桑叶多糖对糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的影响

目的观察桑叶多糖(MLP)对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)基因表达的影响,探讨MLP抗肾纤维化的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、MLP高、中、低剂量(C、D、E)治疗组。采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立DN大鼠模型。给予不同剂量MLP进行治疗8 w后,分别检测大鼠空腹血糖(FPG);检测尿液中微量白蛋白(mAlb)含量;测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量;通过RT-PCR法测定肾脏中TGF-β1 mRNA表达。结果 MLP能显著降低DN大鼠FPG、mAlb含量,同时能够降低血清中BUN、Cr含量(P<0.01);下调TGF-β1 mRNA表达(P<0.01)。结论 MLP对DN具有一定肾保护作用及抗肾小球纤维化的作用,其作用机制可能是通过下调TGF-β1 mRNA表达来实现。     

苦参碱对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨苦参碱对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及机制.方法 采用单侧肾切除、腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病肾病(DN)大鼠模型,并设立正常对照(NC)组;DN对照(DN)组,苦参碱治疗组(MT)(100 mg·kg~(-1)·d~(-1)),腹腔给药8 w后处死所有大鼠,检测苦参碱对DM大鼠肾功能的影响,病理切片HE染色,观察肾脏病理改变,免疫组化检测肾组织转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平.结果 与NC组大鼠比较,DN组大鼠尿蛋白排泄量增多,肾小球体积增加,血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)升高,肾组织TGF-β1表达上调(P<0.01).苦参碱明显减少DN大鼠尿蛋白排泄量,降低血清BUN、Cr水平(P<0.05,P<0.01),肾小球体积明显改善,肾组织TGF-β1表达明显下调(P<0.05,P<0.01).结论 苦参碱显著改善抑制肾脏TGF-β1表达,改善肾小球肥大,减轻蛋白尿,对DM大鼠肾损害具有保护作用.     

血清胱抑素C在糖尿病肾病早期诊断中的意义

目的探讨血清胱抑素(Cys)C早期诊断糖尿病肾病(DN)的意义。方法 2型糖尿病患者140例按照尿清蛋白排泄率(UAER)分为糖尿病组(UAER30 mg/24 h,n=94)和DN组(UAER≥30 mg/24 h,n=46),并选取同期体检的健康者60例作为对照组。比较三组空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)及尿微量清蛋白(m Alb)、肾功能相关指标及Cys C水平。结果 DN组和糖尿病组FPG、2 h PG、Hb A1c、m Alb、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿β2微球蛋白(MG)及Cys C水平均显著高于对照组,DN组FPG、2 h PG、Hb A1c、m Alb、BUN、Scr、β2-MG及Cys C水平显著高于糖尿病组(P0.05)。DN组BUN、Scr、β2-MG及Cys C阳性率显著高于糖尿病组和对照组,DN组Cys C阳性率显著高于同组的BUN、Scr、β2-MG阳性率(P0.05)。Cys C对DN早期诊断的灵敏度、特异度和准确度分别为86.96%、90.26%和85.24%,灵敏度显著高于BUN、Scr和β2-MG(P0.05),特异度显著高于β2-MG(P0.05),准确度显著高于BUN、Scr和β2-MG(P0.05)。结论血清Cys C早期诊断DN具有较高的灵敏度、特异度及准确度。     

苦瓜提取物对糖尿病大鼠早期肾损伤的保护作用

目的探讨苦瓜提取物(MCE)对糖尿病(DM)大鼠早期肾损伤的保护作用及其作用机制。方法链脲佐菌素(STZ)诱导产生大鼠DM模型,随机将大鼠分为正常组(NC)、模型组(DN)、MCE预防给药低、高剂量组(A、B组)、MCE治疗给药低、高剂量组(C、D组)。检测各组大鼠肾脏肥大指数、血糖、测定24 h尿蛋白量、24 h尿微量白蛋白排泄量(UAE)量及尿中β2-球蛋白(β2-MG)浓度及肾皮质丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏病理学变化。结果 A、B、C、D各组均能明显降低DN组大鼠的血糖、肾指数及24 h尿蛋白量、24 h UAE量、尿β2-MG浓度,并显著降低肾皮质MDA含量和明显升高SOD活性(P<0.05或P<0.01),且MCE各给药组均在不同程度上减轻了DN组大鼠的肾小球结构模糊、细胞数增多等病理变化;同剂量下,A组较C组,B组较D组效应更显著(P<0.05或P<0.01)。结论苦瓜提取物对DM的早期肾损伤有一定保护作用,其作用机制可能与其抗氧化应激作用有关。     

糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化逆转可能性的研究

目的 动态观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达,探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化逆转的可能性.方法 选择SD大鼠随机分为正常对照组、DM组和胰岛素治疗组,链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠DM.正常对照组和DM组按病程分为2、4、8、12、16、20和24 w组,胰岛素治疗组从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,分为16、20和24 w组.检测各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)和肾脏指数(RI);PAS染色光镜观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾皮质α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达;Western印迹检测肾皮质α-SMA和E-cadherin蛋白表达量;RT-PCR检测肾皮质α-SMA和FN mRNA水平.结果 DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、Scr、RI均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素治疗组上述指标均较DM组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).正常大鼠α-SMA只在血管壁表达,DM组2 w开始有少量间质细胞胞浆内有阳性染色,随病程进展间质细胞阳性染色增多;8 w时肾小球系膜细胞胞浆内见阳性表达;从16 w开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组未见表达;DM组肾皮质α-SMA和FN蛋白与mRNA表达水平较正常对照组显著增多(P＜0.01),胰岛素治疗组则显著低于DM组(P＜0.01);DM组E-cadherin蛋白的表达水平较正常对照组显著降低(P＜0.01),而胰岛素治疗组显著高于DM组(P＜0.01).结论 控制血糖可使DN大鼠肾脏一定程度的纤维化逆转,其机制可能与肾脏固有细胞表型转变被抑制或反转有关.     

桑枝黄酮对糖尿病肾病大鼠的保护作用

目的观察桑枝黄酮对糖尿病肾病(DN)大鼠的保护作用。方法采取一侧结扎肾脏+链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法复制DN大鼠模型,分为模型组,二甲双胍组、低、高剂量桑枝黄酮组(9、18 g/kg),取健康大鼠为正常对照组,灌胃治疗,1次/d,连续4 w后检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、血肌酐(Scr)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和C反应蛋白(CRP)水平;收集24 h尿液测定尿蛋白。同时取肾脏制备病理切片,PAS染色后镜下观察。结果与正常对照组比较,模型组的FBG、Scr、尿蛋白、TNF-α、IL-6、CRP均显著升高(P<0.01),说明DN模型复制成功;与模型组比较,桑枝黄酮组的FBG、m Alb、TNF-α、IL-6、CRP水平显著降低(P<0.01),并呈一定剂量依赖性;病理切片显示高剂量桑枝黄酮组大鼠肾脏损害轻于模型组。结论桑枝黄酮可降低DN大鼠的血糖、改善肾功能、减轻肾脏病理改变,对DN大鼠的肾脏具有保护作用,降低炎症因子水平可能是其机制之一。     

糖尿病肾病大鼠铁超载对内皮功能及氧化应激的影响

目的探讨糖尿病肾病(DN)大鼠铁超载后对内皮功能及氧化应激的影响。方法将采用随机数字法30只健康雄性Wistar大鼠分为正常对照组(NC组)10只和糖尿病模型组20只,糖尿病模型组按65 mg/kg体重单次腹腔注射链脲佐菌素。将20只造模成功的大鼠仍按随机数字法分为DN组10只和铁超载组(Fe组)10只。NC组和DN组继续给予普通全价颗粒饲料,Fe组给予高铁饲料,喂养12 w。实验结束前1 d收集24 h尿液测量尿白蛋白,计算尿白蛋白排泄率(UAER);心脏采血检测血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、组织铁(TI)、内皮素(ET)-1、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)等相关指标;观察肾脏及肝脏病理情况;制备肾组织匀浆检测一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(T-SOD)及丙二醛(MDA)。结果 Fe组大鼠的肾重/体重(KW/BW)显著高于DN组(P<0.05)。Fe组血糖、UAER、Scr、BUN、SI、TI显著高于DN组(P<0.01),TIBC显著低于DN组(P<0.01);肾组织NO、NOS显著低于DN组,ET-1显著高于DN组(P<0.01);T-SOD显著低于DN组(P<0.01),MDA显著高于DN组(P<0.01)。结论铁超载能促进DN的发生与发展,机制可能与血糖水平升高、内皮功能障碍及氧化应激有关。     

