不同HPLC-MS/MS法检测骨髓移植患者雷帕霉素血药浓度的相关性及意义

目的 建立以雷帕霉素(RAP)稳定同位素(RAP-d3)为内标的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并与以子囊霉素为内标的HPLC-MS/MS法检测结果进行差异性分析.方法 以RAP-d3为内标,建立测定RAP血药浓度的HPLC-MS/MS法,并对其进行方法学性能验证.同时,收集服用RAP的骨髓移植患者送检血样173份,分别用以RAP-d3和子囊霉素为内标的HPLC-MS/MS法测定全血RAP浓度,并对两种方法检测结果进行分析.结果 建立的以RAP-d3为内标的HPLC-MS/MS法,各方法学评价指标均符合要求.HPLC-MS/MS(RAP-d3)法和HPLC-MS/MS(子囊霉素)法检测结果均符合正态分布,且相关性较好(回归方程为Y=0.932 X+0.158,r2=0.915),测定结果的均值分别为4.30 ng/mL和4.16 ng/mL,差异无统计学意义(t=2.127,P=0.35).结论 以RAP-d3和子囊霉素为内标的两种HPLC-MS/MS法,其检测结果无差别,无须进行换算,可直接用于临床骨髓移植患者RA P血药浓度测定.     

环孢素A血药浓度检测方法比较分析

目的比较电化学发光法(Elecsys)、化学发光微粒子免疫法(CMIA)及液质联用(HPLC-MS/MS)法监测环孢素A(CSA)血药浓度的相关性。方法收集101例服用环孢素A达稳态的骨髓移植患者全血样本,分别用3种方法进行测定并进行评价。结果 3种测定方法的相关性良好,Elecsys法与HPLC-MS/MS的检测结果相关系数r为0.99,CMIA法与HPLC-MS/MS的检测结果相关系数r为0.92,Elecsys法与CMIA法的检测结果相关系数r为0.91,但CMIA检测结果明显高于Elecsys和HPLC-MS/MS,t值分别为1.97×10-4和7.49×10-6,差异有统计学意义;而Elecsys和HPLC-MS/MS检测结果比较差异无统计学意义(t=0.39,P>0.05)。结论三种方法的检测结果相关性好。HPLC-MS/MS与Elecsys法检测结果可以根据相应的回归方程互算,而HPLC-MS/MS与CMIA法检测结果不可直接进行换算。     

肾移植术后患者西罗莫司血药浓度的测定

目的建立肾移植术后患者西罗莫司血药浓度的液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)测定方法。方法选取服用FK506/Cs A+西罗莫司+糖皮质激素三联免疫治疗的肾移植术后患者20例,采集西罗莫司谷浓度全血样本,以达那唑为内标,经沉淀蛋白及液液萃取处理后,经液相色谱分离,采用ESI离子源,以SIR正离子方式进行检测,检测离子为m/z 936.76(西罗莫司),m/z 338.26(内标)。同时将所建立的HPLC-MS法和微粒子酶免疫法(MEIA)分别测定肾移植患者全血西罗莫司浓度,评价两种分析方法测定结果的一致性。结果西罗莫司在0.2~100μg/L范围内线性关系良好(r=0.9992),最低定量限为0.2μg/L。日内、日间精密度均小于6%,方法学回收率为92.93%~102.98%。两种方法测得的数据相关系数为0.979(P0.05),两组数据间存在相关性(n=20)。当西罗莫司浓度在1.9~11.1μg/L时,两种方法测定的平均偏差为1.4μg/L。结论本文建立的HPLC-MS测定方法快速、准确、灵敏、选择性高,适用于临床对西罗莫司的血药浓度监测;HPLC-MS法和MEIA法测定西罗莫司全血浓度存在相关性,同一份样本用MEIA测定的浓度均值比HPLC-MS法测定的值高。     

