TRAIL在原发免疫性血小板减少症患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的：探讨原发免疫性血小板减少症（primary immune thrombocytopenia,ITP）中TRAIL的表达及其在发病机制中的作用。方法使用Ficoll密度梯度离心法,收集28例ITP患者和30例健康对照的外周血单个核细胞（PBMC）。采用实时荧光定量PCR检测TRAIL基因的表达,采用 ELISA方法检测血清中细胞因子TNF-α,IFN-γ,IL-4和 IL-10的量,并分析TRAIL与患者TNF-α,INF-γ,IL-10和血小板计数的相关性。结果与健康对照组相比,ITP患者 PBMC中 TRAIL表达显著增高（2.80±0.43 vs 1.00±0.24,t＝19.72,P＜0.001）。与健康对照组相比,ITP患者血清中IFN-γ和TNF-α升高（52.43±11.04 pg/ml vs 23.26±8.15 pg/ml;69.14±10.89 pg/ml vs 36.14±13.17 pg/ml,t＝10.36～11.50,P值均＜0.001）,IL-10降低（11.18±6.13 pg/ml vs 33.28±9.85 pg/ml,t＝10.17,P＜0.001）,IL-4的变化差异无统计学意义（35.75±12.52 pg/ml vs 40.16±14.26 pg/ml,t＝1.25,P＞0.05）。且ITP患者TRAIL的表达与血清中IFN-γ,TNF-α正相关（r＝0.432,0.541,P 值均＜0.05）,与 IL-10,血小板计数负相关（r＝-0.424,-0.553,P 值均＜0.05）。结论TRAIL可能通过介导细胞因子免疫紊乱,参与了 ITP的发生与发展,这为进一步研究 ITP的免疫干预治疗提供了新的线索和思路。     

隐球菌脑膜炎患者血清外泌体CD93表达增高及意义

目的检测隐球菌脑膜炎患者血清中外泌体表达CD93的水平,进一步探究其临床意义。方法实验组为2012年11月~2016年12月在上海长海医院和长征医院确诊的38例隐球菌脑膜炎患者的血清,诊断标准为脑脊液染色新生隐球菌阳性或培养阳性;对照组为同期收集的38例健康人血清。血清外泌体的分离采用超高速离心法;外泌体表面抗原的鉴定采用磁珠捕获结合流式细胞仪检测法;血清中细胞因子用ELISA法进行蛋白定量。实验组与对照组检测值的比较采用两独立样本的t检验,两变量之间的相关性以Pearson系数表示。结果流式结果表明,实验组血清外泌体中CD93的表达水平高于对照组为(79.11±19.31vs 23.98±6.56)%,差异具有统计学意义(t=16.66,P0.000 1)。IFN-γ在实验组与对照组血清中的表达水平为(39.78±10.77vs 58.98±16.99)pg/ml,差异具有统计学意义(t=5.884,P0.0001);IL-17在实验组与对照组血清中的表达水平为(16.32±4.03vs 3.11±0.87)pg/ml,差异具有统计学意义(t=19.75,P0.000 1);IL-1β在实验组与对照组血清中的表达水平为(57.12±12.98vs 13.45±4.78)pg/ml,差异具有统计学意义(t=19.46,P0.000 1)。实验组血清中CD93+exosomes所占的百分比与IFN-γ,IL-17,IL-1β的蛋白表达量呈正相关(r=0.488,0.456,0.532,均P0.01)。结论隐球菌脑膜炎疾病过程中,CD93在外泌体的表达可能通过影响CD4+T细胞参与了该病病程。     

