气管导管生物被膜与复发性铜绿假单胞菌呼吸机相关肺炎的相关性

目的：确定机械通气患者气管内导管（ETT）细菌生物被膜（BF）与长期机械通气反复发作铜绿假单胞菌呼吸机相关肺炎（PA－VAP）病原的相关性。方法：应用染色体DNA SpeI限制酶切脉冲场电脉（PFGE）技术和染色体DNA印迹平均链锁聚类分析及相似系数计算方法,前瞻性研究了15例机械通气且反复发作VAP患者的同期ETT－BF,咽拭子和下呼吸道分泌物分离出的铜绿假单胞菌DNA基因型同源性。结果：在15例长期机械通气反复发作VAP患者中,有7例（15次）同时从ETTBF和下呼吸道分泌物中分离出相同DNA基因型的铜绿假单胞菌。有6例是由同一菌株或亚型所致,9例患者间的细菌DNA基因型各不相同,相似水平很低（＜31．2％）。结论：ETT的细菌寄殖和BF形成与VAP病原菌有密切的相关性,是VAP发病机制中的一个重要因素及持续存在的病原来源;反复发作PA－VAP是以原有致病原的持续寄殖及复发为主,而不是发生外源性再感染。     

铜绿假单胞茵在急性下呼吸道感染患者中生物被膜形成与群体感应系统基因相关性分析

目的：探讨在急性下呼吸道感染患者体内铜绿假单胞菌群体感应系统中Las系统和Rhl系统的表达及与其生物被膜形成的相关性。方法：以铜绿假单胞菌临床分离株为研究对象,检测群体感应系统中Las系统和Rhl系统相对表达量及生物被膜形成能力．分析Las系统和Rhl系统表达量与生物被膜形成能力的相互关系。结果：测定的120株铜绿假单胞菌临床菌株中．Las信号系统的Lasl和LasR基因相对表达与生物被膜形成均呈正相关fP〈0．001）,其中第1天分离的临床株中Lasl和LasR基因相对表达量与生物被膜生成量呈正相关（P〈0．01）．第14天分离的临床株中Lasl基因相对表达量与生物被膜生成量有密切正相关性（P〈0．001）．LasR基因相对表达量与生物被膜生成量呈正相关（P〈0．05）。Rh1信号系统的Rh11和．R^艉基因相对表达量与生物被膜生成量密切正相关（P〈0．001）．其中第1天分离的菌株中Rh11和Rh1R基因相对表达量与生物被膜生成量密切正相关（P〈0．001）,而第14天分离的菌株中Rh11和Rh1R基因相对表达量与生物被膜生成量无相关性。结论：铜绿假单胞菌的群体感应系统中Las信号系统和Rh1信号系统与生物被膜形成密切相关．在生物被膜的形成过程起到关键作用．     

60例医院获得性肺炎患者铜绿假单胞菌生物被膜形成能力的分析

目的通过研究医院获得性肺炎患者铜绿假单胞菌生物被膜形成过程,初步讨论铜绿假单胞菌生物被膜可能的干预治疗手段。方法以PA临床株为研究对象,收集第1天和第14天HAP患者下呼吸道痰标本并分离细菌,检测临床菌株细菌运动(泳动能力,颤搐运动和丛集运动)和BF形成能力的关联。结果本研究共收集病例60例,共获得PA临床株120株。共有115株菌株具有生物被膜形成能力(占95.8%),其中有96株菌株的生物被膜形成能力较弱(占80%)。生物被膜形成量与细菌泳动能力,颤搐运动及丛集运动均呈正相关(P0.01),比较第1天与第14天收集细菌运动及生物被膜形成量均无明显差异(P0.05)。结论我们收集的PA菌株中绝大多数具有BF形成能力,细菌运动能力越强,形成的BF量越多。本研究收集的病例临床治疗对PA生物被膜形成能力无明显影响。     

呼吸道的生物被膜病：慢性难治性肺部感染的关键环节

慢性难治性肺部感染与气道内细菌生物被膜的形成有关，因此有人提出呼吸道生物被膜病的概念。本以铜绿假单胞菌为例，综述了细菌生物被膜的形态、结构、生理病理意义及呼吸道生物被膜病发病机制、临床和实践意义等方面内容。     