高效液相色谱-串联质谱法测定移植患者血浆泊沙康唑水平

目的建立测定血浆泊沙康唑水平的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,并应用于临床治疗药物监测。方法 HPLC色谱柱为Ultimate XB-C18。柱温50℃,流速0.8mL/min,流动相为含0.1%甲酸,以及2mmol/L乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液,梯度洗脱。质谱检测方式为ESI正离子模式,MRM扫描,监测泊沙康唑m/z 701.5~683.4作为定量离子,内标泊沙康唑-d4m/z 705.4~687.5作为定量离子。结果泊沙康唑水平在0.1~10.0μg/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.993 0),日内及日间精密度5%,平均回收率为90%~103%。结论该方法简便、准确、快速,适用于泊沙康唑的血药浓度测定。     

LC-MS/MS检测血清万古霉素浓度方法的建立及评价

目的建立检测人血清中万古霉素浓度的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法,并与化学发光微粒子免疫法(CMIA)比较方法学性能。方法血清样品经过甲醇沉淀蛋白质,采用安捷伦Poroshell 120EC C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,2.7μm)梯度洗脱分离,流动相为甲醇(0.1%甲酸)-水(0.1%甲酸),流速为0.5 m L/min,内标采用去甲万古霉素,质谱采用ESI正离子多反应监测扫描模式。用该方法定量检测112例临床服用万古霉素患者血清万古霉素含量,并与临床常用的CMIA所得结果进行比较。结果万古霉素在1~100μg/m L内线性关系良好(r2=0.996 4);方法日内日间精密度、准确度均满足药物定量检测要求,且无基质效应和残留效应。Wilcoxon符号秩和检验结果显示,LC-MS/MS测定结果与CMIA结果比较,差异有统计学意义(P0.05);相关性检验结果显示,两者线性相关性良好,Y=1.06X-0.37(r=0.986)。结论 LC-MS/MS法性能较好,价格优廉,与CMIA法有较好的相关性,且检测在准确度、精密度上优势明显,可用于临床检测万古霉素的血清药物浓度。     

HPLC-MS/MS法检测血浆伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的方法建立及在白血病患者用药监测中的应用

目的建立同时测定白血病患者血浆伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于此三种药物的常规治疗药物监测,为其在临床合理使用提供血药浓度依据。方法色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相:甲醇(0.1 ml/dl甲酸)和水(0.1 ml/dl甲酸和2 mmol/L乙酸铵),流速:0.8 ml/min,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM扫描,监测伏立康唑m/z 350.1281.2和伏立康唑-d3 m/z 353.1284.2;泊沙康唑m/z 701.4683.4和泊沙康唑-d4 m/z 705.4687.4;伊曲康唑m/z 705.3392.2和伊曲康唑-d9 m/z 714.5401.4。用含伏立康唑、泊沙康唑与伊曲康唑相应同位素内标甲醇液对白血病患者血浆样本进行蛋白沉淀处理,进行质谱检测,内标法定量,对各自检测结果作四分位分析。结果在0.1～10.0μg/ml范围内,伏立康唑峰面积/伏立康唑-d3峰面积与伏立康唑浓度线性关系良好,Y=1.58X+0.011 6(R=0.998 7);泊沙康唑峰面积/泊沙康唑-d4峰面积与泊沙康唑浓度线性关系良好,Y=1.38X+0.021 7(r=0.998 2);伊曲康唑峰面积/伊曲康唑-d9峰面积与伊曲康唑浓度线性关系良好,Y=1.42X+0.032 5(r=0.999 1)。此三种药物日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于5%,平均回收率为95%～105%。1 000份白血病患者伏立康唑浓度四分位结果为Q1～Q3:0.3～1.7μg/ml;1 000份白血病患者泊沙康唑浓度四分位结果为Q1～Q3:0.4～1.4μg/ml。结论建立了同时测定白血病患者伏立康唑、泊沙康唑和伊曲康唑浓度的HPLC-MS/MS法,该方法前处理简单,检测耗时短,检测结果准确度和稳定性好,可适用于临床检测。     

