苦参中3种生物碱成分在Caco-2细胞中的吸收特性及在大鼠肝微粒体中的代谢速率

目的：研究苦参中3个生物碱成分苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱通过Caco-2细胞的吸收特性及在大鼠肝微粒中的代谢速率。方法：采用Caco-2细胞吸收模型分析3个生物碱的吸收特性,采用体外大鼠肝微粒体模型研究3个生物碱的代谢速率,运用HPLC-MS法测定3个生物碱类成分的含量,计算其渗透速率和代谢速率;液相条件采用Agilent Zorbax SB-C₁₈色谱柱(3.0 mm×100mm,3.5μm),乙腈：水(60：40)等度洗脱,进样量5μL,流速0.8 mL/min,柱温：30℃,运行时间30 min。质谱条件,选择正离子模式监测,干燥器温度350℃,毛细管电压4000V,干燥器流速 9.0 L/min,碎片电压 90eV。结果：Caco-2细胞吸收模型中,苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱分别在0.0505～10.01μM的线性范围内,线性关系良好(r>0.999 5),通过Caco-2细胞吸收模型的渗透速率常数分别为：苦参碱1.251、氧化苦参碱0.9375、槐果碱1.424;大鼠肝微粒体模型中,苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱分别在0.0501～1.001μM的线性范围内,线性关系良好(r>0.999 8),3个生物碱类成分代谢的半衰期分别为：苦参碱4.331 h、氧化苦参碱1.084 h、槐果碱2.478 h,方法学考察结果表明,日内日间精密度RSD%< 4 %,基质效应> 80 %,提取回收率> 88 %,结论：苦参中三个生物碱类成分易通过Caco-2细胞吸收模型,主动转运为其主要的吸收方式,在大鼠肝微粒体中不易发生代谢。     

胆木生物碱成分研究

目的研究胆木Naucleaofficinalis的生物碱成分。方法95%乙醇提取胆木带皮茎枝的化学成分,采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH20凝胶柱色谱和C-18反相硅胶柱色谱分离纯化,通过光谱分析鉴定化合物的结构。结果从醋酸乙酯部位分离得到11个成分,其中9个为吲哚类生物碱,2个喹啉酮类生物碱,分别鉴定为牛眼马钱托林碱(angustoline,Ⅰ)、19-乙氧基牛眼马钱托林碱(19-O-ethylangustoline,Ⅱ)、3-S-3,4-二氢牛眼马钱托林碱(3-S-3,4-dihydroangustoline,Ⅲ)、3-R-3,4-二氢牛眼马钱托林碱(3-R-3,4-dihydroangustoline,Ⅳ)、naucleamide A(Ⅴ)、异长春花苷内酰胺(strictosamide,Ⅵ)、喜果苷(vincosamide,Ⅶ)、6′-异乙酰基长春花苷内酰胺(6′-acetyl-stric-tosamide,Ⅷ)、2′-异乙酰基长春花苷内酰胺(2′-acetyl-strictosamide,Ⅸ)、短小蛇根草苷(pumiloside,Ⅹ)、3-表短小蛇根草苷(3-epi-pumiloside,Ⅺ)。结论化合物Ⅰ~Ⅺ均为首次从该植物中分离得到。     

马齿苋水提物中生物碱oleraisoindole和7'-乙氧基-反式-阿魏酰基酪胺及其抗氧化活性研究

目的:研究马齿苋(Portulaca oleracea L.)水提取物中生物碱类化学成分分离及其抗氧化活性。方法:依次采用水提取、乙酸乙酯萃取、硅胶柱色谱、ODS柱色谱进行提取、分离及纯化,采用超高效液相色谱进行制备和核磁共振技术进行结构鉴定。然后,采用DPPH自由基清除的方法评估生物碱类化合物抗氧化活性。结果:通过1H-NMR、13C-NMR与有关文献对照,证明两种化合物分别为oleraisoindole和7'-乙氧基-反式-阿魏酰基酪胺(ETFT)。结论:马齿苋中分离得到两种生物碱oleraisoindole和ETFT,并首次开展了两种生物碱的抗氧化活性研究,结果表明两种生物碱具有显著的抗氧化活性。     

马齿苋中两种酪胺类生物碱分离及鉴定

目的:分离马齿苋(Portulaca oleracea L.)水提取物中生物碱类化学成分。方法:采用水煎煮提取、乙酸乙酯萃取、硅胶柱色谱、ODS柱色谱、葡聚糖柱色谱等技术进行提取、分离和纯化,再用超高效液相色谱进行制备,利用高分辨质谱和核磁共振等技术进行结构鉴定。结果:HR-ESI-TOF-MS、~1H-NMR、~(13)C-NMR、DEPT和2D NMR的结果与有关文献对照,确定所得化合物为N-反式-阿魏酰酪胺和N-反式-阿魏酰-3-甲氧基酪胺。结论:该实验从马齿苋中分离得到两种酪胺类生物碱:N-反式-阿魏酰酪胺和N-反式-阿魏酰-3-甲氧基酪胺。     

