基于“瘀阻经络”病机探讨自噬与脊髓损伤修复的关系北大核心CSCD

脊髓损伤是各种创伤所致的中枢神经系统损伤的一种疾病。研究发现脊髓损伤后自噬水平一定程度的上调能促进脊髓损伤后功能的修复。自噬在应激状态下通过降解体内过多的错误折叠蛋白及受损细胞器,为细胞供能,以维持细胞内环境的稳定。具有活血祛瘀通络功效的中药在治疗脊髓损伤中广泛受到关注,其作用与细胞自噬的调节有着密切的联系。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对大鼠脊髓损伤后细胞自噬的影响

背景:过氧化物酶体增殖物激活受体γ受体激动剂具有抗炎和抑制神经凋亡保护作用,能在一定程度上保护脊髓神经元,对脊髓损伤后细胞自噬应激调控等产生影响。目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体γ对大鼠脊髓损伤后细胞自噬的影响。方法:将60只SD大鼠分为3组,正常对照组仅做椎板切除,不损伤脊髓,腹腔注射生理盐水;其余大鼠以改良Allen法制作大鼠脊髓损伤模型,过氧化物酶体增殖物激活受体γ组腹腔注射罗格列酮;脊髓损伤组不做处理。损伤后1,3,7,14d为时间点并取材,对脊髓损伤区分别进行免疫组织化学法检测,并以WesternBlot法检测Beclin1/Bcl-2的表达变化,同时采用BBB评分方法观察神经功能恢复情况。结果与结论:大鼠脊髓损伤后第3～14天,过氧化物酶体增殖物激活受体γ组BBB评分显著高于脊髓损伤组(P<0.05)。脊髓损伤组和过氧化物酶体增殖物激活受体γ组均见自噬相关阳性细胞表达,过氧化物酶体增殖物激活受体γ组细胞自噬程度相对降低,Beclin1表达较脊髓损伤组降低(P<0.05),Bcl-2表达较脊髓损伤组明显增加(P<0.05),神经功能增强(P<0.05)。提示过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂在一定程度上降低大鼠脊髓损伤后细胞自噬,对细胞凋亡产生拮抗作用,并在一定程度上可促进神经功能的恢复。     

抑制自噬减少大鼠脊髓损伤后髓鞘碱性蛋白的丢失

目的:观察自噬抑制剂对脊髓损伤后髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法:将99只大鼠随机分成假手术组、损伤组和干预组各33只,各组再分成损伤后3、7、14 d 3个时间点,应用打击器制备T10脊髓损伤模型。干预组造模前注射1μL 3-甲基腺嘌呤(3-MA)。假手术组不造成打击。提取脊髓样本进行Western blot和实时定量荧光PCR检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和MBP的蛋白、m RNA水平。用BBB行为学评分分别于伤后1、7、14 d评估大鼠。结果:伤后14 d时干预组的BBB评分明显高于损伤组(P=0.001)。损伤组各时间点大鼠脊髓损伤区域的LC3-Ⅱ蛋白含量较假手术组明显增加(P0.05),干预组损伤区域的LC3-Ⅱm RNA和蛋白水平在伤后3、7、14 d均比损伤组减少(P0.05)。干预组大鼠损伤区域的MBP m RNA和蛋白水平在伤后3、7、14 d均比损伤组增加(P0.05)。结论:大鼠脊髓损伤后存在自噬的过度激活,自噬抑制剂可通过减少脊髓损伤后MBP的丢失发挥神经保护作用。     

神经病理性疼痛中自噬的参与以及高压氧对其调节的展望

外周神经损伤导致的神经病理性疼痛是严重的、不易耐受的病症,其临床治疗颇具挑战。神经病理性疼痛是神经系统对损伤适应不良的表现,而自噬提供了一种对抗各种病理条件的适应机制,自噬是生物体内为了维持体内蛋白质和细胞器平衡、消除有功能障碍细胞成分的必要降解过程。在神经病理性疼痛动物模型中脊髓神经元以及胶质细胞的自噬活动均发生变化,这表明自噬在神经病理性疼痛中有着重要地位。另外,高压氧有可能通过激活自噬从而减轻神经病理性疼痛。     

