T-钙黏蛋白在冠心病中的作用研究进展

T-钙黏蛋白(T-cad)是一种新发现的脂联素受体,可以与脂联素六聚体和高分子质量多聚体结合。T-cad在体内许多组织中广泛表达,尤其是心血管系统。T-cad与冠心病密切相关,具有抑制细胞凋亡、阻止动脉粥样硬化、限制血管内膜增生、诱导血管内皮细胞增殖、促进生长因子分泌、促进肌肉再生的作用。因此,探讨T-cad在冠心病中的作用机制,或许能为冠心病的诊疗提供新的思路。     

T-钙黏蛋白基因在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 研究T-钙黏蛋白(CDH13)基因在非小细胞肺癌组织中的表达水平及其意义.方法 采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测该基因在肺癌组织中的表达水平.结果 在35例非小细胞肺癌患者癌组织中CDH13的表达较正常肺组织明显减低(P＜0.05);CDH13在非肺癌患者切除肺组织中的表达与正常组织无明显异常(P＞0.05).结论 在非小细胞肺癌中基因CDH13呈明显低表达,提高CDH13水平将有望成为提高非小细胞肺癌愈后的新治疗方向.     

脂联素及T-钙黏蛋白与大鼠糖尿病心肌病的关系

观察糖尿病（DM）大鼠心肌细胞形态学变化,测定血清脂联素（APN）及受体T-钙黏蛋白（T-cad）在心肌的表达水平。DM大鼠心肌细胞超微结构出现符合糖尿病心肌病改变,血清APN及T-cad的表达随着病变发展而升高。血清APN及T-cad的表达均随时间延长增多,从而发挥其保护作用。     

脂联素受体 T-钙黏蛋白在香烟烟雾暴露所致大鼠肺气肿中的作用

目的：通过观察香烟烟雾暴露大鼠血清脂联素（adiponectin , APN ）、支气管上皮和肺血管内皮细胞A PN受体T‐钙黏蛋白（T‐cadherin , T‐cad ）的表达水平,以及二者与肺气肿严重程度的相关性,探讨T‐cad在香烟烟雾暴露所致大鼠肺气肿中的作用。方法选取6周龄健康雄性SD大鼠,体质量约为（190±10） g ,共16只,按有无香烟烟雾暴露随机分为香烟烟雾暴露组和对照组,每组8只,饲养6个月。显微镜下计算肺组织平均肺泡数（mean alveoli number , M AN ）及平均内衬间隔（mean linear intercept , MLI）, ELISA法测定血清总APN水平,免疫组织化学分析法对支气管上皮和肺血管内皮细胞 T‐cad进行半定量分析。结果①香烟烟雾暴露组MAN [（163.72±31.04）个／mm2]较对照组[（203.66±8.51）个／mm2]降低,MLI [（76.33±10.98）μm]较对照组[（65.57±5.72）μm]升高,差异有统计学意义（ t值分别为－3.51,2.46,P值均＜0.05）;MAN与MLI呈负相关（ r ＝－0.791,P＜0.01）。②香烟烟雾暴露组APN [（8.14±1.17） mg／L]较对照组[（6.57±1.15） mg／L]升高,差异有统计学意义（ t ＝2.71,P ＜0.05）;APN与MAN呈负相关,与MLI呈正相关（ r分别＝－0.673和0.751,P值均＜0.05）。③香烟烟雾暴露组肺血管内皮细胞 T‐cad [（30.79±1.22）×10‐4]较对照组[（47.32±3.42）×10‐4]降低,差异有统计学意义（t ＝－12.85,P ＜0.05）;T‐cad与M A N呈正相关,与M L I呈负相关（ r ＝0.674,－0.615, P值均＜0.05）。④香烟烟雾暴露组支气管上皮细胞T‐cad [（308.01±16.82）×10‐4]与对照组[（293.14±19.60）×10‐4]比较差异无统计学意义, T‐cad与MAN、MLI均无相关性。⑤血清APN与肺血管内皮细胞 T‐cad表达水平呈负相关（ r ＝－0.677, P ＜0.05）,与支气管上皮细胞T‐cad无相关性。结论香烟烟雾暴露可以降低肺血管内皮细胞T‐cad的表达,使其对血管内皮的保护作用减弱,同时升高血清A PN水平,进一步促进肺气肿的形成。     

