Morris水迷宫检测动物学习记忆水平的方法学

<正>阿尔茨海默病(AD)是现代医学的治疗难点,也是老年医学研究的热点。是目前神经生物学和神经药理学非常重要的研究内容。Morris水迷宫~([1])1981年初被设计并应用于学习记忆脑机制研究,目前已成为AD基础研究中评价动物学习记忆的经典方法。然而在国内外现有文献中,关于Morris水迷宫实验动物的选择、实验指标确定、数据统计等方面存在很大差异,这可能造成资源的浪费和实验成本的增高,导致实验结果和结     

脑心通胶囊对拟血管性痴呆大鼠行为学和海马细胞形态学的影响

目的研究脑心通胶囊对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆能力和海马细胞形态的影响。方法采用大脑中动脉梗死（MCAO）法制成VD大鼠模型后随机分为脑心通组（中药组）、西药组、模型组，另设假手术组和正常组，共治疗28d，治疗后以Morris水迷宫实验检测其学习记忆行为能力，以HE染色、Nissl染色检测其细胞形态的变化。结果脑心通胶囊可以改善VD大鼠学习记忆能力，明显减轻缺血对海马CA1区锥体细胞的损伤。结论脑心通胶囊为治疗VD大鼠的有效方，其治疗机制可能与减轻缺血对海马CA1区锥体细胞的损伤有关。     

铜过量负荷对大鼠学习记忆功能的影响

目的观察铜负荷饮食对大鼠空间学习记忆行为的影响。方法40只雄性大鼠适应性喂养1周后,随机分为模型组和空白对照组各20只,模型组予含硫酸铜1g／kg的粉状饲料和含量为0．185％硫酸铜的去离子水喂养,正常对照组喂食普通饲料,8周后采用Morris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,采用原子吸收法测肝、脑组织铜元素含量。结果Morris水迷宫实验：模型组大鼠在定位航行试验中平均逃避潜伏期较正常对照组显著延长,空间探索试验中穿越平台次数较正常组明显减少（P＜O．01）,与正常组比较,模型组大鼠肝、脑组织Cu元素含量明显增加（P〈O．01）。结论铜负荷饮食可以引起大鼠的学习记忆障碍。     

艾灸关元、足三里穴对不同月龄大鼠空间学习记忆能力的影响

目的 研究艾灸关元、足三里穴对不同月龄大鼠空同学习记忆能力的改善作用.方法 分别将10月龄及12月龄雌性大鼠各28只,随机分为对照组及灸治组,每组14只,观察不同月龄大鼠在Morris水迷宫中的学习记忆能力,并用定量分析的方法比较不同月龄、不同分组大鼠在定位航行及空间搜索试验中的学习记忆能力,评价不同月龄大鼠在灸治前后的行为学改变.结果 与青年组比较10月龄及12月龄雌性大鼠在定位航行及空间搜索试验中的学习记忆能力均明显下降,其中12月龄平均逃避潜伏期时间最长,通过平台的次数、在原平台象限停留时间最短,而不同月龄灸治组与对照组比较逃避潜伏期缩短,通过平台的次数、在原平台象限停留时间增加,以10月龄大鼠表现尤为明显(P＜0.05).结论 保健灸法可以提高不同月龄大鼠空间定位及探索能力,以10月龄保健灸组大鼠的疗效更为显著,采用灸治方法增强学习记忆能力,应提早进行.     

核桃叶水提取液对小鼠空间学习记忆能力的影响

将70只小鼠随机分为空白对照组、模型组及核桃叶水提取液大、中、小剂量治疗组各14只.除空白对照组外,余组小鼠皮下注射D-半乳糖建立衰老模型,治疗组同时以12、6、3 g/(kg·d)核桃叶水提取液灌胃30 d,利用Morris水迷宫观察各组小鼠定位航行能力和空间探索能力的变化.结果与模型组比较,治疗组小鼠搜索站台的潜伏期明显缩短,穿越站台次数明显增加,原站台所在象限停留时间明显延长;且呈剂量依赖性.认为核桃叶水提取液能改善衰老模型小鼠的空间学习记忆能力,与其抗氧化作用有关.     

