骨髓间充质干细胞对糖尿病肾病大鼠肾脏结缔组织生长因子的干预效果

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对糖尿病大鼠肾组织纤维结缔生长因子(CTGF)表达的影响。方法 SD大鼠高脂高糖喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立2型糖尿病模型,并按随机数字表法分为:糖尿病肾病对照组(DN)、干细胞移植组(MSC)、前列地尔组(AL)。非糖尿病大鼠作为正常对照组(NC)。MSCs经体外培养、鉴定、标记后,经尾静脉注射到MSC大鼠体内(6×106MSCs/ml),同时AL大鼠每日经尾静脉注射10μg·kg-1·d-1,连续注射21 d。于开始治疗后第7、14、21天测定大鼠血糖、24 h尿总蛋白、血肌酐、尿素氮,采用HE染色观察大鼠肾脏病理变化并应用免疫组化检测肾组织CTGF蛋白的表达。结果与NC组比较,造模鼠血糖、24 h尿蛋白、肌酐、尿素氮均显著升高(P<0.05);与DN组比较,MSC组及AL组血肌酐、尿素氮、尿蛋白均显著降低(P<0.05);与NC组比较,DN组肾组织CTGF表达显著升高(P<0.05);与DN组比较,MSC组及AL组肾组织CTGF表达显著降低(P<0.05),但仍高于NC组(P<0.05);与AL组比较,MSC组血肌酐、尿素氮、尿蛋白、肾组织CTGF的表达均显著降低(P<0.05)。结论 MSCs可以抑制CTGF蛋白的过度表达,进而减缓DN的病程进展。     

糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化逆转可能性的研究

目的 动态观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达,探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化逆转的可能性.方法 选择SD大鼠随机分为正常对照组、DM组和胰岛素治疗组,链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠DM.正常对照组和DM组按病程分为2、4、8、12、16、20和24 w组,胰岛素治疗组从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,分为16、20和24 w组.检测各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)和肾脏指数(RI);PAS染色光镜观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾皮质α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达;Western印迹检测肾皮质α-SMA和E-cadherin蛋白表达量;RT-PCR检测肾皮质α-SMA和FN mRNA水平.结果 DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、Scr、RI均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素治疗组上述指标均较DM组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).正常大鼠α-SMA只在血管壁表达,DM组2 w开始有少量间质细胞胞浆内有阳性染色,随病程进展间质细胞阳性染色增多;8 w时肾小球系膜细胞胞浆内见阳性表达;从16 w开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组未见表达;DM组肾皮质α-SMA和FN蛋白与mRNA表达水平较正常对照组显著增多(P＜0.01),胰岛素治疗组则显著低于DM组(P＜0.01);DM组E-cadherin蛋白的表达水平较正常对照组显著降低(P＜0.01),而胰岛素治疗组显著高于DM组(P＜0.01).结论 控制血糖可使DN大鼠肾脏一定程度的纤维化逆转,其机制可能与肾脏固有细胞表型转变被抑制或反转有关.     

黄芪注射液联合胰岛素疗法对糖尿病大鼠血清TNF-α、IL-6表达的影响

目的 观察黄芪注射液联合胰岛素疗法对糖尿病(DM)大鼠血清血糖、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨链脲酶菌素(STZ)诱导的DM大鼠是否产生低度炎症以及黄芪联合胰岛素疗法对DM这种低度炎症的治疗效果.方法 30只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、胰岛素组、黄芪组和黄芪联合胰岛素组.除正常组外,其他组大鼠STZ腹腔注射制备DM模型.治疗8 w周后,腹主动脉取血,测定血清中血糖、IL-6以及TNF-α的水平.结果 与正常组相比,模型组、黄芪组大鼠血糖、IL-6、TNF-α水平明显升高(P＜0.05),而黄芪组、胰岛素组、黄芪联合胰岛素组血清血糖、IL-6、TNF-α水平明显低于模型组(P＜0.05),且黄芪联合胰岛素组血糖、IL-6、TNF-α值低于黄芪组及胰岛素组(P＜0.05).结论 黄芪联合胰岛素疗法治疗DM具有协同作用,可有效改善DM的高糖和炎症状况.     