苦柏坐浴颗粒质量标准研究

目的 建立苦柏坐浴颗粒的质量控制方法.方法 采用薄层色谱(TLC)法对苦柏坐浴颗粒中苦参、延胡索进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法对其主要成分苦参碱、氧化苦参碱进行含量测定;采用紫外-可见分光光度法对总生物碱进行含量测定.结果 TLC中可检出苦参、延胡索的特征斑点,且阴性无干扰.苦参碱、氧化苦参碱回归方程分别...     

HPLC法测定苦参生物碱部位中4种成分含量

目的建立苦参生物碱部位中4种成分氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱和槐果碱的HPLC含量测定方法。方法采用Agilent Zorbax C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),系统A为10 mmol/L醋酸铵水溶液(0.1%氨水,pH=9.2),系统B为20 mmol/L醋酸铵的甲醇-乙腈(1∶1)混合溶液,梯度洗脱,洗脱流速为0.8 mL/min,检测波长220 nm。结果氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱、槐果碱平均回收率分别为101.43%、99.08%、102.59%和102.06%,RSD分别为1.30%、0.94%、1.69%和1.10%。结论3批样品测定结果表明,该方法简便、准确,可用于苦参生物碱部位中4种生物碱成分的含量测定。     

苦参化学成分及其生物碱抑菌活性研究

目的 :研究苦参(Sophora flavescenes Ait)总生物碱及其主要生物碱的抑菌效果,探究苦参开发消洗剂的可行性。方法 :采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱等技术手段对苦参干燥根进行分离纯化并通过波谱数据对化合物进行结构鉴定。采用药物二倍稀释法与菌落计数相结合法考察苦参总生物碱及其主要生物碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希杆菌、铜绿假单胞菌、乙型溶血型链球菌和白色念珠菌的抑菌作用,并测定各成分用药时的抑菌浓度范围。结果 :从苦参中分离了16个单体化合物,包括9个生物碱类成分和7个黄酮类成分。药敏结果显示,5个样品对所选菌株均具有一定抑菌活性;苦参总生物碱抑菌作用强于各单体生物碱;各单体对金葡球菌的抑菌效果强于其他4种菌;苦参碱和槐果碱对金黄色葡萄球菌的抑菌作用均强于自身氧化物。结论 :苦参中总生物碱及其主要生物碱成分存在明显的抑菌作用,各单体间抑菌活性各有不同,且对各菌种的抑菌作用也不甚相同,可为苦参开发消洗剂的可行性奠定基础。     

阔叶十大功劳总生物碱提取及小檗碱含量测定

目的 建立阔叶十大功劳中总生物碱的提取工艺和小檗碱的含量测定方法.方法 通过正交试验确立提取总生物碱的最佳工艺条件,紫外分光光度法测定总生物碱含量;采用HPLC-UVD法,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-水(各含0.1％甲酸)为流动相,流速1 mL/min,柱温35℃,检测波长345 nm,测定小檗碱的含量.结果 最佳提取工艺为药材质量6倍量的80％乙醇、提取4次、每次2h;小檗碱在36.00～486.00 μg/mL范围内呈良好线性关系,平均回收率为98.0％,RSD为0.53％.结论 总生物碱的提取工艺回收率较高、稳定且重复性好;所建立的测定小檗碱含量的HPLC法简便、快速,结果准确可靠.     

不同炮制方法对附子生物碱类成分的影响

目的采用高效液相色谱法分析附子不同炮制品中6个生物碱的含量,研究炮制方法对附子中生物碱类成分的影响。方法采用Waters sunfire C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流速0.8ml/min,柱温30℃,检测波长235nm,流动相乙腈-四氢呋喃(25∶15)和0.1mol/L醋酸铵溶液(每1 000ml加冰醋酸0.5ml),梯度洗脱。结果各成分分离度良好。在相应浓度范围内6个生物碱的线性关系良好(r0.999 1);精密度相对标准偏差0.44%;加样回收率为95.1%～105.0%。结论该方法快速、准确,适用于附子不同炮制品6种生物碱成分的定量分析。药典法和蒸制法、炒制法都能有效地降低毒性较大的双酯型生物碱类含量,而蒸制法和炒制法又能增加毒性小、疗效高的单酯型生物碱类含量,达到炮制减毒增效的目的。     

