测哨点医院送检的流感样患者鼻咽拭子标本,采用real-time PCR方法进行检测。结果 2011年-2013年共检测标本1 924份,检出流感病毒核酸阳性294份,总阳性率为15.28%。2011年流行期,B型流感病毒与甲型H1N1病毒同时流行,2012年流行期B型流感病毒与H3N2流感病毒同时流行,2013年流行期H3N2流感病毒与甲型H1N1流感病毒同时流行。结论 2011年-2013年奉贤区流感流行以冬春季高发,呈B型、甲型H1N1和H3N2交替流行趋势。     

2010-2014年石家庄市流感流行季流感病毒监测 结果分析

摘要:目的　分析2010-2014年石家庄市流感病毒监测资料,为流感,特别是甲型H1N1的防控提供科学依据。方法　2010-2014年流感流行季,搜集石家庄市2家流感监测哨点医院流感样病例（Influenza-Like Illness,ILI）数据,采集部分ILI咽拭子标本,用Real Time RT-PCR方法进行病毒核酸检测。结果　2010-2014年流感流行季,2家哨点医院门（急）诊共报告ILI 338846例,ILI就诊百分比为1.10%。采集ILI咽拭子标本1926份,经流感病毒核酸检测阳性468份,阳性率24.30%,其中甲型H1N1、季节性H3N2、B型分别占50.00%、17.52%、32.48%,各监测年度ILI%高峰和检测阳性率高峰相一致。除2011-2012年度,其他均有甲型H1N1流感检出,其在2013-2014年流感流行季为优势流行株。2010-2011年与2012-2013年和2013-2014年相比,甲型H1N1流感阳性标本的年龄构成有差异（χ2＝17.91,P＜0.01）。结论　2010-2014年流感流行季石家庄市流感活动较弱,甲型H1N1流感病毒流行常态化,与季节性H3N2和B型流感病毒成为主要流行型别。     

2015镇江市流感病原学监测结果分析

目的分析镇江市2015年流感病毒流行情况,为今后科学有效地防控流感提供依据。方法收集2015年镇江市国家级流感哨点监测医院流感样病例(ILI)标本3 237份,利用实时荧光定量PCR法进行病毒核酸检测,并对ILI报告数据、病原学监测数据进行分析。结果 3 237份咽拭子标本共检出流感病毒核酸阳性464份,总阳性率为14.33%,其中甲型H1N1流感病毒3份、季节性H3N2型流感病毒164份、BY型流感病毒297份。男性和女性阳性率分别为14.10%和14.55%,不同性别阳性率比较,差异无统计学意义(χ2=0.13,P0.05)。流感全年出现,冬季和夏季2个小流行高峰。1月-3月优势流感毒株为BY型,7月-9月优势流感毒株为季节性H3N2型。结论 2015年镇江市共出现3种毒株流行。应进一步加强流感哨点监测工作,加强人员密集场所的暴发性疫情监测,警惕新型流感病毒株的出现和流行。     

广州市2010年流行性感冒监测结果分析

目的了解2010年广州市流行性感冒的流行特征,为流感防治策略的制定提供依据。方法选取广州市19家医疗机构作为哨点医院,统计每周在内、儿、急诊科就诊的流感样病例数和门诊就诊人数,计算出流感样病例就诊指数（ILI％）;采集哨点医院流感样病例和暴发疫点现患病例的漱口液或咽拭子进行病毒分离和鉴定。结果19家哨点医院全年监测流感样病例301219人次,流感样病例就诊指数为4．71％（301219／6398064）。全年共报告流感样病例暴发疫情17起,累计发病626例,罹患率介于0．75％～8．61％,其中15起发生在学校及托幼机构;疫情主要发生在3-4月（14起）;17起疫情中现场采集病例漱口液共79份,结果显示12起疫情为季节性流感（B型10起、H3N2型2起）,其他5起疫情未检测到流感病毒。共采集流感样病例标本2689份,流感病毒核酸检测阳性695份,阳性率为25．85％,其中B型294份（占42．30％）、H3N2型213份（占30．65％）、甲型H1N1流感188份（占27．05％）。结论2010年广州市流感流行毒株以B型、H3N2型为主,暴发疫情主要发生在3-4月,学校是高发场所,应加强监测。     

