人参皂苷对波动性高糖大鼠心肌损伤标志物的影响

目的:观察人参皂苷对波动性高糖大鼠氧化应激水平及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肾脏及主动脉组织表达的影响。方法:将48只雄性SD大鼠随机分成正常对照组8只(N组)和糖尿病模型组40只。用高脂饲料喂养模型组大鼠4周,予小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,将其随机分为稳定高糖组(S组)8只和波动性高糖模型组32只,错时注射葡萄糖、胰岛素制备血糖波动模型。2周后,将波动性高糖模型组随机分为人参皂苷低(FL组)、中(FM组)、高剂量组(FH组)及波动性高糖组(FO组),各8只,人参皂苷低、中、高各剂量组予相应剂量[14 mg(kg·d)、28 mg/(kg·d)、56 mg/(kg·d)]的人参皂苷灌胃8周,波动性高糖组(FO组)给予等量的生理盐水灌胃。测定大鼠血清活性氧(ROS)浓度,取肾脏及主动脉组织,观察其病理变化,并测定MCP-1和TNF-α在大鼠肾脏及主动脉组织的表达情况。结果:与正常对照组(N组)比较,稳定高糖组(S组)及波动性高糖组(FO组)各时间点血糖水平明显增高;血清ROS浓度均明显增加;血管和肾脏组织MCP-1和TNF-α的表达均增多(P<0.05)。与稳定高糖组(S组)比较,波动性高糖组(FO组)各时间点的血糖水平变化较大(P<0.05),其在1天内有2个明显的血糖波动高峰和低谷;血清ROS浓度明显增加;血管和肾脏组织MCP-1和TNF-α表达增多(P<0.05)。与波动性高糖组(FO组)比较,人参皂苷低(FL组)、中(FM组)、高剂量组(FH组)血清ROS浓度均明显下降,血管和肾脏组织组MCP-1和TNF-α表达均明显下降(P<0.05)。人参皂苷低剂量组(FL组)、中剂量组(FM组)、高剂量组(FH组)组间比较,人参皂苷浓度越高,血清ROS浓度、MCP-1和TNF-α的表达越低(P<0.05)。结论:人参皂苷可以下调氧化应激,抑制MCP-1和TNF-α的过表达对血管组织的损伤,对波动性高糖所致血管病变有一定的保护作用。     

人参皂苷对波动性高糖大鼠MCP-1和TNF-α表达的影响

目的:观察人参皂苷对波动性高糖大鼠氧化应激水平及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在大鼠肾脏及主动脉组织表达的影响。方法:将48只雄性SD大鼠随机分成正常对照组8只(N组)和糖尿病模型组40只。用高脂饲料喂养模型组大鼠4周,予小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,将其随机分为稳定高糖组(S组)8只和波动性高糖模型组32只,错时注射葡萄糖、胰岛素制备血糖波动模型。2周后,将波动性高糖模型组随机分为人参皂苷低(FL组)、中(FM组)、高剂量组(FH组)及波动性高糖组(FO组),各8只,人参皂苷低、中、高各剂量组予相应剂量[14 mg(kg·d)、28 mg/(kg·d)、56 mg/(kg·d)]的人参皂苷灌胃8周,波动性高糖组(FO组)给予等量的生理盐水灌胃。测定大鼠血清活性氧(ROS)浓度,取肾脏及主动脉组织,观察其病理变化,并测定MCP-1和TNF-α在大鼠肾脏及主动脉组织的表达情况。结果:与正常对照组(N组)比较,稳定高糖组(S组)及波动性高糖组(FO组)各时间点血糖水平明显增高;血清ROS浓度均明显增加;血管和肾脏组织MCP-1和TNF-α的表达均增多(P0.05)。与稳定高糖组(S组)比较,波动性高糖组(FO组)各时间点的血糖水平变化较大(P0.05),其在1天内有2个明显的血糖波动高峰和低谷;血清ROS浓度明显增加;血管和肾脏组织MCP-1和TNF-α表达增多(P0.05)。与波动性高糖组(FO组)比较,人参皂苷低(FL组)、中(FM组)、高剂量组(FH组)血清ROS浓度均明显下降,血管和肾脏组织组MCP-1和TNF-α表达均明显下降(P0.05)。人参皂苷低剂量组(FL组)、中剂量组(FM组)、高剂量组(FH组)组间比较,人参皂苷浓度越高,血清ROS浓度、MCP-1和TNF-α的表达越低(P0.05)。结论:人参皂苷可以下调氧化应激,抑制MCP-1和TNF-α的过表达对血管组织的损伤,对波动性高糖所致血管病变有一定的保护作用。     