RP-HPLC法评价山豆根药材质量

目的 探讨山豆根的质量评价标准。方法 采用反相高效液相色谱法(RP-HPL)测定15批山豆根商品药材中氧化苦参碱和苦参碱的含量。结果 山豆根药材两生物碱成分分离较完全且呈良好的线性关系，氧化苦参碱和苦参碱的平均回收率分别为98．4％和102．5％。不同地方购得的药材两种生物碱含量差异较大，氧化苦参碱为0．16％～2．47％，苦参碱为0．09％～0．69％，两生物碱总含量为0．76％～3．16％。氧化苦参碱的含量明显高于苦参碱且相对较稳定，并与两生物碱总含量高低基本一致。结论 氧化苦参碱含量或苦参碱和氧化苦参碱总含量可作为山豆根药材质量控制指标。     

海南青牛胆生物碱的研究

目的:研究海南青牛胆(TinosporahainanesisH.S.LoetZ.X.Li)藤茎中的生物碱成分。方法:用溶剂提取及硅胶柱色谱分离纯化化学成分,通过MS,NMR,HMQC,HMBC及X-ray测定结构。结果:3种季铵生物碱以碘化物形式被分离并鉴定为:非洲防己碱(columbamine,I)、S-反式-N-甲基四氢非洲防己碱(S-trans-N-methyltetrahydrocolumbamine,II)及S-反式-轮环藤酚碱(S-trans-cyclanoline,III)。结论:III是新生物碱。     

HPLC-QTOF-MS法鉴别雷公藤多苷工艺残渣中的化学成分

建立高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱法(HPLC-QTOF-MS)快速鉴定雷公藤多苷柱色谱工艺残渣化学成分。采用Zorbax SB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×50 mm,1.8 μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,采用ESI-Q-TOF检测,正离子模式扫描。根据色谱峰精确相对分子质量、碎片离子信息及液相色谱保留时间比较鉴别化合物。结果表明,采用HPLC-QTOF-MS法鉴定了雷公藤多苷工艺残渣中30个成分,包括15个生物碱类化合物,10个二萜类化合物,4个三萜类化合物,1个不饱和脂肪酸。本研究工作为雷公藤多苷工艺残渣的综合开发利用提供定性分析依据。     

正交试验法优选川芎总生物碱的提取工艺

目的:优选川芎总生物碱的提取工艺。方法:采用回流提取,以酸性染料比色法测定的川芎总生物碱含量为指标,考察料液比、乙醇浓度、提取温度、提取时间对提取工艺的影响,通过正交试验L9(34)确定最佳提取工艺。结果:影响川芎总生物碱提取率的主次因素为:乙醇浓度料液比提取温度提取时间;川芎总生物碱的最佳提取工艺为:15倍量80%乙醇,100℃提取2.5 h。3次工艺验证试验中川芎总生物碱平均含量为2.745 mg/g(RSD=1.66%,n=3)。结论:本实验首次采用正交试验对川芎总生物碱的提取工艺进行优化,建立的提取工艺简便可行、稳定可靠。     

氧化铝柱纯化吴茱萸提取液中总生物碱和柠檬苦素的研究

目的 研究中性氧化铝柱纯化吴茱萸总生物碱和柠檬苦素的工艺。 方法 以转移率和质量分数为评价指标,对水沉工艺的pH值,氧化铝柱色谱的上样量、洗脱剂的种类、洗脱剂体积和洗脱体积流量进行考察。 结果 水沉工艺的pH值为3,氧化铝柱色谱的上样量20 g,洗脱剂为醋酸乙酯二氯甲烷 (70∶30),洗脱剂用量为5 BV和洗脱速度为2 BV/h。 结论 氧化铝柱色谱对吴茱萸活性成分吴茱萸碱、吴茱萸次碱、柠檬苦素的纯化方法可行,经济简便,效率较高。     

高效液相色谱法同时测定牡蒿叶中4个绿原酸类成分含量

[目的]通过响应面法优化提取工艺,并结合高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定牡蒿叶中4个绿原酸类成分的含量,探究其开发利用价值。[方法]采用Thermo Scientific Syncronis Amino色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)色谱条件为流动相乙腈:0.1%甲酸水(40:60,V/V),流速1mL·min~(-1),柱温25℃检测波长325nm;以绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C的总含量为响应值乙醇浓度、液料比、超声功率为主要因素采用Box-Behnken响应面法对牡蒿叶中4个绿原酸类成分进行优化提取,并测定其含量。[结果]以乙腈:0.1%甲酸水(40:60,V/V)等度洗脱,流速1mL·min~(-1),柱温25℃检测波长325nm,牡蒿叶中绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C分离度良好,在6.25～200.00μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好加样回收、精密度、稳定性和重复性均符合要求。优化得到的最佳提取工艺为:乙醇浓度60%,液料比40:1(单位mL·g~(-1))超声功率250W频率53kHz室温超声20min。通过HPLC法测得绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C含量分别为14.317 0mg·g~(-1)、27.945 2mg·g~(-1)、1.2304mg·g~(-1)和5.066 5mg·g~(-1),合计总量达48.559 0mg·g~(-1)。[结论]HPLC法测得牡蒿叶中绿原酸类成分含量较为丰富。采用响应面法优化提取工艺,能够显著提高牡蒿叶中4个绿原酸类成分提取率具有较好潜在开发应用价值。     