复方酸枣仁栀子油胶囊对大鼠空间学习记忆能力的影响

目的观察复方酸枣仁油栀子油对大鼠空间学习记忆能力的影响。方法采用Morris水迷宫,观察复方酸枣仁油栀子油对大鼠的学习记忆作用;用比色法测定大鼠脑组织中的乙酰胆碱酯酶(AchE)活性和一氧化氮(NO)含量。结果复方酸枣仁油栀子油能改善和提高大鼠的学习记忆功能;复方酸枣仁油栀子油可以减少大鼠海马组织中AchE的活性,增加NO的含量。结论复方酸枣仁油栀子油具有促学习记忆作用。     

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠行为学和海马神经元形态学的影响

目的观察补阳还五汤对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和海马神经元形态的影响。方法将60只大鼠随机分为5组:正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组、尼莫地平组。补阳还五汤组药量为50g/(kg·d),尼莫地平组药量为20mg/(kg·d),共给药30d。模型组、假手术组和正常对照组均给予蒸馏水1mL/100g灌胃。治疗后以Morris水迷宫检测其学习记忆行为能力,以HE染色、Nissl染色检测其神经细胞形态学的变化。结果Morris水迷宫实验中,正常对照组、假手术组、模型组、补阳还五汤组、尼莫地平组的逃避潜伏期分别为:7.67s±3.42s、8.76s±4.03s、29.56s±13.28s、16.96s±7.06s、20.16s±8.89s;探索次数分别为:16.86/min±5.37/min、14.42/min±4.01/min、4.26/min±0.80/min、8.96/min±1.30/min、8.74/min±2.52/min。与正常对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长(P0.05),平均探索次数显著减少(P0.05);与模型组比较,补阳还五汤组、尼莫地平组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05),平均探索次数显著增加(P0.05)。光镜观察显示,补阳还五汤组和尼莫地平组均可见海马CA1区神经元脱失现象明显减轻,数目增多,神经元丢失率明显降低。结论补阳还五汤可以改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与减轻脑缺血再灌注对海马CA1区神经元的损伤有关。     

硒碘缺乏对大鼠空间学习记忆能力的影响

目的探讨硒、碘缺乏对连续繁殖的三代生长发育期的SD大鼠空间学习记忆能力的影响。方法实验分为对照组、低硒组、低碘组、低硒低碘组,通过测定大鼠在Morris水迷宫中的各种参数来反映其空间学习记忆能力。结果仔一代和仔二代大鼠在定位航行实验和空间探索实验各参数差异均无统计学意义,仔三代大鼠在定位航行实验中,低硒低碘组雌鼠9个时段的平均潜伏期比对照组明显延长。在空间探索实验中,雌鼠在各象限停留时间各组之间差异无统计学意义,但对照组在目标象限停留时间较其他3个组长,在远离目标象限停留时间短。低硒低碘组雌鼠穿过原平台所在位置的次数较对照组明显减少。结论硒、碘缺乏对仔一代和仔二代生长发育期大鼠的空间学习记忆能力没有明显影响;单纯的膳食性低硒、低碘对仔三代大鼠空间学习记忆能力没有明显影响,但硒、碘水平同时降低却可以明显降低空间学习记忆能力,而且硒、碘水平同时降低对雌性大鼠学习记忆的影响更为显著。     

龙眼参多糖对老年痴呆模型SAMP8小鼠学习记忆的改善作用

目的 观察龙眼参多糖(LYSP)对老年痴呆模型SAMP8鼠学习记忆能力的影响.方法选用6月龄SAMP8鼠50只,随机均分为SAMP8空白组、阳性药石杉碱甲对照组、低、中、高剂量LYSP组;另选用6月龄SAMR1鼠10只作正常对照组.各组分别灌胃相应药物40 d后,应用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力的变化.结果与SAMR1组比较,SAMP8小鼠在隐蔽平台试验中表现出明显的学习记忆障碍,逃避潜伏期显著延长(P＜0.05),LYSP组从第3天起逃避潜伏期较SAMP8空白组显著缩短(P＜0.05);探索试验中LYSP组原平台象限的停留时间和穿越原平台次数明显多于SAMP8空白组;反向试验中LYSP组第3天的逃避潜伏期比SAMP8空白组亦显著缩短(P＜0.05);可视平台试验结果各组无差异.结论 LYSP能改善SAMP8鼠的学习记忆能力.     