糖尿病脑病大鼠脑PET/CT显像、胰岛素样生长因子受体及葡萄糖转运蛋白4的表达

目的观察糖尿病脑病大鼠脑PET/CT显像、胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R)及葡萄糖转运蛋白(GLUT)4的表达。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠糖尿病模型,Morris水迷宫试验筛选糖尿病脑病大鼠模型,正常对照组,糖尿病组(排除脑病),糖尿病脑病组各随机选取8只,进行脑部PET/CT显像、免疫组化法检测脑组织IGF-1R及GLUT4表达。结果与正常对照组及糖尿病组比较,糖尿病脑病组大鼠标准摄取值(SUV)显著降低(P<0.01);IGF-1R表达显著增高而GLUT4显著下降(P<0.01)。结论糖尿病脑病大鼠脑组织IGF-1R异常高表达,扰乱了脑部糖代谢的相关通路。     

糖尿病大鼠肾脏8-羟基脱氧鸟苷和超氧化物歧化酶表达的变化及西格列汀对其影响的研究

目的 探讨西格列汀对糖尿病大鼠肾脏8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和血清超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响. 方法 复制糖尿病大鼠模型,随机分为西格列汀1 mg/(kg·d)干预组(Sita1,n=15),西格列汀10mg/(kg·d)干预组(Sita2,n=15),糖尿病未干预组(DM,n=16)及正常对照组(NC,n=15).14周末观察各组FPG、FIns、肾功能、SOD 24 hUAlb、尿8-OHdG的变化. 结果 与NC组比较,DM、Sita1和Sita2组FIns及血清SOD活性均下降(P＜0.05),FPG、BUN、血肌酐(Scr)、24 hUAlb及尿8-OHdG均升高(P＜0.05).与DM组比较,Sita1组BUN、Scr、24 hUAlb及尿8-OHdG均降低(P＜0.05),血清SOD活性升高(P＜0.05);与DM组比较,Sita2组FPG、BUN、Scr、24 hUAlb及24h尿8-OHdG降低(P＜0.05),FIns和血清SOD活性升高(P＜0.05). 结论 氧化应激参与糖尿病大鼠肾脏病变的发生发展,西格列汀对糖尿病大鼠肾脏有一定的保护作用.     

1型糖尿病大鼠肾脏Ⅳ型胶原的表达及坎地沙坦的干预作用

目的 探讨1型糖尿病大鼠造模后肾脏Ⅳ型胶原的表达及肾小球病理形态改变及坎地沙坦的保护作用和机制.方法 雄性Wistar大鼠36只,随机分出正常对照组(NC组)12只,余24只腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,再随机分为糖尿病组(DM组)12只和坎地沙坦干预组(DMC组)12只;DM-C组给予坎地沙坦5 mg·kg-1·d-1灌胃.干预12 w后,检测各组大鼠的空腹血糖(FPG)、血压、24 h尿白蛋白排泄量(24 h UAE)、肌酐清除率(Ccr)、肾重指数(KI);光镜下观察肾小球病理形态改变,测定肾小球平均截面积(MGA)、肾小球平均体积(MGV)和肾小球系膜基质分数(MMF);免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原的表达.结果 与NC组相比,DM组大鼠的FPG、24 h UAE、Ccr及KI均显著升高(P＜0.01),MGA、MGV及MMF显著增大(P＜0.01),肾小球Ⅳ型胶原的表达明显增加(P＜0.01);DMC组较DM组肾小球Ⅳ型胶原的表达明显减少(P＜0.01),FPG、24 h UAE、Ccr及KI均显著降低(P＜0.01),MGA、MGV及MMF显著减小(P＜0.01);三组间大鼠血压差异无统计学意义(P＞0.05).结论 糖尿病大鼠肾脏Ⅳ型胶原表达增加;坎地沙坦具有独立于降压以外的肾脏保护作用.     

