罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌腺苷酸活化蛋白激酶α表达及活性的影响

目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌脂肪酸代谢及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)α表达和活性的影响.方法 根据随机数字表将40只4～5月龄雄性Wistar大鼠随机分至健康对照组(n=16;给予基础饲料)和高脂喂养组(n=24;给予高脂饲料).喂养4周末,两组各取8只大鼠行高胰岛素.正葡萄糖钳夹实验,评价高脂喂养组胰岛素抵抗状态.造模成功后根据随机数字表将高脂喂养组(n=16)随机分至高脂喂养亚组(n=8)和罗格列酮干预亚组(n=8),继续喂以高脂饲料4周,罗格列酮干预亚组同时给予3 mg·kg-1·d-1罗格列酮灌胃.骨骼肌甘油三酯经氯仿-甲醇抽提后采用全自动生化分析仪测定.运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法 测定骨骼肌AMPKα1及AMPKα2 mRNA表达水平;运用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot方法 测定骨骼肌AMPKα1、AMPKα2及P-AMPKα蛋白表达水平.组间比较采用完伞随机设计的单因素方差分析.结果 第8周末,高脂喂养亚组葡萄糖输注率低于健康对照组[分别为(19.3±3.7)和(30.4±4.2)mg·kg-1·min-1,P<0.01],罗格列酮干预亚组葡萄糖输注率高于高脂喂养亚组[分别为(25.8±1.6)和(19.3±3.7)mg·kg-1·min-1,P<0.05].高脂喂养亚组骨骼肌甘油三酯含量高于健康对照组[分别为(4.4±1.2)和(2.0±0.5)μmol/g,P<0.01],罗格列酮干预亚组骨骼肌甘油三酯含量低于高脂喂养亚组[分别为(3.3±1.1)和(4.4±1.2)μmol/g,P<0.05].骨骼肌AMPKαl mRNA及蛋白表达无组问差异(P>0.05);骨骼肌AMPKα2 mRNA、蛋白表达和P-AMPKα蛋白表达高脂喂养亚组低于健康对照组,而罗格列酮干预亚组高于高脂喂养亚组(均P<0.05).结论 高脂饮食可导致大鼠骨骼肌脂质堆积及胰岛素抵抗.罗格列酮干预可增加胰岛素抵抗大鼠骨骼肌AMPKα2表达和AMPKα活性,降低骨骼肌脂质含量,提高胰岛素敏感性.     

耐力训练对糖尿病糖脂代谢相关因子基因表达的影响

目的探讨糖尿病(DM)对长期耐力训练产生运动适应的分子机制。方法 2型糖尿病(T2DM)大鼠12只,随机分为安静组(GKC)、耐力训练组(GKE)。跑台训练6 w,末次训练后24⁴8 h内断颈处死,取腓肠肌,荧光定量PCR检测GLUT4、AMPKα2、PDK4和CPT-1β的基因转录。结果 GKE组AMPKα2 mRNA水平非常显著高于GKC组(P<0.01),GLUT4 mRNA转录没有显著性差异(P>0.05),PDK4 mRNA表达显著性降低(P<0.05),CPT-1βmRNA转录没有显著性差异(P>0.05)。结论 (1)6 w耐力运动干预可能通过能量敏感性通路AMPK-GLUT4葡萄糖转运机制极大地促进了GK大鼠骨骼肌糖摄取能力,在一定程度上逆转了AMPK磷酸化受损状况,对改善DM进程有一定益处。(2)耐力训练显著降低了PDK4水平,对促进DM大鼠有氧呼吸能力有利,但对CPT-1β水平影响不显著,可能此时DM大鼠仍然以葡萄糖氧化为主供能。     