测定血液病患者血浆Venetoclax浓度的HPLC-MS/MS方法

目的建立测定血液病患者血浆Venetoclax浓度的HPLC-MS/MS法。方法患者血浆经甲醇(含内标Venetoclax-d8)沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate@XB-C18(4.6×50 mm,5μm),柱温60℃。流动相为含0.1%甲酸和2 mmol·L^-1乙酸铵的水溶液和含0.1%甲酸的甲醇溶液,流速0.7 m L·min^-1,梯度洗脱。Venetoclax与Venetoclax-d8质谱检测方式均为电喷雾正离子模式,多反应监测(MRM),同时监测Venetoclax m/z 868.5~321.7(定量离子),Venetoclax m/z 868.5~177.6(定性离子)及Venetoclax-d8m/z 876.6~329.4(定量离子)。以Venetoclax和Venetoclax-d8峰面积比为定量依据,计算血浆Venetoclax浓度。并对该方法进行性能评价。结果Venetoclax在10~2 000 ng·mL^-1范围内线性良好,三批回归方程进行线性拟合后的标准曲线方程为Y=0.001 87 X+0.003 15,r=0.996 7;携带污染、重复性、实验室内精密度、回收率、基质效应和稳定性均符合性能验证要求。结论所建立的HPLC-MS/MS方法可准确、灵敏、快速地检测血液病患者血浆Venetoclax浓度,可应用于Venetoclax治疗药物监测及其体内药动学分析。     

HPLC-MS/MS 法在检测慢性粒细胞白血病患者帕纳替尼血药浓度中的应用

目的　建立测定慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia, CML) 患者血浆帕纳替尼浓度的高效液相色谱- 串联质谱法（HPLC-MS/MS）,并应用于帕纳替尼血药浓度日常监测,为帕纳替尼合理使用提供实验室依据。方法　采用含内标（帕纳替尼-d8）的甲醇对患者血浆进行沉淀蛋白处理。色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相为甲醇相（0.1% 甲酸）和水相（0.1% 甲酸和2 mmol/L 乙酸铵）,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,MRM 扫描,同时监测帕纳替尼m/z 533.1>260.1 和帕纳替尼-d8 m/z 541.2>260.1。采用内标法定量,以帕纳替尼和帕纳替尼-d8 峰面积比为定量依据,计算血浆帕纳替尼浓度,并分别对其线性、专属性、精密度、准确度及稳定性进行考察。结果　帕纳替尼浓度在（1 ～ 250） ng/ml 范围内与峰面积线性关系良好,Y = 0.019 3X + 0.028 4 （r= 0.999 1）。专属性较好,血浆中的内源性物质不干扰帕纳替尼及其内标的测定;日内及日间RSD 均小于5%;相对回收率为100.91%~105.18%;室温放置稳定性及冻融稳定性RSD 均小于5%。结论　该文建立的HPLC-MS/MS 法,前处理简单,特异度及灵敏度高,能准确、快速地检测血浆帕纳替尼浓度,适合慢性粒细胞白血病患者帕纳替尼血药浓度的日常监测。     

LC-MS/MS检测万古霉素血清药物浓度方法的建立及评估

摘要：目的：建立液相色谱–串联质谱（HPLC–MS/MS）法检测人血清中万古霉素的浓度,并与化学发光微粒子免疫法（CMIA）进行比较。方法：血清样品经过甲醇沉淀蛋白,采用安捷伦Poroshell 120EC C18色谱柱（2.1mm*50mm,2.7μm）梯度洗脱分离,流动相为甲醇（0.1%甲酸）–水（0.1%甲酸）,流速为0.5 mL/min, 内标采用去甲万古霉素,质谱采用ESI正离子多反应监测扫描模式。本方法成功应用于112例临床服用万古霉素患者的血清样本万古霉素的定量,并与传统临床常用的CMIA方法所得结果进行比较研究。结果：万古霉素在1–100μg?mL-1内线性关系良好（r2 = 0.9964）;方法日内日间精密度、准确度均满足药物定量检测要求,且无基质效应和残留效应。Wilcoxon符号秩和检验结果显示HPLC–MS/MS测定结果与CMIA结果进行比较,具有显著的差异（P<0.05）;相关性检验结果显示,两者线性相关性良好,Y = 1.06X – 0.37（r = 0.986）。结论：LC–MS/MS与CMIA两种方法检测万古霉素血清药物浓度所得结果存在明显差异,而两者相关性良好;且LC–MS/MS法与CMIA法有较好的可比性,可用于临床检测万古霉素的血清药物浓度。     

