不同修复方法对乳腺癌免疫组化染色结果的影响

目的:探讨检测乳腺癌ER、PR、ki-67、E-Cad的最佳抗原修复方法.方法:微波抗原修复和高温高压加热抗原修复在相同pH值的缓冲液中对60例乳腺癌组织切片进行抗原修复,检测ER、PR、ki-67、E-Cad,显微镜观察结果.结果:高温高压抗原修复法在乳腺癌组织ER、PR、ki-67、E-Cad检测中阳性定位准确,着色强度增强,极大降低免疫组化背景着色.与微波抗原修复法比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:用高温高压对乳腺癌ER、PR、ki-67、E-Cad进行抗原热修复免疫组化染色效果最佳.     

环氧化酶-2在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的研究环氧化酶-2（COX-2）在乳腺癌组织中的表达及其与微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）之间的关系,初步探讨COX-2对乳腺癌发生发展的作用及临床意义。方法选择146例乳腺癌标本,应用免疫组织化学染色方法（SP法）检测标本中COX-2、VEGF的表达和CD34标记的MVD值。结果 146例中,COX-2表达阳性114例（78.1%）,高表达70例（47.9%）。COX-2表达程度与患者年龄、肿瘤直径及HER-2/neu表达程度无关（P〉0.05）,与腋淋巴结转移状况和肿瘤分期有关（P〈0.01）,与VEGF表达程度及MVD值明显相关。COX-2高表达组的MVD值高于低表达组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 COX-2的高表达在乳腺癌的发生发展中起重要的作用,其能促进乳腺癌新生血管的形成,进而影响乳腺癌的发展和转归。     

高温高压抗原修复法提高乳腺癌免疫组化准确率的应用研究

目的探讨免疫组化反应中的高温高压抗原修复法预处理方法对反应结果的影响。方法对60份经10％中性甲醛液固定过的乳腺癌组织,经脱水、石蜡包埋制成切片,分别采用高温高压抗原修复法和微波炉抗原修复法做预处理后,进行免疫组化染色。结果石蜡组织切片免疫组化反应预处理,采用高温高压抗原修复法,其阳性率为55．8％,采用微波炉抗原修复法,其阳性率为45．4％。免疫组化反应中采用高压高温抗原修复法作预处理,石蜡组织切片阳性表达率较微波炉抗原修复法明显提高（P〈0．05）。结论预处理采用高温高压抗原修复法,提高了免疫组化阳性率的表达,显色对比鲜明,背景干净清晰,从而提高病理诊断的准确率。     

论述免疫组织化学染色中抗原修复方式及对比分析

目的:探讨分子生物化学实验室内免疫组织化学染色中抗原修复的最佳方式。方法:采用高温高压修复法和微波修复法对病理科采用的四项免疫组织化学标记(ER、PR、C-erb B-2及E-Cadherin)进行染色对比以获取最佳抗原修复方法,在显微镜下评判其统计阳性率及阳性程度对两种方法进行比较。结果:ER、PR、C-erb B-2及ECadherin四项标记在高温高压抗原修复法与微波抗原修复法均具有较高的阳性率,在阳性程度、显色强度及背景清晰度方面高温高压抗原修复法要优于微波抗原修复法。结论:高温高压抗原修复法与微波抗原修复法均是简便实用的方法,两者相比高温高压抗原修复法具有更强适用性。     

光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色的影响

目的:探讨光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响.方法:用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波-微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用标记的链霉菌素卵白素-生物素(LSAB)免疫组织化学(免疫组化)染色技术检测不同脱钙条件下心钠素(ANP)、5-羟色胺(5-HT)、S-100、神经微丝蛋白(NF)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理.结果:8%硝酸室温脱钙时间最长,光波-微波组合脱钙时间最短;微波组、光波组、光波-微波组合Ⅰ组、Ⅱ组的免疫组化染色均明显比对照组好(P＜0.01);光波-微波组合Ⅰ组、Ⅱ组均明显好于单纯微波组(P＜0.01)或单纯光波组(P＜0.01);光波-微波组合Ⅰ组与Ⅱ组,单纯光波组与单纯微波组之间的免疫组化染色无显著差异(P＞0.05).结论:光波-微波-硝酸脱钙所用时间比室温常规脱钙、单纯光波、微波脱钙时间明显缩短,免疫组化染色效果最好.     

