Avian influenza virus ecology in Iceland shorebirds: Intercontinental reassortment and movement

Shorebirds are a primary reservoir of avian influenza viruses (AIV). We conducted surveillance studies in Iceland shorebird populations for 3 years, documenting high serological evidence of AIV exposure in shorebirds, primarily in Ruddy Turnstones (Arenaria interpres; seroprevalence = 75%). However, little evidence of virus infection was found in these shorebird populations and only two turnstone AIVs (H2N7; H5N1) were able to be phylogenetically examined. These analyses showed that viruses from Iceland shorebirds were primarily derived from Eurasian lineage viruses, yet the H2 hemagglutinin gene segment was from a North American lineage previously detected in a gull from Iceland the previous year. The H5N1 virus was determined to be low pathogenic, however the PB2 gene was closely related to the PB2 from highly pathogenic H5N1 isolates from China. Multiple lines of evidence suggest that the turnstones were infected with at least one of these AIV while in Iceland and confirm Iceland as an important location where AIV from different continents interact and reassort, creating new virus genomes. Mounting data warrant continued surveillance for AIV in wild birds in the North Atlantic, including Canada, Greenland, and the northeast USA to determine the risks of new AI viruses and their intercontinental movement in this region.     

云浮市2010年流行性感冒病原学监测结果分析

目的:对云浮市2010年流感病毒进行病原学监测,分析云浮市流行性感冒(流感)的流行特征,总结流行规律,为预防和控制流感提供科学依据。方法:每周采集监测哨点医院、学校流感样病人的鼻咽拭子标本,采用Real time-PCR法检测流感病毒核酸;并用MDCK细胞进行病毒分离,流感病毒亚型鉴定采用血凝抑制试验和(或)Real time-PCR方法。结果:2010年共采集鼻咽拭子标本2823份,流感病毒核酸阳性267份,检出率为9.5%;其中B型106份,A1(H1N1)季节性的4份,A3(H3N2)127份,A1(H1N1)大流行的的30份,分别占总检出数的39.7%、1.5%、47.6%和11.2%;病毒检出高峰出现在4月-9月;B、A1(H1N1)季节性的、A3(H3N2)三种型别在0岁~15岁少年儿童中分布最多,而A1(H1N1)大流行的在0~和25~岁组人群中占的比例最多。结论:流感病例中A1(H1N1)大流行的、A1(H1N1)季节性的、B型和A3(H3N2)交替出现,上半年以B型(Victoria系)流感病毒为流行优势株,下半年则以A3(H3N2)亚型流感病毒为流行优势株。应密切注意流感活动情况,加强监测...     

清远市2011年流感监测结果分析

目的:分析清远市2011年流感监测结果,了解流感流行特征,为清远市流感防控工作提供科学依据。方法:选择清远市人民医院作为流感监测的哨点医院,采集疑似流感样患者咽拭子标本。采用实时荧光定量RT-PCR方法检测流感病毒核酸。结果:清远市2011年检测疑似流感样患者咽拭子标本共484份,流感病毒核酸阳性为36份,总阳性率为7.44%。其中新型甲型H1N1和乙型流感分别占69.44%、16.67%;未分离到季节性H1和H3亚型,A通用型未分型占13.89%。清远市2011年流感活动高峰主要集中在1月-3月份和12月份。结论:清远市2011年春季以新型甲型H1N1流感流行为主,然后逐渐过渡为乙型流感。     

Role of terrestrial wild birds in ecology of influenza A virus (H5N1)

House sparrows, European starlings, and Carneux pigeons were inoculated with 4 influenza A (H5N1) viruses isolated from different avian species. We monitored viral replication, death after infection, and transmission to uninfected contact birds of the same species. Sparrows were susceptible to severe infection; 66%-100% of birds died within 4-7 days. High levels of virus were detected from oropharyngeal and cloacal swabs and in organs of deceased sparrows. Inoculation of starlings caused no deaths, despite high levels of virus shedding evident in oropharyngeal swabs. Least susceptible were pigeons, which had no deaths and very low levels of virus in oropharyngeal and cloacal swabs. Transmission to contact birds did not occur frequently: only A/common magpie/Hong Kong/645/2006 virus was shown to transmit to 1 starling. In summary, recent influenza (H5N1) viruses are pathogenic for small terrestrial bird species but the rate of intraspecies transmission in these hosts is very low.     

