乙型肝炎肝硬化患者外周血IFN-γ、IL-32和IL-6的临床相关性

目的探讨乙肝肝硬化患者外周血IFN-γ、IL-32和IL-6水平的临床相关性。方法收集42例乙型肝炎肝硬化患者和50例健康对照者空腹血清,采用ELISA法检测血清IFN-γ、IL-32和IL-6水平;采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量;采用全自动生化分析仪检测血清肝功能水平。结果健康对照者血清IFN-γ、IL-32和IL-6水平分别为(14.41±3.71)、(182.24±72.22)、(1.62±0.63)ng/mL,乙肝肝硬化患者分别为(182.12±41.37)、(1218.21±215.08)、(37.70±9.77)ng/mL。IFN-γ水平与ALb水平呈负相关(r=-0.342,P0.05),与HBV DNA水平呈正相关(r=0.319,P0.05);IL-6水平与ALT水平呈负相关(r=-0.314,P0.05)。结论 IFN-γ、IL-32和IL-6在慢性HBV感染过程中可能起重要作用,可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。     

慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清骨桥蛋白和TGF-β1水平变化

目的分析慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清骨桥蛋白(OPN)和转化生长因子β1(TGF-β1)水平变化。方法选择慢性乙型肝炎患者268例,其中轻度54例、中度89例、重度73例和乙型肝炎肝硬化52例,采用ELISA法检测血清OPN和TGF-β1,采用化学发光免疫法检测血清III型前胶原(PC III)、IV型胶原(C IV)、层连蛋白(LN)和透明质酸(HA)。结果慢性乙型肝炎中度患者血清OPN和TGF-β1水平分别为(67.45±8.33)ng/ml和(164.30±34.61)pg/ml,显著高于慢性乙型肝炎轻度患者【分别为(31.28±7.45)ng/ml和(89.21±18.54)pg/ml,P0.05】;重度患者血清OPN和TGF-β1水平分别为(83.21±12.45)ng/ml和(248.95±52.33)pg/ml,显著高于轻度【分别为(31.28±7.45)ng/ml和(89.21±18.54)pg/ml,P0.05】或中度【分别为(67.45±8.33)ng/ml和(164.30±34.61)pg/ml,P0.05】;重度患者血清PC III和LN水平分别为(22.04±6.12)ng/ml和(181.06±37.89)ng/ml,显著高于轻度【分别为(13.84±3.11)ng/ml和(121.32±20.84)ng/ml,P0.05】;乙型肝炎肝硬化患者血清OPN和TGF-β1水平分别为(138.42±29.11)ng/ml和(456.39±97.60)pg/ml,显著高于慢性乙型肝炎患者(P0.05);无论是在肝炎还是肝硬化患者,血清OPN水平与血清PC III、C IV、LN、HA水平呈显著正相关(r=0.397、r=0.416、r=0.402、r=0.435,P0.05);血清TGF-β1水平与PC III、C IV、LN、HA水平呈显著正相关(r=0.426、r=0.493、r=0.415、r=0.481,P0.05)。结论慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清OPN和TGF-β1水平升高,可能与肝纤维化发生有关。     

Notch2分子对慢性乙型肝炎患者CD8~+T细胞功能的影响及意义

目的观察慢性乙型肝炎患者外周血CD8~+T细胞中Notch2分子的表达情况,并分析Notch2分子对CD8~+T细胞功能的影响。方法选择30例慢性乙型肝炎患者和15名健康对照者,应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,应用免疫磁珠法分离CD8~+T细胞,应用反转录实时定量PCR法检测CD8~+T细胞中Notch2 mRNA的表达水平。将分离的CD8~+T细胞与HepG2.2.15细胞混合培养,并加入抗Notch2抗体,培养48 h后应用CCK-8法检测细胞增殖,应用ELISA法检测上清中IFN-γ、IL-2及TNF-α的表达水平。结果慢性乙型肝炎患者CD8~+T细胞中Notch2 mRNA的表达水平明显升高,较健康对照者升高超过5倍。应用抗Notch2抗体抑制Notch2分子信号通路后,混合培养细胞的增殖水平(8.88±1.56)×10~5较同型对照组(4.47±1.13)×105和空白对照组(4.39±0.95)×10~5均明显升高,培养上清中的IFN-γ:3815±807 pg/mL和TNF-α:346.3±77.3 pg/mL的表达水平也较同型对照组IFN-γ:1316±484 pg/mL;TNF-α:139.8±40.1 pg/mL及空白对照IFN-γ:1383±604 pg/mL;TNF-α:124.0±45.5 pg/mL组显著升高,差异均具有统计学意义。结论 HBV感染可能通过提高Notch2的表达抑制CD8~+T细胞的杀伤功能,诱导机体免疫耐受,导致感染慢性化。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8＋CD28＋T细胞、血清IFN-γ水平变化及意义

