氨基胍与Baicalein对糖尿病大鼠脑微血管重塑的影响

目的观察氨基胍(AG)、Baicalein对糖尿病(DM)大鼠脑组织微血管重塑的影响并探讨其机制。方法将48只SD大鼠随机分为AG组、Baicalein组、DM组、对照组,每组12只,对照组给予普通饮食喂养;AG组、Baicalein组、DM组采用高脂高糖饮食联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素的方法建立DM大鼠模型,造模成功后,AG组、Baicalein组分别给予AG、Baicalein溶液灌胃,剂量均为150 mg·kg-1·d-1,DM组、对照组给予等量生理盐水灌胃,16 w后,透射电镜下观察各组大鼠脑微血管及血管周围的结构变化,免疫组织化学法检测各组大鼠脑组织CD34蛋白的表达,计数有CD34表达的微血管数。结果 (1)透射电镜下观察,对照组脑微血管基底膜及周围组织结构正常,DM组血管管腔狭窄、变形,血管周围可见大量的水肿液,基底膜结构不清晰,AG组、Baricalein组均有类似DM的病理改变,但其程度较DM组减轻。(2)CD34微血管计数表达:AG组、Baicalein组、DM组与对照组相比,CD34表达的微血管数据均明显减少(P<0.01);AG组、Baicalein组与DM组比较,CD34表达的微血管计数明显增多(P<0.01),AG组与Baicalein组比较,CD34表达的微血管数无统计学差异(P>0.05)。结论 DM大鼠有微血管重塑;AG与Baicalein可抑制脑微血管重塑,因此具有保护脑血管的作用。     

桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α和腺苷酸活化蛋白激酶α2蛋白表达的影响

目的探讨桑叶总黄酮对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α2蛋白表达的影响及机制。方法建立高脂饲料喂养且用链脲佐菌素诱导T2DM雄性Wistar大鼠模型,将模型大鼠随机分为5组:模型组、二甲双胍组(100 mg/kg灌胃)、桑叶总黄酮组(200,100,50 mg/kg灌胃),同时设立正常对照组。4 w后检测大鼠空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)水平,Western印迹检测肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达。结果桑叶总黄酮能降低T2DM大鼠的FPG、FINS水平,Western印迹显示模型组大鼠肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达较正常对照组均明显下降(P<0.01)。经桑叶总黄酮干预治疗后,AMPKα2蛋白表达较模型组显著增加(P<0.01),PPARα蛋白水平改变不明显(P>0.05)。结论桑叶总黄酮对T2DM大鼠有一定的治疗作用,可能与其增加大鼠肝脏AMPKα2蛋白表达有关。     

二甲双胍对2型糖尿病大鼠胆固醇代谢途径的影响

目的探讨二甲双胍对2型糖尿病大鼠胆固醇代谢相关基因SREBP-2,HMGR,LDLR,CYPA7a1的影响及其作用机制。方法 60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(CON),2型糖尿病组(DM),二甲双胍治疗糖尿病组(DM+MET)。CON组给予标准饮食,DM组及DM+MET组高脂饮食8 w给予小剂量STZ腹腔注射,建立2型糖尿病模型。造模成功后,DM+MET组给予二甲双胍灌胃治疗(500 mg·kg-1·d-1)。12 w后检测各组大鼠FPG、FINS、TG、TC、LDL-C、HDL-C、TBA等血清生化学指标。HE染色观察各组大鼠肝脏形态变化。荧光实时定量PCR技术检测各组大鼠肝脏SREBP-2、HMGR、LDLR、CYP7a1 mRNA表达水平。结果 DM组与CON组比较FPG、FINS、TG、TC、LDL-C、TBAs表达升高(均P<0.05)。HE染色肝脏脂质沉积,脂肪空泡明显增多。CYP7a1 mRNA表达升高(P<0.05),SREBP-2、HMGR、LDLR mRNA表达降低(均P<0.05);DM+MET组与DM组比较FPG、FINS、TG、TC、LDL-C、TBAs表达降低(均P<0.05)。HE染色肝脏脂肪空泡明显减少。SREBP-2、HMGR、LDLR、CYP7a1 mRNA表达升高(P<0.001)。结论二甲双胍使糖尿病大鼠肝脏组织SREBP-2 mRNA及下游基因HMGR、LDLR表达上调,促进胆固醇合成和吸收,另一方面,二甲双胍可使CYP7a1 mRNA表达上调,促进胆固醇转变为胆汁酸,加速胆固醇降解,二甲双胍通过协调胆固醇的合成途径和转化途径促进胆固醇代谢,进而降低2型糖尿病大鼠血浆胆固醇水平。     