2016 - 2019年包头市甲型H1N1流感病毒基因分析

目的 了解包头市流感病毒的变异情况,评估流行株在致病性、毒性、耐药性方面的改变,以研究结果为依据,为流感防控、指导抗流感药物的选用及筛选新的疫苗代表株提供依据。方法 按分离比例随机抽取2016 - 2019年甲型H1N1疫苗株进行基因测序分析。结果 包头市2016 - 2019的甲型H1N1分离株主要属于6B.1A分支,与疫苗株A/Brisbane/02/2018同源性较高。各年度病毒株与疫苗株A/Brisbane/02/2018的组间遗传距离分别为0.014,0.016,0.014和0.012。分离株抗原位点集中在 Sa 区的163 - 164位点发生变异。分离株2018 - 1139 - HA.seq发生了H275Y位点变异。结论 包头市2016 - 2018年度内甲型H1N1流感病毒分离株与A/Brisbane/02/2018亚型流感病毒同源性较高。相对A/Brisbane/02/2018疫苗株而言,本次分析的病毒基因并未发生抗原漂移现象,可以初步判定目前推荐的疫苗株对当前流行的甲型H1N1流感具有较好的保护效果。     

禽流感病毒感染哺乳动物的致病机制

目前禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)已跨越种属的限制,造成多种哺乳动物包括人在内的感染并导致死亡,但是关于AIV在人与人之间传播的证据很少。世界各国对此高度重视,并进行了大量研究工作。此文从AIV感染哺乳动物的临床特点、传播途径、组织病理学特征以及引起动物机体免疫应答等方面,对AIV感染哺乳动物的致病机制作了综述。     

黄热病毒与甲型流感病毒及其分型集合检测芯片的初步研制

目的：研制黄热病毒与流感病毒及其分型集合检测芯片。方法：设计并合成60mer寡核苷酸（Oligo）探针用于制备检测芯片。提取黄热病、甲型流感病毒核酸,以限制性显示技术进行扩增标记,完成杂交后对芯片进行扫描和数据分析。结果：Oligo探针与相应的荧光标记样本杂交后,大部分能检测出阳性荧光信号,而空白对照和阴性对照均为阴性信号。结论：寡核苷酸芯片技术可应用于多种病毒的检测及分型,从而为多种病毒感染的早期鉴别诊断提供科学依据。     

2006-2013年马鞍山市流行性感冒监测分析

目的 通过对2006-2013年马鞍山市流感监测结果进行分析,探索流感流行规律,为制定流感防治措施提供依据.方法 对马鞍山市2006-2013年流感监测年度的流感样病例(influenza-like illness,ILI)监测资料、病原学监测资料进行分析.结果 2006-2013年马鞍山市流感监测哨点医院的平均ILI就诊百分比(ILI％)为6.72％,流感发病呈现冬春季及夏季两个峰,病例以15岁以下的少年儿童为主.2006～2009年7月,病毒分离平均阳性率为8.13％,毒株类型以季A(H1N1)和B型交替出现为主;2009年8月～2013年,核酸检测平均阳性率为18.40％,以新甲(H1N1)、季A(H3N2)和B型交替出现为主.结论 2006-2013年马鞍山市流感活动相对稳定,但流感监测工作仍然不能放松,需加强对B型流感的监测与防控.     

Avian influenza virus (H5N1) replication in feathers of domestic waterfowl

We examined feathers of domestic ducks and geese inoculated with 2 different avian influenza virus (H5N1) genotypes. Together with virus isolation from the skin, the detection of viral antigens and ultrastructural observation of the virions in the feather epidermis raise the possibility of feathers as sources of infection.     

甲型流行性感冒病毒感染患者免疫学指标的观察

目的 探讨甲型流行性感冒(流感)病毒感染患者免疫学指标的变化,为其临床研究提供参考依据.方法 共纳入52例甲型流感病毒感染患者作为病例组,同时随机选取50名健康人作为对照组,比较两组患者免疫学指标的差异.结果 病例组CD3+ CD4+ (409.6±167.2)细胞/μl及CD3+ CD8+ (323.3±146.5)细胞/μl,对照组分别为(659.6±198.4)细胞/μl及(413.3±175.5)细胞/μl,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);病例组血小板计数(172.6±2.2)×109/L、白细胞计数(4.3±0.5)×109/L,对照组分别为(213.7±2.4)×109/L、(5.5±0.7)×l09/L,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);病例组嗜中性粒细胞(56.6±9.2)％、补体C3(1.1±0.2) g/L、C4(0.3±0.1)g/L,对照组患者分别为(50.7±7.4)％、(0.9±0.3)g/L、(0.2±0.1)g/L,两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 甲型流感病毒感染后常有多种免疫学指标的改变,因此在临床工作中需要严密观察该类指标的变化,以便更好地了解患者的病情.     