HPLC-MS/MS法同时测定白血病患者全血环孢素A、他克莫司和西罗莫司水平

目的建立高效液相色谱质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定白血病移植患者全血中免疫抑制治疗药物环孢素A(CsA)、他克莫司和西罗莫司血药水平的方法。方法通过含有内标的甲醇对免疫抑制剂全血标本进行处理,利用HPLC-MS/MS以ESI+模式的多离子反应监测(MRM)扫描方式同时对CsA、他克莫司和西罗莫司进行监测,以2mmoL/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液(B)-0.1%甲酸甲醇溶液(A)为流动相进行梯度洗脱。结果该方法中CsA、他克莫司和西罗莫司在检测范围内线性良好,各r均大于0.99;各精密度均小于8.33%;3个水平的标本稳定性均良好(RSD≤11.9%)。结论该方法操作简便、检测效率高,稳定性好,适用于移植患者服用免疫抑制类药物的血药水平监测。     

HPLC-MS/MS法在伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼治疗CML患者血药浓度监测中的应用

目的建立测定慢性粒细胞白血病(CML)患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并应用于临床血药浓度监测。方法血浆经甲醇沉淀蛋白处理,采用内标法定量。色谱柱为Ultimate XB-C18,柱温60℃,流动相为甲醇(0.1%甲酸)和水(0.1%甲酸和2mmol/L乙酸铵),梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾离子阱正离子模式,多反应监测模式(MRM)扫描,监测离子对:伊马替尼m/z 494.3→394.1,达沙替尼m/z 488→401,尼洛替尼m/z 530.2→289.2。结果伊马替尼浓度在50～2500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.001 17 X+0.006 17(r=0.999 5);达沙替尼浓度在1～250ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=0.013 7 X+0.000 435(r=0.999 2);尼洛替尼浓度在50～2 500ng/mL与峰面积比值线性关系良好,Y=1.1e+0.03 X+1.05e+0.04(r=0.998 5)。日内及日间相对标准偏差(RSD)均小于5%,相对回收率在90.0%～110.0%。结论该方法前处理简单,检测的特异性及灵敏度高,可适用于CML患者血浆伊马替尼、达沙替尼与尼洛替尼血药浓度的快速、准确测定。     

HPLC-MS/MS法检测骨髓移植患者全血环孢素A(CsA)浓度及与AM1和AM4N代谢产物的相关性研究

目的探索环孢素A(CsA)在骨髓移植患者代谢产物AM1和AM4N与母药CsA的关系,为CsA在临床合理使用提供支持。方法用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)对骨髓移植患者个体内和个体间的全血样本进行CsA,AM1和AM4N血药浓度检测。结果 CsA个体内代谢:AM1与CsA相关性不好(r=0.79),AM4N与CsA和AM1相关性均较好(r0.9),代谢产物AM1和AM4N含量及比率各异;CsA个体间代谢:个体间CsA和AM1的相关性较差(r=0.59),AM4N和CsA及AM1在个体间不存在相关性(r0.5),代谢产物AM1和AM4N含量及比率各异。结论 CsA代谢存在个体差异;HPLC-MS/MS法可用于骨髓移植患者CsA血药浓度检测。     

HPLC-MS/MS检测血液病患者体内鲁索替尼血药浓度

目的建立测定血液病患者鲁索替尼血药浓度的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),并用于血液病患者鲁索替尼的个体化给药。方法采用同位素内标法,通过含内标(鲁索替尼-d9)的甲醇沉淀蛋白,萃取鲁索替尼,用HPLC-MS/MS分离和测定鲁索替尼和鲁索替尼-d9。以鲁索替尼和鲁索替尼-d9峰面积比为定量依据,计算血浆鲁索替尼浓度,并考察其性能。结果鲁索替尼在2.5~250.0 ng/mL内线性关系良好,3个回归方程相关系数r均≥0.9950,携带污染率、重复性、实验室内精密度、回收率、基质效应和稳定性均符合性能验证要求。结论HPLC-MS/MS可快速、特异和准确地检测血液病患者血浆鲁索替尼浓度,能为临床合理使用鲁索替尼提供用药参考。     