不同强度有氧运动对非酒精性脂肪肝炎大鼠肝线粒体增殖相关转录因子表达的影响

目的研究不同强度运动对非酒精性脂肪肝炎(NASH)大鼠肝线粒体增殖相关调节因子的影响。方法 SD大鼠随机分为普通安静组(ND组)和高脂组,高脂组分为安静对照组(C组)和运动组,分别以普通或高脂饲料喂养16 w,后6 w运动各组进行跑台运动。结束时测血谷丙转氨酶(ALT)和血脂,肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),肝烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶依赖的组蛋白去乙酰代酶(SIRT1)、过氧化物增殖物激活受体γ辅因子(PGC-1)α、核呼吸因子(NRF)-1、mt DNA转录因子(TFAM)mRNA和SIRT1、AMPK、p AMPK蛋白表达,肝HE染色切片。结果C组发生NASH;运动各组NAS和氧化应激不同程度缓解;中等、较大强度运动能显著升高SIRT1、p AMPK蛋白表达和SIRT1、PGC-1α、NRF-1、TFAM mRNA水平。结论中等和较大强度运动激活SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路,促进线粒体增殖,降低氧化应激水平,抑制炎症的发生。     

水飞蓟素保护肾小球内皮细胞氧化损伤的效应与SIRT1及腺苷酸活化蛋白激酶α的作用机制

目的研究水飞蓟素对肾小球内皮细胞氧化损伤的保护作用及SIRT1和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α在其中的作用机制。方法使用1×10~5nmol/L H_2O_2处理肾小球内皮细胞,构建氧化应激细胞模型。MTT实验法检测水飞蓟素对氧化应激造成的肾小球内皮细胞损伤的影响。实时定量RT-PCR法测定水飞蓟素对氧化应激损伤的肾小球内皮细胞SIRT1和AMPKαmRNA水平的影响。Western印迹法测定水飞蓟素对氧化应激损伤的肾小球内皮细胞SIRT1,AMPK和AMPKα磷酸化蛋白水平的影响。结果 1×10~5nmol/L H_2O_2处理肾小球内皮细胞后,细胞存活率显著降低,而1μg/ml和5μg/ml的水飞蓟素处理可以显著提高细胞存活率。实时定量RT-PCR结果显示,5μg/ml的水飞蓟素处理显著提高了肾小球内皮细胞SIRT1 mRNA水平,而对AMPKαmRNA水平无显著影响。Western印迹结果显示,H_2O_2处理后,细胞的SIRT1蛋白水平和AMPKα磷酸化蛋白水平未出现显著变化,但AMPKα蛋白水平显著降低。1μg/ml和5μg/ml的水飞蓟素处理显著提高了细胞SIRT1蛋白水平和AMPKα磷酸化蛋白水平;H_2O_2处理后细胞的AMPKα蛋白水平显著降低,而1μg/ml和5μg/ml的水飞蓟素处理显著提高了AMPKα蛋白水平,和对照组无显著差异。结论水飞蓟素可能通过调节细胞内SIRT1及AMPKα蛋白的表达及AMPKα磷酸化发挥抗氧化损伤作用而保护肾小球内皮细胞。     

地塞米松致小鼠肌肉衰减综合征模型建立

目的通过研究地塞米松(DXM)对C57BL/6小鼠肌肉质量和肌肉功能的影响,探究理想的肌肉衰减综合征小鼠的建模方法。方法将23只6~7个月龄C57BL/6小鼠分为2组:对照组(0.9%生理盐水)、实验组(5 mg/kg DXM),连续皮下注射6 w。前2 w每3 d及后4 w每7 d测量小鼠摄食量、体重和体成分。最后一次给药24 h后,利用水迷宫测量游泳速度和轮式跑台测量掉落次数。结果实验组肌肉质量和肌肉功能较对照组显著降低(P0.05),实验组摄食量与体重较对照组显著增加(P0.05)。结论 OXM能够建立理想且可靠的肌肉衰减综合征小鼠模型。     