呼吸机相关性肺炎的病原学特点及对预后的影响

目的:调查重症监护室(ICU)呼吸机相关性肺炎(VAP)的病原菌特点及其对临床预后的影响。方法:回顾性调查ICU行机械通气48 h的327例患者,分为VAP组和非VAP组,VAP组又分为早发VAP组和晚发VAP组,对所有患者的呼吸道分泌物进行培养,同时观察各组患者的临床预后。结果:85例VAP患者中共分离出96株菌株,其中革兰氏阴性菌(G-菌)79株(82.29%),以铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌及肺炎克雷伯菌最常见;72例患者(84.71%)为单细菌感染,13例患者(15.29%)为多细菌感染;早发型VAP患者36例,共培养出38株致病菌,主要为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌,晚发型VAP患者49例,共培养出58株致病菌,主要为鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌及肺炎克雷伯菌;早发型VAP患者多重耐药菌7株,晚发型VAP患者24株,其差异有统计学意义(P=0.021);早发型VAP和晚发型VAP的机械通气天数分别为(8.49±4.36)d vs(26.06±14.90)d(P=0.001),总住院天数分别为(28.11±25.51)d vs(42.88±28.31)d(P=0.020),30 d病死率分别为50.0%vs 35.4%(P=0.180),60 d病死率分别为58.33%vs 45.83%(P=0.257)。VAP和非VAP组机械通气天数分别是(16.82±38.83)d vs(6.66±5.28)d(P=0.018),ICU住院天数分别为(24.16±40.42)d vs(11.79±11.63)d(P=0.007),住院期间病死率分别为54.12%vs39.67%(P=0.023)。结论:我院ICU中VAP的致病菌以铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌及肺炎克雷伯菌等G-菌最常见,其中早发型VAP致病菌以肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌为主,而晚发型VAP致病菌以鲍氏不动杆菌、铜绿假单胞菌及肺炎克雷伯菌为主;多重耐药菌更常见于晚发型VAP病例;晚发型VAP的机械通气时间及总住院时间较早发型VAP组延长。     

66例下呼吸道感染者痰检出铜绿假单胞菌的临床分析

铜绿假单胞菌(PA)是呼吸道标本中最常见的革兰氏阴性杆菌[1],广泛存在于自然界,是一种条件致病菌,近年来该菌分离阳性率明显增加,已成为医院感染的重要致病菌之一。对2000～2004年我院呼吸科确诊铜绿假单胞菌下呼吸道感染66例进行回顾性分析,测定其对常用16种抗生素的耐药性为临床提供更多参考。1病例选择1999年1月～2004年12月我院呼吸科病房诊为铜绿假单胞菌下呼吸道感染66例,男39例,女27例,年龄60～85岁,平均67岁,均为老年人。慢性支气管炎急性发作37例,支气管扩张21例,其它如肺炎、肺癌、支气管哮喘、肺间质纤维化共8例,使用糖皮质激素…     

采用Red重组系统敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因

目的敲除铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因,获得无弹性蛋白酶活性的铜绿假单胞菌菌株。方法采用PCR从pKD46质粒上扩增λ噬菌体的Red重组酶基因,并将其克隆到大肠杆菌和铜绿假单胞菌穿梭质粒pUCP多克隆位点上,电击转化铜绿假单胞菌PAO1感受态细胞,构建PAO1/pUCP-Red基因敲除体系。常规基因操作构建两端与弹性蛋白酶基因上、下游同源,中间为庆大霉素抗性基因的线性打靶片段;并将其电击转化pUCP-Red/PAO1感受态;采用庆大霉素和羧苄青霉素抗性平板初步筛选阳性重组菌;通过PCR、RT-PCR及弹性蛋白酶活性检测方法,鉴定菌株弹性蛋白酶基因的敲除情况。结果本研究通过构建Red重组系统,获得了无弹性蛋白酶活性的铜绿假单胞菌菌株。结论本研究成功敲除了铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因,所获无弹性蛋白酶活性的菌株将为系统深入研究弹性蛋白酶在铜绿假单胞菌致病性中的详细作用机理提供材料和基础。     