环氧化酶-2基因及蛋白在乳腺癌中的表达及意义

目的：探讨环氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）基因及蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义。方法：采用原位杂交和S-P免疫组织化学技术检测20例乳腺纤维腺瘤和52例乳腺癌中COX-2mRNA和蛋白的表达。结果：COX-2mRNA和蛋白在乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织中的阳性率分别为（20.0%、65.4%）、（15.0%、57.7%），差异有显著性（P〈0.01）；COX-2mRNA和蛋白表达之间差异无显著性（P〉0.05）。COX-2mRNA表达与淋巴结转移和肿瘤大小有关（P〈0.05），与年龄和组织学分级无关（P〉0.05）；COX-2蛋白表达与淋巴结转移有关（P〈0.05），与年龄、肿瘤大小和组织学分级无关（P〉0.05）。结论：（1）COX-2mRNA及蛋白在乳腺癌中表达上调，提示COX-2在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。（2）COX-2与淋巴结转移正相关，提示COX-2可作为判断乳腺癌预后的标记物。     

光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色的影响

目的:探讨光波微波硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波微波组合Ⅰ和光波微波组合Ⅱ条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用标记的链霉菌素卵白素生物素(LSAB)免疫组织化学(免疫组化)染色技术检测不同脱钙条件下心钠素(ANP)、5羟色胺(5HT)、S100、神经微丝蛋白(NF)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸室温脱钙时间最长,光波微波组合脱钙时间最短;微波组、光波组、光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组的免疫组化染色均明显比对照组好(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组均明显好于单纯微波组(P<0.01)或单纯光波组(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组与Ⅱ组,单纯光波组与单纯微波组之间的免疫组化染色无显著差异(P>0.05)。结论:光波微波硝酸脱钙所用时间比室温常规脱钙、单纯光波、微波脱钙时间明显缩短,免疫组化染色效果最好。     

COX-2与VEGF在乳腺癌中的表达及相关性研究

目的通过研究环氧化酶-2（COX-2）和血管内皮因子VEGF在乳腺癌组织中的表达与乳腺癌生物学特性间的相互关系,进一步探讨COX-2和VEGF在乳腺癌发生发展中的作用及临床意义。方法采用免疫组化方法检测50例乳腺癌和30例良性肿瘤组织中COX-2、VEGF的表达情况,并分析乳腺癌生物学行为并判断其与预后的关系。结果乳腺癌组COX-2和VEGF阳性率分别为66%和65%,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;COX-2表达与VEGF显著相关P〈0.05。二者均与乳腺癌预后有关。结论COX-2和VEGF在乳腺癌组织中的表达较高者是影响乳腺癌患者预后的主要因素之一。因此,联合检测COX-2和VEGF对乳腺癌患者判断预后、指导临床有重大意义。     

膝骨性关节炎病证特征及与COX-2的相关性研究

目的：研究膝骨关节炎不同病情分级、不同中医证型中COX-2表达差异，及不同证型、分级患者血清COX-2疗效差异性。方法选择我院2012年12月-2014年1月收入的膝关节退行性骨关节炎患者90例，分为肝肾亏虚型、气滞血瘀型、风寒湿痹型，各30例。收集3组对象血清，采用酶联免疫夹心法（ELISA法）对患者的COX-2进行检测。结果肝肾亏虚型患者的COX-2含量明显低于气滞血瘀型（t=9.8301，P=0.0000），也明显低于风寒湿痹型患者（t=6.3159，P=0.0000），气滞血瘀型患者的COX-2含量明显高于风寒湿痹型患者（t=3.2669，P=0.0018）。不同中医证型患者的COX-2含量有显著性差异（P〈0.01）。Ⅰ级X线等级患者的COX-2含量明显低于Ⅱ级X线等级患者的COX-2含量（t=4.7011，P=0.0000）；Ⅱ级X线等级患者的COX-2含量明显低于Ⅲ级X线等级患者的COX-2含量（t=3.0037，P=0.0044）；Ⅲ级X线等级患者的COX-2含量明显低于Ⅳ级X线等级患者的COX-2含量（t=4.6004，P=0.0000）。结论不同中医证型和不同X线片等级的COX-2表达存在差异性，气滞血瘀型和X线显示等级高的膝关节骨性关节炎患者COX-2表达增高。     