目的 观察慢性乙型肝炎患者外周血CD8＋ CD28＋T细胞、血清γ干扰素（IFN-γ）水平变化,并讨论其临床意义.方法 慢性乙型肝炎45例为观察组,健康体检者20例为对照组.采用双抗体夹心时间分辨荧光免疫分析法测定HBeAg,应用实时荧光定量PCR法检测外周血HBV-DNA,流式细胞术检测外周血CD8 CD28＋T细胞水平,ELISA法检测血清IFN-y水平.结果 对照组、观察组外周血CD8＋ CD28＋T细胞比例分别为12.86％±2.57％、10.74％±3.59％,两组比较P＜0.05;血清IFN-γ水平分别为（5.79±1.28）、（311.00±80.40） pg/mL,两组比较P均＜0.01.观察组Child-Pugh A、B、C级外周血CD8＋ CD28＋T细胞比例分别为7.98％±2.62％、12.37％±1.73％、13.05％±3.38％,各级间比较P均＜0.01;血清IFN-y水平分别为（320.10±86.55）、（299.95±60.84）、（307.57±88.43） pg/mL,各级间比较P均＞0.05.CD8＋ CD28＋T细胞与HBeAg、HBV-DNA相关系数分别为-0.33、-0.44,P均＜0.05;IFN-γ与CD8＋T细胞相关系数为-0.33,P＜0.05;CD28＋T细胞与IFN-γ相关系数为0.34,P＜0.05.结论 IFN-γ水平可反映HBV慢性感染者的免疫状态,CD8＋ CD28＋T细胞有助于病毒的清除.     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞分泌IFN-γ的实验研究

目的:探讨外周血单个核细胞(PBMC)分泌γ干扰素(IFN-γ)水平在曼性乙型肝炎发生、发展中的意义.方法:采用ELISA法测定20名正常人和44例HBV感染者的PBMC经植物血凝素(PHA)刺激前后IFN-γ在上清液中的表达水平.结果:正常及患者组PBMC上清液中IFN-γ低水平的活性表达;经PHA刺激后其活性明显升高(对照组23.7±12.7升高至117.2±64.7 pe/mL,n=20,t=10.41,P＜0.01;轻度组24.6±9.3升高至57.4±27.1 pg/mL,n=21,t=4.92,P＜0.01;中度组30.1±15.5升高至81.6±42.2 pg/mL,n=15,t=4.45,P＜0.01;重度组35.6±17.9升高至114.5±49.3 pg/mL,n=8,t=4.26,P＜0.01),但患者组IFN-γ水平显著低于正常对照组(177.2±64.7vs57.4±29.1、81.6±42.2、114.5±49.3 pg/mL,t值分别为7.50、5.28和2.77,P＜0.01);患者组IFN-γ与血清HBV-DNA水平呈明显负相关(γ-0.49,P＜0.01).结论:乙型肝炎慢性化以及高复制状态可能与PBMC分泌IFN-γ性降低有关.     

慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞及其相关细胞因子水平检测及临床意义

目的探讨慢性乙型肝炎病毒感染者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)、IL-18、IFN-γ、TGF-β水平变化及临床意义。方法选择乙型肝炎病毒携带者(ASC)112例、慢性乙型肝炎患者(CHB)63例和健康对照者50例,采用流式细胞术和ELISA法分别检测CD4+CD25+细胞和IL-18、IFN-γ、TGF-β水平;采用荧光定量聚合酶链反应法检测HBV DNA载量。结果CHB患者外周血CD4+CD25+Treg细胞数、IL-18、IFN-γ、TGF-β水平分别为(30.97±18.78)%、(448.51±75.75)ng/ml、(190.93±38.52)ng/ml和(331.22±71.67)ng/ml,ASC组分别为(28.17±18.52)%、(524.52±81.42)ng/ml、(204.93±47.77)ng/ml和(336.01±82.61)ng/ml,均显著高于健康人[分别为(27.30±17.59)%、(49.79±25.68)ng/ml、(14.41±11.75)ng/ml和(42.28±17.50)ng/ml,P0.05]。结论乙型肝炎病毒感染者存在CD4+CD25+Treg细胞数的变化,IL-18、IFN-γ和TGF-β可能参与了乙型肝炎患者肝损伤过程。     