MIF在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞中升高及临床意义

目的检测巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达水平,进一步探讨其临床意义。方法收集2012年8月~2015年11月到上海长海医院确诊的42例新型隐球菌脑膜炎患者及同期体检的42例健康个体外周血,以密度梯度离心法分离PBMCs,以PCR方法检测PBMCs中MIF的mRNA相对表达量,以ELISA法检测血浆中MIF,IL-17,IL-1β,TNF-α,IFN-γ和IL-4水平,两组间细胞因子表达的比较采用两独立样本t检验,MIF与细胞因子间的关系以Pearson相关系数表示。结果 MIF在实验组与对照组的蛋白表达水平为34.17±7.88 ng/ml vs 10.89±2.76 ng/ml(t=18.07,P0.0001);mRNA相对表达量为2.87±0.94 vs 1.95±0.89(t=4.606,P0.0001),差异具有统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析显示实验组MIF与IL-1β,IL-17呈正相关(r=0.467,0.401,P0.01),差异具有统计学意义。结论 MIF可能通过影响IL-1β和IL-17等细胞因子的分泌及功能参与了隐球菌脑膜炎的免疫调节过程,是该病潜在的靶位点和疾病监测指标。     

白细胞介素-18和白细胞介素-12在儿童1型糖尿病酮症酸中毒中的作用

目的探讨白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-12(IL-12)和干扰素-γ(INF-γ)在儿童1型糖尿病酮症酸中毒(DKA)中的作用。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测61例儿童1型糖尿病(T1DM)患儿(其中28例伴DKA,33例无DKA)和30例正常对照者IL-18、IFN-γ和IL-12的血清水平。结果(1)T1DM患儿中血清IL-18水平明显比对照组高[(691．99±381．42) pg/ml vs(310．02±265．32)pg/ml,P=0．03],而两组间IFN-γ和IL-12水平则无差别。(2)DKA组患儿中IL-18和IFN-γ血清水平明显高于无DKA组[(759．25±353．82)pg/ml vs(634．93±399．79)pg/ ml,P=0．001和(9．35±8．06)pg/ml vs(5．21±6．47)pg/ml,P=0．044],而两组间IL-12血清水平则无差别。(3)IL-18和IFN-γ呈相关趋势,而与IL-12正相关。结论DKA患儿IL-18和IFN-γ血清水平明显升高,提示其可能在DKA的发生、发展中起重要作用。     

大剂量地塞米松对免疫性血小板减少性紫癜患者浆细胞样树突状细胞功能及Toll样受体9 mRNA表达的影响

本研究探讨大剂量地塞米松对免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDC)功能及Toll样受体9(TLR9)表达的影响。15例初诊的ITP患者给予地塞米松40 mg/d,连用4 d,采用免疫磁珠分离法体外分离15例正常对照及13例治疗有效患者治疗前后外周血中pDC;用CpG-ODN 2216刺激外周血pDC并与之共培养24 h,采用ELISA方法检测上清中IFN-α、IL-6、TNF-α的含量;用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测pDC的TLR9 mRNA表达量。结果表明,①治疗前pDC产生IFN-α、IL-6、TNF-α水平〔(960.83±164.65)pg/ml,(156.15±39.89)pg/ml,(137.31±35.44)pg/ml)〕明显高于正常对照组〔(616.67±105.98)pg/ml,(89.13±21.48)pg/ml,(88.53±25.81)pg/ml,P<0.05〕;治疗后pDC产生IFN-α、IL-6、TNF-α水平分别降至(678.46±128.88)pg/ml,(97.77±26.31)pg/ml,(103.08±26.42)pg/ml,与治疗前比较差异有统计学意(P<0.05),与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);②治疗前pDC的TLR9 mRNA的表达水平高于正常对照组(P<0.05);治疗后pDC的TLR9 mRNA的表达水平低于治疗前(P<0.05),与正常对照组比较差异无统计学显著性(P>0.05)。结论:pDC分泌的细胞因子及其表达的TLR9在ITP发病中起重要作用;地塞米松可能通过下调TLR9的表达,抑制pDC分泌细胞因子的功能,而对ITP起到治疗作用。     