E-cad、LN、ColⅣ和PCNA与乳腺癌浸润转移的关系

目的探讨细胞黏附分子钙黏蛋白（E-cad）、层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原蛋白（ColⅣ）和增殖细胞核抗原（PCNA）表达与乳腺癌的关系。方法采用免疫组织化学技术对80例乳腺癌E-cad、LN、ColⅣ和PCNA的表达进行检测。结果 E-cad低表达率与乳腺癌组织类型、分化程度、临床分期、转移及生存期短显著相关（P〈0.01）;基底膜缺损程度在分化低、临床Ⅲ～Ⅳ期、有转移及生存期〈5年的乳腺癌组,显著高于分化高、临床Ⅰ～Ⅱ期、无转移及生存期≥5年组（P〈0.01）,而PCNA的表达在前组中显著增高（P〈0.01）。结论 E-cad、LN、ColⅣ和PCNA的表达可作为临床判断乳腺癌浸润转移及预后的重要指标。     

COX-2与Fax、Ki-67在宫颈癌中表达的临床意义

目的：探讨环氧化酶-2（COX-2）、Fax、Ki-67在宫颈癌中的表达及其临床病理意义。方法采用免疫组织化学染色的方法,检测宫颈癌（cervical cancer, CC）40例,宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasm, CIN）10例及正常宫颈组织（normal cervical epithelium, NCE）9例中COX-2、Fax、Ki-67的抗体表达的情况。结果 COX-2在宫颈癌中的表达率为70%-90%,而在正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤变中表达率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。Fax在宫颈癌中的阳性表达率明显低于正常宫颈组织和CIN组织（P〈0.05）;Ki-67在宫颈癌、CIN与正常宫颈组织中表达差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 COX-2、Fax、Ki-67在宫颈癌的发生、发展及淋巴结转移中有着重要作用,可以作为判断宫颈癌恶性程度及淋巴结转移的生物学指标。     

特异性环氧化酶2与肾细胞癌血管增生的相关性研究

目的 探讨特异性环氧化酶2(COX-2)在肾细胞癌的表达及其与肾细胞癌血管增生的关系.方法 免疫组化检测肾细胞癌组织标本(85例)以及癌旁正常组织标本(48例)COX-2、血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达,CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞进行微血管密度(MVD)计数.结果 COX-2、VEGF和bFGF在癌旁正常组织中阳性表达率分别为16.7％,20.8％和22.9％,在肾细胞癌组织阳性表达率分别为77.6％、80.0％和74.1％,两组差异均有统计学意义(均P＜0.01).肾癌组织MVD为(55.47±18.47),高于癌旁正常组织的(20.42±8.72)(P＜0.01).COX-2、VEGF、bFGF表达阳性的肾细胞癌其MVD均大于表达阴性的肾细胞癌MVD(P＜0.05或P＜0.01).肾细胞癌组织COX-2表达与VEGF、bFGF表达呈显著正相关(P＜0.01).结论 COX-2在肾细胞癌组织中表达升高,与肾细胞癌血管增生密切相关.     