小肠移植术后患者他克莫司用药及血药浓度监测的护理

目的 总结同种异体小肠移植术后他克莫司(FK506)血药浓度监测的护理经验.方法 选取6例小肠移植术患者,对术后FK506血药浓度监测的护理要点进行总结.结果 FK506血药浓度监测护理包括:药物的保存、血标本的采集(血标本采集的时间、采集注意事项)、定期监测与随访、健康教育(用药前告知、服药指导、服药的不良反应、家属教育).术后6例患者及移植肠全部存活,FK506血药浓度基本维持在目标浓度范围内,1例患者在术后1个月内发生急性排斥反应,经用甲泼尼龙冲击治疗并调整FK506的剂量后逆转.结论 小肠移植术后,重视并加强FK506用药及血药浓度监测的护理至关重要.     

HPLC-MS/MS法在白血病患者血浆维生素C水平测定中的临床应用

目的建立测定白血病患者血浆维生素C水平的高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)法,并应用于临床。方法采用HPLC-MS/MS法,L-Ascorbic Acid-1-13 C为内标,XBridge?C18(4.6 mm×50.0mm,5μm)色谱柱,流动相为(0.1%甲酸)甲醇-(2mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸)水,梯度洗脱,流速为0.8mL/min,柱温60℃,进样量10μL。采用电喷雾电离源,以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测。并对123份白血病患者标本及407份健康志愿者标本进行了检测,测定结果用t检验进行比较分析。结果维生素C的水平在0.5～50.0μg/mL范围内线性关系良好(r0.990 0),日内及日间精密度(RSD)均小于5%,回收率在90%～110%;与健康人相比,患者体内维生素C水平明显偏低[(8.8±3.0)vs.(2.4±3.9)μg/mL,P0.01]。结论该方法快速、准确、灵敏度高、操作简单,适用于临床中患者血浆中维生素C水平的检测。建议白血病患者应适当补充维生素C。     

高效液相色谱串联质谱法测定血清非结合雌三醇的前处理研究

目的优化高效液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定血清游离雌三醇(uE3)的前处理方法。方法以活性炭吸附血清为研究基质,通过加入已知量的雌三醇(E3)标准品及E3-2-3-4-13 C3内标,在LC-20AD XR高效液相色谱系统和API 5500串联四级杆质谱仪上对E3检测的色谱条件、质谱条件及萃取条件等进行优化。结果色谱条件:选用菲罗门Knietex色谱柱(100.0mm×2.1mm,2.6μm);有机相为甲醇,水相为0.1mmol/L氟化铵水溶液,8min梯度洗脱。质谱条件:选用电喷雾(ESI)负离子模式和多反应监测(MRM)模式分析,选择质荷比(m/z)287→m/z 145作为E3的定量离子对,m/z 287→m/z 171作为定性监测离子对;选择m/z 290→m/z 148作为内标的定量离子对,m/z 290→m/z 174作为定性监测的离子对。萃取条件:萃取剂为正己烷/乙酸乙酯(50/50,v/v),样品与萃取剂的比例为1∶2,萃取率可达85.71%。结论 E3检测的色谱条件、质谱条件、萃取条件已得到全面优化,为后续建立LC-MS/MS测定人血中uE3的参考方法打下良好基础。     

不同采血管对环孢霉素A和普乐可复血药浓度测定的影响

目的 2种EDTA-K2抗凝真空采血管应用于环孢霉素A(CsA)和普乐可复(FK506) 血药浓度测定的临床评价.方法 在雅培公司ARCHITECT System I2000SR和AxSYM全自动免疫分析仪上同时应用2种EDTA-K2抗凝真空采血管测定环孢霉素A(CsA)和普乐可复(FK506) 血药浓度,进行线性回归分析,评价其相关性.结果 其中1种EDTA-K2抗凝真空采血管对普乐可复(FK506)在雅培ARCHITECT System I2000SR和雅培AxSYM两个系统上检测没有影响,在2种方法上检测的相关性很好.另一种EDTA-K2抗凝真空采血管在雅培ARCHITECT System I2000SR上测定对环孢霉素A(CsA)有影响.结论 不同的EDTA-K2抗凝真空采血管可能会对环孢霉素A(CsA)的检测结果产生严重影响,在更换检测系统时应进行真空采血管的对比,选择合适的真空采血管应用于临床.     