同时测定苦参碱和氧化苦参碱的研究进展

正苦参碱、氧化苦参碱为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait及越南槐Sophora tonkinensis Gagnep的干燥根和根茎的主要活性成分之一,是一类独特的生物碱(喹里西啶生物碱)。现代研究表明,苦参碱和氧化苦参碱除具有清热燥湿、杀虫、利尿等作用外,还具有抑菌[1]、抗癌转移[2]、肿瘤抑制[3]等作用。随着苦参碱和氧化苦参碱应用范围的扩大,其相关制剂的应用也更为广泛,质量控制的相关研究报道也很多。本     

正交试验法优选蟾皮中吲哚类生物碱的提取工艺

目的:优选蟾皮中吲哚类生物碱的提取工艺。方法:采用正交试验设计法,以吲哚类生物碱的含量为评价指标,优选其提取工艺。结果:最佳提取工艺为14倍加水量,水煎煮3次,每次煎煮80 min。在此条件下,蟾皮中吲哚类总生物碱含量达到最高,为4.193%。结论:该工艺稳定、可行,可为工业化生产提供理论依据。     

人工栽培关白附中二萜生物碱的HPLC-Q-TOF-MS鉴别

建立了快速鉴定3年生人工栽培的关白附中二萜生物碱类化学成分的分析方法。采用碱化乙醚超声提取关白附药材粉末,提取物以流动相定容制备供试液;样品用Zorbax-SB C₁₈柱分离,以含0.2%甲酸和0.1%三乙胺的缓冲溶液/乙腈为流动相,梯度洗脱,应用ESI-Q-TOF检测,正离子模式下采集数据;根据色谱峰的准确分子量、液相色谱保留时间以及质谱裂解方式比较等方法鉴别化合物。结果表明,借助HPLC-Q-TOF-MS方法从关白附中分离检测出60个成分,根据保留时间和二级质谱裂解规律鉴定了其中26个二萜生物碱,为人工载培关白附的化学成分鉴定和未知化合物发现提供了一种快速方法。与此同时总结了C₂₀-二萜生物碱(Hetisine型、Atisine型)及C₁₉二萜生物碱(Lycoctonine型)在ESI正离子模式下的质谱裂解规律。     

不同物候期苦豆籽中8种生物碱含量的变化分析

目的 考察不同物候期苦豆籽中8种生物碱的含量变化,以确定苦豆子系列生物碱产业化生产中原药材的合理采收和有效利用苦豆子资源.方法 采用高效液相色谱（HPLC）检测方法,色谱柱Waters X-Brige C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.05 mol·L-1的磷酸二氢钾溶液（2.0 mL·L-1三乙胺）,进行梯度洗脱;检测波长205 nm和311 nm,检测器为二极管阵列检测器（DAD）,柱温25 ℃,进样量10 μl,流速1.0 mL·min-1.结果 苦豆籽中不同生物碱的量随物候期呈现不同规律的变化,其中氧化苦参碱,氧化槐果碱和野靛碱的含量从8～10月份递增,槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量随物候期的变化不大,且苦豆籽中氧化苦参碱和氧化槐果碱为主要的生物碱.结论 可根据苦豆籽中各生物碱量随物候期的变化规律及各生物碱的含量为工业化生产不同生物碱而确定苦豆籽的合理利用.     

正交试验优选黄蒲通窍胶囊提取工艺研究

目的:优选黄蒲通窍胶囊的最佳提取工艺。方法:采用L9(34)正交表,以浸膏得率、浸膏中大黄和石菖蒲有效成分含量为指标,考察不同因素水平对提取工艺的影响。采用UPLC法,以BEH C18(50mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱为固定相;以甲醇:0.1%的磷酸(85:15,v:v)为流动相;波长检测254nm;柱温30℃测定大黄素、大黄酚、大黄素甲醚总含量;以BEH C18(50mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱为固定相;以水:乙腈(38:62,v:v)为流动相,检测波长257nm;柱温30℃测定β-细辛醚含量。结果:以浸膏得率、浸膏中大黄和石菖蒲有效成分3个指标综合评定,确定最佳提取工艺条件为:乙醇浓度为70%,10倍8倍量提取2次。第1次回流2h,第2次回流1.5h,残渣加8倍量水,煎煮1h。UPLC法同时测定3种大黄成分及β-细辛醚含量方法快捷、准确、重复性好。结论:实验优选出来的提取工艺有效成分提取率较高,提取工艺简便、可行。