白杨素通过调控SIRT1/AMPK信号通路对心肌缺血再灌注损伤老年大鼠的干预效果

目的 探讨白杨素通过调控沉默信息调节因子(SIRT)1/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路对心肌缺血再灌注损伤老年大鼠的干预效果。方法 选取SPF级SD老年雄性大鼠分为空白组(5只)、模型组(6只)、药物对照组(6只)、白杨素组(6只)。空白组、模型组只进行生理盐水灌胃,不做其他处理,白杨素组给予白杨素20 mg/kg灌胃,药物对照组给予8μg/kg前列地尔注射液进行治疗,检测肌酸激酶(CK)、CK-同工酶(MB)、肌钙蛋白(cTn)I、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)水平、SIRT1、AMPK mRNA及蛋白表达情况。结果 白杨素组CK、CK-MB、cTnI、MDA、ROS水平高于空白组,低于模型组、药物对照组,SOD、SIRT1、AMPK mRNA及蛋白表达低于空白组,高于模型组、药物对照组,均有统计学差异(均P<0.05)。结论 白杨素通过调控SIRT1/AMPK信号通路,能显著改善心肌缺血再灌注损伤老年大鼠心肌损伤,抑制异常氧化应激状态,改善心肌细胞凋亡情况,改善病情。     

间歇有氧运动训练上调SIRT3改善衰老心肌线粒体功能

目的 探讨间歇有氧运动训练（AIT）对调节SIRT3介导的抗氧化酶系统改善老年小鼠心肌线粒体功能的影响。方法 采用C57小鼠（20月龄）20只,随机分为AIT组和非运动组,每组10只。以成年野生型C57小鼠非运动组(4月龄,10只)为对照组。建立间歇有氧运动训练12周小鼠模型,跑台训练由3部分构成:10 min热身运动,7 min间歇训练（4 min高强度和3 min低强度训练）及1 min冷却。每日训练1 h,每周训练5 d,训练时间为12周。应用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌线粒体抗氧化酶相关蛋白的表达。结果 AIT显著上调衰老心肌中线粒体去乙酰化酶sirtuin-3（SIRT3）表达水平,提高AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平(P<0.05);AIT可改善老年组小鼠心肌线粒体抗氧化酶(MnSOD、Catalase)的活性,有效减少衰老心肌脂质过氧化损伤(P<0.05);AIT训练显著提高衰老心肌线粒体生物合成能力改善了线粒体的功能(均P<0.05)。结论 有氧间歇运动训练可有效地上调衰老小鼠心肌细胞SIRT3水平,有效提高衰老小鼠心肌线粒体功能,其机制可能与激活心肌SIRT3所介导的抗氧化酶系统有关。     

不同运动训练方式对老年骨质疏松模型小鼠骨生物力学的影响

目的探讨跑台运动、游泳等不同运动训练方式对老年性骨质疏松小鼠骨生物力学的影响。方法取小鼠66只,根据不同运动训练方式将小鼠分为游泳组、跑台组及对照组,每组22只。采用切除双侧卵巢方法建立老年性骨质疏松模型。游泳组前3 d每次训练30 min,后4 d每次训练40 min,水深40 cm。跑台组持续性水平运动,前3 d每次30 min,跑台速度0.8 m/s;后4 d跑40 min,跑台速度1.0 m/s,共训练4 w。对照组不进行运动干预自然恢复。采用骨密度仪及电子万能试验机测定小鼠骨密度(BMD)及右侧股骨、腰椎骨生物力学指标。结果跑台组、游泳组及对照组在1 w、2 w体重差异无统计学意义(P>0.05);跑台组小鼠在3 w、4 w体重显著高于游泳组与对照组(P<0.05)。(2)跑台组小鼠钙、磷水平显著低于游泳组和对照组(P<0.05),碱性磷酸酶(AKP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(STR-ACP)水平显著高于游泳组(P<0.05);游泳组钙、AKP、STR-ACP水平显著低于对照组(P<0.05),磷显著高于对照组(P<0.05)。(3)跑台组右侧股骨与腰椎骨BMD水平显著高于游泳组与对照组(P<0.05),游泳组右侧股骨与腰椎骨BMD水平显著高于对照组(P<0.05)。(4)跑台组小鼠骨生物力学指标显著高于游泳组与对照组(P<0.05)。游泳组小鼠骨生物力学指标显著高于对照组(P<0.05)。结论运动训练对老年性骨质疏松小鼠生物力学性能有一定的改善,游泳、跑台运动对骨质疏松小鼠有预防和缓解作用,可以维持并提高小鼠BMD,且生物力学显示跑台运动训练更加适宜。     