肾移植术后FK506血药浓度监测

他克莫司(FK506)是一种强效免疫抑制剂,在临床器官移植的抗排斥反应中应用日趋广泛.实践证明,FK506谷值浓度过高易致肾毒性和高血糖发生,过低义易并发急性排斥反应[1],而且,FK506的治疗窗窄,个体差异大,所以,在肾移植术后定期监测FK506血药浓度并及时调整用药剂量,对充分发挥他克莫司的免疫抑制剂的作用,避免或减少不良反应非常重要.本文对我院30例使用FK506的肾移植患者定期进行FK506血药浓度监测832次,并对结果进行统计分析.     

HPLC-MS/MS检测血浆百草枯浓度方法的建立

目的建立高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测血浆百草枯浓度的方法。方法选用Phenomenex Kinetex 2.6μm HILIC色谱柱(100.0 mm×2.1 mm),以1%甲酸水溶液(含250 mmol/L甲酸铵)为流动相A、乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,进样量为10μL,柱温为40℃;使用电喷雾电离(ESI)源,采用正离子条件下多离子反应监测扫描模式。百草枯和内标乙基百草枯的离子对分别为质/荷比(m/z)92.7→171.0和m/z 107.0→185.1。对建立的HPLC-MS/MS进行方法学评价(线性范围、定量下限、准确度、精密度、选择性和基质效应、稳定性),并检测75例百草枯急性中毒患者的血浆百草枯浓度,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆百草枯浓度对临床结局的判断价值。结果 HPLC-MS/MS检测百草枯浓度在54.28~13 190.00 ng/mL范围内具有良好线性关系(Y=0.000 1X+0.011 6,r2=0.998 3)。定量下限处的批内平均准确度为96.31%~120.04%,批间准确度为104.43%;高、中、低浓度批内和批间检测值与理论值的偏差均在±15%范围内;高、中、低浓度及定量下限处的批内和批间相对标准偏差(RSD)均15%。随机选择6份空白基质考察方法的选择性和基质效应,结果表明百草枯出峰位置无干扰,方法选择性好;高、低浓度处经内标归一化的基质因子的变异系数均15%,基质效应符合要求。样本室温放置可稳定1 d,2~8℃放置可稳定1周,-80℃冻存可稳定1个月,反复冻融处理3次对结果无影响。75例百草枯中毒患者的血浆百草枯浓度为2 820(0~22 200)ng/mL,死亡组血浆百草枯浓度明显高于存活组(P0.05)。ROC曲线分析显示血浆百草枯浓度判断临床结局的ROC曲线下面积为0.855,最佳临界值为2 431 ng/mL。结论建立的HPLC-MS/MS方法可用于临床血浆百草枯浓度的常规检测。     

同位素稀释-超高效液相色谱串联质谱法测定人体血清/全血中维生素B1

目的建立快速、灵敏测定人体血清/全血中维生素B_1的稳定同位素稀释-超高效液相色谱串联质谱(ID-UPLC-MS/MS)法。方法血清/全血样本经蛋白质沉淀处理,上清液用双蒸水稀释,采用Thermo Hypersil GOLD a Q色谱柱分离,以10 mmol/L甲酸铵水溶液~乙腈为流动相,梯度洗脱。采用电喷雾离子源电离,正离子模式下,采用多反应监测(MRM)扫描方式检测,维生素B_1和同位素内标的离子通道分别为m/z 265.2→122.0和269.2→122.0。结果维生素B_1在0.446~89.2 ng/m L范围内线性关系良好,r=0.999 6;低、中、高质控样本的日内、日间精密度的相对标准偏差(RSD)均5.34%;平均加样回收率在96.9%~102.6%,RSD均6.61%。结论建立的方法简单快速、灵敏度好、准确度高,可用于人体血清/全血中维生素B_1的测定。