黄芪联合胰岛素疗法对糖尿病大鼠体内氧化应激的影响

目的 观察黄芪联合胰岛素疗法对糖尿病(DM)大鼠氧化应激的影响,为临床治疗DM患者应用抗氧化剂提供实验依据.方法 腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导DM大鼠模型.造模成功的大鼠随机分为DM组、黄芪治疗组、胰岛素治疗组、黄芪+胰岛素治疗组,正常大鼠作为对照组.每隔3d监测大鼠血糖.治疗8w后,腹主动脉取血,检测各组大鼠血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果 DM模型组及其治疗组SOD活力、体重明显低于对照组(P＜0.05),黄芪治疗组、胰岛素治疗组和黄芪+胰岛素治疗组SOD活性、体重明显高于dm模型组(P＜0.05),黄芪治疗组和胰岛素治疗组SOD活性、体重明显低于黄芪+胰岛素治疗组(P＜0.05).DM模型组及其治疗组MDA含量明显高于正常对照组(P＜0.05),黄芪治疗组和胰岛素治疗组MDA含量、血糖明显高于黄芪+胰岛素治疗组(P＜0.05),黄芪治疗组、胰岛素治疗组和黄芪+胰岛素治疗组MDA含量、血糖明显低于DM模型组(P＜0.05).结论黄芪联合胰岛素在抑制DM大鼠的氧化应激,改善血糖,控制体重上较单一应用黄芪或胰岛素,效果更显著.     

益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织血管内皮生长因子表达的影响

目的研究益肾胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠模型肾组织血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨益肾胶囊对DN的保护机制。方法将体重为200g～250g正常Wistar健康雄性大鼠24只随机分为正常对照组、模型组、益肾胶囊治疗组。模型组和治疗组分别用STZ诱导建立DN大鼠模型,成模2d后治疗组每天给予益肾胶囊625mg/（kg.d）灌胃,模型组和正常对照组每天仅给予等量生理盐水灌胃。监测血糖、体重、24h尿蛋白的变化,测定血生化,采用免疫组织化学方法 ,观察大鼠肾小球VEGF的分布及其强度变化。结果 2周、4周、8周末,模型组大鼠的体重明显低于对照组大鼠;治疗组大鼠的体重高于模型组大鼠,而低于对照组大鼠（P〈0.05）。模型组及治疗组大鼠的血糖、24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮均高于对照组大鼠（P〈0.05）。正常对照组大鼠VEGF主要分布于肾小球脏层上皮细胞,治疗组大鼠肾皮质VEGF表达比未治疗组明显减弱。结论模型组大鼠肾脏VEGF的表达较正常组大鼠表达明显增强,提示VEGF与DN的发生发展有关。益肾胶囊可抑制DN大鼠肾脏VEGF的过度表达。     

姜黄素对糖尿病肾病大鼠脂质代谢的影响

目的 观察姜黄素(CUR)和缬沙坦对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗和脂质代谢保护作用。方法 60只SD大鼠随机分为6组：空白组、模型组、低、中、高浓度CUR组和缬沙坦组，高糖高脂饲料配合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)进行DN大鼠造模。给药12 w后取肾进行HE染色和PAS染色；采用全自动生化分析仪检测血中的生化指标；酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中血清脂联素(APN)和瘦素(LEP)水平。结果 HE染色和PAS染色镜下可观察到模型组肾小球肥大，球囊腔狭窄，肾小球基底膜增厚等变化。与模型组比较，高浓度CUR组明显改善。与空白组对比，模型组血糖、肌酐、尿素氮等指标显著升高(P<0.05)。与模型组比较，高浓度CUR组血糖、肌酐、尿素氮、LEP、三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白等均显著降低，高密度脂蛋白和APN显著升高(均P<0.05)。结论 高浓度CUR对DN大鼠的治疗作用最显著，且其对DN大鼠的APN和LEP数值干预明显，对DN大鼠脂质代谢具有保护作用。     