人参皂苷对波动性高糖大鼠氧化应激及血管病变的影响

目的观察人参皂苷对波动性高糖大鼠氧化应激及血管病变的影响。方法将48只雄性SD大鼠随机分成正常对照组8例和糖尿病模型组40例。高脂饲料喂养糖尿病模型组大鼠2周后用小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导建立糖尿病大鼠模型,之后随机分为稳定高糖组(n=8)和波动性高糖组(n=32),波动性高糖组错时注射葡萄糖、胰岛素制备血糖波动大鼠模型。2周后,将波动性高糖组随机分为中药低剂量组[人参皂苷14 mg/(kg·d)],中药中剂量组[人参皂苷28 mg/(kg·d)],中药高剂量组[人参皂苷56 mg/(kg·d)]及波动性高糖模型组。实验结束后测定大鼠血清一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)浓度并取肾脏及主动脉组织并做常规病理。结果 1)与正常对照组相比,稳定高糖组及波动性高糖模型组血清NO、NOS、GSH-Px浓度均明显增加(P0.05);与稳定高糖组比较,波动性高糖模型组NO、NOS、GSH-Px浓度明显增加(P0.05);与波动性高糖模型相比,中药各剂量组NO、NOS浓度均有明显下降,GSH-Px浓度均有明显上升(P0.05);与中药低剂量组相比,中药中、高剂量组有降低NO、NOS浓度,升高GSH-Px浓度的趋势(P0.05);与中药中剂量组相比,中药高剂量组有降低NO、NOS浓度,升高GSH-Px浓度的趋势(P0.05)。2)与正常对照组相比,稳定高糖组及波动性高糖模型组主动脉内皮细胞出现一定程度的紊乱与损伤,肾小球体积不同程度的增大变形。结论人参皂苷可降低波动性高血糖大鼠NO、NOS水平,升高GSH-Px水平,减轻血管病变情况,因此,人参皂苷可能降低波动性高血糖大鼠机体的氧化应激水平,提高抗氧化的能力,对波动性高血糖所导致的血管病变有一定的保护作用。     

天香丹对冠脉微循环障碍大鼠Nrf2/ARE信号通路表达的影响

目的探究天香丹对冠脉微循环障碍大鼠核转录因子 NF-E2 相关因子 2 /抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）信号通路相关因子mRNA及蛋白表达的影响。方法36只SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、尼可地尔组、天香丹组，每组9只。除空白对照组外，其余大鼠开胸后左心室内注射月桂酸钠建立冠脉微循环障碍大鼠模型。各组大鼠分别给予天香丹［0.9408 （大鼠体重）2/3g/d］、尼可地尔［0.7840 （大鼠体重）2/3mg/d］、生理盐水灌胃28天，每只大鼠给药体积均为2 mL/d。HE染色观察大鼠心肌形态学变化，RT-PCR及Western Blot 法观察各组大鼠心肌中Nrf2/ARE信号通路核转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）、醌氧化还原酶1（NQO1）、氧化氢酶（CAT）、血红素加氧酶-1（HO-1）mRNA及蛋白的表达变化。结果HE染色显示天香丹可减轻冠脉微循环障碍大鼠微血栓程度。与空白对照组比较，模型组大鼠 Nrf2、NQO1、CAT mRNA 表达降低（P<0.05），Keap1 mRNA及蛋白表达均降低（P<0.05）；与模型组比较，尼可地尔组Nrf2 mRNA及蛋白表达量明显升高（P<0.05），CAT mRNA表达升高（P<0.05），HO-1 mRNA表达降低（P<0.05）；天香丹组Nrf2、NQO1、CAT、HO-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05），Keap1 mRNA表达升高（P<0.05）；与尼可地尔组比较，天香丹组Nrf2、Keap1、NQO1、CAT、HO-1 mRNA表达升高（P<0.05），CAT蛋白表达升高（P<0.05）。结论天香丹改善冠脉微循环障碍机制可能与调控Nrf2/ARE信号通路有关。     