EGCG对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）治疗鼻咽癌的作用机制。方法体外培养鼻咽癌CNE-2细胞并以不同质量浓度EGCG处理,采用MTr法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR检测细胞中锰超氧化物歧化酶（MnSOD）表达变化。结果EGCG处理后,CNE-2细胞增殖明显受到抑制,且呈时间和剂量依赖性;CNE-2细胞凋亡率显著升高,且呈量效关系;MnSOD表达明显上调。且随EGCG作用时间延长有升高趋势。结论EGCG能抑制CNE-2细胞增殖、促进其凋亡,可能机制为上调MnSOD表达;此为EGCG在鼻咽癌防治中的应用提供了理论依据。     

稳恒磁场照射对人鼻咽癌CNE-2细胞生长与凋亡的影响

目的研究稳恒磁场对体外培养的人鼻咽癌细胞（CNE-2）生长抑制与凋亡作用的影响。方法利用磁感应强度为7 mT的自制稳恒磁场对体外培养的CNE-2细胞进行照射,经1、3、9、12、24、36、48、60、72 h不同时间照射处理后,采用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,MTT法检测细胞生长活性,HE染色观察细胞形态学改变,琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡情况。结果从照射9 h起细胞生长受到显著抑制（P〈0.05）,生长曲线结果与MTT实验具有良好的一致性。经72 h照射处理后,MTT法、HE染色观察细胞出现形态学改变,但琼脂糖凝胶电泳检测未见细胞DNA断裂现象。结论 7 mT稳恒磁场照射对体外培养的CNE-2细胞生长有显著的抑制作用,而对诱导细胞凋亡的效果有待进一步研究。     

神经钙黏蛋白调控Akt/PKB信号通路对神经干细胞增殖的影响

目的探讨神经钙黏蛋白(N-cadherin)调控蛋白激酶(Akt/PKB)信号通路对神经干细胞(NSCs)生长的影响。方法利用RNAi技术将N-cadherin基因的RNA干扰载体p MSCVneo/N-cadherin质粒及p EGFP-MSCVneo对照质粒分别转染至原代培养NSCs,分别作为干扰组和对照组,以原代培养NSCs作为正常组。Western印迹方法检测各组细胞N-cadherin、蛋白激酶(PKB)、蛋白激酶磷酸化(P-PKB)、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1)的蛋白表达水平。以MTT法检测NSCs的增殖情况。结果与正常组和对照组相比,干扰组N-cadherin、PKB、P-PKB及PDK1的表达水平显著降低(P0.05),其NSCs克隆形成率显著减少(P0.05),NSCs增殖速度也显著减慢(P0.05)。结论沉默N-cadherin表达可能阻断Akt/PKB信号通路,从而抑制NSCs的增殖。N-cadherin有望成为促进NSCs增殖的潜在靶点。     

siRNA干扰MDM2基因对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的将靶向MDM2的siRNA转染人肝癌HepG2细胞,观察转染后细胞内p21基因的表达变化及其对HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法将人工合成的针对MDM2基因的siRNA片段通过LipofectamineTM 2000转染人肝癌细胞HepG2。实验分为MDM2 siRNA转染组、阴性对照组、脂质体组、正常对照组。分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中MDM2、p21的mRNA和蛋白质的表达量,并用MTT法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化。结果与其他3组比较,siRNA转染组细胞中MDM2 mRNA及蛋白表达减少（P〈0.01）,而p21 mRNA及蛋白表达增高（P〈0.01）。HepG2转染MDM2 siRNA后,增殖能力减弱,凋亡显著。结论 MDM2基因可能通过影响p21控制肝癌细胞的生长。     