原发性胆汁性肝硬化患者血清细胞因子表达及意义

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中16种相关炎性因子表达及其临床意义。方法以50例PBC患者和40名健康对照者作为研究对象,应用Luminex液态芯片系统检测16种炎性因子血清表达情况。分析表达存在明显差异细胞因子与PBC临床及实验室参数相关性。指标相关性采用Spearman相关性检验,数值资料比较采用t检验。结果与健康对照组相比,PBC组血清中IL-6、IL-8、IL-17A、IFN-γ和TNF-α表达显著升高,差异有统计学意义[(5.8±1.3)pg/ml,(69.7±22.1)pg/ml;(328.5±154.5)pg/ml,(874.5±678.5)pg/ml;(21.3±8.5)pg/ml,(68.5±32.5)pg/ml;(25.6±10.5)pg/ml,(104.5±46.8)pg/ml;(125.5±69.5)pg/ml,(408.5±185.6)pg/ml;P均<0.01]。IL-6、IL-17A、IFN-γ和TNF-α血清表达与PBC Mayo风险评分呈正相关,相关系数r分别为0.598、0.618、0.519和0.614,P均<0.05。IL-17A、IFN-γ和TNF-α血清表达与ALT、ALP及CRP水平呈正相关,相关系数r分别为:0.632、0.521、0.493;0.614、0.603、0.532;0.727、0.814、0.659;P均<0.05。结论 PBC患者血清炎性因子IL-6、IL-17A、IFN-γ和TNF-α表达显著升高,且与疾病活动指数呈相关。     

血浆HMGB1、IFN-γ、IL-4和CD4~+T细胞表面TLR4的表达在免疫性血小板减少症患者中的意义

目的:探讨血浆HMGB1、IFN-γ、IL-4和CD4~+T细胞表面TLR4的表达对免疫性血小板减少症(ITP)的影响。方法:选取我院2014年10月至2015年10月确诊为ITP的患者25例,同时选取健康人20例为对照组;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组血浆HMGB1、IFN-γ和IL-4的水平;流式细胞术检测CD4~+T细胞表面TLR4的表达水平;分析不同参数之间的关系。结果:ITP组治疗前血浆HMGB1水平显著高于对照组(t=4.259,P0.01),治疗后降低至接近对照组(t=1.267,P0.05);ITP组治疗前、后血浆IFN-γ检测值与对照组差异均无统计学意义(P0.05,P0.05);ITP组治疗前血浆IL-4水平非常显著低于对照组(t=5.708,P0.01),治疗后明显高于对照组(t=2.107,P=0.01);ITP组治疗前血浆IFN-γ/IL-4比值非常显著高于对照组(t=5.436,P0.01),治疗后显著降低且略低于对照组;ITP组治疗前后TLR4表达均非常显著低于正常对照组(P0.01);ITP患者HMGB1水平与CD3~+的含量呈正比(r=0.824,P0.01),与CD4~+的含量无明显关系(r=0.074,P0.05),与CD8~+的含量呈正比(r=0.844,P0.01),与IL-4的含量呈正比(r=0.784,P0.01),与IFN-γ的含量呈反比(r=-0.814,P0.01),与IFN-γ/IL-4比值呈反比(r=-0.887,P0.01),与TLR4表达水平呈正比(r=0.772,P0.01)。结论:ITP患者HMGB1和TLR4的表达水平较高,临床治疗可以通过靶向控制其表达,以缓解病情并达到治疗目的。     

隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞PILRα升高及意义

目的探究Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体(paired immunogobin-like type 2ceceptor alpha,PILRα)在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的表达情况,初步讨论其临床意义。方法收集2014年5月~2016年11月到长海医院就诊的30例隐球菌脑膜炎患者外周血作为实验组,诊断标准为脑脊液染色新生隐球菌阳性或培养阳性,同期体检的30例健康人外周血作为对照组。以密度梯度离心法获得标本PBMCs,以PCR检测PBMCs中PILRα的基因表达情况,以ELISA法检测血浆中PILRα及相关细胞因子的表达情况。以独立样本t检验进行两组间变量的比较,以Pearson相关系数表示两变量间的相关性。结果实验组与对照组PBMCs中PILRα相对mRNA水平为2.49±0.74vs 1.77±0.69(t=3.898,P=0.000 3),血浆中PILRα的蛋白表达水平为33.81±10.21ng/ml vs 20.01±6.74ng/ml,差异均具有统计学意义(t=6.178,P0.000 1)。实验组血浆中PILRα的蛋白表达量与IL-1,IL-6和IFN-γ呈正比(r=0.456,0.521,0.467,P0.05),差异具有统计学意义。结论 PILRα可能参与了隐球菌脑膜炎的免疫炎症过程,是该病潜在的监测标志物和治疗靶点。     