中药复方糖肾安对实验性2型糖尿病大鼠肾脏ROS水平及Nrf2、HO-1表达的影响

目的探讨中药复方糖肾安对实验性2型糖尿病大鼠肾脏ROS水平、Nrf2、HO-1表达的影响。方法70只健康SD大鼠随机分为正常组(n=10)和造模组(n=60)。造模组大鼠高糖高脂饮食4周后一次性腹腔注射STZ(35 mg/kg)建立2型糖尿病大鼠模型,将成模的大鼠随机分为模型组、糖肾安低、中、高剂量组、西药组。药物治疗8周后,用流式细胞仪检测ROS水平,用定量RT-PCR、Western blot检测Nrf2、HO-1表达情况。结果各治疗组ROS水平均高于正常组(P0.01),糖肾安组ROS水平均明显低于模型组(P0.01)。各治疗组Nrf2、HO-1表达均低于正常组(P0.01),糖肾安中、高剂量组的表达较高,高于模型组(P0.01)。结论中药复方糖肾安可能通过激活抗氧化应激Nrf2/ARE通路,诱导糖尿病大鼠肾脏Nrf2、HO-1的表达,降低ROS水平,改善肾脏炎症反应,从而起到肾脏保护作用。     

糖肾安对高糖环境下人肾系膜细胞Nrf2/ARE通路的影响

目的:探讨糖肾安对肾脏的保护作用是否与激活核转录因子NF-E2相关因子(neclear factorerythroid 2-related factor 2,Nrf2)/抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)通路,发挥抗氧化应激作用,减轻炎症反应有关。方法:健康雄性Wistar大鼠随机分6组,正常组、模型组、糖肾安低、中、高剂量组、厄贝沙坦组,制备含药血清;将正常组含药血清加入正常糖浓度培养的肾系膜细胞中培养,其他5组加到高糖培养的肾系膜细胞中培养;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Nrf2和谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteinesynthetase,γ-GCS)的mRNA及蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-1,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α)的含量。结果:与模型组比较,各给药组Nrf2,γ-GCS mRNA及蛋白表达显著上调(P0.01),IL-6和TNF-α的含量下降(P0.01)。结论:糖肾安能通过激活Nrf2/ARE通路,发挥抗氧化应激作用,减轻炎症反应,最终实现肾脏保护作用。     

异甘草酸镁对肝纤维化大鼠Nrf2-ARE途径相关指标的影响研究

目的观察异甘草酸镁对肝纤维化大鼠Nrf2-ARE途径相关指标的影响,探讨其抗纤维化的机制。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和异甘草酸镁组,每组16只。模型组和异甘草酸镁组采用四氯化碳建立肝纤维化模型,造模成功后,继续给予四氯化碳皮下注射,每2周1次,异甘草酸镁组同时给予异甘草酸镁30 mg/kg腹腔注射,每日1次,共8周。末次注射24 h后分别采用实时定量PCR、免疫印迹和免疫组织化学技术检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及其抗氧化反应元件(ARE)诱导Ⅱ相解毒酶血红素加氧酶-1(HO-1)和NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)的表达情况。结果模型组大鼠肝组织中Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白表达水平均明显低于正常组(P均<0.05),异甘草酸镁组Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA和蛋白表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),但仍低于正常组(P均<0.05)。结论异甘草酸镁组可通过激活Nrf2-ARE途径起到抗肝纤维化的作用。     