酸柏栀油软胶囊对2型糖尿病肾病大鼠的作用

目的探究酸柏栀油软胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠的作用。方法 60只4周龄雄性SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,运用高糖高脂饲料联合小剂量链脲佐菌素(STZ)制备DN模型。成模后大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、酸柏栀油软胶囊高、中、低剂量组。正常对照组和模型对照组给予等量生理盐水,阳性对照组给予盐酸二甲双胍、酸柏栀油软胶囊高、中、低剂量组分别给予不同剂量酸柏栀油软胶囊灌胃。干预8 w末,检测大鼠血糖、血脂、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平。结果在干预末,各给药组体重均显著高于模型对照组(P<0.05),酸柏栀油软胶囊高剂量组体重、血糖、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、BUN与阳性对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论酸柏栀油软胶囊具有改善DN大鼠糖代谢、脂代谢紊乱的作用,能促进糖尿病大鼠肾功能的恢复。     

饮食对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3β表达的影响

目的 探讨饮食治疗对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)表达的影响.方法 30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为2组,正常对照组(10只,常规饲料喂养)、模型组(20只,高脂饲料喂养;4w后模型形成).模型组随机分为2个亚组(胰岛素抵抗组和饮食干预组,每组10只),胰岛素抵抗组继以高脂饲料喂养,饮食干预组给予普通饲料喂养.6w后,用Western-blot方法检测各组大鼠附睾脂肪组织中GSK-3β的表达,对比各组的表达差异;定期检测大鼠体重、空腹血糖及血浆胰岛素、血甘油三酯和胆固醇,并计算胰岛素敏感指数.结果 高脂饲料喂养4w后,与正常对照组比较,模型组大鼠体重、空腹血糖、胰岛素、胆固醇、甘油三酯显著升高(P＜0.05或P＜0.01),胰岛素敏感指数显著下降(P＜0.01),胰岛素抵抗模型诱导成功;饮食干预6w后与胰岛素抵抗组大鼠比较,脂肪组织中GSK-3β的表达显著下降(P＜0.05);与正常对照组比较,差异无统计学意义.结论 饮食干预能改善大鼠机体胰岛素抵抗,可能与下调脂肪组织GSK-3β的表达有关.     

胰岛素泵强化治疗早期糖尿病肾病的疗效

目的探讨胰岛素泵泵入门冬胰岛素、门冬胰岛素+地特胰岛素对早期糖尿病肾病(DN)患者的疗效。方法将64例早期DN患者随机分为胰岛素泵泵入门冬胰岛素组(CSII组)、门冬胰岛素+地特胰岛素组(MSII组),治疗4 w后观察两组的血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿微量蛋白(ACR)、尿白蛋白排泄率(UAER)、24 h尿蛋白的变化。结果两组治疗后血糖、HbA1c、ACR、UAER、24 h尿蛋白较治疗前均有下降并差异显著(P<0.05),血糖、HbA1c、低血糖次数治疗组较对照组下降更明显并有统计学差异,ACR、UAER、24 h尿蛋白无统计学差异(P>0.05)。结论胰岛素泵泵入门冬胰岛素能显著降低早期DN的ACR、UAER、24 h尿蛋白,降糖更安全、更迅速。     

二氮嗪与格列吡嗪影响2型糖尿病肥胖大鼠胰岛功能的比较

60只SD大鼠分别给予正常饲料和高脂饲料喂养,8周后高脂组中选取肥胖大鼠给予腹腔内注射小剂量链脲佐菌素制备糖尿病模型.成模大鼠分为安慰剂、二氮嗪和格列吡嗪组,治疗4周.结果显示,2型糖尿病模型肥胖大鼠体重、胰岛素、胰岛素敏感性显著低于高脂对照组(P＜0.01).与格列吡嗪相似,二氮嗪可降低血糖,改善葡萄糖耐量(P＜0.01),2组之间无显著差异(P＞0.05).二氮嗪组胰岛的形态基本完整,胰岛细胞凋亡率显著低于糖尿病组(P＜0.05),同格列吡嗪组相比无显著差异(P＞0.05).提示二氮嗪作为KATP通道开放剂,能促进胰岛细胞休息,减轻胰岛素分泌负荷,改善2型糖尿病肥胖大鼠的胰岛功能.     