α-亚麻酸对大鼠学习记忆功能和海马神经元的影响

目的 探讨α-亚麻酸对第二代大鼠学习记忆功能和海马神经元的影响.方法 以富含α-亚麻酸的青花椒籽油饲料饲喂SD大鼠两代,Morris水迷宫测定仔代大鼠的学习记忆能力,电子显微镜观察仔代大鼠海马神经元超微结构的变化.结果 青花椒籽油组大鼠学习记忆能力有一定程度提高;青花椒籽油组海马神经元蛋白质合成增强,细胞分化程度增加.结论 富含α-亚麻酸的青花椒籽油对大鼠大脑具有一定的营养和保健作用.     

穴位埋线对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及血清白介素-1β、肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的观察穴位埋线对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力和血清白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量的影响。方法将大鼠随机分成假手术组、VD模型组、穴位埋线组、尼莫地平组,采用改良Pulsinelli四血管闭塞法(4-VO)建立VD大鼠模型,两个治疗组分别施行穴位埋线和尼莫地平治疗,连续15 d。Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,酶联免疫吸附法测定血清IL-1β、TNF-α含量,制作海马组织病理切片并进行HE染色,观察并比较各组大鼠学习能力、血清IL-1β、TNF-α含量及海马神经元损伤的变化。结果模型组表现出明显的学习记忆障碍,定位航行试验、空间探索试验与假手术组相比有显著差异(P<0.01);与VD模型组比较,穴位埋线治疗后VD大鼠学习记忆能力显著提高(P<0.05,P<0.01),血清IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05)。结论穴位埋线可改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与埋线后降低血清IL-1β、TNF-α含量,缓解脑缺血后炎症反应,减轻神经元的损伤有关。     

七氟醚吸入对糖尿病模型大鼠空间学习和记忆能力的影响及其机制

目的 观察七氟醚吸入对糖尿病模型大鼠空间学习和记忆能力的影响,并探讨其机制.方法 72只SPF级雄性成年SD大鼠,其中48只腹腔注射链脲佐菌素53 mg/kg制备糖尿病模型后随机分为模型组和七氟醚组(各24只),另24只记为空白对照组.七氟醚组大鼠进行3.4％七氟醚吸入麻醉干预3 h,模型组及空白对照组大鼠同期吸入30...     

黄芩茎叶总黄酮对AD模型大鼠学习、记忆能力及神经元损伤的影响

目的探讨黄芩茎叶总黄酮（SSTF）对AD的防治作用。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为三组各10只,观察组予SSTF100mg／（kg&#183;d）灌胃1次／d,第8天双侧海马注射凝胶态淀粉样蛋白（Aβ）25-35 5μl（10μg）,继续SSTF灌胃;对照组及模型组予蒸馏水灌胃1次／d,第8天双侧海马分别注射生理盐水及Aβ23-35,5μl（10μg）,继续灌胃。三组均于第15天采用Morris水迷宫试验观察大鼠学习记忆能力（逃避潜伏期时间）,连续观察5d后处死,硫堇Nissl染色观察海马神经元变化。结果模型组及观察组大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长,观察组明显短于模型组;模型组海马CAI区神经细胞带脱失、不完整,脱失处胶质细胞增多,观察组细胞损伤较轻。结论SSTF可明显改善Aβ25-35所致AD大鼠学习、记忆能力,可能机制为减少Aβ所产生的氧自由基,减轻胶质细胞增殖所致损害。     