糖络宁对糖尿病周围神经病变大鼠Nrf2/ARE通路的影响

目的探讨糖络宁对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠Nrf2/ARE通路相关蛋白的影响。方法将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和链脲佐菌素(STZ)组,STZ组大鼠一次性腹腔注射60 mg/kg STZ,造模1周后,将空腹血糖浓度≥16.7 mmol/L的大鼠稳定1个月后,随机分为模型对照组、α-硫辛酸组、糖络宁低剂量组和糖络宁高剂量组,并给予相应药物12周。麻醉取大鼠坐骨神经,采用免疫组织化学方法检测大鼠坐骨神经Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1),核转录因子NF-E2相关因子(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、及谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的表达。结果与空白对照组比较,模型对照组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱,脱髓鞘严重,坐骨神经中Keap1、Nrf2、HO-1和γ-GCS的表达增加,差异有统计学意义(P0.05);与模型对照组比较,糖络宁低、高剂量组大鼠坐骨神经髓神经纤维排列紊乱和脱髓鞘现象得到改善,其中糖络宁低剂量组Keap1、Nrf2表达增加,糖络宁高剂量组HO-1、γ-GCS表达增加,差异均有统计学意义(P0.05)。结论糖络宁能够改善DPN大鼠坐骨神经的病理状态,上调Nrf2/ARE信号通路中Keap1、Nrf2、HO-1及γ-GCS的表达,增强机体抗氧化应激的能力。     

温肾醒脑方对血管性痴呆大鼠认知功能的影响及机制研究

目的:研究温肾醒脑方对血管性痴呆(Vascular dementia,VD)大鼠认知功能的改善作用及对Nrf2、Keap1相关信号通路的影响。方法:70只雄性SD大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组、脑复康组(0.15 g/kg)、温肾醒脑方给药组(高剂量组5 g/kg、中剂量组2.5 g/kg、低剂量组1.25 g/kg),每组10只动物。采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD模型。给予温肾醒脑方灌胃治疗后,Morris水迷宫测试治疗后VD大鼠认知功能的改善情况。检测脑组织中SOD、MDA、GSH-Px、NOS,HE染色观察脑海马组织的病理变化情况,RT-PCR大鼠脑组织NQO1、HO-1的mRNA水平和Western Blot检测Keap1、Nrf2、NQO1、HO-1蛋白水平的表达情况以及EMSA检测Nrf2与ARE结合力。结果:与正常组比较,VD模型组大鼠逃避潜伏期明显较长,游泳总距离明显缩短,穿越站台总数明显减少(P0.01);大脑组织中MDA含量显著增加,SOD、GSH-Px和NOS的含量明显减少(P0.01);大脑组织结构明显受损伤,细胞形态改变,细胞核固缩,核仁不清晰;同时大脑组织中细胞核Nrf2蛋白表达降低、细胞质中Keap1蛋白表达增加,NQO1、HO-1 mRNA和蛋白表达降低(P0.01)。与VD模型组比较,脑复康和温肾醒脑方组大鼠的认知行为得到很大的提高,脑组织MDA、SOD、GSH-Px、NOS含量和脑组织病理结构得到很好的改善,Nrf2、Keap1、NQO1、HO-1在mRNA水平或蛋白水平上有一定程度改变,特别是温肾醒脑方组大鼠的改善非常显著。结论:温肾醒脑方可以改善VD大鼠的认知行为,其机制可能与Nrf2-Keap1-NQO1/HO-1抗氧化应激信号通路相关。     

参苓白术散对NAFLD大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响

目的观察参苓白术散对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路相关蛋白表达的影响。方法取SD大鼠32只,随机分为正常组,模型组,参苓白术散高、低剂量组(30,10 g·kg-1),每组8只。采用高脂饲料喂养16周,建立NAFLD大鼠模型,给药组大鼠同时灌服参苓白术散浸膏剂进行干预,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)含量;油红O染色观察肝组织脂质蓄积程度;Western Blotting法检测肝组织Nrf2/ARE信号通路相关蛋白(Nrf2)、醌氧化还原酶(NQO1)和血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白的表达水平。结果模型组大鼠肝组织油红O染色结果表明肝组织脂质蓄积严重,提示高脂饲料诱导的NAFLD大鼠模型建立成功。与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、AST水平显著升高(P0.01),HDL-C水平显著降低(P0.01);肝组织Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组大鼠肝组织脂质蓄积程度明显改善,两组血清TC、TG、LDL-C含量及AST水平均呈不同程度下降,血清HDL-C及肝组织Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达水平呈不同程度升高(P0.05,P0.01),其中参苓白术散高剂量组变化更为显著。结论参苓白术散能够改善高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏脂肪代谢紊乱,减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与其激活Nrf2/ARE信号通路有关。     