Mesenchymal stem cells transplantation ameliorates glomerular injury in streptozotocin-induced diabetic nephropathy in rats via inhibiting oxidative stress

Aims

Mesenchymal stem cells (MSCs) have been demonstrated to be protective in diabetic nephropathy (DN) by reducing albuminuria and attenuating glomerular injury. However, the mechanisms remain unclear. The aim of this study was to explore the effects of MSCs on oxidative stress in DN.

Materials/methods

Streptozotocin-induced diabetic rats received no treatment or treatment with MSCs (2 × 10⁶, via tail vein) for two continuous weeks. Two other control groups received the antioxidant-probucol or insulin. Eight weeks after treatment, physical, biochemical, renal functional and morphological parameters were measured. Glomerular mesangial cells were cultured for the in vitro experiment.

Results

Green fluorescent protein-labeled MSCs were only detected around the glomeruli and near vessels in the kidney. MSCs treatment dramatically reduced blood glucose, urinary albumin excretion, creatinine clearance and renal mass index. The glomerulosclerosis as revealed by periodic acid Schiff staining and expression of collagen I and fibronectin was significantly reduced by MSC treatment. Oxidative stress was also markedly inhibited in the MSCs group. Furthermore, the expression of TGF-β and membrane localization of GLUT1 were also down-regulated by MSCs. MSCs secreted a significant amount of hepatocyte growth factor (HGF). In vitro, MSC conditioned medium inhibited up-regulation of TGF-β expression stimulated by high glucose and HGF neutralizing antibody blocked the inhibitory effect of MSC conditioned medium.

Conclusions

MSC treatment reduced urinary albumin excretion and ameliorated glomerulosclerosis. The mechanisms underlying these effects involved reduced blood glucose levels and cellular glucose uptake mediated by GLUT1, thus inhibiting oxidative stress.     

糖尿病肾病患者肾小球中nephrin表达及其临床意义

目的检测糖尿病肾病（DN）患者肾小球组织中nephrin的表达,以探讨nephrin在DN患者蛋白尿发生机理中可能的作用.方法免疫荧光染色图像分析及RT-PCR法检测DN组、单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组肾小球组织nephrin的表达水平.结果DN组肾小球组织nephrin的表达量显著低于单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组（P＜0.05）.DN组患者肾小球组织中nephrin的mRNA表达量也显著低于单纯糖尿病组、单纯血尿组及对照组（P＜0.05）.结论DN患者肾小球组织nephrin的表达减少,可能影响肾小球滤过屏障的通透性,导致蛋白尿的产生.     

经静脉移植骨髓间充质干细胞对大鼠急性心肌梗死的影响

目的研究单次与多次经静脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠急性心肌梗死的影响。方法选择60只SD大鼠随机分为A组(单次移植MSCs)、B组(多次移植MSCs)、C组(单次移植MSCs对照)和D组(多次移植MSCs对照),每组15只。A组在心肌梗死后第1天、B组在心肌梗死后第1、4、7、10、13天经尾静脉移植MSCs 5×10~6个,C组和D组注射等量培养液。大鼠心肌梗死后4周测定左心功能,并行免疫组织化学检测。结果心肌梗死后4周A组和B组大鼠梗死心肌中均可以观察到4’,6二脒基-2-苯吲哚标记阳性细胞存在。与C组和D组比较,A组和B组大鼠左心功能均明显改善,心肌梗死面积减小,毛细血管密度增高(P<0.05)。与A组比较,B组改善作用更加明显(P<0.05)。结论经静脉单次与多次移植MSCs对大鼠急性心肌梗死均有效,但多次移植效果更好。     