COPD患者呼吸机肺炎的致病菌特点及治疗模式分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者发生呼吸机相关性肺炎(VAP)的病原菌特点及不同治疗方法的预后,为临床提供治疗依据。方法对67例符合VAP标准的COPD机械通气患者的痰培养病原学、药敏结果、治疗方法及预后进行回顾性分析。结果VAP的病原菌以G-杆菌为多数,铜绿假单胞菌、不动杆菌属为VAP的主要致病菌(35．1％);金黄色葡萄球菌为VAP的主要致病G 球菌。病原菌对常用抗菌药耐药率较高,降阶梯治疗组的病死率(13．3％)明显低于升阶梯治疗组(61．5％)和非阶梯治疗组(33．3％)。结论铜绿假单胞菌、不动杆菌属、金黄色葡萄球菌为COPD患者VAP的主要病原菌,病原菌的耐药率较高,使用降阶梯治疗可降低病死率。     

ICU 铜绿假单胞菌临床分布及耐药性分析

目的：调查 ICU 铜绿假单胞菌临床分布及耐药性分析,为临床诊断及合理应用抗生素提供科学依据。方法选择济宁医学院附属医院 ICU 一区2013年9月至2014年9月住院患者的临床标本进行常规细菌培养鉴定,以 K-B 纸片扩散法进行药物敏感性试验,对分离出的铜绿假单胞菌药敏试验结果进行统计分析。结果从各种标本中共分离到铜绿假单胞菌216株,其中呼吸道标本痰液百分比最高,占69%。在15种抗生素药敏试验中阿米卡星、头孢哌酮舒巴坦钠、头孢吡肟体外抗菌活性最好,铜绿假单胞菌株耐药性强,产生多重耐药菌63株。结论 ICU 铜绿假单胞菌感染主要为呼吸道感染,ICU中铜绿假单胞菌耐药率较高,应引起高度重视,要加强病原学检测,以有效控制感染。     

健康肉鸡高比率携有多重耐药铜绿假单胞菌

摘要： 目的 为了解健康成年肉鸡中铜绿假单胞菌的流行情况及其抗生素抗菌谱。方法 2011年1月~3月在河南省洛阳市两个菜市场随机抽取市售健康肉鸡鸡肠内容物,经SCDLP液体培养基增菌,菌液十六烷基三甲基溴化铵琼脂培养基培养,分离细菌经氧化酶试验、绿脓菌素测定、明胶液化试验、42℃生长试验和硝酸盐还原产气试验等一系列试验鉴定,鉴定的铜绿假单胞菌采用K-B法测定对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮、羧苄西林、氨曲南、庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、氯霉素、四环素、诺氟沙星、环丙沙星的耐药性。结果 20个样品9个分离出11株铜绿假单胞菌。11株细菌具有7种耐药模式;3种模式为多重耐药模式,共6株细菌,来源6只肉鸡。结论 45%肉鸡携带铜绿假单胞菌,30%肉鸡携有多重耐药铜绿假单胞菌。     

COPD机械通气并发呼吸机相关肺炎45例临床分析

目的分析慢性阻塞性肺病（COPD）有创机械通气并发呼吸机相关肺炎（VAP）的相关因素及致病菌。方法回顾性分析近年来本院ICU收治的45例COPD机械通气并发VAP患者的临床资料、发病原因和致病菌。结果VAP的发生率为73．7％,共培养出细菌73株,真菌3株;其中革兰氏阴性杆菌（GNB）50株（68．49％）,革兰氏阳性球菌（GPC）20株（27．39％）。COPD并发VAP居首位的细菌是铜绿假单胞。结论VAP是COPD有创机械通气治疗中常见的严重并发症,应尽早停机拔管,改用无创通气,合理使用抗生素,谨慎使用抗酸药,注意无菌操作,是预防VAP的有效措施。     