黄芪注射液对糖尿病大鼠肾脏BMP-7和CTGF表达的影响

目的观察黄芪注射液对糖尿病大鼠肾脏骨形成蛋白7(BMP-7)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法高脂高糖饲料喂养6周并注射STZ建立大鼠糖尿病模型,将成模的大鼠随机分为模型组和黄芪治疗组,并设正常对照组。各组大鼠干预8周。检测血糖(BG),计算肾质量/体质量(KI),放射免疫法检测24 h尿蛋白排泄率(UAER),全自动生化分析仪检测血总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG),免疫组化法测定大鼠肾脏BMP-7和CT-GF蛋白表达情况,实时荧光定量PCR法检测大鼠肾脏BMP-7和CTGF mRNA表达情况。结果与正常对照组相比,模型组KI、BG、TC、TG、UAER显著增高,肾组织BMP-7蛋白和mRNA表达均明显下降,CTGF蛋白和mRNA表达均明显升高;与模型组比较,黄芪治疗组TC、TG、KI及24 h UAER显著降低,肾组织BMP-7蛋白及mRNA表达升高,而CTGF蛋白及mRNA表达明显下调。结论黄芪注射液对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与恢复肾组织BMP-7表达,降低肾组织CTGF过度表达有关。     

克癃胶囊对前列腺增生大鼠模型及Nrf2/ARE信号通路的影响

目的:探讨克癃胶囊对丙酸睾酮诱导的大鼠前列腺增生模型的影响及抗氧化作用机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,克癃胶囊低、高剂量组(3.6,7.2 g·kg-1),核因子E2相关因子2(Nrf2)干预剂组,每组8只。除正常组外,其余各组均皮下注射丙酸睾酮建立前列腺增生的大鼠模型,同时给予药物灌服,连续4周。观察不同药物对前列腺湿重、前列腺指数的影响,苏木素-伊红(HE)观察病理组织形态变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清样品中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测前列腺组织中Nrf2/ARE信号通路抗氧化因子Nrf2,血细素单加氧酶-1(HO-1),醌氧化还原酶1(NQO1)mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的前列腺湿重及前列腺指数升高,前列腺上皮皱褶增生,大鼠血清GSH含量明显降低,Nrf2,HO-1和NQO1 mRNA表达明显降低(P0.05,P0.01)。与模型组比较,克癃胶囊明显降低前列腺指数,改善前列腺上皮组织的增生,促进大鼠血清GSH的含量增加(P0.01);克癃胶囊能上调Nrf2,HO-1和NQO1的mRNA表达水平(P0.05,P0.01)。结论:克癃胶囊能明显抑制大鼠的前列腺增生,低剂量的克癃胶囊可激活Nrf2/ARE信号通路,提高机体抗氧化能力。     

苓桂术甘汤与茵陈蒿汤合方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠Nrf2/ARE信号通路的影响