YKL-40、PCPE-1对慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度的评估价值

目的探究慢性乙型肝炎患者患者血清中YKL-40、PCPE-1水平及在肝纤维化程度评价中的价值。方法选择2015年1月至2018年2月在我院就诊的232例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,最终将符合条件的136例慢性乙型肝炎患者纳入本次研究。选择同期健康体检的人员36例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附法检测受试者血清中YKL-40、PCPE-1水平,探究其与肝纤维化程度评分的关系及诊断显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的价值。结果慢性乙型肝炎组患者血清中YKL-40、PCPE-1水平分别为(31.6±3.6) ng/mL和5.9(2.5,9.1) pg/mL,健康对照组受试者血清中YKL-40、PCPE-1水平分别为(7.1±0.5) ng/mL和42.0(21.4,62.8) pg/mL。两组受试者血清YKL-40、PCPE-1比较,差异均有统计学意义(P0.001)。YKL-40在慢性乙型肝炎病理分期S0、S1、S2、S3和S4患者中的表达水平分别为(27.7±2.3) ng/mL、(30.7±1.9) ng/mL、(31.6±3.0) ng/mL、(34.8±2.1) ng/mL和(36.2±1.9) ng/mL;PCPE-1在慢性乙型肝炎病理分期S0、S1、S2、S3和S4患者中的表达水平分别为(11.5±2.7) pg/mL、(7.0±2.1) pg/mL、(3.9±2.7) pg/mL、(2.8±1.9) pg/mL和(1.5±1.3) pg/mL。五组患者血清YKL-40、PCPE-1水平比较,差异均有统计学意义(P0.001)。随肝纤维化程度加深,慢性乙型肝炎患者血清YKL-40水平升高,PCPE-1水平降低。慢性乙型肝炎患者血清YKL-40水平与肝纤维化程度评分呈正相关(P0.05),血清PCPE-1水平与肝纤维化程度评分呈负相关(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1诊断慢性乙型肝炎患者显著纤维化、进展期纤维化及早期肝硬化的效能均较高,两者诊断效能比较,差异均不具统计学差异(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测和FIB-4诊断显著纤维化的效能比较,差异不具统计学意义(P0.05);但二者诊断显著纤维化的效能均高于APRI,差异均有统计学意义(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测诊断进展期纤维化的效能高于APRI、FIB-4,差异有统计学意义(P0.05)。血清YKL-40、PCPE-1联合检测与APRI、FIB-4诊断早期肝硬化的效能比较,差异均不具统计学意义(P0.05)。结论 YKL-40、PCPE-1是慢性乙型肝炎患者肝纤维化程度判断的有效生物标志物,其诊断肝纤维化的效能优于APRI和FIB-4。     

维生素D缺乏对乙型肝炎患者的影响

目的探讨维生素D缺乏对慢性乙型肝炎、肝硬化、肝细胞癌患者临床各指标的影响。方法选择慢性乙型肝炎14例,肝硬化44例,肝细胞癌33例和13名健康对照者,采用同位素稀释的液相色谱-串联质谱法测定血清中维生素D水平,同时检测T淋巴细胞亚群、肝功能、病毒学指标等。结果维生素D缺乏(20 ng/mL)的发生率在肝癌(96.97%)和肝硬化(93.18%)患者中较高,健康人群为76.92%,乙型肝炎患者为77.83%。健康人群维生素D水平为(16.38±5.53)ng/mL,慢乙肝组为(15.06±4.91)ng/mL,肝硬化组为(11.85±2.66)ng/mL,肝癌组为(10.59±3.06)ng/mL。4组患者不同季节的血清维生素D水平差异均无统计学意义(P0.05)。健康人群血清维生素D与慢性乙型肝炎组之间差异无统计学意义(P0.05)。肝硬化组患者血清维生素D与肝癌组之间差异无统计学意义(P0.05)。但肝硬化组及肝癌组维生素D与健康人群、慢性乙型肝炎患者组之间维生素D差异有统计学意义(P0.05),考虑维生素D水平的降低与乙型肝炎的临床进展相关。维生素D水平与淋巴细胞、血红蛋白、血小板、PTA、白蛋白、前白蛋白、胆碱脂酶、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD3+CD8+、CD45+)等参数相关,提示维生素D与肝脏合成功能及免疫功能有一定联系。结论大多数乙型肝炎患者存在维生素D缺乏。维生素D可能参与乙型肝炎免疫功能的调节,这可能为乙型肝炎发病机制的研究和治疗提供新的思路。     