青海昆仑雪菊对糖尿病大鼠血糖的影响及可能机制

目的研究青海昆仑雪菊对糖尿病(DM)大鼠血糖的影响,初步探讨其降血糖作用机制。方法采用高脂饲料喂养加链脲佐菌素(STZ)注射的方法建立2型糖尿病(T2DM)模型大鼠,以血糖≥16.7 mmol/L界定造模是否成功,将造模成功的大鼠随机分为DM组、二甲双胍组、雪菊水提组、甲醇组及乙醇组,另设对照组。分别用二甲双胍片溶液、青海昆仑雪菊水、甲醇、乙醇提取液对大鼠连续灌胃4 w,DM组、对照组用生理盐水灌胃。每周大鼠尾尖测血糖,4 w后腹主动脉取血检测血清谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、胰岛素(INS)及C肽(C-P)水平。结果青海昆仑雪菊能显著降低T2DM模型大鼠血糖水平(P<0.01),甲醇、乙醇提取液降糖效应优于水提液(P<0.05);青海昆仑雪菊能明显增加血清GSH、SOD、INS、CP水平(P<0.05),降低MDA水平(P<0.05)。结论青海昆仑雪菊对T2DM模型大鼠有较好的降血糖作用,其作用可能与雪菊中黄酮类成分改善胰岛β细胞氧化应激损伤,增加血清INS水平有关。     

老龄2型糖尿病大鼠胰腺微循环改变及其临床意义

目的通过观察老龄2型糖尿病(T2DM)大鼠胰腺体尾部血液灌注量的动态变化,探讨老龄T2DM大鼠胰腺微循环的改变及其临床意义。方法 120只健康Wistar老龄大鼠随机分为对照组和T2DM组。采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射方式,建立老龄T2DM大鼠模型,利用(LISCA)激光多普勒微循环血流图像仪(LDPI),于成模后0、4、8、12与16 w,分别观测各组老龄T2DM大鼠胰腺体尾部血液灌注量的变化。结果①对照组大鼠不同病程胰腺体尾部血液灌注量无明显变化(P>0.05)。②T2DM组大鼠0 w、4 w、8 w、12 w、16 w胰腺体尾部血液灌注量低于同时相对照组(P<0.05);且随病程延长,胰腺体尾部血液灌注量呈逐渐减少趋势(P<0.05)。结论老龄T2DM大鼠早期即出现胰腺体尾部血液灌注量减少,随着病程延长,胰腺体尾部血液灌注量呈逐渐减少趋势,老龄T2DM更早发生微循环障碍。     

绞股蓝皂苷对2型糖尿病并非酒精性脂肪性肝病大鼠脂联素和瘦素水平的影响

目的观察绞股蓝皂苷(GPS)对2型糖尿病(T2DM)并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血清瘦素(LP)、脂联素(APN)水平的影响。方法 65只SPF级雄性SD大鼠,体质量220²50 g,随机分为空白对照组(7只),NAFLD模型组(7只),T2DM并NAFLD模型组(51只)。空白对照组给予普通饲料喂养。模型组先给予高糖高脂饲料喂养4 w;隔夜空腹腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40 mg/kg,继续给予高糖高脂饲料喂养至8 w,建立T2DM并NAFLD大鼠模型;将大鼠模型分为GPS大剂量干预组(9只,JH组),给予GPS1 g·kg-1·d-1灌胃;GPS小剂量干预组(9只,JL组),给予GPS 0.5 g·kg-1·d-1灌胃;T2DM并NAFLD模型对照组(9只,M组),同等体积纯净水灌胃;继续给予高糖高脂饲料;治疗周期为6 w。实验周期14 w。放射免疫法测定血清LP水平。酶联免疫法测APN定水平。HE染色检测肝脏病理学。结果 JH组、JL组血清LP水平低于M组(P<0.01);JH组低于JL组(P<0.05)。JH组、JL组血清APN水平高于M组(P<0.01);JH组高于JL组(P<0.05)。肝脏病理学NM组、M组重度NAFLD,JH组、JL组中度至重度NAFLD。结论 GPS通过抑制T2DM并NAFLD大鼠通过抑制血清LP水平上升,血清APN水平的下降,达到抑制脂肪肝程度的作用,并有剂量依赖性。     