目的:从氧化应激的角度,观察苓桂术甘汤与茵陈蒿汤合方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的干预效应,并通过Nrf2/ARE信号通路探讨合方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的作用机制。方法:将SPF级SD大鼠随机分为正常组,模型组,合方组(6.93 g·kg~(-1)),苓桂术甘汤组(3.465 g·kg~(-1)),茵陈蒿汤组(3.465 g·kg~(-1)),莱菔硫烷组(0.5 mg·kg~(-1)),采用高脂饲料法建立NASH模型;高脂饲料饲养8周并同时给药,取材检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)以及血脂总胆固醇(total cholesterol,TC),甘油三酯(triglyceride,TG),高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein,HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein,LDL-C)水平,取部分肝组织进行苏木素-伊红(HE)染色,蛋白质免疫印迹(Western blot)与逆转录PCR(RT-PCR)法测定肝脏细胞质接头蛋白1(Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1),核因子E2-关联因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2),醌氧化还原酶1(quinone oxidoreductase-1,NQO1),血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白与mRNA表达水平。结果:给药后,与正常组比较,模型组大鼠血脂TC,TG,HDL-C,LDL-C及血清ALT,AST水平升高,肝脏脂肪变明显,肝脏Keap1表达量降低,Nrf2,NQO1,HO-1蛋白与mRNA表达量升高(P0.05);与模型组比较,各给药组血脂TC,TG,HDL-C,LDL-C及血清ALT,AST水平有不同程度降低,肝脏病理学也有不同程度改善,除茵陈蒿汤组变化不明显外,各给药组大鼠肝脏Nrf2,NQO1,HO-1蛋白与mRNA表达量均有不同程度升高(P0.05,P0.01);但对于Keap1的表达无明显作用。结论:苓桂术甘汤以及合方可能通过激活Nrf2/ARE信号通路,从而达到改善氧化应激,防治非酒精性脂肪性肝炎的目的。     

中药复方糖肾安对实验性2型糖尿病大鼠肾组织Nrf2/ARE通路的影响

目的探讨中药复方糖肾安对实验性2型糖尿病大鼠肾组织核因子NFE2相关因子(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)通路的影响。方法将50只健康雄性SD大鼠随机分为正常组8只和造模组42只,造模组高脂高糖喂养,4周后按35 mg/kg一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病模型。将成模大鼠随机分为模型组、糖肾安低剂量组、糖肾安中剂量组、糖肾安高剂量组及西药组。各给药组给予相应的剂量药物灌胃,8周后收集所有大鼠肾脏标本。采用免疫组化技术检测大鼠肾组织中Nrf2、血红素加氧酶(HO-1)表达情况,Western blot、RT-PCR技术检测大鼠肾组织中核因子κBp65(NF-κBp65)表达情况,ELISA法检测大鼠肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果模型组大鼠肾组织中Nrf2、HO-1、NF-κBp65表达水平均明显高于正常组(P均0.05),而SOD活性明显弱于正常组(P0.05);糖肾安中剂量组、糖肾安高剂量组及西药组大鼠肾组织中Nrf2、HO-1表达水平及SOD活性均明显高于模型组(P均0.05),而各给药组大鼠肾组织中NF-κBp65表达水平均明显低于模型组(P均0.05)。结论中药复方糖肾安可激活糖尿病大鼠肾脏Nrf2/ARE通路,抑制NF-κBp65活化,增强抗氧化酶活性,减轻糖尿病大鼠肾脏氧化应激及炎症反应,从而发挥肾脏保护作用。     

敦煌医方瞿麦汤对肾草酸钙结石大鼠核转录因子2-NAD(P)H醌氧化还原酶1通路的影响

目的:研究探讨敦煌医方瞿麦汤对肾草酸钙结石模型鼠Nrf2-NQO1通路的影响。方法:SD雄性大鼠60只按随机数字表法分为空白对照组(等体积蒸馏水)、模型组(等体积蒸馏水)、肾石通颗粒组(5 g/kg·d),敦煌医方瞿麦汤高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg)每组各10只。大鼠肾草酸钙结石模型的制备采用1%乙二醇+2%氯化铵的溶液联合灌胃法,造模5 h后给予相应药物干预,持续4周。末次给药24 h后,检测各组大鼠的体质量、肾指数、血清钙(calcium,Ca~(2+))、磷(phosphorus,P)含量、肾组织SOD活性、MDA含量、Nrf2 mRNA和QNO1mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠肾指数、血清Ca~(2+)含量、肾组织MDA的含量均增加,其体质量、肾组织SOD活性、Nrf2mRNA和NQO1mRNA的表达均下降;与模型组比较,敦煌医方瞿麦汤各干预组肾指数、血清Ca~(2+)含量均下降,体质量和肾组织SOD活性均升高,MDA含量均下降;敦煌医方瞿麦汤中、高剂量组肾组织Nrf2 mRNA和NQO1mRNA表达均升高。结论:敦煌医方瞿麦汤可通过上调Nrf2-NQO1通路相关因子表达,抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。     