乙型肝炎病毒感染者不同疾病阶段外周血T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1及血清细胞因子的表达

目的 探讨HBV感染后不同疾病阶段(免疫耐受期、免疫清除期、非活动携带状态)患者T淋巴细胞表面程序性死亡受体-1(PD-1)和血清细胞因子的表达差异.方法 2011年4月至2011年9月无锡市第五人民医院住院或门诊的HBV感染者105例,HBV感染后免疫耐受期、免疫清除期、非活动携带状态患者各35例,另选20名健康人作为对照组.收集研究对象的外周血,流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞表面PD-1的表达水平,ELISA检测血清IL-10、IFN-γ的表达水平.数据处理采用t检验,相关性分析采用Pearson相关分析.结果 HBV感染组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平为(12.35±3.48)％,高于健康对照组的(4.65±1.21)％(t=9.76,P＜0.01);HBV感染组CD4+T淋巴细胞表面PD-1表达水平为(4.95±2.87)％,健康对照组为(4.08±2.14)％,两组比较差异无统计学意义(t=1.29,P＞0.05).免疫耐受组、免疫清除组、非活动携带组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平分别为(15.87±3.18)％、(7.69±3.64)％和(10.12±2.84)％,均高于健康对照组(t值分别为15.12、3.61和8.17,均P＜0.01),免疫耐受组CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平高于免疫清除组(t=10.01,P＜0.01).慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达水平与IL-10呈正相关(r=0.377,P＜0.05),与IFN-γ呈负相关(r=-0.620,P＜0.05).结论 慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T淋巴细胞表面PD-1表达上调,PD-1水平与血清Th1细胞因子IFN-γ呈负相关,与血清Th2细胞因子IL-10呈正相关;HBV感染慢性化可能与PD-1高表达有关.     

肝细胞癌患者免疫功能的研究

目的探讨肝细胞癌免疫功能的临床意义。方法对54例HCC患者、64例慢性乙型肝炎患者和23位正常献血员采用双抗体夹心法,一抗为生物素标记的抗IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-10、IL-12P70抗体,根据样本的OD值及曲线的斜率计算出细胞因子的含量。采用免疫组织化学方法检测外周血CD3＋、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞的百分率。银染法检测T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白,流式细胞仪测定肝细胞癌患者外周血黏附单个核细胞CD83及HLA-DR表达。结果 HCC患者血清IFN-γ含量为（4.92±2.15）pg/mL,低于健康献血员（19.16±2.34）pg/mL和慢性乙型肝炎患者（11.42±6.86）pg/mL（P〈0.05）。HCC患者IL-2、IL-12P70含量降低,而TNF-α、TGF-β1、IL-4、IL-10含量增高。根据肝癌体积大小对患者分组比较血清IFN-γ水平,随着肿瘤体增大,血清IFN-γ水平下降,调节IFN-γ分泌的IL-12P70水平与IFN-γ的变化趋势一致,但HCC患者血液中都存在IFN-γ。根据甲胎蛋白的水平将未经治疗的HCC患者分成2组,结果提示甲胎蛋白含量高时血清IFN-γ水平下降,调节IFN-γ分泌的IL-12P70水平与IFN-γ的变化趋势一致。与慢性乙型肝炎患者和健康献血员相比,HCC患者CD4＋T淋巴细胞、CD4＋/CD8＋比值降低,反映T淋巴细胞增殖活性的AgNORs降低。黏附细胞悬液CD83和HLA-DR表达降低。结论 HCC患者的免疫功能低下,与肿瘤细胞的免疫逃逸有关。     