自噬对肿瘤形成的双重调节作用及相关机制

自噬是溶酶体参与的降解细胞代谢物质、细胞质蛋白质和细胞器的主要途径。自噬是一个多步骤的过程,受损的细胞器或细胞质蛋白质被包裹进单独的膜结构内,并逐步成熟为双层膜小泡即自噬泡。自噬泡与溶酶体融合后形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物。在正常细胞中,低水平的自噬是细胞应激情况下(如营养物质缺乏、DNA损伤、细胞器损伤等)时所必需的。低水平的细胞自噬还能够帮助降解损伤的细胞器,因而是一种细胞保护机制,但高水平的自     

自噬和线粒体自噬在细胞损伤控制中的作用

自噬和线粒体自噬是细胞内非常重要的生理进程,负责分解细胞内容物、保持能量供给并使细胞免受有害物质积聚所导致的损伤。本文对自噬机制进行总结,并对自噬所调控蛋白的降解过程进行了回顾,着重对自噬及线粒体自噬在细胞应激反应中的作用进行探讨。1自噬的概念及分类基因干扰、营养不足、衰老和环境毒素都可对细胞造成损伤。体内细胞损伤的管理受自噬的高度调控。     

脊髓损伤患者嗅鞘细胞移植术后护理

脊髓损伤是致死性人类最严重致残性损伤之一,脊髓损伤的治疗目前仍是困扰科学家及临床医生难题。一系列基础研究证实嗅鞘细胞是能促进已损伤的中枢神经重新恢复功能最有效的种子细胞之一。因为嗅鞘细胞不仅能促进轴突的再生,且能引导再生的轴突重新进人中枢神经系统,从而与靶器官形成新的功能连接。嗅鞘细胞移植能够促进脊髓的再生和恢复脊髓的部分神经功能,从而改善其生活质量。自2004年6月山东泰安荣军医院将嗅鞘细胞采用区域多靶点移植的方法应用到脊髓损伤的患者,取得了较好的效果。现对脊髓损伤患者进行嗅鞘细胞移植后的护理体会报道如下。     

自噬与缺血再灌注损伤

自噬是存在于真核细胞生物中的一种细胞自我吞噬的现象。在生理状态下,可以维持机体内环境的稳定。在多种疾病的发生过程中,自噬也发挥重要作用。实验证明在缺血再灌注损伤的整个过程中,均有自噬的参与,但在缺血阶段和再灌注阶段,自噬有可能发挥不同的作用。在缺血阶段,自噬发挥保护细胞的作用,而在再灌注阶段,自噬可能会进一步加重细胞损伤甚至导致细胞死亡。     

细胞自噬与肿瘤的研究进展

细胞自噬是细胞在某些刺激因素下,细胞内膜性结构包绕损伤的蛋白或细胞器,并通过溶酶体融合降解损伤的蛋白质或细胞器的过程;生理状况下的自噬,对于维持细胞稳态有积极作用;肿瘤形成以后,细胞自噬反为癌细胞提供更多的营养,起到促进肿瘤发展的功能。自噬主要有三种方式,即分子伴侣介导的自噬、微自噬和巨自噬,均通过两个泛素化途径实现。细胞自噬可以通过影响DNA损伤修复、细胞应激反应、肿瘤基因表达、凋亡及病毒感染反应等诸多过程参与细胞癌变,也可能在肿瘤治疗过程中降低了对于化疗和放疗的敏感性,但是在肿瘤进展的不同时期,不同肿瘤之间自噬活性的变化不一。自噬过程中的重要中间产物或关键酶可能成为抗肿瘤药物的靶标,拓展了肿瘤防治思路。     

乙酰左旋肉碱对急性脊髓损伤大鼠细胞自噬、凋亡及运动功能的影响

目的旨在检测乙酰左旋肉碱(ALC)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、细胞凋亡及运动功能的影响。方法成年雌性Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组(Sham组)、单纯脊髓损伤组(SCI组)、ALC治疗组,每组12只。Allen法建立大鼠T10脊髓损伤模型。损伤后3 d行BBB运动评分;取脊髓组织,Western blotting和免疫荧光标记技术检测LC3-Ⅱ表达,TUNEL法观察细胞凋亡。结果与Sham组相比,SCI组LC3-Ⅱ明显升高(P0.01),细胞凋亡显著增加(P0.001),BBB评分显著降低(P0.001);与SCI组相比,ALC组LC3-Ⅱ显著升高(P0.001),细胞凋亡显著降低(P0.001),BBB评分明显提高(P0.01)。结论 ALC可能通过增强大鼠脊髓损伤后细胞自噬,减少细胞凋亡,促进大鼠运动功能恢复。     