赛来昔布和帕瑞昔布钠用于围术期镇痛的效果观察

目的观察赛来昔布和帕瑞昔布钠用于围术期镇痛的效果。方法将髋关节置换、膝关节置换和脊柱手术患者72例随机分为2组,试验组42例采用赛来昔布和帕瑞昔布钠进行围术期镇痛,在术前2h给予赛来昔布400mg、术后即刻给予帕瑞昔布钠40mg肌内注射、以后每12小时1次,共6次,进行围术期镇痛;对照组30例使用静脉镇痛泵镇痛,药液为芬太尼混合液。2组均在术后24、48、72h用VAS评分评价疼痛程度,在术前、术后即刻和48h测定血清中COX-2和人前列腺素E（PGE2）。结果 2组的VAS评分在术后24h和48h具有统计学差异（P〈0.05）。术前2组血清COX-2和PGE2差异无统计学意义（P〉0.05）;试验组术后即刻血清COX-2和PGE2均下降,但与术前对比无统计学意义（P〉0.05）;术后48h血清COX-2和PGE2均下降,且与术后即刻对比较差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;对照组术后即刻血清COX-2和PGE2均升高,而且PGE2浓度术后即刻与术前对比差异有统计学意义（P〈0.05）;术后48h血清COX-2和PGE2均较术后即刻下降,但术后48h与术后即刻血清COX-2比较差异无统计学意义（P〉0.05）;而血清PGE2浓度差异有统计学意义（P〈0.01）;术后即刻2组血清PGE2浓度差异有统计学意义（P〈0.05）,术后48hCOX-2和PGE2差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论围术期使用赛来昔布和帕瑞昔布钠具有较强的镇痛作用。     

胃癌和胃癌前病变COX-2表达与Hp感染的相关性研究

目的：探讨诱生型环氧合酶（COX-2）在胃癌和胃癌前病变中的表达及其与幽门螺杆菌（Hp）的相关性。方法选取本院2010年3月～2013年3月收治的30例胃癌患者（A组）、60例萎缩性胃炎患者（B组）、30例浅表性胃炎患者（C组）,使用免疫组织化学法对3组患者的胃黏膜COX-2水平进行检测。结果 B组肠上皮化生（IM）患者的Hp阳性检出率最高,异型增生（Dys）与A组的Hp阳性检出率、COX-2阳性检出率次之。 A、B组的Hp阳性检出率均显著高于C组患者,差异均有统计学意义（P〈0.05）;在GCa、Dys、IM中均可检测到COX-2蛋白表达,3组差异均无统计学意义（P〉0.05）;COX-2阳性在Hp阳性胃黏膜病变中的检出率显著高于Hp阴性胃黏膜病变（P〈0.05）。结论 Hp感染可促进胃癌细胞的COX-2表达,COX-2表达过度、Hp感染都是胃癌发生的重要因素。     

颞肌下和颞肌外两种颅骨修补术式的临床疗效对比

目的探讨采用颞肌下与颞肌外两种钛网修补术式行颅骨缺损修补的临床疗效。方法选择2009年2月—2013年2月该院收治的颅骨缺损患者共30例,按不同手术方法分为颞肌外修补组15例和颞肌下修补组15例,比较两组患者临床疗效。结果颞肌外修补组手术时间（1.5±0.5）h,术中出血量（80.3±30.4）mL及脑膜破损率13.3%均较颞肌下修补组明显减少,差异有统计学意义,P〈0.05。颞肌下修补组并发症、外观满意度、2周后局部疼痛及嘴嚼受限情况均较颞肌外修补组增多,差异有均统计学意义,P〈0.05。结论数字化成型二维钛网颞肌外修补颅骨缺损具有操作简便,手术时间短,术中出血少,并发症少等优点。其效果明显优于颞肌下修补术,值得临床推广应用。     

COX-2、PTEN在皮肤基底细胞癌中的表达与临床意义

目的探讨皮肤基底细胞癌（basal cell carcinoma,BCC）组织中COX-2和PTEN的表达情况及临床意义。方法采用免疫组SP法检测58例基底细胞癌组织和20例正常对照组织中COX-2和PTEN的表达情况。结果 C0X-2蛋白在正常皮肤中阳性表达率为15%,在BCC中呈高表达,阳性表达率为60.3%,其差异有统计学意义（P〈0.01）;PTEN蛋白在正常皮肤组织中阳性表达率为90.0%,而在BCC中表达明显减弱,阳性表达率仅为17.2%,其差异也具有统计学意义（P〈0.01）;且COX-2的表达与PTEN的表达呈显著负相关（r=-0.376）。结论 PTEN蛋白在BCC中的低表达,COX-2蛋白在BCC中的高表达,且两者的表达呈负相关,提示二者可能共同参与细胞基底细胞癌的发病过程。     