沙格列汀联合二甲双胍治疗维吾尔族老年2型糖尿病的疗效

目的观察单用二甲双胍血糖控制不佳的维吾尔族新诊断老年2型糖尿病(T2DM)患者加用沙格列汀的有效性。方法 160例单用二甲双胍12 w,血糖不达标的维族新诊断老年T2DM患者,随机分为沙格列汀组82例和阿卡波糖组78例,进行12 w的随访,对比空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清脂联素(APN)、稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、体重指数(BMI)等指标的变化。结果治疗12 w后,沙格列汀组与阿卡波糖组FBG、2 h PG和HbA1c水平较治疗前明显降低,且沙格列汀组均较阿卡波糖组下降幅度大(P<0.05),HbA1c达标率明显高于阿卡波糖组(P<0.05),沙格列汀组与阿卡波糖组HOMA-IR均较治疗前明显下降而APN水平明显升高(P<0.05),沙格列汀组HOMA-IR、APN的改善优于阿卡波糖组(P<0.05),两组治疗前后BMI水平无统计学差异(P>0.05)。结论沙格列汀与二甲双胍联用治疗维吾尔族新诊断的老年T2DM患者治疗效果好。     

补阳还五汤对2型糖尿病大鼠模型PPARα/γ表达的影响

目的 探讨补阳还五汤对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠PPARα/γ表达的影响.方法 SD大鼠100只,采用高脂高糖饲料喂养加腹腔小剂量注射链脲佐菌素,诱导T2DM大鼠模型,在此基础上采用疲劳游泳法复制气虚血瘀模型.随机分为:模型组20只、二甲双胍组20只、补阳还五汤组(中药组)20只、结合组18只,对照组18只,分别灌胃治疗.于第8周观察空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)等指标变化及PPARα/γ mRNA表达.结果 模型组大鼠FPG、FINS、TC、TG、LDL高于对照组(P<0.01);3个治疗组与模型组比较各项指标明显降低(P<0.05或P<0.01).模型组大鼠肝脏PPARα/γ mRNA的表达明显低于对照组(P<0.05),经治疗后3个治疗组PPARα/γ mRNA表达明显高于模型组,且以结合组最高(P<0.05).结论 补阳还五汤可降低T2DM模型大鼠血糖、血脂,使PPAR α/γ mRNA的表达上调,从而改善胰岛素抵抗.     

糖基化终产物对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2表达的调节

目的 观察糖基化终产物(AGEs)对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)表达的调节和意义.方法 诱导糖尿病模型后,立即给予干预组糖尿病大鼠氨基胍.第12周末检测尿白蛋白排泄率(UAER)、肾脏系膜外基质增生(MME),测定肾内ACE2、ACE蛋白表达,计算ACE2/ACE比值,并检测肾脏ACE2mRNA水平.结果 与糖尿病对照组相比,氨基胍干预组UAER及MME降低(P< 0.05),肾脏ACE2表达及ACE2/ACE比值增加(P< 0.05).结论 AGEs可下调糖尿病大鼠肾脏ACE2表达,减少ACE2/ACE比值,可能是导致糖尿病肾病的重要原因之一.     

早期糖尿病大鼠视网膜电图改变及生长抑素的表达变化

目的观察早期糖尿病(DM)大鼠视网膜改变及生长抑素表达的变化。方法取54只雄性Wistar大鼠行链脲佐菌素(STZ)腹腔注射以建立DM大鼠模型。另取Wistar雄性大鼠54只作为正常对照组。分别测定两组大鼠的早期视网膜电图(ERG)改变及生长抑素(SS)表达的变化,并对各指标进行统计学分析。结果成功建立大鼠DM模型。与正常对照组比较,建模后1 w DM模型组振幅没有改变,但与对照组比较,杆细胞反应及最大反应的a波和b波的潜伏期都显著延长(P0.05),SS表达降低(P0.05),建模后6 w时DM模型组除潜伏期持续延长外,振幅也开始下降(P0.05)。结论 DM大鼠早期即出现最大反应及杆细胞反应的a波和b波的潜伏期延长,振幅下降;随病程进展,SS在视网膜的表达呈逐渐下降趋势。     