莲雾提取液对游泳小鼠糖原及运动耐力的影响

目的探讨莲雾(WA)提取液对游泳小鼠糖原及运动耐力的影响。方法 50只健康小鼠分为安静对照组、训练对照组、给药对照组、训练力竭组和给药力竭组,测定其肝糖原、肌糖原、力竭时间等数据。结果试验后给药对照组肝、肌糖原较试验前明显增加,给药对照组与安静对照组相比较差异具有显著性意义(P<0.05),给药对照组和训练对照组相比差异也具有显著性意义(P<0.05),但安静对照组和训练对照组间差异无显著意义(P<0.05);试验后给药力竭组和训练力竭组相比延长力竭时间27.33%,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 WA提取物可显著增加机体内糖原储量,能延长游泳等耐力运动的持续时间,对消除疲劳及平衡运动过程中的物质能量代谢有重要作用。     

心肌去乙酰化酶SIRT3对缺血/再灌注小鼠心律失常的影响

目的:探讨心肌线粒体去乙酰化酶SIRT3对急性缺血再灌注(I/R)所致心律失常的影响。方法:以24只SIRT3基因敲除型小鼠为实验对象，用24只野生型小鼠为对照，两种小鼠均随机各分为对照组、假手术组、I/R模型组及I/R+烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）治疗组，每组6只小鼠(n=6)。采用冠脉左前降支结扎缺血30 min再灌注2 h建立在体大鼠急性心肌I/R模型，于术中监测心电指标。取心肌组织检测SIRT3、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）和过氧化氢酶（Catalase）蛋白的表达和心肌内氧自由基(ROS)的水平。结果:与野生型对照小鼠相比，SIRT3基因敲除型小鼠心肌中SIRT3、MnSOD和Catalase蛋白表达的水平显著降低。心律失常评分的结果显示，SIRT3基因敲除型小鼠的假手术组即可观察到心律失常。SIRT3基因敲除可导致小鼠心肌I/R所致心律失常显著加重（与野生型模型组相比，P<0.05）。心肌I/R后，SIRT3基因敲除型小鼠心肌中ROS的增加程度明显高于野生型模型组小鼠（P<0.05）。预先采用NAD+治疗，可显著提高野生型I/R小鼠心肌SIRT3的活性（与野生型小鼠模型组相比，P<0.05），显著增加心肌MnSOD的活性，进而有效地抑制I/R小鼠心肌中ROS的水平，有效缓解I/R所致心律失常（与野生型小鼠模型组相比，均P<0.05）。但是，SIRT3基因敲除后，NAD+治疗引起的上述心肌保护作用基本消失。结论:心肌中SIRT3表达的降低可能是加重心肌I/R过程中氧化应激损伤并促发心律失常的重要机制。SIRT3正常活性的维持有助于对抗心肌I/R损伤(MIRI)的发生。     

Sirtuin 3下调在高铁负荷导致骨骼肌损伤中的作用

目的观察体外高铁细胞培养环境以及小鼠铁蓄积状态下骨骼肌Sirtuin 3(SIRT3)表达的变化, 探讨SIRT3下调在高铁负荷导致骨骼肌损伤中的作用。方法以梯度浓度的枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate, FAC)干预小鼠成肌细胞C2C12, 检测细胞增殖、凋亡, 观察细胞形态, 检测SIRT3 mRNA、蛋白以及活性水平;ICR小鼠随机分为对照组, FAC干预组以及FAC+去铁胺(deferoxamine, DFO)组。对照组予生理盐水干预;FAC组以FAC干预, 再以生理盐水干预;FAC+DFO组在FAC后再以DFO干预, 检测骨骼肌非血红素铁、SIRT3蛋白水平, 测定肌细胞原位凋亡, 观察骨骼肌形态。结果 C2C12细胞分化后在FAC的干预下, 细胞的增殖活性下降(P<0.05), 细胞凋亡率升高(P<0.05), SIRT3 mRNA、蛋白以及生物活性均下降(P<0.05), 细胞形态逐渐萎缩, 肌管长度、数目逐渐减少。在在体研究中, FAC组小鼠骨骼肌非血红素铁含量与对照组相比增加(P<0.05), FAC+DFO组与FAC组...     