老年呼吸机相关性肺炎患者病原菌分布及耐药情况研究

目的探讨医院呼吸机相关性肺炎（VAP）老年患者感染病原菌分布及耐药情况。方法收集2009年1月至2014年1月我院收治的598例进行机械通气老年患者的临床资料进行回顾性调查,从资料中筛选出VAP老年患者并对VAP老年患者下呼吸道分泌物培养及病原菌耐药结果进行统计分析。结果 598例进行机械通气患者中共有221例患者并发有VAP（发生率为36.9%）,下呼吸道痰液共分离出251株致病菌,其中有30例发生2种病原菌感染;其中革兰阴性菌分离率最高,占71.3%,其次为革兰阳性菌（占17.9%）、真菌（占10.8%）;革兰阴性菌中前3位病原菌依次为鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌,分别占24.3%、17.9%、9.2%;鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌泛耐药菌株的检出率分别为21.8%和22.2%,产ESBLs细菌检出率为53.6%。革兰阳性菌中,以金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌为主,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）检出率分别为66.7%和64.7%。结论 VAP的病原菌以革兰阴性菌为主,相关菌株耐药性逐渐增高,及时监测相关病原菌耐药性对指导临床合理用药至关重要。     

Study of biological characteristics of Pseudomonas aeruginosa strains isolated from patients with cystic fibrosis and from patients with extra-pulmonary infections.

A total of 120 strains of Pseudomonas aeruginosa, isolated from cystic fibrosis (CF) patients (n = 80) and from patients having extra-pulmonary infections (n = 40) were studied regarding the presence of some virulence factors (hemolysin, gelatinase and elastase production) and presence of the algD and algU genes as detected by polymerase chain reaction-PCR. There was not a significant difference for the production of gelatinase and hemolysin between non-mucoid strains from CF patients and other isolates from extra-pulmonary infections and mucoid strains. The production of elastase was found to be significant among these strains. The algD gene was detected by PCR in all studied strains but the algU gene was detected only in 25% of the mucoid strains. Conclusion withdrawn from the results were: (i) hemolysin and gelatinase production although present in many strains of P aeruginosa should not be considered as general virulence factors for the mucoid phenotype but could help in the pathogenic process; (ii) elastase production could be a necessary virulence factor for the initial pathogenesis process; (iii) mucoid and non-mucoid phenotypes could also be expressed according to the host's tissues or environment, and finally, (iv) more than one regulator system for alginate production is probably present in each strain.     

老年肺纤维化合并肺气肿患者急性加重期病原学调查

目的：了解老年肺纤维化合并肺气肿（CPFE）患者急性加重时下呼吸道病原体分布及其耐药谱。方法入选2013年1月至2014年1月因急性加重在重庆医科大学附属第二医院和重庆市中山医院呼吸科住院的CPFE患者76例，分析痰培养与药敏试验结果。结果76例老年住院患者中，痰培养出88株病原体的患者68例，以革兰阴性菌及真菌为主，检出率位于前6位的病原体分别为鲍氏不动杆菌24株（27.3%）、白假丝酵母18株（20.5%）、肺炎克雷伯菌10株（11.4%）、铜绿假单胞菌8株（9.1%）、嗜麦芽寡养单胞菌6株（6.8%）、阴沟肠杆菌6株（6.8%）。合并两种以上病原体感染的患者26例，对测试抗感染药物存在多药耐药。结论老年CPFE患者急性加重时，机会感染率高且耐药严重，应区分病因、予以合理的抗感染及糖皮质激素等治疗。     

铜绿假单胞菌耐药性及产碳青霉烯酶研究

目的了解医院2010年分离的铜绿假单胞菌的耐药性及耐亚胺培南菌株产碳青酶烯酶情况。方法 K-B纸片扩散法进行药敏试验;碳青霉烯酶检测采用改良Hodge试验。结果 2010年分离铜绿假单胞菌145株,主要来自呼吸道标本、脓汁及分泌物。药敏结果显示铜绿假单胞菌氨苄西林耐药率最高,达88.97%。对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、环丙沙星和头孢他啶的耐药率均超过50%。对洛美沙星和头孢哌酮/舒巴坦较敏感;耐亚胺培南铜绿假单胞菌31株,耐药率21.38%,改良Hodge试验阳性10株,阳性率为32.26%。结论分离的铜绿假单胞菌耐药性和产碳青霉烯酶率均较高,铜绿假单胞菌耐药严重     