坎地沙坦对糖尿病大鼠心肌bcl-2、p53蛋白表达及线粒体超微结构的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂坎地沙坦(Candesartan)对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及线粒体超微结构的影响及其可能机制。方法 16只健康雄性SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病模型,随机分为糖尿病组(DM组),坎地沙坦治疗组(Cand组),同时设立对照组(NC组)。Cand组每日灌胃给予坎地沙坦(8 mg/kg),共12 w。透射电镜观察心肌线粒体的超微结构改变,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测心肌bcl-2、p53蛋白表达。结果与NC组相比,DM组大鼠心肌细胞凋亡数明显增多(P0.01),bcl-2蛋白表达减弱,p53蛋白表达显著增强(P0.01);DM组心肌线粒体肿胀、空泡形成、线粒体嵴大部分消失;Cand组大鼠线粒体损伤程度明显减轻,凋亡细胞数减少(P0.05),bcl-2蛋白表达增强、p53蛋白表达减弱(P0.01)。结论坎地沙坦通过影响凋亡相关基因Bcl-2、P53蛋白表达而保护糖尿病心肌结构。     

糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化逆转可能性的研究

目的 动态观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达,探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化逆转的可能性.方法 选择SD大鼠随机分为正常对照组、DM组和胰岛素治疗组,链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠DM.正常对照组和DM组按病程分为2、4、8、12、16、20和24 w组,胰岛素治疗组从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,分为16、20和24 w组.检测各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)和肾脏指数(RI);PAS染色光镜观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾皮质α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达;Western印迹检测肾皮质α-SMA和E-cadherin蛋白表达量;RT-PCR检测肾皮质α-SMA和FN mRNA水平.结果 DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、Scr、RI均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素治疗组上述指标均较DM组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).正常大鼠α-SMA只在血管壁表达,DM组2 w开始有少量间质细胞胞浆内有阳性染色,随病程进展间质细胞阳性染色增多;8 w时肾小球系膜细胞胞浆内见阳性表达;从16 w开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组未见表达;DM组肾皮质α-SMA和FN蛋白与mRNA表达水平较正常对照组显著增多(P＜0.01),胰岛素治疗组则显著低于DM组(P＜0.01);DM组E-cadherin蛋白的表达水平较正常对照组显著降低(P＜0.01),而胰岛素治疗组显著高于DM组(P＜0.01).结论 控制血糖可使DN大鼠肾脏一定程度的纤维化逆转,其机制可能与肾脏固有细胞表型转变被抑制或反转有关.     

降糖胶囊对2型糖尿病大鼠模型胰岛素抵抗的改善作用

目的 观察降糖胶囊对大鼠2型糖尿病(T2DM)模型血糖、血脂代谢的影响及其对胰岛素抵抗的改善作用.方法 将大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍组及降糖胶囊 0.5、1.0、2.0 g/kg组,高脂饮食伴小剂量链脲佐菌素(STZ) 55 mg/kg建立大鼠T2DM模型.除正常对照组外,其余各组均治疗性给药4 w,每周测空腹血糖1次,4 w后检测肝糖原、胰岛素、C-肽、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与模型对照组比较,降糖胶囊 1.0、2.0 g/kg组于第2、3、4周空腹血糖明显降低(P<0.05或P<0.01),4 w后肝糖原含量明显升高(P<0.05或P<0.01),LDL-c、TC、TG、TC/HDL-c、LDL-c/HDL-c、FFA及MDA均显著降低(P<0.05或P<0.01),SOD活性、C-肽含量及胰岛素敏感指数(ISI)均显著升高(P<0.05或P<0.01),胰岛素及HDL-c含量变化不明显(P>0.05).结论 降糖胶囊能明显降低T2DM大鼠的空腹血糖,改善血脂代谢紊乱,提高肝脏及外周组织胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗.     

虫草菌丝对2型糖尿病大鼠认知功能障碍的影响

目的探讨虫草菌丝(CS)对2型糖尿病(T2DM)大鼠认知功能的影响。方法采用链脲佐菌素联合高脂饮食复制T2DM大鼠模型,将成功造模大鼠随机分成模型组,CS低、中、高剂量组[CS1组1.5 ml/(kg·d)、CS2组3.0 ml/(kg·d)、CS3组6.0 ml/(kg·d),灌胃]。给药4 w后,采用Morris水迷宫法进行行为学检测;测定大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素敏感指数(ISI);测定海马组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量。结果与对照组比较,模型组逃避潜伏期明显延长,在原平台象限停留的时间明显缩短,FBG、FINS、MDA和TNF-α含量明显升高,ISI、SOD水平明显降低(均P0.05)。与模型组比较,CS3组避潜伏期明显缩短(P0.05);CS2、CS3组在原平台象限停留的时间明显增加(P0.05);CS2、CS3组其他各指标均显著改善(P0.05),作用呈剂量依赖性。结论 CS可改善T2DM大鼠认知障碍,可能与其降低T2DM大鼠体内血糖,减轻脑部炎症反应和提高抗氧化能力有关。     