硝克柳胺对慢性肾功能不全大鼠血清TGF-β1、CTGF表达及生存时间的影响

目的研究硝克柳胺对慢性肾功能不全(CRF)大鼠血清转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生长因子(CT-GF)表达及生存时间的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只。建模组、低剂量硝克柳胺组(L组)、高剂量硝克柳胺组(H组)大鼠用腺嘌呤〔(150 mg/(kg·d)〕进行灌胃12 w,构建CRF大鼠模型。正常组给予同等剂量蒸馏水。给予L组大鼠硝克柳胺5 mg/(kg·d),给予H组大鼠硝克柳胺10 mg/(kg·d),均腹腔注射给药。观察各组大鼠治疗1、3、5 w后血清TGF-β1、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、CTGF表达情况,并观察各组生存时间。结果正常组各时间点TGF-β1、BUN、Scr、CTGF含量差异无统计学意义(P> 0. 05),建模组、H组、L组TGF-β1、BUN、Scr、CTGF含量均显著高于正常组(P<0. 05)。L组、H组TGF-β1、BUN、Scr、CTGF含量均显著低于建模组(P<0. 05),且H组TGF-β1、BUN、Scr、CTGF含量均显著低于L组(P<0. 05)。模型组最早出现死亡个体,且最早全部死亡。与模型组比较,H组、L组生存时间显著延长,且L组显著低于H组(P<0. 05)。结论硝克柳胺可降低大鼠血清TGF-β1、CTGF、BUN、Scr水平,延长其生存时间。     

大豆异黄酮对糖尿病小鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的通过建立糖尿病(DM)小鼠肾缺血再灌注损伤模型,观察大豆异黄酮对DM小鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法将健康小鼠随机分为6组:正常对照组(NG),假手术组(Sham),缺血再灌注模型组(DIR),大豆异黄酮低剂量组(SI1,50 mg/kg),大豆异黄酮中剂量组(SI2,80 mg/kg),大豆异黄酮高剂量组(SI3,100 mg/kg),每组12只。Sham、DIR、SI1、SI2、SI3组一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)55 mg/kg,建立DM小鼠模型。每天灌胃给药,SI1、SI2、SI3组依次给予SI 50、80、100 mg/kg,NG、Sham、DIR组灌生理盐水,持续6 w后,除NG、Sham组外均建立肾缺血再灌注损伤小鼠模型。检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等生化指标,免疫组化分析SGK1表达量。结果 DIR组Scr、BUN、TC、TG含量明显高于NG组(P<0.05),SI1组与DIR组比较Scr、BUN、TC含量明显降低(P<0.01),SI2、SI3组与DIR组比较TG含量明显降低(P<0.01)。SI各组SGK1的表达量随剂量的增加呈下降趋势,与DIR组比较,SI2、SI3组SGK1的表达量显著下降(P<0.01)。结论大豆异黄酮可降低DM小鼠肾缺血再灌注损伤后SCr、BUN、TC和TG等水平;大豆异黄酮对DM小鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用。     

解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9、金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的影响