应用多重TaqMan MGB探针实时聚合酶链反应检测A型和B型流感病毒的研究

目的 应用多重real-time PCR方法检测A型和B型流感病毒,探讨其在快速诊断流感病毒感染中的优越性.方法 根据A型和B型流感病毒M基因的相对保守序列,设计两套特异性引物和TaqMan MGB探针,进行多重real-time PCR检测A型和B型流感病毒.将该方法与病毒分离、免疫层析、传统RT-PCR进行比较,并对多重real-time PCR的特异性进行评估.并应用multiplex real-time PCR方法和常规的病毒分离方法对广东省流感样病例334份咽拭标本进行检测,比较其灵敏性和特异性.结果 多重real-time PCR反应可以检测到A、B型流感病毒的最低病毒量分别为10-1和10-3TCID50/反应.该方法在对流感病毒株以及其他呼吸道病毒株样品的检测中,未发现假阳性和假阴性现象,特异性为100%.该方法对334份临床标本进行检测,结果与经典检测方法(病毒分离鉴定结合血清学检测)的符合率达100%,且灵敏度明显高于病毒分离.结论 该研究建立的多重TaqMan MGB real-time PCR是一种快速、灵敏性和特异性高的流感病毒检测方法,对于流感的早期诊断及指导临床有重要意义.     

双重荧光定量RT-PCR快速检测A、B型流感病毒的研究

目的：建立双重荧光定量RT—PCR技术同时快速检测A、B型流感病毒，并应用于临床样本的检测。方法：在A型流感病毒M基因和B型流感病毒NP基因的保守区序列分别设计特异性引物和Taqman探针，建立优化单一和双重荧光RT—PCR反应体系，评价所建双重RT—PCR反应体系的特异性、敏感性和稳定性，并应用于疑似流感含漱液标本检测。结果：该方法对A、B型流感病毒检测具有高度特异性，检出限分别为0．1TCID50和0．01TCID50，可从疑似流感患者含漱液中直接检测到流感病毒核酸。构建的体系定量标准曲线相关系数分别为0．998和0．999，具有较好的稳定性。结论：本研究建立的双重荧光定量RT—PCR可以同时准确分型A、B型流感病毒，灵敏度高，稳定性好，是一种快速检测流感病毒的新方法。     

TaqMan-MGB荧光定量逆转录聚合酶链反应快速检测甲型流感病毒

目的:建立一种特异、灵敏、快速检测甲型流感病毒核酸的荧光定量RT-PCR方法。方法:根据GenBank登录的流感毒株序列,应用生物软件在甲型流感病毒膜蛋白(MP)基因的保守区设计与筛选引物和MGB探针,对荧光定量RT-PCR反应体系与条件进行优化,验证方法的特异性和敏感性。并通过对疑似流感临床样本的检测,以评价该方法的实际应用价值。结果:该方法对甲型流感病毒的检测有高度的特异性、通用性,对乙型流感、麻疹、风疹、腮腺炎、RSV和腺病毒等其他呼吸道病毒均无交叉反应,检测的灵敏度达0.1TC ID50,可从疑似流感患者含漱液中直接检测流感病毒核酸,从病毒核酸提取至完成检测仅需2.5 h左右,且操作简便,重复性好。结论:本研究建立的MGB荧光定量RT-PCR的方法具有特异、敏感、快速的特点,适用于甲型流感疫情的应急快速检测。     

北京市西城区2009-2010年流感监测结果分析

目的分析北京市西城区2009-2010年流感监测结果。方法由两家哨点医院每周随机采集流感样病例的咽拭子共40～60份,提取病毒RNA,应用real-time PCR法和MDCK细胞分离法进行检测。结果共采集2 077件流感样样本,其中790件real-time PCR检测阳性,总阳性率为38.04%。其中男性样本1 050件,阳性402件(阳性率38.28%),女性样本1 027件,阳性388件(阳性率37.78%)。哨点医院A送检样本1 071件,阳性410件(阳性率38.28%),哨点医院B送检样本1 006件,阳性380件(阳性率37.77%)。阳性率最低的是2009年6月,为1.65%,阳性率最高的是2010年1月,为91.41%,2009年10月至2010年2月期间阳性率在50.00%上下。其中H3N2流感阳性117件,甲型H1N1流感阳性292件,B型流感阳性373件。790件样本经MDCK细胞培养后,共有143件阳性,阳性率为6.88%。结论北京市西城区2009-2010年流感流行高峰为2009年10月～2010年2月。存在H3N2、甲型H1N1和B型三种流感流行,以甲型H1N1和B型流感病毒为优势毒株。     