类风湿性关节炎患者血清中sICAM-1与细胞因子的研究及临床意义

目的 研究类风湿性关节炎(RA)患者血清中可溶性细胞间黏附分子-1(siCAM-1)与IL-1,IL-6,TNF-a,IFN-γ水平和临床意义,并探讨这些免疫分子在RA发生和发展中的作用,为评价该病惠者的病理状况和预后提供临床依据.方法 采用定量酶联免疫吸附试验(ELLSA)检测RA患者与健康对照者血清中siCAM-1,IL-1,IL-6,TNF-a及IFN-γ水平,使用SPSS 10.00软件包进行统计学分析.结果 ①活动期组RA患者(49例)血清siCAM-1,IL-1,IL-6,TNF-a及IFN-γ水平(分别为861.1±263.5 ng/ml,105.2±33.1 pg/ml,37.1±12.9 pg/ml,47.2±13.9 pg/ml,12.9±4.6 pg/ml)均显著高于正常对照组(42例)(分别为295.6±75.7 ng/ml.32.4±10.1 pg/ml,11.8±2.9 pg/m1.11.4士3.0 pg/ml,4.1±1.1 Pg/m1)(t=14.35,14.60,13.38,17.61,13.12,P<0.01);也均显著高于稳定期组(15例)(分别为325.9±87.6 ng/ml,55.6±11.2 pg/ml,14.1±4.2 pg/ml,15.3±4.3 pg/ml,5.6±1.6 pg/ml)(t=12.19,8.94,10.82,14.10,9.53,P<0.01).②sICAM-1与IL-1,TNF,IFN-γ水平呈正相关,相关系数r分别为0.742,0.667,0.449,P<0.05.结论 活动期RA患者血清中sICAM-1,IL-1,IL-6,TNF-a及IFN-γ水平均明显升高,不同的检测指标与病情的相关程度不同,临床上应该同时测定多项指标,以便更加准确地对疾病进行诊断和疗效的判断.     

Tim-3及Th-17在儿童急性ITP发病机制中的作用

目的 探讨Tim-3、Th17细胞及Treg细胞在ITP患者中的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测42例ITP患者与39名健康对照者Th17细胞及Treg细胞的表达;采用ELISA法检测外周血血浆中IL-17、IFN-γ和IL-4的表达;应用RT-PCR方法 检测Tim-3、IFN-γ、IL-4、T-bet等细胞因子和转录因子的mRNA表达.结果 ITP患者Th17细胞比例为(2.41±1.43)%,明显高于健康对照组的(1.08±0.59)%,差异有统计学意义(t=5.35,P<0.05);ITP患者Treg细胞比例为(1.64±0.74)%,明显低于健康对照组的(3.12±0.52)%,差异有统计学意义(t=10.33,P<0.05).IL-17在ITP患者血浆中的表达水平为(14.42±6.37)ng/L,健康对照组为(13.91±4.47)ng/L,差异无统计学意义(t=0.42,P>0.05);而ITP患者血浆IFN-γ含量为(55.74±15.25)ng/L,较健康对照组的(31.33±12.99)ng/L明显升高,IL-4含量为(7.42±1.50)ng/L,较健康对照组的(18.17±5.19)ng/L明显降低,差异均有统计学意义(t=7.72、2.87,P均<0.05).ITP患者的T-bet mRNA和IFN-γmRNA表达水平明显升高,分别为健康对照组的(3.34±1.32)倍和(8.57±3.44)倍,差异有统计学意义(t=6.41、13.21,P<0.05);而Tim-3 mRNA和IL-4 mRNA表达水平明显下降,分别为健康对照的(0.29±0.15)倍和(0.25±0.15)侪,差异均有统计学意义(t=9.61、10.02,P<0.05).结论 Th17/Treg细胞亚群比例失调和Tim-3的表达下降可能是ITP发生和发展的重要决定因素.     