脂蛋白相关磷脂酶A2与乙肝肝硬化Child-Pugh分级

目的探讨血清脂蛋白相关磷脂酶A2(lipoprotein related phospholipase A2,Lp-PLA2)水平与乙型肝炎肝硬化Child-Pugh分级的关系.方法选择269例乙型肝炎肝硬化患者为病例组,慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)组157例为疾病对照组,健康体检者120例为正常组,肝硬化患者根据ChildPugh分级分为A、B、C组进行,各组均抽取静脉血采用免疫散射比浊法检测其血清Lp-PLA2水平,采用倾向性评分匹配统计学分析进行筛选,根据匹配结果对应的分组进行统计分析,比较各组间的差异.结果肝硬化C组血清Lp-PLA2水平(443.1 ng/mL±40.6ng/mL)明显高于肝硬化A组(208.5ng/mL±84.6ng/mL)、B组(390.5 ng/mL±42.3 ng/mL)和CHB组(154.3ng/mL±54.1ng/mL)(P 0.01),肝硬化B组明显高于肝硬化A组和CHB组(P0.01),肝硬化A组明显高于CHB组(P 0.01),CHB组与健康对照组(119.1ng/mL±19.8 ng/mL)相比差异显著(P0.01); ROC曲线显示:当对照组设为CHB对肝硬化的AUC为0.852,诊断阈值为262.5 ng/mL;对照组设为硬化A级对肝硬化B级的AUC为0.969,诊断阈值为311.5 ng/mL;对照组设为硬化B级对24例肝硬化C级的AUC为0.809,诊断阈值为420.5 ng/mL.结论血清Lp-PLA2水平随乙型肝炎肝硬化的病程进展呈升高趋势,有助于肝硬化Child-Pugh分级的判断,血清Lp-PLA2水平的变化可作为乙型肝炎肝硬化病程监测的参考指标.     

拉米夫定联合苦参素治疗慢性乙型肝炎患者外周血T细胞亚群和细胞因子的变化

目的观察拉米夫定联合苦参素治疗对慢性乙型肝炎患者血清细胞因子水平的影响和T细胞亚群的变化。方法 86例慢性乙型肝炎患者被随机分为治疗组42例和对照组44例,治疗组给予拉米夫定联合苦参素治疗,对照组单用拉米夫定治疗,在48周末观察结果。采用ELISA双抗体夹心法检测IL-2、IL-6、IL-10和IFN-γ水平;采用FACScalibur流式细胞仪检测外周血T细胞亚群。结果在治疗48周末,治疗组和对照组谷丙转氨酶复常率分别为90.2%和83.3%(P>0.05);治疗组HBeAg转阴率、HBeAg/HBeAb转换率和HBV DNA转阴率分别为57.1%、35.3%和88.5%,显著高于对照组的30.2%、19.8%和67.1%(P<0.05);治疗组和对照组IL-2水平分别为181.1±26.1pg/ml和86.9±10.7pg/m(l P<0.05),IFN-γ水平分别为47.5±4.3pg/ml和27.8±4.4pg/m(l P<0.05),IL-6水平分别为13.2±5.8pg/ml和27.1±6.4pg/m(l P<0.05),IL-10水平分别为109.7±32.1pg/ml和169.5±36.2pg/m(l P<0.05);治疗组和对照组CD4+T淋巴细胞百分率分别为37.2±5.8%和27.8±6.4%(P<0.05),CD8+T淋巴细胞百分率分别为20.8±5.2%和26.3±6.2%(P<0.05),CD4+/CD8+比值分别为1.56±0.3和1.34±0.2(P<0.05)。结论拉米夫定联合苦参素治疗可以纠正慢性乙型肝炎患者Th1和Th2型细胞因子紊乱,改善T细胞亚群中各成分的比值,对慢性乙型肝炎患者细胞免疫有一定的调节作用,因而具有治疗作用。     