丝胶对2型糖尿病大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白表达的作用

目的观察丝胶对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白表达的影响。方法 36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和丝胶治疗组,每组12只大鼠。链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型并给予丝胶(2.4 g/kg)灌胃。SP免疫组织化学染色法观察大鼠胰岛细胞胰岛素蛋白的表达情况。结果胰岛素蛋白免疫阳性产物位于胰岛β细胞胞质,呈棕黄色颗粒状。糖尿病模型组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.392±0.017),明显低于正常对照组大鼠(0.729±0.017)(P<0.01);丝胶治疗组大鼠胰岛β细胞胰岛素蛋白的表达水平为(0.619±0.039),明显高于糖尿病模型组大鼠(P<0.01)。结论丝胶可通过上调胰岛素蛋白的表达保护糖尿病时胰岛β细胞损伤。     

二甲双胍抑制2型糖尿病大鼠脂肪组织胎球蛋白A表达的研究

目的探讨二甲双胍对T2DM大鼠外周血及脂肪组织胎球蛋白A(FetA)的影响。方法40只SD大鼠分为普食组(NC组)、T2DM组、二甲双胍治疗组(MET组)及胰岛素治疗组(INS组),每组各10只。高脂高糖饮食联合小剂量STZ建立T2DM大鼠模型,MET组予二甲双胍灌胃,INS组皮下注射胰岛素使其血糖与MET组基本保持一致。16周龄时ELISA检测血清FetA浓度,Western blot法检测脂肪单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)、核转录因子(NF-κB)及FetA的表达,RT-qPCR法检测脂肪NF-κB及FetA mRNA的表达。结果 T2DM组血清FetA较NC组升高[(11.26±1.76)vs(23.99±4.64)ng/ml,P0.05],脂肪AMPK表达降低[(0.68±0.17)vs(0.11±0.03),P0.05],NF-κB及其mRNA表达升高[(0.53±0.07)vs(0.86±0.14),(1.00±0.10)vs(2.42±0.47),P0.05],FetA及其mRNA表达增多[(0.40±0.07)vs(0.66±0.11),(1.07±0.09)vs(1.98±0.27),P0.05]。与T2DM组比较,MET组血清FetA降低[(23.99±4.64)vs(17.37±3.25)ng/ml,P0.05],脂肪AMPK表达升高[(0.11±0.03)vs(0.49±0.80),P0.05],NF-κB及其mRNA表达减少[(0.86±0.14)vs(0.61±0.09),(2.42±0.47)vs(1.51±0.37),P0.05],FetA及其mRNA表达降低[(0.66±0.11)vs(0.47±0.06),(1.98±0.27)vs(1.25±0.16),P0.05]。与T2DM组比较,INS组各指标变化差异无统计学意义(P0.05)。结论二甲双胍降低T2DM大鼠外周血FetA的浓度,可能通过AMPK-NF-κB抑制脂肪组织FetA来表达。     

大鼠肝癌发展过程MAPK信号转导通路蛋白的动态变化

目的研究p38、JNK、ERK表达与肝癌发生的关系。方法雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组和模型组,空白对照组自由饮用食用水;模型组采用间断性自由饮用二乙基亚硝胺(DEN)食用水的方法诱发肝癌模型,第0、5、9、12、14、16、18、20周取出肝脏,观察其病理学改变;检测p38、JNK及ERK1/2 mRNA和蛋白表达情况。结果模型组大鼠肝变硬,出现巨块状结节,癌细胞强嗜碱性,内质网扩张,线粒体肿胀,嵴断裂,核染色质边缘化;与空白对照组比较,模型组p38 mRNA表达水平9、12 w增加(P<0.05),JNK mRNA表达水平从5 w增加至16 w,随后表达水平显著降低(P<0.05),ERK mRNA表达水平18 w显著降低(P<0.05);模型组p-p38蛋白14、16、20 w表达均明显降低(P<0.05),p-JNK蛋白5 w、12~20 w表达明显升高(P<0.05),p-ERK1/2蛋白5 w表达明显增加,18 w表达显著降低(P<0.05)。结论 DEN诱发大鼠肝癌发生中,MAPK信号中p38、ERK1/2激酶磷酸化水平降低而JNK激酶磷酸化水平增高,可能与内质网和线粒体关系密切。     