基于Nrf2/HO-1通路探讨黄芪甲苷对顺铂诱导的急性肾损伤的保护作用

目的:探讨黄芪甲苷对核转录因子NF-E2相关因子2 (Nrf2)/血红素氧合酶-1 (HO-1)通路的调控作用及对顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)的保护作用。方法:将大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组5组,每组10只。除对照组外,其余各组用顺铂按7 mg/kg的剂量单次腹腔注射建立AKI模型。黄芪甲苷低、中、高剂量组分别按5、10、20 mg/kg的剂量给予黄芪甲苷注射液,模型组和对照组给予生理盐水。用HE染色观察肾脏组织病理学改变;测定血清中肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)含量;测定肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量;分别用蛋白质印迹法(Western blot)、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Nrf2和HO-1蛋白及mRNA表达水平。结果:与对照组比较,模型组大鼠肾脏组织病理病变明显,可见肾小管坏死和退行性改变;与模型组比较,黄芪甲苷低、中、高组大鼠肾脏组织病理病变程度减轻,其中黄芪甲苷高剂量组最为明显。与对照组比较,模型组血清中SCr和BUN含量显著升高(P0.05),肾组织中GSH-Px、SOD活性显著降低(P0.05),MDA含量显著升高(P0.05),Nrf2和HO-1相对蛋白表达和mRNA水平显著降低(P0.05);与模型组比较,黄芪甲苷低、中、高剂量组血清中SCr和BUN含量显著降低(P0.05),肾组织中GSH-Px、SOD活性显著升高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05),Nrf2和HO-1相对蛋白表达和mRNA水平显著升高(P0.05);与黄芪甲苷低剂量组比较,黄芪甲苷高剂量组血清中SCr和BUN含量显著降低(P0.05),Nrf2和HO-1相对蛋白表达水平显著升高(P0.05)。结论:黄芪甲苷可通过调控Nrf2/HO-1通路对顺铂诱导的AKI大鼠肾脏组织起显著的保护作用。     

商陆皂苷甲对水负荷大鼠肾脏AQP2及AQP4表达的影响北大核心CSCD

目的:观察商陆皂苷甲对水负荷大鼠肾脏水通道蛋白2(AQP2)及水通道蛋白4(AQP4)表达的调节作用,研究商陆皂苷甲利尿作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、氢氯噻嗪组及商陆皂苷甲高、中、低剂量组,腹腔注射给药,氢氯噻嗪组给予氢氯噻嗪0.4 mg/kg,商陆皂苷甲高、中、低剂量组分别给5.2、2.6、1.3 mg/kg商陆皂苷甲,收集并测量给药后6 h内的尿量;水负荷实验结束后将大鼠麻醉处死,运用免疫组化及Real Time-PCR技术检测大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达的变化。结果:与空白对照组比较,商陆皂苷甲高剂量组大鼠尿量显著增多,肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA的表达显著下调(P<0.05);商陆皂苷甲中、低剂量组尿量及肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达差异无统计学意义。结论:商陆皂苷甲通过下调大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达,使水分重吸收降低,可能是其利尿作用的机制之一。     

苦瓜总皂苷对环磷酰胺所致卵巢损伤大鼠卵巢组织Nrf2表达的影响

目的:观察苦瓜总皂苷对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)所致大鼠卵巢损伤的作用。方法:60只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、苦瓜总皂苷低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)和高(40mg/kg)剂量组以及阳性药物逍遥丸(20 mg/kg)干预组,每组10只。大鼠腹腔注射CTX(162 mg/kg)造模成功后,各组给予相应剂量药物灌胃,连续给药6周。处死大鼠,观察卵巢组织病理学变化,测定血清和卵巢组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot、半定量PCR测定卵巢细胞核转录因子Nrf2(nuclear factor erythroidrelated factor 2,Nrf2)蛋白和mRNA的表达。结果:病理学HE染色可见正常组卵泡丰富,皮髓质结构清晰;模型组有明显卵泡闭锁,同时皮质结构破坏,苦瓜总皂苷3剂量组和逍遥丸组相较于模型组病理改变有明显的改善。与正常组相比,模型组血清和卵巢组织MDA含量明显增加(P0.05),CAT和SOD活性明显降低(P0.05);苦瓜总皂苷各剂量血清和卵巢组织MDA含量明显下降(P0.05),CAT和SOD活性明显升高(P0.05);且高剂量组效果优于逍遥丸组(P0.05)。与正常对照组相比,模型组大鼠卵巢细胞Nrf2蛋白及mRNA表达明显增加,而苦瓜总皂苷3剂量组和逍遥丸组Nrf2表达显著增强(P0.05);苦瓜总皂苷高剂量优于逍遥丸组(P0.05)。结论:苦瓜总皂苷对环磷酰胺诱导的卵巢组织损伤具有一定的保护作用,与其可增强Nrf2表达及提高抗氧化活性。     