不同中医证型慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和HBV DNA水平变化

目的探讨不同慢性乙型肝炎中医证型患者血清IFN-γ和HBV DNA水平的变化。方法 5种不同中医证型慢性乙型肝炎患者150例和健康人30例被纳入研究,采用ELISA法检测血清IFN-γ,常规检测血清HBV DNA。结果本组健康人血清IFN-γ为6733.08±4008.51ng/L,而慢性乙型肝炎患者为1949.16±523.79ng/L(P<0.01);湿热中阻、肝肾阴虚、肝郁脾虚、瘀血阻络和脾肾阳虚患者血清IFN-γ分别为2723.22±119.73ng/L、2292.08±60.93ng/L、1788.40±143.22ng/L、1615.18±286.57ng/L和1326.93±46.92ng/L;93例血清HBV DNA阳性患者血清IFN-γ显著高于阴性患者(2172.64±446.42ng/L对1788.06±464.48ng/L,P<0.05)。结论不同中医证型慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ水平存在明显的差异。     

重型乙型肝炎患者血清干扰素诱导蛋白-10、干扰素γ的检测及临床意义

目的 探讨干扰素诱导蛋白-10(IP-10)、IFN-γ与重型乙型肝炎(SHB)患者肝脏炎性反应程度及病情发展的关系.方法 采集40例SHB患者入院时、单次血浆置换(PE)开始、PE结束及PE后5 d血清,根据SHB患者PE后5 d病情转归分为好转组及恶化组;采集20例慢性乙型肝炎(CHB)患者及20例健康对照组血清;双抗体夹心ELISA法检测血清IP-10、IFN-γ、TNF-α水平.结果 入院时,SHB及CHB组患者血清IP-10水平分别为(683.6±174.6)、(216.1±102.9)ng/L,均高于健康对照组的(107.6±55.8)ng/L(F=9.036,P<0.01),且sHB组高于cHB组(P<0.01);SHB及CHB组患者血清IFN-γ水平分别为(19.8±8.8)、(16.7±7.8)ng/L,均高于健康对照组的(2.6±1.2)ng/L(F=9.288,P<0.01);SHB患者IP-10、IFN-γ与TNF-α均呈正相关(r=0.366,r=0.365;P<0.05),与凝血酶原活动度呈负相关(r=-0.401,r=-0.350;P<0.05),与血清TBil相关性不明显(r=0.223,r=0.219;P＞0.05),IP-i0与IFN-γ呈正相关(r=0.602;P=0.000).PE后5 d,SHB两组患者血清IP-10均明显下降(t=8.947,P<0.01;t=4.121,P<0.05),恶化组高于好转组(t=7.862,P<0.01),IFN-γ下降均不明显(t=0.491,P＞0.05).结论 IP-10、IFN-γ参与SHB的肝脏免疫损伤;血清IP-10水平与肝脏炎性损害程度有关;IP-10能反映SHB患者病情发展及转归.     

胸腺肽α1对慢性乙型肝炎患者免疫系统的影响

目的:了解胸腺肽α 1(Tα1)对慢性乙型肝炎患者免疫系统的影响,评价Tα1对慢性乙型病毒性肝炎的疗效.方法:选择60例慢性乙型肝炎患者,其中T α 1组25例,给予Tα1(1.6mg,sc,2次/wk,3-6 mo)治疗,联合组35例,给予T α 1联合贺普丁(0.1 g,po,1次/d,3-6 mo)治疗,另选60例作为对照组,仅给予保肝治疗.应用双抗体酶联分析法检测治疗前后血清中IFN-γ和IL-4的浓度,以IFN-γ代表Th1,IL-4代表Th2,从而计算Th1/Th2比值;采用流式细胞仪观察外周血CD4+T,CD8+T细胞亚群.结果:联合组与对照组比,治疗后肝功能改善显著(P＜0.01);联合组乙型肝炎病毒标志物HBsAg或HBeAg阴转(9例)及HBV-DNA定量指标降低(14例),与对照组比,均具有统计学差异(P＜0.01;P＜0.05).但T α 1组分别与对照组、联合组比,无统计学差异(P＞0.05).T α 1组治疗后CD4+T细胞增高(由31.3±2.4增高到36.1±2.5)具有统计学意义(P＜0.01),CD8+T细胞稍高且CD4+/CD8+无明显变化,相差无统计学意义(P＞0.05);IFN-γ浓度(由71.3±21.0增高到83.7±21.4)及Th1/Th2比值升高(由0.79±0.2增高到0.98±0.3)均有统计学意义(P均＜0.05),但IL-4表达水平变化无统计学意义.结论:Tα1能提高机体的细胞免疫功能,有利于病毒清除和疾病的恢复.     