节律基因Per2对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨节律基因Per2对胶质瘤细胞的影响及其作用机制。方法将Per2表达质粒pcDNA3.1-Per2及空载对照质粒pcDNA3.1分别经阳离子脂质体介导转染CHG-5细胞,用G418筛选出Per2稳定表达细胞株;分别用MTT法、流式细胞仪、RT-PCR技术,检测CHG-5细胞增殖、细胞周期和凋亡,以及该细胞株中增殖、凋亡相关基因p53和c-myc表达。结果筛选到稳定表达Per2基因的细胞株CHG-5/Per2细胞,Per2有抑制肿瘤细胞增殖能力;与对照组（pcDNA 3.1-CHG-5）和未处理组（CHG-5）比较,转染组CHG-5/Per2细胞在G1期阻滞,细胞凋亡明显增加（P均〈0.05）;Per2可明显上调p53基因表达,抑制c-myc基因表达。结论节律基因Per2可促进胶质瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖,是胶质瘤中的肿瘤抑制因子。     

曲古抑菌素A对CNE2鼻咽癌细胞增殖及凋亡的影响

目的研究曲古抑菌素A（TSA）在体外对人鼻咽癌细胞的影响,为鼻咽癌的药物治疗提供依据。方法将鼻咽癌CNE2细胞经0.125%胰酶处理制成细胞悬液,培养24 h。试验设TSA1～TSA5组及对照组,TSA1～TSA5组分别加入TSA200、300、400、500、600 nmol/L,对照组加入等量生理盐水;6、12、24、36 h后MTT法计算细胞抑制率。将CNE2细胞接种于25 ml培养瓶中,分为TSA1～TSA3组及对照组,TSA1～TSA3组分别加入300、400、500nmol/L TSA处理24 h;对照组加入等量生理盐水;流式细胞仪检测分析细胞周期及细胞凋亡率。结果 TSA可明显抑制CNE2细胞生长,同时点细胞抑制率对照组〈TSA1组〈TSA2组〈TSA3组〈TSA4组〈TSA5组,并呈剂量时间效应关系,P均〈0.05。TSA干预后CNE2细胞G2/M期细胞明显增多,出现G2/M期阻滞,细胞凋亡率明显升高,且呈浓度依赖性。结论 TSA能明显抑制CNE2细胞增殖,诱导细胞凋亡,并具有G2/M期阻滞效应,是治疗鼻咽癌的潜在药物。     

金花茶醇提物对人低分化鼻咽癌CNE-2细胞增殖和周期的影响

目的探讨金花茶醇提物对人低分化鼻咽癌CNE-2细胞增殖、周期的影响及其机制。方法将人鼻咽癌CNE-2细胞分为两组,实验组加入终浓度为25、50、100、200、400μg／ml的金花茶醇提物,对照组不加药物,采用MTT法检测两组24、48、72h增殖抑制率,倒置相差显微镜及荧光显微镜观察48h后细胞形态的变化,流式细胞仪分析细胞周期变化及凋亡率。结果金花茶醇提物对CNE-2细胞的增殖有抑制作用,且呈时间和剂量效应;金花茶醇提物处理CNE-2细胞48h后,倒置相差显微镜及荧光显微镜示CNE-2细胞随着浓度的增加发生不同形态改变;流式细胞仪分析显示金花茶醇提物将CNE-2细胞阻滞于G1期。结论金花茶醇提物能够抑制CNE-2细胞的增殖,其作用机制可能是使CNE-2细胞阻滞于G1期从而抑制CNE-2细胞的生长。     

上皮型钙黏蛋白基因甲基化与消化系肿瘤

上皮型钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)基因位于染色体16q22.1,它编码的E-cad蛋白是一种钙依赖性黏附分子,分布于各类上皮细胞,在维持细胞的极性和完整性方面起重要作用.近年来大量研究表明,E-cad基因启动子区5'CpG岛的高甲基化可导致基因功能丧失,并与多种肿瘤尤其是消化系肿瘤的增殖、侵袭或转移密切相关.     