慢性非细菌性前列腺炎大鼠的IFN-γ、TNF-α和IL-10表达分析

目的分析慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠的γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)表达。方法选取广西医科大学动物实验中心提供的10只12月龄健康雄性SD大鼠,随机将其分为CAP模型组(n=5)和正常对照组(n=5)两组。建立动物模型并对其进行实验处理,运用免疫组化链酶卵白素-过氧化酶法检测前列腺组织IFN-γ、TNF-α蛋白表达,用双抗体夹心ELISA法对前列腺中IL-10表达进行定量分析,然后对两组大鼠前列腺病理形态学改变、IFN-γ、TNF-α和IL-10表达进行统计分析。结果正常对照组大鼠具有完整的前列腺组织结构,有少量粉红色正常分泌物存在于腺腔中,CAP模型组大鼠病理呈明显炎症表现。CAP模型组大鼠前列腺IFN-γ、TNF-α和IL-10表达[(0.327±0.034)pg/ml、(32.152±4.143)pg/ml、(330.140±31.480)pg/ml]均显著高于正常对照组[(0.018±0.002)pg/ml、(0.371±0.040)pg/ml、(0.015±0.001)pg/ml](P0.05)。结论慢性非细菌性前列腺炎大鼠的IFN-γ、TNF-α和IL-10表达提升,在前列腺炎的发生发展过程中有这三种炎性因子参与,并对前列腺炎的转归造成直接影响,值得临床充分重视。     

sCD93在免疫性血小板减少症患者中表达升高及临床意义

目的 探究sCD93在免疫性血小板减少症(ITP)患者中的表达水平及其与TNF-α等细胞因子的相关性,分析其临床意义。方法 收集2012年5月～2015年8月在上海长海医院血液科确诊的34例ITP患者和同期体检的34例健康个体外周血,分别作为实验组和对照组,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中sCD93,TNF-α,IL-4,IL-17和IFN-γ的蛋白表达水平,对sCD93与TNF-α等细胞因子进行Pearson相关性分析。结果 实验组与对照组sCD93为(367.28±206.98 vs 218.43±96.14)ng/ml,差异具有统计学意义(t=3.803,P=0.000 3); sCD93与TNF-α,IL-17呈正相关,差异具有统计学意义(r=0.448,0.473,P均<0.01)。结论 sCD93可能参与了ITP疾病免疫机制,是该病潜在的疾病预测指标和研究靶点。     