脑心通胶囊对血管性痴呆大鼠行为学及海马组织的作用

目的观察脑心通胶囊对血管性痴呆（VD）模型大鼠行为学及海马组织形态学的作用。方法采用大脑中动脉闭塞法（MCAO）制作VD动物模型；跳台试验测定大鼠学习记忆成绩取脑组织作冰冻切片，HE染色，观察大鼠海马形态学改变。结果跳台实验中，与假手术组比较，模型组大鼠存在着明显的学习记忆障碍；与模型组比较。中药组、西药组大鼠学习记忆能力得到改善，且两组相比无统计学意义。光镜观察显示，假手术组大鼠海马CA1区锥体细胞排列紧密整齐，无明显神经元脱失；模型组大鼠海马CA1区锥体细胞排列稀疏、紊乱，神经元脱失明显，可见胶质细胞增生，中、西药治疗组可明显减轻大鼠CA1区海马神经元脱失现象，使锥体细胞形态较正常，排列较整齐，接近假手术组。结论脑心通胶囊对血管性痴呆模型大鼠有治疗作用．     

葛根异黄酮对衰老模型大鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶的影响

目的观察葛根异黄酮对衰老模型大鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶(AChE)的影响。方法选用3～4月龄,雌性Wistar大鼠,体重(180±20)g,随机分为生理盐水对照组(生理盐水组),衰老模型组(模型组),用药(低、中、高剂量)组,每组11只。造模时,模型组、药物组每天颈背部皮下注射1%D-半乳糖100mg/kg,生理盐水组每天颈背部皮下注射等量生理盐水,连续6w。造模成功后,第2天开始灌胃给药,药物(低、中、高剂量)组每天分别给予(40、80、160mg/kg)葛根异黄酮灌胃,模型组、生理盐水组每天给予80mg/kg生理盐水灌胃,连续8w。用药结束后,用跳台实验方法测试大鼠学习记忆功能。制备海马10%组织匀浆,检测其AChE活性。结果与模型组比较,低、中、高剂量用药组均能使衰老模型大鼠的潜伏期延长,错误次数减少(P0.05,P0.01)。与模型组比较,中、高剂量组大鼠海马中AChE活性明显降低(P0.05,P0.01)。结论葛根异黄酮对衰老模型大鼠学习记忆功能具有促进作用,其机制可能与AChE活性降低有关。     

异氟烷麻醉后老年大鼠学习/记忆功能改变与脑海马CA1区谷氨酸水平变化的关系

目的观察异氟烷麻醉后老年大鼠学习/记忆功能障碍模型中海马CA1区谷氨酸浓度的动态变化,探讨术后认知功能障碍(POCD)的可能机制。方法将38只老年大鼠(≥18月龄)随机分为3组:对照组(n=6;不接受迷宫训练和麻醉)、空气吸入组(n=7,接受迷宫训练但不接受麻醉)、异氟烷麻醉组(n=25,接受迷宫训练和麻醉)。应用Morris水迷宫对大鼠进行学习/记忆功能测试,根据迷宫测试成绩将异氟烷麻醉组大鼠进一步分为学习/记忆功能明显受损亚组(MIS组)和学习/记忆功能无明显受损亚组(NMIS组)。应用活体脑微透析系统收集不同时间点大鼠脑海马CA1区的脑脊液并应用高效液相色谱法(HPLC)测定脑脊液样本中的谷氨酸浓度。结果接受异氟烷麻醉的大鼠学习/记忆功能明显受损的发生率为12.0%(3/25)。异氟烷麻醉组大鼠麻醉过程中的谷氨酸浓度均明显低于对照组和空气吸入组(P0.05)。异氟烷麻醉组大鼠麻醉结束后1h时脑脊液谷氨酸浓度明显低于空气吸入组(P0.01),但与对照组比较无统计学差异(P0.05)。对照组和空气吸入组大鼠在各时间点脑脊液谷氨酸浓度均无统计学差异(P0.05)。异氟烷麻醉过程中,对照组和空气吸入组脑脊液谷氨酸浓度均明显高于NMIS亚组(P0.05)和MIS亚组(P0.05)。麻醉1 h后,空气吸入组谷氨酸水平明显高于NMIS和MIS两亚组(P0.01),而MIS亚组谷氨酸水平明显低于对照组(P0.05)。麻醉后24 h时,MIS亚组谷氨酸水平明显高于对照组和NMIS亚组(P0.05和0.01)。麻醉后首次水迷宫训练时,MIS组谷氨酸浓度明显高于NMIS组(P0.05)。麻醉48 h以后各个时间点,MIS亚组谷氨酸水平均明显高于其余3组。结论异氟烷麻醉学习/记忆功能障碍大鼠模型中海马CA1区谷氨酸水平呈持久性升高,提示麻醉后脑内高谷氨酸水平可能与麻醉药引发的学习/记忆功能障碍的病理生理过程有关。     