目的观察解聚复肾宁(JJFSN)对糖尿病(DM)大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达及肾脏保护作用机制。方法建立STZ诱导的DM SD大鼠模型,将成模DM大鼠随机分成4组:模型组、JJFSN组、厄贝沙坦组、JJFSN+厄贝沙坦组,同时设正常对照组。各组大鼠采用相应的干预措施处理12 w。检测各组大鼠第12周时肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率(UAER),免疫组化法检测肾组织MMP-9、TIMP-1表达,透射电镜观察肾脏超微结构。结果模型组肾脏超微结构改变明显,血糖、UAER、尿素氮、血肌酐、肾重/体重显著增高。模型组大鼠肾组织TIMP-1的表达较正常对照组明显上调(P<0.01),JJFSN组、厄贝沙坦组、JJFSN+厄贝沙坦组肾组织TIMP-1表达明显下调(P<0.01),但仍高于正常对照组(P<0.01),JJFSN+厄贝沙坦组下调最明显(P<0.01)。DM模型组大鼠肾组织MMP-9的表达较正常对照组明显下调(P<0.01),解聚复肾宁组、厄贝沙坦组、解聚复肾宁+厄贝沙坦组肾组织MMP-9表达明显上调(P<0.01),但仍低于正常对照组(P<0.01),解聚复肾宁+厄贝沙坦组上调最明显(P<0.01)。结论 MMP-9、TIMP-l的表达变化与肾小球细胞外基质(ECM)降解减少相关,可能促进了糖尿病肾病(DN)的发生,JJFSN可能通过干预这种表达变化,减缓DN的发生和发展。     

雷公藤多苷对糖尿病肾病大鼠肾损伤的保护作用及可能机制

目的探讨雷公藤多苷对糖尿病(DM)肾病(DN)大鼠肾损伤的保护作用及其可能机制。方法将50只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组(10只)和DM模型组(40只),采用链脲佐菌素诱导的方法建立大鼠DM模型,将DM模型成功的大鼠按随机数字分为模型组、西药组、雷公藤多苷低、高剂量组,每组10只。西药组给予50 mg/kg厄贝沙坦灌胃,雷公藤多苷低剂量组、高剂量组均给予雷公藤多苷8 mg/kg、16 mg/kg灌胃。对照组和模型组均给予生理盐水灌胃,各组均连续灌胃8 w。观察大鼠血糖(BG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、尿蛋白(Pro)水平及肾脏指数(RI)、肾小球面积(MGA)、肾小球体积(MGV)。结果模型组的BG和Hb A1c水平均显著高于对照组(P0.01);西药组和雷公藤多苷低、高剂量组BG和Hb A1c水平与模型组对比均无明显差异(P0.05)。与对照组对比,模型组的SCr、BUN和Pro水平均显著升高(P0.01);与模型组对比,西药组和雷公藤多苷低、高剂量组均明显降低(P0.01)。与对照组对比,模型组的RI、MGA、MGV均显著性升高(P0.01);与模型组对比,西药组和雷公藤多苷低、高剂量组均明显降低(P0.01)。对照组大鼠肾组织形态正常;模型组异常,肾小球管壁薄肿胀,呈现无规则,管腔大小不均匀,血管萎缩,肾小管上皮细胞空泡变性。西药组和雷公藤多苷低、高剂量组的以上病理变化明显改善,尤其雷公藤多苷高剂量组改善程度更大。结论雷公藤多苷能改善DN大鼠SCr、BUN、Pro水平,对DN大鼠肾损伤有一定的保护作用。     

雷公藤多苷对2型糖尿病肾脏疾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的观察雷公藤多苷对STZ诱导的糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠肾脏中细胞核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体(RANK/RANKL)的表达变化,探讨其保护肾脏的机制。方法采用高糖高脂喂养加STZ腹腔注射法建立T2DM动物模型,造模成功后随机分为DKD模型组(DKD,n=8)和雷公藤多苷组(DT,n=8),另选健康大鼠作为正常对照组(NC,n=8)。DT组予雷公藤多苷50mg/(kg·d)剂量灌胃,NC组和DN组每日予等量生理盐水灌胃。12周后处死大鼠,检测FPG、FIns、UAlb、BUN、Scr、Ucr,计算Ccr。PAS染色观察肾脏病理改变,免疫组织化学法检测肾脏中RANK、RANKL的表达分布,Western blot检测RANK、RANKL、Nephrin的蛋白表达。结果与NC组比较,DKD组FPG、FIns、UAlb、Ccr、BUN在给药12周末表达均升高,肾脏中RANK[(0.27±0.05)vs(0.68±0.11)]、RANKL[(0.23±0.07)vs(0.62±0.08)]蛋白表达增加,而Nephrin表达水平下降(P0.01);与DN组比较,DT组上述生化指标均改善,肾脏病理改变减轻;RANK[(0.45±0.09)vs(0.68±0.11)]、RANKL[(0.39±0.06)vs(0.62±0.08)],而Nephrin蛋白表达增多(P0.01)。结论雷公藤多苷可以抑制RANK/RANKL的表达,减轻T2DM大鼠肾脏病理改变,减少蛋白尿,起到肾脏保护作用。     