Th17细胞/Treg细胞失衡在儿童过敏性紫癜发病机制中的作用

目的:探讨Th17细胞、CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)及其特异性转录因子RORγt和FoxP3在儿童过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病机制中的作用,为儿童HSP的治疗从调控Th17/Treg失衡作为切入点提供一条新思路。方法:以2012年2月——2013年3月我院(四川省人民医院)儿科诊治的初次发病的HSP急性期患儿40例作为研究对象,以及同期来我院体检的健康儿童40例作为对照,采用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术测定外周血单个核细胞中RORγt mRNA和FoxP3 mRNA的表达水平;用流式细胞术测定外周血T淋巴细胞中Th17细胞和Treg细胞的表达水平;用双抗夹心ABC-ELISA技术测定血清IL-17A、TGF-β1、IL-2和IL-6浓度。结果:HSP组Th17细胞(2.75±0.60%)及RORγt mRNA(1.11±0.51)明显高于对照组Th17细胞(1.41±0.29%)及RORγt mRNA(0.65±0.24)(P0.01),而Treg细胞(4.56±1.26%)及FoxP3 mRNA(1.15±0.45)明显低于对照组Treg细胞(7.85±1.97%)及FoxP3 mRNA(2.32±1.13)(P0.01);HSP组血清IL-17A(40.40±11.81 pg/ml)、IL-6(75.38±27.19 pg/ml)、TGF-β1(309.41±81.03 pg/ml)与对照组IL-17A(20.32±10.70 pg/ml)、IL-6(25.16±8.31 pg/ml)、TGF-β1(236.34±66.01 pg/ml)相比明显升高(P0.01),而血清IL-2(25.60±13.19 pg/ml)水平与对照组(34.42±11.69 pg/ml)比较则降低(P0.01);在HSP组Th17细胞表达与RORγt mRNA、IL-17A、IL-6表达呈正相关,相关系数分别为0.887,0.938,0.934(P0.01);Treg细胞表达与FoxP3 mRNA,IL-2表达呈正相关,相关系数分别为0.834,0.932(P0.01)。结论:急性期HSP患儿存在Th17细胞、RORγt mRNA及IL-17A表达水平升高,Treg细胞和FoxP3 mRNA表达水平降低,Th17/Treg细胞的失衡;急性期HSP患儿存在血清TGF-β1、IL-6水平增高,IL-2水平降低,且Th17细胞表达水平与IL-6表达呈正相关,Treg细胞表达水平与IL-2表达呈正相关。     

妊娠期糖尿病患者血清细胞因子的水平及临床意义

目的探讨血清细胞因子水平与妊娠期糖尿病(GDM)的相关性及其临床意义。方法选择54例GDM患者作为研究对象,选择同期体检的健康妊娠妇女60例作为对照组,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,同时采用稳态模型评估法(HOMA)评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果与对照组比较,GDM组患者血清TNF-α[(82.53±21.85)pg/ml vs(45.27±12.53)pg/ml]、IL-6水平[(98.43±28.73)pg/ml vs(59.34±17.28)pg/ml]和HOMA-IR[(2.13±0.69)vs(1.36±0.32)]均明显增高,差异有统计学意义(P均<0.01);GDM患者血清TNF-α和IL-6与HOMA-IR分别呈正相关(r=0.784,0.725),差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 GDM患者血清细胞因子TNF-α和IL-6水平明显增高,与GDM发生密切相关。     

免疫性血小板减少症患者促炎因子与抑炎因子分泌失衡

目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)患者促炎因子与抑炎因子的分泌状态。方法:纳入研究的ITP患者35例,健康对照组28例。应用Aim Plex流式高通量多细胞因子检测技术检测IL-8、IL-17A、IL-22、TNF-α、IFN-γ、IL-4、CD40、CD40L、TGF-β和IL-10的表达水平。结果:与健康对照组相比,促炎因子IL-8、IL-17A、IL-22、TNF-α和IFN-γ在ITP组表达均显著升高(P0.05);而抑炎因子IL-4、CD40L、TGF-β和IL-10在ITP组的表达均显著降低(P0.05);ITP组CD40水平与对照组比较无显著差异(P0.05)。ITP组和对照组细胞因子TNF-α表达水平均与血小板计数显著相关(ITP组r=0.64,P=0.04;对照组r=-0.41,P=0.02),两组CD40、TGF-β、CD40L、IL-8、IL-17A、IL-22、IL-10、IL-1β、IFN-γ和IL-4的表达水平均与血小板计数无明显相关性。结论:ITP患者存在有促炎因子和抑炎因子的失衡现象。血小板计数减少可能受到细胞因子TNF-α表达的调控。     