辅助性T淋巴细胞1、2、17在慢性乙型肝炎病毒感染状态中的变化

目的 了解慢性HBV感染中辅助性T淋巴细胞(Th)1、Th2、Thl7产生的主要细胞因子的表达,以反映这3种细胞的功能状态.方法 ELISA测定34例慢性乙型肝炎、31例肝硬化、26例原发性肝癌、22例慢性重型乙型肝炎患者及15例健康对照者m清中的1FN-γ、IL-4和IL-17水平,对数据进行t检验和Pearson相关分析.结果 IFN-γ/IL-4在慢性乙型肝炎患者(1.08±0.66)比健康对照者(2.60±0.60)降低(P＜0.01),在慢性重型乙型肝炎患者(4.81±0.87)比健康对照者升高(P＜0.01);IFN-γ/IL-17在慢性乙型肝炎(1.13±0.85,P＜0.01)、肝硬化(1.69±0.92,P=0.010)、肝癌(1.76±0.84,P=0.011)患者比健康对照者(2.66±0.70)降低,在慢性重型乙型肝炎患者(3.68±0.42)比健康对照者升高(P=0.004);IL-4/IL-17在肝硬化(0.72±0.38,P=0.026)、肝癌(0.63±0.19,P＜0.01)患者比健康对照者(1.04±0.23)降低.结论 慢性乙型肝炎患者IL-4的表达占优势;肝硬化、肝癌患者IL-17的表达占优势;慢性重型乙型肝炎患者IFN-γ的表达占优势.     

血清白介素1和γ干扰素的检测对肺结核的诊断价值

目的探讨血清白介素1(IL-1)和γ干扰素(IFN-γ)的检测在肺结核诊断中的意义。方法采用酶联免疫法(ELISA)检测42例肺结核患者和27例健康人血清中IL-1和IFN-γ的水平。结果与健康人组相比较,肺结核组血清中IL-1[(78.21±27.13)pg/mL vs(8.80±6.94)pg/mL]和IFN-γ[(56.85±20.62)pg/mL vs(29.11±31.52)pg/mL]的水平均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论血清IL-1和IFN-γ的测定有助于肺结核患者的诊断。     

25羟维生素D水平与不同病因肝硬化的相关性

目的探讨血清中25(OH)D水平与肝硬化的相关性。方法收集慢性乙型肝炎30例和不同病因肝硬化患者61例,包括乙型肝炎肝硬化28例、酒精性肝硬化5例、混合性(丙型肝炎、酒精性肝炎)肝硬化11例、隐匿性肝硬化17例,其中代偿期28例,失代偿期33例。所有患者进行血清生化学检测,分成慢性乙型肝炎组、肝硬代偿组、肝硬化失代偿组,比较3组的生化指标。比较不同病因肝硬化中的25(OH)D水平。分析不同病因肝硬化25(OH)D水平与多变量间的相关性,采用logistic回归分析评价不同病因肝硬化25(OH)D缺乏的影响因素。结果慢性乙型肝炎组、肝硬化代偿期组、肝硬化失代偿期组三组的年龄、TBIL、ALT、ALB、血肌酐、血钾、血钠、血钙、25(OH)D组间比较差异有统计学意义(P0.05),慢性乙型肝炎组的25(OH)D水平高于肝硬化代偿期组、肝硬化失代偿期组分别为25.22(22.54,27.36)ng/mL、18.05(10.35,23.93)ng/mL、15.46(11.83,23.60)ng/mL,(P0.01)。在61例不同原因肝硬化中56例(91.8%)25(OH)D水平缺乏/不足,乙型肝炎肝硬化组为(16.74±6.96)ng/mL、酒精性肝硬化组为(19.49±10.93)ng/mL、混合性肝硬化组为(16.62±9.29)ng/mL、隐匿性肝硬化组为(17.89±8.86)ng/mL,不同病因肝硬化之间维生素D水平差异无统计学意义(P0.05)。Pearson/Spearman相关分析结果显示25(OH)D与Alb(r=0.46,P0.01)、血钾(r=0.34,P=0.01)呈正相关,与INR负相关(r=-0.30,P=0.022)。多因素logistic回归分析结果表明,Alb是不同病因肝硬化患者发生25(OH)D缺乏的危险因素(P0.05)。结论维生素D缺乏/不足在肝硬化患者中非常普遍,并随肝脏疾病程度的进展而加重,与肝硬化病因无关。Alb是肝硬化患者发生25(OH)D缺乏的危险因素。     