甲型流感病毒宿主特异性研究进展

大量证据显示，哺乳动物甲型流感病毒可能来源于野生水禽。甲型流感病毒由水禽传播给家禽和哺乳动物是近年流感爆发的根源；但不同物种来源的甲型流感病毒不能在其他物种中有效繁殖，表明甲型流感病毒存在宿主特异性。本文简要概述了近年来流感病毒宿主特异性的相关知识及研究进展，重点介绍宿主受体唾液酸衍生物种类、唾液酸一半乳糖基连接键型对病毒感染宿主特异性的影响以及流感病毒血凝素的受体特异性。     

2014-2017年南宁市流感病原学监测结果分析

目的 分析2014-2017年南宁市流感病毒病原学监测结果,为今后的流感防控工作提供依据。方法 采集2014-2017年南宁市流感监测哨点医院流感样病例(ILI)的咽试子标本,采用实时荧光定量PCR进行流感病毒核酸检测,并对病原学检测数据进行整理分析。结果 2014-2017年共采集流感样病例标本8246份,流感病毒核酸阳性1125份,总阳性率为1364%。H3N2亚型阳性率高峰在2014年、2015年和2017年的夏季,新甲型H1N1阳性率的高峰在2014年、2016年和2017年的春季,乙型流感病毒全年均有分布,2014-2017年流行趋势逐渐增强,并在2017年冬季形成流行高峰。不同年龄组的流感病毒核酸阳性率差异有统计学意义(〖XC小五号.EPS;P〗=373856,P＜0001),以15岁~年龄组阳性率最高(2450%)。结论 南宁市在2014-2017年中流感以春、夏季流行为主,冬季也会出现流行高峰,优势毒株交替流行。应加强冬季流感的防控工作,密切关注乙型流感病毒的流行趋势和病原学变化。     

Discovery of highly potent agents against influenza A virus

We previously reported several new M2 inhibitors as active as amantadine against influenza A virus and validated by three types of in vitro assays. Herein, we further modified one of the most potent hits in a viral inhibition assay and conducted structure-activity relationship studies on this scaffold. As a result, compound 8e was identified to be the most potent inhibitor against wild-type influenza A virus, being nearly 240-fold more active than amantadine.     

逆转录聚合酶链反应法在北京市流感病毒型别鉴定中的应用

目的：建立在流感病毒型别鉴定中使用的逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法。方法：用常规细胞培养法扩增病毒后,用2对型别鉴定引物和4对亚型鉴定引物进行RT－PCR反应。结果：在23株发生细胞病理变化的标本中RT－PCR阳性标本为10份,其中甲型7株（6株甲3亚型、1株甲1亚型）,乙型3株,结论：该方法快速、特异,灵敏,在流感病毒型别鉴定中具有较大的应用价值。     

检测基因及样本类型对人感染H7N9禽流感病毒实验室检测结果的影响

目的 检测北京市H7N9禽流感病毒感染病例及密切接触者样本中H7N9流感病毒相关基因,分析不同靶基因、不同类型样本对检测结果的影响.方法 收集2013年4月～7月北京市人感染H7N9禽流感病例及密切接触者咽拭子、痰、气管灌洗液、血清样本,提取病毒RNA,检测甲型流感病毒基质蛋白(influenza A matrix protein,Am)基因、血凝素-7(hemagglutinin 7,H7)基因和神经氨酸酶-9(neuraminidase 9,N9)基因,并对结果进行统计分析.结果 H7N9禽流感确诊病例样本中Am基因、H7基因和N9基因的检测阳性率分别为68.3％、66.0％和41.5％,N9基因阳性率低于前两者.在定量检测中,Am基因、H7基因和N9基因的定量限分别为10 copies/ml、10 copies/ml和100 copies/ml.在各类型检测样本中,气管灌洗液样本的病毒核酸检出率较高,未在血清和结膜分泌物样本中检出病毒核酸.结论 在人感染H7N9禽流感检测中,应尽量使用气管灌洗液等下呼吸道样本,综合判定检测结果,为临床治疗提供参考依据.     