血管内皮钙黏蛋白参与动脉粥样硬化形成的机制

血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)作为内皮连接的主要黏附分子,对血管稳态的维持起着非常重要的作用.它调控着血管内皮对白细胞、脂质等血浆内容物的渗透以及细胞的增殖和凋亡,并通过参与血管发生在动脉粥样硬化进程的多个环节中发挥着重要作用.文章就近年来VE-cadherin血在动脉粥样硬化发生和发展过程中的作用及其机制的研究进展做了综述.     

芒果甙对鼻咽癌细胞系CNE2细胞增殖、凋亡及周期的影响

目的 探讨芒果甙治疗鼻咽癌的可行性.方法 以不同浓度的芒果甙作用于人鼻咽癌CNE2细胞,检测细胞抑制率、凋亡率及细胞周期.结果 芒果甙作用后CNE2细胞抑制率及凋亡率均明显增加,且呈浓度及时间依赖性,P均＜0.05;芒果甙作用72 h后,随药物浓度增加,CNE2细胞出现S期阻滞;浓度＞100 μmol/ L时出现G2/M期阻滞.结论 芒果甙能明显抑制CNE2细胞增殖,诱导细胞凋亡,并具有S期和G2/M期阻滞效应,具有潜在抗肿瘤作用.     

原钙黏蛋白的研究现状及意义

原钙黏蛋白(protocadherin,Pcdh)大约在十年前由Shintaro等在使用经典钙黏蛋白(cadherin,Cdh)细胞外(Extracellua,EC)结构域重复序列的简并引物PCR扩增鉴定Cdh家族新成员时,意外发现了编码Cdh EC域的PCR扩增产物片段,这些Cdh的EC结构域与经典Cdh的EC结构域明显不同,于是就将它们称为Pcdh.目前已经发现了100多种不同的Cdh.研究表明,Cdh是一种钙离子依赖性的细胞黏附分子,但现在的研究证实Cdh亦参与包括细胞识别、胚胎发育过程中的细胞信号转导以及神经回路的形成等.其具有严格的种属特异性,并且具有亲同种抗原的细胞粘附活性.Cdh的表达受严格的时间和空间的调控,表明在动物发育的过程中Cdh起着重要的作用.由于中枢神经系统(CNS)需要各种细胞间的相互作用来维持功能,那么就需要许多新的Cdh在CNS中进行表达.Pcdh是Cdh中的一个新的群体,是一种带有亲同种抗原结合活性的跨膜蛋白,主要在神经系统中表达,具有独特的功能,由于Pcdh特有的生物学功能而受到越来越多的关注,因此有关这方面的研究也在不断深入.     

血管生成素-1基因对人胃癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨人血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang1)对胃癌细胞MGC-803增殖与凋亡的影响,研究其生物学作用及其在肿瘤发生中的作用机制.方法:以人胚肾293细胞对重组质粒Ad-Ang1和Ad-GFP进行包装、扩增和纯化后转导MGC-803细胞,应用MTT比色法分析Ang1对该胃癌细胞增殖的影响,通过流式细胞仪分析血浆Ang1对胃癌细胞凋亡的影响,并通过免疫组织化学法检测Ang1及其受体Tie-2的表达情况.结果:成功包装、扩增及纯化了重组腺病毒Ad-Ang1及对照病毒Ad-GFP,其感染滴度分别为2.0×1012和1.15×1013 PFU/L.当感染复数(MOI)为20时转导率即接近100%,而细胞形态无明显改变.MTT结果显示,24,48和72 h时Ad-Ang1组吸光度均明显高于Ad-GFP组及对照组(Ad-GFP vs Ad-Ang1:24 h,t=16.32,P＜0.0001;48 h,t=10.47,P=0.0005:72 h,t=24.59,P＜0.0001.对照组vs Ad-Ang1:24 h,t=10.54,P=0.0005;48 h,t=13.92,P=0.0002;72 h,t=22.46,P＜0.0001),Ad-GFP组与对照组相比无差别;流式细胞仪检测显示,对照组、Ad-GFP组和Ad-Ang1组的凋亡率(%)分别为:9.90±0.62,10.07±1.27和4.17±0.35:免疫组化显示,3组细胞均有不同程度Ang-1及其受体Tie-2的表达,且其阳性表达率在Ang1基因转染组(Ang-1:99.2±0.8;Tie-2:85.4±1.8)显著高于对照组(Ang-1:51.0±2.7;Tie-2:30.8±1.5)和GFP组(Ang-1:51.4±1.5;Tie-2:32.4±2.3)(P＜0.0001).结论:Ang1能显著促进人胃癌细胞MGC-803体外增殖,抑制血浆饥饿时的凋亡.     