拉米夫定治疗对慢性乙型肝炎患者干扰素-γ和白细胞介素-4的影响

目的 观察拉米夫定治疗慢性乙型肝炎患者血清IFN-γ和IL-4水平的动态变化.方法 ELISA法分别检测66例慢性乙型肝炎患者在拉米夫定治疗前,治疗后第3、6、9、12个月时的血清IFN-γ和IL-4水平.选取20名健康献血员作为健康对照.治疗前后比较用t检验,计数资料采用非参数秩和检验.结果 HBeAg阳性患者拉米夫定治疗前.完全应答组IFN-γ水平为(21.03±4.44)ng/L,明显高于部分应答组的(13.85±3.92)ng/L及无应答组的(10.63±3.11)ng/L(t=7.56,t=11.87,均P<0.01);以IFN-γ为15.66 ng/L为界,治疗前IFN-γ高水平患者完全应答率明显高于低水平患者(31.0%比8.7%,x2=8.391,P<0.01),无应答率明显低于低水平患者(13.8%比52.2%,x2=4.256,P<0.01).治疗后完全应答组患者IFN-γ/IL-4接近或高于对照组,部分应答组和无应答组低于对照组;HBeAg阴性患者拉米夫定治疗后IFN-γ/IL-4缓慢上升,但未达对照组水平.结论 拉米夫定治疗慢性乙型肝炎可增加IFN-γ释放,抑制IL-4释放,治疗应答程度与治疗后辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2平衡的恢复及治疗前IFN-γ水平有关.     

晚期血吸虫病患者外周血NK细胞Tim-3分子的表达及其与肝纤维化指标的关系

目的探讨T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(T cell immunoglobulin and mucin domain protein 3,Tim-3)在晚期血吸虫病患者外周血CD56+自然杀伤细胞(NK细胞)表面的表达及其与肝纤维化指标的关系。方法采用流式细胞术检测28例临床晚期血吸虫病患者和30例健康者CD56+NK细胞表面Tim-3的表达,应用全自动化学发光免疫分析仪检测肝纤维化血清学三型前胶原N端肽(PIIIP N-P)、层黏连蛋白(LN)、IV型胶原(CIV)和透明质酸(HA)等4项指标,ELISA检测血清中γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平,Fibroscan仪检测肝硬度值(LSM)反映肝纤维化程度。统计分析Tim-3表达水平与IL-4和IFN-γ水平、肝脏纤维化程度以及肝纤维化血清指标的相关性。结果流式细胞分析结果显示,晚期血吸虫病患者外周血CD56+NK细胞表面Tim-3表达水平为(62.3±11.4)%,高于健康对照组的(52.1±6.5)%(P0.01)。晚期血吸虫病患者和健康对照组的PIIIP N-P水平分别为(86.5±29.5)ng/ml和(22.0±7.8)ng/ml,LN分别为(49.3±21.5)ng/ml和(20.4±6.3)ng/ml,CIV分别为(67.5±22.3)ng/ml和(22.0±3.9)ng/ml,HA分别为(645.9±483.1)ng/ml和(54.7±27.7)ng/ml,两组各指标差异均具有统计学意义(P0.05)。晚期血吸虫病患者和健康对照组IFN-γ水平分别为(93.9±20.1)ng/L和(107.7±24.6)ng/L,IL-4分别为(46.6±11.8)ng/L和(28.9±8.9)ng/L,两组差异均具有统计学意义(P0.05)。Spearman非参数相关分析结果显示患者CD56+NK细胞表达的Tim-3水平与患者肝纤维化指标LSM、PIIIP N-P、LN、CIV和IL-4水平呈正相关(r=0.528~0.834,P0.01),与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.501,P0.01),而与HA水平无明显相关性(r=0.352,P0.05)。结论晚期血吸虫病患者外周血CD56+NK细胞Tim-3表达呈上调,并与患者肝纤维化指标LSM、PIIIP N-P、LN、CIV和IL-4水平呈正相关。