低蛋白合并α-酮酸饮食对被动型Heymann肾炎大鼠肾小球足细胞Nephrin表达的影响

目的 观察低蛋白合并α-酮酸饮食对被动型Heymann肾炎大鼠肾小球足细胞Nephrin表达的影响.方法 将40只SD大鼠分为对照组、模型组(PHN组)、低蛋白饮食组(LPD组)和低蛋白合并α-酮酸饮食组(LK组),对照组经尾静脉注射1 mL/100 g生理盐水,其他三组经尾静脉注射1 mL/100 g新西兰大耳兔抗FX1A血清.对照组、PHN组饮食蛋白占饲料质量的10％,LPD组饮食蛋白占饲料质量的5％,LK组饮食蛋白占饲料质量的5％(其中α-酮酸提供1％的蛋白).4周后检测各组24 h尿蛋白定量、血清肌酐、TG、TC及血清白蛋白,激光共聚焦显微镜免疫荧光检查大鼠肾小球足细胞Nephrin表达情况.结果 激光共聚焦显微镜显示,PHN组、LPD组肾小球内Nephrin荧光强度较对照组明显减弱,且部分节段有缺失;LK组肾小球内Nephrin荧光强度较对照组减弱.结论 低蛋白合并α-酮酸饮食对被动型Heymann肾炎大鼠具有肾脏保护作用.     

当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌卫星细胞增殖及c-kit表达的影响

目的观察当归补血汤对体外造血微环境中小鼠肌卫星细胞增殖及c-kit表达的影响。方法分离培养小鼠卫星细胞并鉴定。制备含有不同剂量当归补血汤的大鼠载药血清及对应剂量的骨髓基质细胞条件培养基。将肌卫星细胞随机分为8组:正常大鼠血清组、当归补血汤载药血清1～3组、正常大鼠血清条件培养基组、条件培养基1～3组,MTT法检测细胞增殖活性,免疫组化法检测细胞c-kit的表达情况,荧光实时定量PCR检测细胞c-kit mRNA的表达。结果培养的肌卫星细胞呈Desmin免疫阳性;与正常大鼠血清组相比,载药血清各组及条件培养基各组细胞增殖显著,载药血清3组、条件培养基各组阳性细胞c-kit蛋白及mRNA表达量有显著性差异,随当归补血汤载药血清浓度增大c-kit表达量增多,条件培养基也呈同样的变化趋势。结论当归补血汤载药血清及含载药血清的条件培养基可促进肌卫星细胞增殖及c-kit的表达。     

间充质干细胞凝胶对大鼠四期压疮创面愈合的作用及机制

目的探讨人间充质干细胞(MSCs)凝胶对大鼠四期压疮创面在不同环境中愈合的效果及作用机制。方法选择126只大鼠,按照随机数字表法选取6只作为正常组;其余120只大鼠造模后随机分为对照组、干性-临床组(GL组)、湿性-临床组(SL组)、干性-干细胞组(GG组)及湿性-干细胞组(SG组),每组各24只。对照组无治疗措施,自然愈合;GL组予以涂抹碘伏+纱布包扎;SL组予以涂抹清创胶+水胶体覆盖;GG组予以涂抹MSCs凝胶+纱布包扎;SG组予以涂抹MSCs凝胶+水胶体覆盖。治疗第3、6、9、15天时,测量各组大鼠创面面积并计算创面愈合率,采用ELISA法测定血清VEGF、TNF-α及IL-10表达水平。结果治疗6 d、9 d、15 d时,SL组创面愈合率均高于GL组(P均<0.05),GG组创面愈合率均高于SG组(P均<0.01)。治疗9 d、15 d时,SL组血清TNF-α水平均低于GL组,GG组血清TNF-α水平均低于SG组(P均<0.05)。治疗3 d、6 d、9 d、15 d时,GG组血清IL-10、VEGF水平均高于SG组(P均<0.05)。结论MSCs凝胶可提高四期压疮大鼠的创面愈合率,且在干性愈合环境中的作用能力优于湿性环境,其机制可能为减轻创面炎症反应、促进血管新生。     

骨髓间充质干细胞对大鼠肾脏衰老的影响

目的 研究骨髓间充质干细胞(MSCs)延缓肾脏衰老的机制.方法 皮下注射D-半乳糖建立肾脏衰老模型,大鼠尾静脉注射3×10<'-4>个MSCs进行生物治疗,应用终浓度为20 μmol/L荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的MSCs回输大鼠体内,制作,肾脏冰冻切片,在荧光显微镜下观察MSCs是否定位于肾脏;采用光镜和图像分析系统对大鼠肾脏各项形态学指标进行定量分析;采用硫代巴比妥酸和黄嘌呤氧化法分别检测血清和肾脏中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;应用实时定量-逆转录PCR和免疫印迹法榆测各组肾脏组织中血管内皮生长因子(VEGF)及P16的表达.结果 MSCs能够归巢到衰老大鼠的肾脏.治疗组肾小球形态大小、肾小球硬化率、肾小球平均细胞数均与模型组不同(P<0.05).治疗组与模型组相比,血清与肾脏中SOD的活性均明显增高,MDA含量也显著降低(P<0.05);与模型组相比,治疗组大鼠肾脏内的VEGF蛋白和VEGF mRNA表达升高(P<0.05).治疗组大鼠肾脏内的P16蛋白和P16 mRNA表达下降(P<0.05).结论 MSCs分泌VEGF、降低P16的表达可能是改善衰老肾脏的作用机制之一.     