A case of immotile-dyskinetic cilia syndrome responding to clenbuterol hydrochloride and azithromycin]

In this case, a 30-year-old man had been treated for chronic sinusitis and bronchiectasis since 2000, and presented at our outpatient clinic in May 2001 with chief complaints of massive yellow sputum expectoration and dyspnea. After he was admitted by our hospital, Pseudomonas aeruginosa bacteria were isolated at the rate of 10(8)/ml from his sputum culture. In electron-microscopic observation, the cilia of the bronchial epithelium were found to lack dynein arms. Semen examination revealed decreased sperm motility. Thus, the following diagnosis was made: diffuse bronchiectasis associated with the immotile-dyskinetic cilia syndrome, complicated with a P. aeruginosa infection. After the airway infection was ameliorated, 40 mg/day of clenbuterol hydrochloride was administered in combination with 250 mg of azithromycin, which was given twice a week, and which led to a markedly decreased frequency of exacerbation of airway infection. Moreover, chest CT scanning and respiratory function testing also indicated improvements. It was hypothesized that the decreased cilia motility due to P. aeruginosa-produced pyocyanin would be ameliorated with a b2 stimulant, and the inhibitory effect of a macrolide on the P. aeruginosa biofilm and production of pyocyanin would also be involved in the improvement of this case.     

Ventilator-associated pneumonia and chronic obstructive pulmonary disease

INTRODUCTION: Chronic obstructive pulmonary disease (COPD) is a common pulmonary and systemic inflammatory disease. Patients with COPD frequently require mechanical ventilation for acute exacerbations. BACKGROUND: The incidence of ventilator-associated pneumonia (VAP) in COPD patients varies from 6 to 33%. Tracheo-bronchial colonisation, local and systemic immuno-supression and frequent antibiotic treatment are factors predisposing to VAP in these patients. Gram negative bacilli are commonly isolated in COPD patients with VAP. Pseudomonas aeruginosa reported to be the most common. The diagnosis of VAP can be difficult in patients with COPD because of the low sensitivity of the portable chest radiograph. VAP is associated with higher mortality rates, longer duration of mechanical ventilation and ITU stay in patients with COPD. Initial antibiotic treatment should be based on recent guidelines and should take account of frequent prior hospitalisation and antibiotic treatment which are well known risk factors for multidrug resistant bacteria. Preventative measures recommended for the general population should be applied to COPD patients. In the absence of contraindications the use of non-invasive ventilation is recommended to reduce the risk of VAP. VIEWPOINT AND CONCLUSION: Future studies should better determine the incidence of VAP in COPD, improve the diagnostic approach and determine the effects of treating malnutrition, chronic tracheobronchial colonisation and limiting antibiotic and corticosteroid treatment on the incidence of VAP.     

Coxiella burnetii and acute exacerbations/infections in patients with chronic lung disease

The aim of the present study was to determine the incidence of Q fever in patients with an acute exacerbation of a chronic lower respiratory tract infection. Eighty patients treated for acute exacerbation of chronic lower respiratory tract infections during a 30-month period were studied. Q fever was diagnosed by ELISA. Two elderly woman with pre-existing bronchiectasis (2.5%) were diagnosed as having an acute infection by Coxiella burnetii. The acute illness was considered to be a result of mixed infection with Pseudomonas aeruginosa and Haemophilus influenzae with C. burnetii. Co-infection with C. burnetii can occur during a bacterial exacerbation of a chronic lower respiratory tract infection.     

呼吸机相关肺炎的病原学及耐药性分析

目的探讨呼吸机相关肺炎(VAP)病原学分布特点。方法回顾分析62例VAP患者的临床资料。结果62例VAP患者共分离病原菌81株，革兰氏阴性杆菌占62．9％，革兰氏阳性菌占19．8％，真菌占17．3％。病原菌以铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌为主。分离的细菌除对泰能较敏感外，对其它抗生素均有不同程度耐药。结论VAP常为多种病原菌的混合性感染，普遍存在耐药性；选择敏感抗生素可提高VAP治愈率。