环氧合酶-2与亚临床动脉粥样硬化关系的临床研究

目的：探讨亚临床动脉粥样硬化（AS）患者血清或血浆中环氧合酶Ⅱ（COX-2）的水平;COX-2水平与亚临床AS影响因素的关系;COX-2抑制剂对预防AS有潜在的临床应用价值。方法：应用酶联免疫法（ELISA）检测亚临床AS患者100例和40名健康人为正常对照组的血浆COX-2水平,并结合临床资料进行分析。结果：亚临床AS组COX-2水平[（10.84±3.11）U/L]明显高于正常对照组[（6.97±1.25）U/L],两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：COX-2水平与亚临床AS水平有明显相关性,测定血浆COX-2活性可作为亚临床AS的诊断、预后判断的参考指标;临床进行早期干预,拮抗COX-2的治疗可能有助于降低心血管意外发作风险。     

脑缺血再灌注损伤中 FK506结合蛋白51对半胱氨酸蛋白酶－3及大鼠海马 CA1区神经元坏死的影响

目的：探讨脑缺血再灌注损伤中FK506结合蛋白51（FKBP51）对半胱氨酸蛋白酶－3（Caspase－3）及大鼠海马CA1区神经元坏死的影响。方法将清洁级SD大鼠随机分成假手术组（ Sham组）、缺血再灌注组（ I／R组）、溶剂对照组（ TE组）、FKBP51反义寡核苷酸组（ FKBP51 ASODN组）和FKBP51错义寡核苷酸组（ FKBP51 MSODN组），采用四血管阻塞模型大鼠全脑缺血模型造模。应用免疫印迹法测定FKBP51蛋白表达、FKBP51 ASODN对FKBP51蛋白水平的表达和Caspase－3活性的影响；采用苏木精－伊红溶液染色法测定FKBP51 ASODN对大鼠海马CA1区神经元坏死的影响。结果（1）在Sham组和I／R组（缺血再灌注0 min、15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、1 d、3 d）中，FKBP51蛋白均有表达，并且表达量间的差异无统计学意义（F＝0．64，P＞0．05）。（2）FKBP51 ASODN组的FKBP51蛋白表达量明显减少，与Sham组差异有统计学意义（t＝8．21，P＜0．05）。（3）Sham组活化Caspase－3的表达量明显低于其他各组，差异有统计学意义（F＝12．31，P＜0．05）；与FKBP51 MSODN组比较，FKBP51 ASODN组的表达量相对较低，差异有统计学意义（ t＝9．71，P＜0．05）。（4）Sham组海马CA1区锥体细胞数量多[（186．3±2．5）个]并且排列密集，核大且圆，核仁明显；I／R 5 d组[（15．4±2．6）个]、TE组[（18．5±2．2）个]和FKBP51 MSODN组[（17．5±1．8）个]海马CA1区锥体细胞几乎完全消失，仅残留少数细胞，大量变性锥体细胞核固缩深染，胞浆嗜伊红，胞膜破裂，胞内容物释放， Sham组与其余各组之间的差异有统计学意义（χ^2＝81．91，P＜0．05）；FKBP51 ASODN组[（92．8±2．6）个]海马CA1区锥体细胞存活数增加，与其余各组的差异有统计学意义（χ^2＝52．36，P＜0．05）。结论在脑缺血再灌注损伤中，FKBP51可以增强活化的Caspase－3的表达并抑制神经元的存?     

神经发育支持模式联合神经节苷脂、高压氧在早产儿脑损伤修复中的作用

目的研究神经发育支持模式联合神经节苷脂、高压氧在早产儿脑损伤修复中的作用。方法抽取2012年1月-2013年6月来本院治疗早产儿脑损伤的患儿100例,按随机数字表法将其分为对照组和观察组,每组各50例,对照组患者给予神经发育支持模式治疗,观察组患者在神经发育支持模式的基础上联合神经节苷脂、高压氧治疗;观察比较两组患者的临床疗效、神经行为评分和后遗症发病率。结果观察组患者的总有效率（92%）显著高于对照组（84%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组患者的后遗症发病率（10%）显著低于对照组（32%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。观察组患者2次的神经行为评分均显著优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论神经发育支持模式联合神经节苷脂、高压氧在早产儿脑损伤修复中的效果显著,且能促进神经系统功能恢复,有益于脑修复,值得临床应用。