骨髓间充质干细胞心肌样分化的微环境因素

目的:探讨促使骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌样分化的微环境因素。方法:分离大鼠MSCs并传至第6代,随机分为混合培养组、条件组及对照组,分别将MSCs与大鼠心肌细胞共同培养(混合培养组),或将心肌细胞培养上清液加入MSCs培养体系(条件组)。1周后,检测MSCs的心肌特异性蛋白titin、Cx43及MHC表达情况。结果:MSCs能在心肌细胞培养上清液及与心肌细胞共同培养中正常生长;条件组MSCs表达titin、Cx43显著增加,但未观察到肌小节样结构;混合培养组MSCs可表达上述蛋白,且部分细胞中可观察到肌小节样结构,与心肌细胞交界面上有Cx43的聚集。3组MSCs均未检测到MHC表达。结论:心肌细胞自身、源于心肌的体液因素及MSCs分化过程中形成的感应器是MSCs心肌样分化的必要条件。     

雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

目的 观察雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocinmRNA和蛋白表达的影响.方法 将体重200 ～ 260 g的50只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和4个模型组（n=10）,后者分别应用链脲佐菌素造模成功后分为糖尿病肾病组（DN组）、厄贝沙坦组、雷公藤多甙组和雷公藤多甙联合厄贝沙坦组.给予相应干预8周后,检测血尿指标,HE染色观察肾组织病理变化,逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）法检测各组大鼠肾皮质中nephrin和podocinmRNA和蛋白表达.结果 （1）与DN组大鼠比较,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾皮质nephrin mRNA （0.507±0.024比0.276 ±0.015,P ＜0.01）和podocin mRNA （0.533±0.024比0.463±0.022,P＜0.01）表达上调.（2）与DN组大鼠比较,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾皮质nephrin蛋白（0.738±0.029比0.199±0.012,P＜0.01）和podocin蛋白（0.811 ±0.032比0.227±0.014,P＜0.01）表达上调.（3） HE染色和Masson染色显示,糖尿病组大鼠肾脏肾小球体积增大,系膜基质弥漫增多,系膜细胞明显增多,基底膜弥漫增厚,间质可见灶性淋巴细胞及单核细胞浸润,厄贝沙坦组和雷公藤多甙组病变较糖尿病组减轻,雷公藤多甙联合厄贝沙坦组大鼠肾脏组织病变较厄贝沙坦组和雷公藤多甙组进一步减轻.结论 雷公藤多甙联合厄贝沙坦对糖尿病大鼠的肾脏足细胞具有保护作用,这种保护作用可能是通过上调足细胞nephrin和podocin mRNA和蛋白表达有关.     

骨髓间充质干细胞静脉移植对心肌梗死大鼠心功能的影响

目的探讨静脉途径移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响。方法雄性SD大鼠20只,分为干细胞移植组(10只)和对照组(10只)。结扎大鼠左冠状动脉建立心肌梗死模型。同种异体大鼠MSCs体外分离、纯化、扩增,4’,6-二脒-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记,并通过尾静脉于心肌梗死后1周移植入AMI大鼠体内,对照组则注射等量培养液。4周后测定心功能,并行免疫组织化学检测。结果心肌梗死4周后,干细胞移植组心肌组织冷冻切片中可以观察到DAPI标记细胞存在,免疫组织化学显示阳性标记细胞a-Actin肌动蛋白检测阳性。干细胞移植组心功能较对照组有明显改善(P<0.05)。结论MSCs经静脉移植可以归巢至梗死心肌处,并能改善受损的心功能。