2005-2009年流感监测及医院感染预防控制

目的掌握2005-2009年吉林大学白求恩第一医院流感流行趋势及流感病毒的变异情况,预防和控制医院感染的发生。方法收集流感流行病学资料和病原学资料进行分析,采取严格的医院感染防控措施。结果 2005-2009年流感样病例就诊率分别为1.82%、3.16%、3.05%及2.12%;流感病例就诊情况基本平稳,发病高峰主要集中在每年的11、12月及1月,发病人群主要集中在儿童;共分离出病毒169株,分离率为15.79%,优势毒株交替出现。结论应继续加强流感监测,积累医院感染预防控制工作经验,为流感预防控制和临床诊疗提供科学依据。     

甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体制备及其初步应用

目的 制备甲型流感病毒核蛋白(NP)单克隆抗体,为甲型流感病毒诊断试剂盒以及相关研究提供材料.方法 大肠埃希菌BL21 (DE3)表达NP作为免疫原,免疫Balb/c小鼠后取脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得阳性细胞株,注射小鼠腹腔得到单克隆抗体,纯化后进行Western印迹法、ELISA法、细胞免疫染色和荧光法、双抗夹心ELISA法确定NP抗体的生物学特性,探索应用范围.结果 从Western印迹法、ELISA和细胞免疫染色法的结果可得知,抗NP单克隆抗体可以与免疫原特异性结合,也可以与H1N1、H3N2亚型流感病毒的NP特异性结合,具备检测流感病毒的能力.双抗夹心ELISA法进一步提升了抗体对抗原的检测灵敏度至128 pg.同时,通过细胞免疫荧光法观察到抗体可在细胞内显示NP从细胞核扩散到细胞质的过程.结论 制备的抗体成功检测H1N1、H3N2两种亚型的流感病毒,可作为用于流感防治的流感病毒诊断试剂盒的材料.     

湖北省2006年甲型流感分离株NP蛋白的克隆及表达

目的采用原核表达系统表达2006年甲型流感分离株NP蛋白。方法参照已发表的甲型流感核蛋白（NP）基因序列及其基因组特性,设计合成PCR克隆引物。从2006年分离的流感病毒毒株中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶,经PCR扩增NP基因,采用原核表达系统进行克隆表达。结果成功获得了纯化的N末端携带多聚组氨酸标签的重组NP蛋白,分子质量约6100kD。结论重组蛋白具有天然蛋白相同的抗原性,可用于流感诊断试剂的研发。     

上海市金山区2010年-2011年流感监测结果分析

目的:对金山区唯一一家哨点医院采集的流感样病例咽拭子标本进行检测,以掌握2010年-2011年度金山区流感流行情况。方法:提取咽拭子标本中的病毒核酸,采用实时荧光定量PCR检测新甲H1N1、季节性H1N1、季节性H3N2、B型流感病毒,对阳性标本进行病毒培养,并进行鉴定。结果:2010年1月-12月,共采集样品631例,阳性数189例,阳性率30.0%,培养出符合滴度的流感病毒毒株6株,为5株B Vic-toria系和1株B Yamagate系;2011年1月-2011年12月,共采集312例,阳性数81例,阳性率26.0%,培养出符合滴度的流感病毒毒株30株,包括5株季节性H3型,4株新甲型H1N1型,13株B(Victoria系)型,8株B(Yamagate系)型。结论:2010年、2011年金山区流感流行特点为冬春季和夏季高发,病毒优势株从数量上呈B、新甲H1N1、季节性H3交替流行态势。     

3种甲型流感快速检测试剂的性能评价

目的比较3种甲型流感快速检测试剂的灵敏度。方法利用病毒分离培养液和入境人群的鼻咽拭子标本考查试剂盒的检测灵敏度。结果甲型流感抗原快速检测试剂（FluA-DOT）对8份病毒分离培养液的检测灵敏度达到10^-2HA,明显高于其他两种检测试剂;FluA-DOT对入境人群鼻咽拭子标本的检出率为91.67%,也远远高于其他两种检测试剂。结论甲型流感抗原快速检测试剂（FluA-DOT）的检测时间短、灵敏度高,适用于口岸现场的甲型流感快速筛查。