脂联素通过LKB1途径激活腺苷酸活化蛋白激酶

目的 探讨脂联素是否通过LKB1途径激活骨骼肌及肝脏中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK).方法 将28只6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠分为普通饮食组(NC组,n=15)和高脂饮食组(HF组,n=13).喂养16 周后,取空腹静脉血测定血清游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及脂联素.采用Western印迹法测定各组大鼠骨骼肌及肝脏组织中AMPKα、磷酸化的AMPKcα和LKB1蛋白的表达.将原代培养的骨骼肌细胞及肝细胞分别予以脂联素和根赤壳菌素干预,免疫荧光技术测定各组细胞中AMPKα、磷酸化AMPKα和LKB1蛋白的表达.结果 与NC组比较,HF组大鼠体重、FFA、TG、FPG、FINS均升高(均P＜0.05),脂联素水平降低(P＜0.05).骨骼肌及肝组织巾AMPKα磷酸化和LKB1蛋白表达水平降低(均P＜0.05).原代培养大鼠骨骼肌细胞及肝细胞中脂联素显著增加AMPKα磷酸化及LKB1表达水平(均P＜0.05).加入根赤壳菌素表达明显降低(均P＜0.05).结论 脂联素在大鼠骨骼肌和肝脏组织可能通过LKB1途径激活AMPK.     

糖尿病小鼠骨骼肌FoxO1及PPARγ的表达及意义

目的观察KKAy糖尿病小鼠骨骼肌组织中叉头状因子(Fox)O1、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ的表达,探讨FoxO1的表达与糖脂代谢的关系。方法8周龄KKAy小鼠8只为糖尿病模型组(DM),予以高脂饲料喂养;8周龄C57BL/6J小鼠16只,随机分为空白对照组(NC)8只、高脂喂养组(HFD)8只。喂养至16 w后检测3组小鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素(Ins)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测骨骼肌组织FoxO1及PPARγmRNA表达,Western印迹检测骨骼肌组织中FoxO1蛋白表达。结果DM组FBG、TG、TC、LDL-C、Ins和HOMA-IR水平均较NC组及HFD组显著升高(P<0.05),HFD组小鼠Ins、TC、LDL-C和HOMA-IR较NC组显著升高(P<0.05);DM组PPARγmRNA较NC组及HFD组均显著降低(P<0.01),HFD组PPARγmRNA较NC组显著降低(P<0.05);DM组FoxO1 mRNA及蛋白表达较NC组及HFD组均明显增高(P<0.05)。DM组骨骼肌FoxO1 mRNA表达与FBG(r=0.910,P<0.01)、Ins(r=0.864,P<0.01)、TG(r=0.897,P<0.01)和HOMA-IR(r=0.944,P<0.01)呈正相关,与PPARγmRNA呈负相关(r=-0.719,P<0.01)。结论FoxO1的表达与糖血脂代谢密切相关。     