sRAGE胞外段—IgG Fc融合蛋白对大鼠糖尿病肾病的作用

目的探讨可溶性人晚期糖基化终末产物受体胞外段—IgG Fc（sRAGE-IgG Fc）融合蛋白对糖尿病（DM）大鼠的肾脏保护作用。方法将60只大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病（DN）组、洛汀新组、sRAGE-IgGFc 4 mg/kg组、sRAGE-IgG Fc 6 mg/kg组、sRAGE-IgG Fc 9 mg/kg组各10只。以左肾切除、高糖、高脂饲养及注射链脲佐菌素方法 ,建立DN模型。检测各组非空腹血糖（FPG）、胰岛素（INS）、血脂、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、肌酐清除率（Ccr）、尿白蛋白排泄率（UAER）等,观察其肾组织变化。结果与DN组比较,sRAGE-IgG Fc用药组、洛汀新组的Scr、BUN、Ccr、UAER等指标均明显降低,肾脏病变不同程度地减轻（P均〈0.01）;除正常对照组外,其他组间FPG、INS、血脂改变无统计学意义（P均〉0.05）。说明sRAGE-IgG Fc融合蛋白对DN大鼠的肾脏保护作用具有剂量依赖性。结论 sRAGE-IgG Fc融合蛋白对DN大鼠的肾脏有明显保护作用,其功能与洛丁新相当。     

金属基质蛋白酶9及其组织抑制物1在肾组织中的表达和调控

目的:观察STZ鼠肾组织及高糖状态下正常人类系膜细胞(NHMC)中金属基质蛋白酶9(MMP-9)、金属基质蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达状况及磷酸肌酸激酶(PKC)抑制剂对其表达的影响,探讨糖尿病肾病(DN)时PKC抑制剂在细胞外基质降解中的作用。方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组、PKC抑制剂组。PKC抑制剂组采用根皮素10mg/(kg.d)混悬液灌胃进行干预。第8周处死大鼠(每组6只)。检测24h尿蛋白定量、血肌酐水平。用免疫组化方法检测肾脏组织MMP-9、TIMP-1的表达。用ELISA方法检测肾脏组织PKC活性。体外实验,将NHMC置37℃,5%CO2培养箱中进行培养。并将NHMC分为N组(对照组):糖浓度5mmol/L,H组(高糖组):糖浓度30mmol/L,P组(高糖加PKC抑制剂):糖浓度30mmol/L加chelery thrine chloride 10-5mmol/L,M组(甘露醇组):甘露醇30mmol/L。于培养24、48、72h后用MTT法测定细胞增值。采用ELISA方法检测四组PKC活性。分别用RT-PCR及Western Blot检测各组MMP-9、TIMP-1mRNA及蛋白表达。结果:DN模型组尿蛋白排泄明显增加(P<0.01),血肌酐上升(P<0.05),PKC活性明显增高,MMP-9和TIMP-1出现表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。PKC抑制剂干预后其尿蛋白排泄明显减少,血肌酐水平降低,PKC活性下降,MMP-9、TIMP-1表达上调,其MMP-9/TIMP-1比值增高。体外实验中,高糖能促进NHMC增殖,且NHMC的增殖状况随时间的递增而明显增加。高糖(30mmol/L)能增加系膜细胞PKC的活性,MMP-9、TIMP-1较高表达,MMP-9/TIMP-1比值降低。而PKC抑制剂使PKC的活性降低同时,MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1比值增高。结论:高糖可诱导PKC活性,PKC抑制剂能使MMP-9、TIMP-1表达上调,MMP-9/TIMP-1表达比值升高,推测PKC的活性状况可影响DN细胞外基质降解过程。     