穴位埋线对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的探讨穴位埋线对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆的影响及其机制。方法改良Pulsinelli′s 4血管阻断法建立VD大鼠模型;造模后给予穴位埋线治疗;采用Morris水迷宫检测学习记忆能力及免疫组化检测胆碱乙酰转移酶（ChAT）表达。结果穴位埋线VD大鼠学习记忆能力提高;海马齿状回ChAT表达增强。结论穴位埋线可提高VD大鼠学习记忆能力,可能与它增强海马ChAT表达、保护胆碱能神经元有关。     

弓形虫感染对大鼠记忆力影响及其机制的实验研究

目的观察弓形虫感染对大鼠学习记忆能力和海马组织细胞因子(白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6)水平以及大脑皮层一氧化氮合酶(NOS)活性的影响,探讨其可能机制。方法40只清洁级SD大鼠随机分成4组,即对照组和高、中、低感染剂量的弓形虫感染组(2×107/ml×2ml、2×105/ml×2ml、2×103/ml×2ml)。9周后进行被动回避实验和Morris水迷宫试验,观察弓形虫感染对大鼠的学习记忆能力等行为学变化。放射免疫法检测大鼠海马组织IL-1β、IL-6、TNF-α水平,免疫组化检测NOS活性。结果弓形虫感染对大鼠的记忆获得没有影响,但高、中剂量弓形虫感染组大鼠的记忆消失要早于对照组(P<0.05),低感染剂量组大鼠记忆消失与正常对照大鼠比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各感染组大鼠Morris水迷宫测试中逃避潜伏期均明显延长,其距离百分比明显降低(P<0.05)。各感染组大鼠海马组织IL-1β、TNF-α水平明显高于对照组(P<0.05);但IL-6水平与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。感染组大鼠大脑皮层NOS阳性细胞数增加。结论弓形虫感染对大鼠的学习记忆能力有影响,其作用机制之一可能与大鼠海马组织IL-1β、TNF-α细胞因子水平升高有关。     

何首乌对D-gal致衰大鼠学习记忆能力及海马内突触素含量的影响

目的　探讨何首乌对致衰大鼠学习记忆能力及海马内突触素含量的影响。方法　选用Wistar大鼠 ,用D 半乳糖 (D gal)制成亚急性衰老模型 ,并观察药物对学习记忆能力的影响 ;通过免疫组化和计算机图象分析研究药物对致衰大鼠海马内突触素含量的影响。结果　何首乌可使致衰大鼠Y 迷宫分辨学习的正确次数明显增加 ,明暗箱被动回避反应的步入潜伏期也显著延长。何首乌可使致衰大鼠海马内突触素免疫反应产物的校正光密度值 (COD)显著高于D gal模型组。结论　何首乌能改善D gal致衰大鼠学习记忆能力及提高海马内突触素的含量。     

穴位埋线与VD模型大鼠记忆障碍及海马Caspase-3表达的关系

目的 探讨穴位埋线对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆的影响及可能的机制.方法 改良Pulsinelli′s四血管阻断法建立VD大鼠模型.造模后给予穴位埋线治疗,用水迷宫检测学习记忆能力,免疫组化观察海马caspase-3的表达.结果 穴位埋线后VD大鼠学习记忆能力明显提高;海马caspase-3在模型组中的表达明显比对照组多,而在埋线组的表达比模型组少.结论 穴位埋线改善VD大鼠的学习记忆能力,可能与其减少海马caspase-3的表达、抑制神经细胞的凋亡有关.