荧光定量逆转录-聚合酶链反应方法快速检测甲1型流行性感冒病毒核酸

目的建立特异、快速、敏感的TaqMan荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,用于检测甲1型流行性感冒(流感)病毒核酸.方法在甲1型流感病毒血凝素基因的保守区设计引物和TaqMan探针,对其进行筛选,同时对荧光定量RT-PCR反应条件和反应体系进行优化,验证该方法的特异性、敏感性、重复性,并对疑似流感患者含漱液标本进行检测.结果该方法对甲1型流感病毒的检测具有高度的特异性,对甲3型流感病毒、乙型流感病毒、禽流感病毒H5、严重急性呼吸道综合征病毒、麻疹病毒及其它呼吸道病毒均无交叉反应,检测的灵敏度达0.1TCID50.采用该方法从临床疑似患者含漱液中对甲1型流感病毒核酸的检出,比采用狗肾传代细胞进行病毒分离更为敏感.从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重复性好,且大大减少了常规RT-PCR检测产物的污染机会.结论新建立的TaqMan荧光定量RT-PCR是一种快速检测甲1型流感病毒的特异、敏感的方法,非常适合于疑似流感爆发疫情的应急诊断和鉴别诊断.     

荧光定量RT-PCR在快速检测流感病毒A型和B型上的应用研究

[目的]探讨荧光定量RT-PCR在流感病毒快速检测上的意义。[方法]收集疑似流感样本20例,分别用定量RT-PCR技术和鸡胚分离培养方法进行检测。[结果]26份标本中定量RT-PCR检测阳性率为57.7%（15/26）,鸡胚分离培养检测的阳性率为26.9%（7/26）。两者的阳性率有统计学差异。[结论]荧光定量RT-PCR方法在检测流感病毒方面具有快速、操作方便、特异性强、灵敏度高优点。因此可以作为一种快速流感病毒检测的诊断方法。     

2010年镇江市流行性感冒病原学流行特点和人群抗体水平分析

目的:监测和分析本市流行性感冒的流行动态和病原学特征,为流感的预防控制提供科学依据。方法:监测本市哨点医院的流感样病例(Influenza Like Illness,ILI)发病动态,实时荧光定量PCR检测咽拭子标本,血凝抑制试验方法检测血清标本抗体。结果:全年本市共监测ILI9433例,占门急诊病例总数的1.69%。411例咽拭子阳性,其中H3亚型111例(27.01%),新H1N1型23例(5.60%),B型277例(67.39%)。3035份流感样病例检出H1、H3、新H1亚型抗体阳性标本分别923例(30.4%)、810例(26.7%)、868例(28.6%)。结论:该市人群已获得一定的免疫力,但流感病毒仍比较活跃,需在流行高峰前继续采取以流感疫苗接种为主导的综合性预防措施。     

探讨实时荧光定量PCR仪用于流感病毒检测的效果分析

目的:探讨实时荧光定量P C R仪器对流感病毒检测效果.方法:选择2019年6月～2020年6月本中心采集的流感病毒咽拭子及血液样本各116份,根据检测方法将其分为三个不同的组别,分别用实时荧光定量P C R仪、普通PCR仪、酶标仪进行检测、最终采用病毒分离培养法进行验证.结果:本次实验研究结果显示,使用实时荧光定量P...     

新型冠状病毒双重荧光RT-PCR检测方法

目的为快速检测新型冠状病毒,防控疫情的输入,建立一种快速的双重实时荧光RT-PCR检测方法。方法对WHO公布的单重实时荧光RT-PCR检测引物和探针进行重新设计和优化,建立双重荧光RT-PCR反应体系,分别采用羧基荧光素(FAM)和绿色荧光蛋白(VIC)荧光基团标记探针,实现双基因的同时检测。结果经优化的双重实时荧光RT-PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒检测灵敏度为31拷贝/μl,检测健康和普通发热人员咽拭子以及流感病毒无交叉反应。结论建立了双重实时荧光RT-PCR快速检测方法,提高检测效率和准确度的同时降低了成本,可用于新型冠状病毒的快速应急检测。     

4重荧光PCR技术在霍乱监测与菌株鉴定的应用研究

目的 应用4重荧光PCR技术检测霍乱弧菌并对菌株进行鉴定.方法 用PCR法对2008-2010年监测的水样、水产品标本及食物中毒疑似菌株以进行检测.同时用细菌学方法分离菌株.再进行PCR检测.结果 1606份标本中.PCR法检出O1群霍乱弧菌阳性标本188份.从中分离到菌株150份(79.8％).O139群霍乱弧菌的P...