黄葵胶囊对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用

目的探讨黄葵胶囊对糖尿病肾病大鼠的肾脏保护作用。方法健康SPF级Wistar大鼠72只随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、黄葵胶囊低、中、高剂量组,每组12只。观察各组大鼠病理学组织变化,各组大鼠炎症因子和肾功能指标水平变化。结果正常对照组大鼠肾小球、系膜基质未出现明显病理变化;模型组大鼠肾小球硬化、系膜基质增生;阳性对照组与黄葵胶囊各剂量组肾脏病理变化均较模型组明显减轻;模型组、阳性对照组、黄葵胶囊低、中剂量组肿瘤坏死因子(TNF)-α、C反应蛋白(CRP)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)含量均较正常对照组明显增加(P0.05),而黄葵胶囊高剂量组TNF-α、CRP、Scr、BUN、UA含量接近与正常对照组(P0.05);阳性对照组、黄葵胶囊低、中、高剂量组TNF-α、CRP、Scr、BUN、UA含量较模型组明显降低,黄葵胶囊低、中、高剂量组TNF-α、CRP、Scr、BUN、UA含量明显低于阳性对照组,黄葵胶囊中的剂量组TNF-α、CRP、Scr、BUN、UA含量明显低于黄葵胶囊低剂量组(P0.05)。结论黄葵胶囊可通过降低TNF-α、CRP水平,减轻糖尿病肾病大鼠炎症反应,可通过降低Scr、BUN、UA水平,保护糖尿病肾病大鼠肾脏。     

糖代谢异常大鼠心肌超微结构改变及TNF-α的表达

目的观察糖代谢异常(糖调节受损和糖尿病)大鼠心肌的超微结构改变及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达,揭示糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DC)发生发展的炎性机制。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为:正常对照组、胰岛素抵抗组(IR组)和T2DM组。用免疫组化法检测心肌组织中TNF-α的表达,透射电镜观察心肌的超微结构,并测定空腹血糖(FPG)、空腹血清胰岛素(FINS)等生化指标及计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果TNF-α在IR组、T2DM组大鼠心肌组织中的阳性表达平均积分光密度值(IDP)显著高于正常对照组(P<0.01);且T2DM组大鼠IDP值显著高于IR组(P<0.01)。IR、T2DM组ISI负值均显著高于正常对照组(P<0.01)。电镜下IR、T2DM组大鼠心肌超微结构发生不同程度的损害。相关分析表明:TNF-α的IDP值与FPG水平、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)呈明显正相关(r=0.905,0.602,0.493,0.430,均P<0.01),与ISI明显呈负相关(r=-0.896,P<0.01),多元逐步回归分析显示FBG、ISI是影响TNF-α水平的重要因素。结论TNF-α的表达与高血糖、胰岛素抵抗(IR)密切相关,且TNF-α作为一种重要的炎症因子可能参与了DC的发病机制。     

二甲双胍对糖尿病大鼠血糖、血脂水平及骨骼肌GLUT4表达的影响

雄性SD大鼠55只,分别予普通饲料和高糖高脂饲料(二甲双胍组)喂养。高糖高脂饲料饲养联合STZ(40 mg/kg)构建糖尿病大鼠模型。二甲双胍组予灌胃4周后检测血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂的水平变化,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。留取各组大鼠骨骼肌,RT-PCR检测GLUT4 mRNA表达,免疫组化法检测GLUT4蛋白表达。结果与正常对照组比较,糖尿病大鼠模型FPG、FINS、TG、HOMA-IR显著增高(P 0. 05),骨骼肌GLUT4表达显著减少(P0. 05);与模型组比较,二甲双胍组FPG、FINS、HOMA-IR显著降低(P 0. 05),骨骼肌GLUT4表达显著增加(P 0. 05)。结论二甲双胍可降低糖尿病模型大鼠血糖。