养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马神经元的保护作用

目的研究慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠海马区局部脑血流量(rCBF)改变及细胞凋亡情况,探讨养血清脑颗粒对血管性痴呆大鼠海马神经细胞的保护机制。方法将36只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、养血清脑颗粒组,每组12只。采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制作血管性痴呆大鼠模型。养血清脑颗粒组术前10 d及术后每天用养血清脑颗粒灌胃4.8 g/kg,共灌胃45 d。Morris水迷宫实验检测大鼠的空间学习以及记忆能力,HE染色法观察大鼠海马CA1区病理组织形态学变化,免疫组织化学法检测大鼠海马区的caspase-3阳性神经元细胞,蛋白印迹检测大鼠海马区凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达含量的变化。激光多普勒血流仪测量大鼠海马脑血流变化。结果 Morris水迷宫检测结果表明,养血清脑颗粒组平均潜伏期明显低于模型对照组(P<0.05)。大鼠脑组织HE染色结果表明,养血清脑颗粒能够改善海马CA1区神经元形态异常。免疫组化染色发现,养血清脑颗粒组大鼠神经细胞caspase-3表达明显低于模型对照组(P<0.05)。养血清脑颗粒能够提高细胞中Bcl-2蛋白表达量,降低Bax蛋白表达(P<0.05),养血清脑颗粒能明显增加大鼠脑血流量(P<0.05)。结论养血清脑颗粒能够增加实验大鼠海马局部脑血流量,抑制海马神经细胞凋亡。     

血红素氧合酶-1对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的探讨血红素氧合酶(HO)-1对糖尿病(DM)大鼠视网膜神经节细胞(RGC)保护作用及其机制。方法清洁级雄性SD大鼠24只中8只为对照组,余16只腹腔注射链脲佐菌素制作DM大鼠模型,将血糖浓度大于16.7 mmol/L的大鼠定为DM模型,随机分为DM组8只,另外8只腹腔注射HO-1特异性诱导剂正铁血红素为实验组,对照组及DM组腹腔注射等剂量生理盐水。12 w后,HE染色观察RGC密度,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫组化染色和Western印迹法检测视网膜HO-1、Caspase-3表达情况。结果与对照组相比,DM组RGC密度显著降低(P<0.01),而实验组无明显变化(P>0.05)。与对照组相比,DM组MDA含量明显升高、SOD活性明显降低(P<0.01),而实验组无明显变化(P>0.05)。HO-1在对照组仅微量表达于内核层,DM组阳性表达在节细胞层及内核层有所增加,而实验组阳性染色显著增加,特别是节细胞层。Caspase-3在对照组视网膜几乎无表达,而DM组阳性表达显著增多,主要分布于节细胞层及内核层,实验组与DM组相比阳性表达有所减弱。与对照组相比,HO-1在DM组及实验组蛋白表达量均增加(P<0.01),且实验组增加更明显(P<0.05);与对照组相比,Caspase-3在DM组蛋白表达显著增加(P<0.01),而实验组无明显变化。结论通过正铁血红素诱导HO-1在视网膜的高表达,下调了DM大鼠视网膜Caspase-3的表达,抑制了氧化应激,恢复了视网膜RGC密度;提示HO-1可能对DM大鼠RGC具有保护作用。     

丝胶对糖尿病大鼠海马生长激素及其受体表达的调节作用

目的探讨丝胶对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠海马生长激素(GH)和生长激素受体(GHR)表达的调控作用。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、T2DM模型组和丝胶用药组,每组12只。腹腔注射链脲佐菌素制备T2DM大鼠模型;在成功制备模型后,对模型大鼠灌胃给予丝胶(2.4 g·kg~(-1)·d~(-1))35 d。分别检测各组大鼠的血糖和血清GH水平(ELISA法),检测大鼠海马GH、GHR蛋白(蛋白印迹法)和mRNA(逆转录PCR法)的表达情况。结果与空白对照组大鼠比较,T2DM模型组大鼠的血糖、血清GH水平、海马GH的表达明显升高,海马GHR的表达明显降低(P<0.05);与糖尿病模型组相比,丝胶组大鼠的血糖、血清GH水平,GH在海马的表达显著降低,GHR在海马的表达显著升高(P<0.05)。结论丝胶可能通过调节糖尿病时海马GH和GHR的表达,进而改善海马GH-GHR/IGF-1轴的功能。