siRNA沉默Drp1对鱼藤酮诱导的帕金森病模型细胞自噬和凋亡的影响

目的探究siRNA沉默动力相关蛋白1(Drp1)后对鱼藤酮诱导的帕金森病模型细胞自噬以及细胞凋亡的影响。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,用1μm、5μm、10μm、20μm鱼藤酮进行处理24 h、48 h,MTT法检测细胞抑制情况。将细胞分为鱼藤酮最佳浓度处理组(20μm鱼藤酮处理,损伤组)、阴性转染组(损伤组基础上转染Drp1阴性序列)、Drp1siRNA处理组(损伤组基础上转染Drp1 siRNA)、Drp1抑制剂组(损伤组基础上添加Mdivi-1试剂)、自噬促进剂组(损伤组基础上添加雷帕霉素)。观察各组线粒体自噬情况、细胞线粒体功能相关蛋白(Mfn2、Drp1、NRF1)、自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3、P62)、凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)表达情况和细胞凋亡情况。结果与对照组相比,鱼藤酮处理组细胞抑制率均升高,随着浓度以及培养时间的增加,细胞抑制率逐渐增加(P0.05)。损伤组、阴性转染组、自噬促进剂组LC3II定位在细胞线粒体,且细胞线粒体结构受损,外周出现自噬双层膜。与Drp1 siRNA转染组、Drp1抑制剂组相比,损伤组、阴性转染组、自噬促进剂组Drp1、LC3II、Beclin-1、Bax蛋白表达和细胞凋亡率升高,Mfn2、NRF1、P62、Bcl-2蛋白表达降低(P0.05)。结论 Drp1参与鱼藤酮诱导帕金森病细胞线粒体自噬,沉默Drp1后可降低鱼藤酮诱导帕金森病细胞线粒体自噬以及细胞凋亡,具有保护作用。     

甲酸钠诱导视网膜光感受器细胞自噬

目的近些年来,发生过很多因饮用假酒致甲醇中毒的事件。本研究旨在探讨甲酸钠诱导视网膜光感受器细胞(661W细胞)损伤过程中对细胞自噬水平的影响。方法将15和30mM浓度的甲酸钠分别加入661W细胞培养基作用24h后,用MDC荧光染色来检测细胞自噬水平改变,透射电镜观察661W细胞自噬体的形成,Western blotting法检测LC3、p-mTOR、Beclin 1及JNK、p-JNK蛋白的表达,流式细胞仪分析检测细胞内活性氧的变化。结果与对照组比较,15或30mM甲酸钠处理661W细胞后,荧光显微镜下观察到细胞自噬水平增强,透射电镜下观察到自噬体形成,Western blotting法显示LC3-II,Beclin 1以及pJNK的蛋白表达水平上调,而p-mTOR的蛋白表达水平减少,流式细胞仪检测法显示甲酸钠处理的661W细胞内活性氧水平增加。结论甲酸钠可诱导661W细胞自噬,而自噬可能参与假酒中毒所致的视觉损伤过程。     

线粒体自噬在肾脏疾病中的研究进展

线粒体自噬通过调节自噬小体特异性吞噬、降解和清除受损线粒体,是线粒体损伤后修复机制,在维持线粒体功能和细胞存活中起到重要作用。同时,线粒体自噬具有促进细胞分化和延缓衰老等生理功能。近年来,线粒体自噬在肿瘤、神经系统疾病、心脏病等疾病中研究众多。线粒体自噬也是肾脏疾病中研究的热点。本综述旨在概述线粒体自噬的机制以及线粒体自噬在肾脏疾病中的研究进展。     

自噬相关基因及蛋白在急性脊髓损伤后大鼠膀胱表达的实验研究

目的 观察自噬相关基因、蛋白在急性期脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌组织中的表达。 方法 选取24只雄性Wistar大鼠并随机分为模型组（12只）及对照组（12只）。模型组采用改良Allen′s法建立脊髓损伤模型,对照组仅予以椎板切除处理。于术后6h对2组大鼠进行BBB运动评分,采用尼氏染色观察2组大鼠脊髓形态学变化,采用Western blotting和免疫荧光染色法检测膀胱平滑肌细胞微管相关蛋白1轻链3(LC3)及P62表达,采用RT-PCR检测膀胱平滑肌自噬相关基因LC3、P62、Beclin1 mRNA表达。 结果 模型组大鼠下肢运动功能BBB评分较对照组明显降低（P<0.05）。尼氏染色观察可见模型组神经元及尼氏小体数量减少;Western blotting染色提示模型组LC3-Ⅱ表达较对照组增高（P<0.05）,P62表达较对照组降低（P<0.05)。免疫荧光染色法提示模型组膀胱平滑肌LC3阳性细胞率较对照组增高（P<0.05),P62阳性细胞率较对照组降低（P<0.05）。RT-PCR检测发现模型组LC3及Beclin1 mRNA水平较对照组升高(P<0.05）,P62 mRNA水平较对照组降低(P<0.05）。 结论 自噬在急性脊髓损伤大鼠膀胱平滑肌中表达活跃,可能与脊髓损伤后神经源性膀胱发病机制有关。     