E-钙黏蛋白与胃癌关系的研究进展

E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)是跨膜糖蛋白家族的一员,正常表达于上皮细胞,介导Ca2-依赖的细胞-细胞黏附,对维持组织结构和形态形成十分重要.转移是恶性肿瘤最具破坏性的特征,也是肿瘤患者死亡的主要原因.因此,以肿瘤的扩散和转移为靶向的研究在肿瘤治疗中起重要作用.本文就近年来关于E-cad在胃癌方面的研究作一概述.     

靶向瘦素基因的siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响

目的 通过构建慢病毒介导的靶向瘦素基因的小干扰RNA(siRNA),探讨瘦素对A549细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立siRNA-a组、siRNA-b组及其各自阴性对照组和空白对照组(A549)5组细胞,分别于荧光显微镜下观察细胞5d和11d的生长情况.噻唑蓝(MTT)比色法测定空白对照组、siRNA-a组及其阴性对照组细胞1～6 d的生长情况,绘制生长曲线,比较各组细胞增殖差异.流式细胞仪分析各组细胞凋亡率,观察瘦素的siRNA对A549细胞凋亡的影响.RT-PCR和Western bloting方法检测各组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平.结果 siRNA-a细胞镜下形态基本正常,5d后荧光效率仍较高,感染稳定,但生长较阴性对照组及空白对照组细胞缓慢.siRNA-b细胞感染48 h后,镜下见细胞肿胀、变形,空泡出现,5d后见多量细胞碎片,凋亡小体形成,呈现凋亡状态,11d后可见细胞碎片,已近完全凋亡.MTT实验siRNA-a组细胞从第3天起生长比其他各组均缓慢(P＜0.01).流式细胞仪检测细胞凋亡率结果:siRNA-a组、siRNA-b组细胞凋亡率明显高于阴性对照组和空白对照组.RT-PCR和Western bloting结果 显示干扰组细胞瘦素mRNA和蛋白表达水平较阴性对照组和空白对照组明显下调.结论 慢病毒介导的siRNA能下调肺腺癌A549细胞瘦素基因的表达,从而抑制A549细胞增殖,促进其凋亡.由此可见,瘦素的siRNA有望成为肺腺癌基因治疗的新手段.     

吡柔比星对鼻咽癌CNE2细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨吡柔比星对鼻咽癌（NPC）CNE2细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养NPC细胞株CNE2,加入不同浓度的吡柔比星。用MTT法检测细胞增殖情况;用RT-PCR法检测NPC细胞株中X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）mRNA的表达情况。结果吡柔比星对NPC细胞的增殖有抑制作用,并诱导其发生凋亡,且呈明显的时效和量效关系,其作用随着浓度及时间的增加而增加;RT-PCR法检测显示XIAP mRNA表达下调。结论吡柔比星可抑制体外培养的NPC细胞株CNE2的增殖和诱导细胞凋亡,其作用与下调XIAP基因表达有关。     

三氧化二砷对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的试用三氧化二砷(As2O3)以提高胰腺癌的疗效。方法分别比较对照组和As2O3组裸鼠原位胰腺癌模型肿瘤体积、细胞增殖指数和细胞凋亡率。结果As2O3组肿瘤体积较对照组缩小31.2%。胰腺癌细胞增殖指数对照组为(21.05±2.18)%,As2O3组为(10.03±2.86)%(P<0.05);胰腺癌细胞凋亡率对照组(4.7±1.4)%,As2O3组(13.4±1.8)%(P<0.05)。结论As2O3体内能显著抑制胰腺癌的生长,其机制与抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡有关。