孕妇产后甲状腺炎患者血清中IL-6,IFN-γ,TNF-a,TPO-Ab含量检测的临床意义

目的探讨孕妇产后甲状腺炎(postpartum thyroiditis,PPT)患者血清中白细胞介素6(IL-6)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)含量的临床意义。方法选取2013年9月~2015年8月于西安医学院第一附属医院产科就诊的34例产后甲状腺炎患者和同期在该院进行健康体检的34例产妇作为研究对象。各清晨空腹抽取两管静脉血,依次使用放射免疫法测定甲状腺抗体(radioimmunologic assaycanti,thyrodid antibogy,RATA),ELISA双抗体夹心法检测两组实验对象IL-6,IFN-γ,TNF-α和TPO-Ab的浓度,对比两组的差异。结果观察组IL-6,IFN-γ,TNF-α和TPO-Ab的结果分别为224.62±6.37pg/ml,2.14±0.10ng/ml,112.38±4.35ng/ml,54.13±1.60u/ml与对照组的82.07±5.58pg/ml,0.92±0.05ng/ml,36.78±1.74ng/ml,14.02±2.14u/ml相比,差异均有统计学意义(t=-98.154,-63.627,-94.090,-87.530,均P0.05)。观察组IL-6,IFN-γ,TNF-α均与TPO-Ab呈正相关关系(RIL-6=0.852,RTNF-α=0.658,RIFN-γ=0.836)。结论 PPT患者的IL-6,IFN-γ,TNF-α和TPO-Ab浓度均明显增加,且前三者均与TPO-Ab浓度呈正相关关系。由此可推断三类炎性因子参与了PPT的发病,继而可以作为PPT患者诊断依据并为此类患者的治疗效果提供参考。     

重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中肝素结合蛋白和Th1/Th2型细胞因子的变化及临床意义

目的本研究旨在分析重症肺炎患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中肝素结合蛋白和辅助性T淋巴细胞1(Th1)/Th2型细胞因子的变化及临床意义。方法选择2018年1月至2020年6月在该院诊治的90例肺炎患儿为肺炎组,其中包括49例轻中度感染患儿和41例重症感染患儿,另选取30例同期到该院取支气管异物但无肺部炎症的患儿作为对照组。采用流式细胞分析仪检测患儿BALF中Th1/Th3型细胞因子包括:白细胞介素(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4和IL-6的表达水平及免疫荧光干式定量法检测肝素结合蛋白(HBP)的表达水平,并计算各组患儿INF-γ/IL-4比值,分析各指标的临床意义。结果与对照组相比,肺炎组的BALF中辅助性T细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-6及肝素结合蛋白(HBP)的表达水平显著升高,差异具统计学意义(P0.05);其中重症肺炎组患儿较轻中度肺炎组患儿BALF中IL-2[(6.12±2.08)pg/mL vs.(2.81±0.9)pg/mL]、IFN-γ[(27.26±13.26)pg/mL vs.(12.99±4.03)pg/mL]和IL-6[(43.32±25.16)pg/mL vs.(18.59±8.55)pg/mL]的表达水平升高,且差异具有统计意义(P0.05),而两组患儿BALF中IL-4的表达水平未见明显差异,差异无统计学意义(P0.05);与对照组相比,肺炎组患儿INF-γ/IL-4比值明显增高,差异有统计学意义(P0.01);其中,重症肺炎组患儿的INF-γ/IL-4比值较轻中度肺炎患儿降低,差异有统计学意义(P0.01)。结论重症肺炎患儿BALF中Th1/Th2型细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-6及肝素结合蛋白(HBP)的表达水平显著增加,提示重症肺炎患儿存在免疫功能的紊乱;且重症肺炎组患儿的INF-γ/IL-4比值较轻中度肺炎患儿降低,提示重症肺炎患儿存在Th1/Th2型细胞因子平衡失调,对评估患儿肺部炎症情况及免疫治疗具一定的指导意义。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中Tim-1表达增高及其意义