自噬对巨噬细胞极化的影响及其与慢性炎症性疾病的关系

自噬是广泛存在于真核细胞内的一种高度保守的细胞过程,它通过降解细胞内受损的细胞器、长寿蛋白、脂质以及病原体,在维持细胞能量稳态、细胞分化及器官发育、炎症及免疫调节方面发挥着重要的作用。细胞在遭受能量应激、缺氧、活性氧释放、DNA损伤、病原体入侵等刺激后会激活自噬相关蛋白及通路,诱导具有双层膜结构的自噬小体形成,自噬小体包裹异常胞内成分后与溶酶体融合,最终降解成为可供细胞循环利用的小分子物。     

自噬及其在缺血-再灌注损伤中的作用

自噬是普遍存在于哺乳动物细胞中的一种由溶酶体介导降解衰老细胞器或蛋白质,产生氨基酸或脂肪酸供细胞再利用的自我吞噬现象,参与生物体的多种生理过程,当存在氧化应激、营养物质不足时,自噬活性显著增强,且其在组织缺血-再灌注损伤过程中也发挥重要作用,这一点已被证实,自噬作为一种细胞程序性死亡方式,其在缺血-再灌注损伤中的作用机制并非十分清楚,仍需深入研究。本文就自噬及其在组织缺血-再灌注损伤中的作用及其可能机制进行综述。     

乳腺癌细胞自噬与相关miRNA研究进展

自噬是一种在生物进化中高度保守的、由溶酶体参与的细胞分解代谢过程。细胞通过自噬降解长寿蛋白和损伤的细胞器以实现物质循环,并维持细胞稳态。miRNA是一种小非编码RNA。近年来,越来越多的研究表明miRNA介导的转录和转录后水平的调控对于癌细胞自噬具有重要作用。乳腺癌因其高发病率、易转移、高度恶性的特点而成为当今社会一大公共卫生问题。本文主要就乳腺癌细胞的自噬调节及其相关miRNA的最新研究动态进行综述,为乳腺癌治     

自噬在感音神经性耳聋中的研究进展

自噬能够清除细胞内损伤的细胞器及错误折叠的蛋白质,是细胞应对损伤、维持稳态的一种方式。自噬在各种疾病的发生发展中都发挥重要作用,在药物性耳聋、老年性耳聋以及噪声性耳聋中能够减少毛细胞死亡,从而保护听力。本综述总结了自噬在感音神经性耳聋中的研究进展,以期为自噬在毛细胞损伤中的作用及机制研究提供参考。     

缺氧状态下细胞自噬变化及其对心血管疾病的改善

自噬是细胞维持内环境稳态的重要方式之一,它是一种细胞缺血及代谢应激时与缺氧相关联的幸存机制。在某些心血管疾病中,缺血(缺氧)微环境会通过多种途径激活自噬,适当的自噬能够降解自身受损蛋白等来维持细胞生存,但当自噬过度时,则会损伤细胞,甚至使细胞发生II型程序性死亡。目前,治疗这类心血管疾病的方式主要有药物疗法和干细胞移植法,而自噬在这其中扮演着重要角色。对于不同类型和不同程度的心血管疾病,自噬可作为促存活机制,也可作为促死亡机制。因此,如何利用自噬有效改善某些心血管疾病是难点所在。     

自噬体的检测及其对肿瘤的作用

1自噬的概述 1．1自噬（autophagy）简介自噬来源于希腊词汇,意思是“self”和“eating”,用来描述细胞在饥饿时,为了存活而降解细胞内成分获得营养。自噬是真核细胞蛋白降解的重要途径,其作用主要是清除降解细胞内受损伤的细胞结构、衰老的细胞器及不再需要的生物大分子等,