黄芪甲苷、人参皂苷Rg1对慢性萎缩性胃炎大鼠Hedgehog信号通路的调控影响

目的探讨黄芪甲苷、人参皂苷Rg1对慢性萎缩性胃炎大鼠Hedgehog信号通路的影响。方法雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、人参皂苷Rg1低剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷高剂量组、Purmorphamine组及叶酸组,运用幽门弹簧法制备萎缩性胃炎模型。应用HE染色评价胃黏膜病理损伤,应用Western Blot、RT-PCR和量子点介导的免疫荧光化学法分别检测各组大鼠胃组织Hedgehog信号通路的蛋白和基因表达水平。结果与空白组相比,模型组大鼠Shh、Ptch、Gli-1基因及蛋白含量均显著降低(P0.05),SUFU蛋白表达明显升高(P0.01),Cyclin D1表达减弱(P0.01)。与模型组相比,人参皂苷Rg1低剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组及叶酸组Shh蛋白表达明显升高(P0.05),各给药组均能显著升高Ptch蛋白含量(P0.05)。人参皂苷Rg1高剂量组、Purmorphamine组Gli-1蛋白表达明显升高(P0.05),黄芪甲苷高剂量组、人参皂苷Rg1高剂量组和Purmorphamine组SUFU蛋白表达明显减弱(P0.05)。黄芪甲苷高剂量组和Purmorphamine组Cyclin D1蛋白表达增强(P0.05)。结论黄芪甲苷、人参皂苷Rg1对Hedgehog信号通路关键因子有一定的激活作用,进而改善慢性萎缩性胃炎大鼠的胃黏膜病变。     

当归补血汤对高糖条件下系膜细胞Nrf2表达及T-SOD、MDA的影响

目的研究当归补血汤对高糖条件下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)核因子相关因子2(Nrf2)表达及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的影响,探讨其在糖尿病肾病(DN)治疗中的作用机制。方法将60只大鼠分为正常组、高糖组、当归补血汤高剂量组[7 g/(kg·d)]、当归补血汤中剂量组[3.5 g/(kg·d)]、当归补血汤低剂量组[1.75 g/(kg·d)]、格列奇特组[(2 mg/kg·d)],每组10只。应用RT-PCR法检测各组GMCs的Nrf2 mRNA表达情况,Western blot法检测各组GMCs的Nrf2蛋白表达情况,应用黄嘌呤氧化酶法检测各组GMCs培养上清液的T-SOD活性,应用硫代巴比妥酸法检测各组GMCs培养上清液的MDA含量。结果正常组Nrf2 mRNA和蛋白有一定量的表达,高糖组和正常组相比Nrf2 mRNA和蛋白表达均增加,当归补血汤高剂量组对高糖条件下系膜细胞Nrf2 mRNA和蛋白表达均有明显上调作用(P均0.01);与正常组相比,高糖组T-SOD活性明显降低(P0.01),MDA含量明显增多(P0.01),而当归补血汤各剂量组能提高T-SOD的活性,抑制高糖条件下MDA的过多生成,尤其以高剂量组最为明显(P0.01)。结论当归补血汤能上调高糖条件下系膜细胞Nrf2的表达,提高T-SOD的活性,抑制MDA的过多生成,从而抵抗高糖诱导的氧化应激反应,保护系膜细胞。