目的 检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血Tim-1,IFN-γ和IL-4的表达水平,分析其相关性,初步探讨Tim-1在PBC诊治中的临床意义。方法 收集2013年6月～2015年11月来长海医院就诊的32例PBC患者和32例同期就诊的健康成人的外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测PBMC中Tim-1 mRNA,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆中Tim-1蛋白表达量,对Tim-1和IFN-γ,IL-4之间的关系进行Pearson相关性分析。结果患者组和对照组Tim-1 mRNA分别为0.63±0.40和0.36±0.32,差异具有统计学意义(t=3.005,P=0.003,P<0.01)。患者组与对照组Tim-1蛋白表达水平分别为62.72±38.60和35.66±30.55 pg/ml(t=3.11,P=0.002 8),IFN-γ表达水平分别为200.81±18.06和79.23±20.02 pg/ml(t=25.51,P<0.000 1),IL-4表达水平分别为99.22±14.67和30.18±20.56 pg/ml,差异均具有统计学意义(t=15.46,P<0.000 1)。Pearson相关分析结果提示Tim-1与IFN-γ呈负相关(r=-0.552,P=0.001 1),与IL-4呈正相关(r=0.652,P<0.000 1)。结论Tim-1可能参与了PBC的发病机制,是该病潜在的标志物和治疗靶点。     

输注储存血液对黑色素瘤荷瘤小鼠辅助性T细胞1和2平衡的影响

目的探究输血对黑色素瘤荷瘤小鼠TH1/TH2平衡及其细胞因子表达的影响。方法构建黑色素瘤小鼠肿瘤模型,设新鲜血组与储存血组(30只/组):经小鼠尾静脉分别输注新鲜全血(0 d)或储存血(15 d)0.2 mL,分别在输血后15、30 min与1、4、8 h收集小鼠全血,用微量标本多指标流式蛋白定量技术(CBA)检测各时间点血浆中细胞因子TNF-α、INF-γ、IL-2、IL-4、IL-10的表达水平;另设未输血组(6只/组)为对照组。结果 1)新鲜血组与对照组比较,输血后4 hTNF-α分泌水平(pg/mL)分别为9.14±0.83 vs 1.72±0.90(P0.01);储存血组与对照组比较,输血后4 h IL-4和IL-10表达水平(pg/mL)分别为1.55±0.17 vs 0.29±0.08和5.4±1.39 vs 0.2±0.08(P0.01)。2)储存血组与新鲜血组比较,输血后1 hTNF-α和INF-γ表达水平(pg/mL)分别为3.67±1.76 vs 7.64±1.04(P0.05)和0.27±0.16 vs 0.49±0.18(P0.05);输血后4 hIL-2的表达水平(pg/mL)分别为0.29±0.08 vs 0.89±0.21(P0.01);输血后4 h IL-10的表达水平(pg/mL)分别为5.40±1.39 vs 2.38±0.54(P0.01)。结论输血可促进小鼠体内TH1和TH2细胞因子的表达,而相对于输注新鲜血,输注储存血组小鼠体内TH1细胞因子表达有所降低,而TH2细胞因子表达得到进一步促进,致TH1/TH2失衡,平衡向TH2方向偏移。     

输卵管支原体感染不孕妇女输卵管液中TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平

【目的】研究支原体感染导致的输卵管不孕患者输卵管液中TNF-α、IFN-γ和IL-6水平。【方法】对179例不孕妇女,应用微量肉汤稀释法检测输卵管液支原体感染情况,双抗体夹心酶联免疫吸附法检测TNF-α、IFN-γ和IL-6含量。【结果】179例不孕妇女中显示支原体阳性者97例,其中Uu阳性者91例,Mh阳性者23例,两种支原体均阳性者17例,未检测出支原体者82例。支原体阳性患者血清TNF-α含量为(171.1±21.4)ng/ml,阴性者血清TNF-α含量为(113.7±35.5)ng/ml;阳性患者血清IFN-γ含量为(70.4±11.2)pg/ml,阴性者血清IFN-γ含量为(38.9±12.9)pg/ml;阳性患者血清IL-6含量为(48.9±5.2)pg/ml,阴性者血清IL-6含量为(26.4±4.7)pg/ml;阳性者血清TNF-α、IFN-γ、IL-6均高于阴性者,差异有显著性(P<0.05)。且阳性组TNF-α和IL-6含量成正相关(r=0.893,P<0.05)。【结论】认为支原体感染引起的输卵管炎症导致不孕可能与TNF-α、IFN-γ和IL-6升高有关。