黄芪多糖对2型糖尿病大鼠骨骼肌氧化应激水平及SIRT3表达的影响

目的探讨黄芪多糖(APS)对2型糖尿病大鼠骨骼肌氧化应激水平以及去乙酰化酶(SIRT)3表达的影响。方法50只SD大鼠随机分为对照组、模型组和APS低、中、高剂量组,每组10只。对照组给予普通饮食并注射等体积无菌柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液,模型组喂以高糖高脂饲料并给予链脲佐菌素溶液。根据禁食8 h后空腹血糖水平和口服糖耐量试验结果判断造模是否成功。APS低、中、高剂量组在模型制造成功后分别给予100、200、400 mg·kg~(-1)·d~(-1)三种不同剂量APS。给药8 w后测定各组血糖水平、体重变化及空腹胰岛素(FINS)水平,大鼠肌肉中超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH),活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR检测SIRT3 mRNA转录水平,Western印迹法检测SIRT3蛋白表达。结果糖尿病病情方面,模型组血糖和FINS较对照组显著升高(P0.05),体重显著下降(P0.05),APS处理组血糖和FINS均较模型组显著下降(P0.05)。氧化应激方面,模型组中GSH、SOD水平较对照组显著降低(P0.05),同时ROS、MDA水平较对照组显著升高(P0.05)。APS处理组GSH、SOD水平较模型组显著升高(P0.05),呈剂量效应关系;高剂量组ROS、MDA水平较模型组显著降低(P0.05)。模型组SIRT3转录和表达水平均较对照组显著下降(P0.05),APS处理后该蛋白转录和表达水平较模型组显著上升(P0.05)。结论 APS处理可以显著降低大鼠体内氧化应激水平,缓解糖尿病的发展,这可能与促进肌肉中SIRT3转录和表达介导有关。     

感染后肠易激综合征模型小鼠肠道组织中Th1/Th2的漂移

目的 观察感染后肠易激综合征(PI-IBS)模型小鼠肠道组织中Th1细胞因子白细胞介素(IL)-12和Th2细胞因子IL-4表达的变化.方法 30只成年雄性NIH小鼠,分为对照组(8只)和模型组(22只).模型组予以旋毛虫幼虫囊胞感染,每周测量小鼠体重,于感染后8周通过腹壁回撤反应(AWR)评分评估小鼠对结直肠扩张的内脏敏感性.感染后8周处死所有小鼠,取空肠、末端回肠、近端结肠和远端结肠行病理切片,HE染色观察肠道炎症情况.应用RT-PCR和Western印迹法检测肠道各部位组织中IL-12和IL-4的mRNA和蛋白表达量.结果 模型组感染后2周体重增长率为-1.08%±1.08%,明显低于正常组(3.09%±1.35%,P<0.05),感染后8周体重变化与对照组差异无统计学意义(P>0.05).模型组感染后2周肠道炎症明显,感染后8周肠道无明显炎症表现.在结直肠扩张压力为30、45和60 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)时,模型组AWR评分均高于正常组(P<0.05);模型组疼痛阈值低于正常对照组(P<0.05).模型组小鼠末端回肠和近端结肠组织中IL-12 mRNA及蛋白表达量均高于对照组(P<0.05);IL-4 mRNA及蛋白在各肠段中的表达均低于对照组(P<0.05).结论 PI-IBS小鼠肠道组织中存在Th1/Th2平衡漂移,为PI-IBS的治疗提供新的思路.     

单核细胞趋化蛋白1在病毒性心肌炎中的作用及黄芪甲甙干预研究

目的 探讨单核细胞趋化蛋白1在病毒性心肌炎中的作用及黄芪甲甙干预后的变化.方法 55只雄性Bal/c小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型对照组(n=15)、低剂量干预组(n=15)及高剂量干预组(n=15),后3组小鼠经腹腔接种0.1mL柯萨奇病毒B3建立病毒性心肌炎模型,低剂量干预组和高剂量干预组于病毒接种后当天分别以0.01g/L、0.09g/L黄芪甲甙0.1mL灌胃,正常对照组和模型对照组均以羧甲基纤维素钠溶液灌胃,第15天处死全部存活小鼠,心脏石蜡切片HE染色计算病理积分,免疫组织化学染色检测单核细胞趋化蛋白1蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应检测单核细胞趋化蛋白1mRNA表达.结果 正常对照组、模型对照组、低剂量干预组及高剂量干预组死亡率分别为0、46.7%、40.0%、13.3.0%,高剂量干预组死亡率明显低于模型对照组和低剂量干预组(P<0.05).模型对照组心肌单核细胞趋化蛋白1mRNA及蛋白表达水平均明显高于正常对照组(P<0.01),高剂量干预组病理积分及单核细胞趋化蛋白1mRNA、蛋白表达量较模型对照组、低剂量干预组显著降低(P<0.05或0.01).结论 单核细胞趋化蛋白1参与病毒性心肌炎发病过程,黄芪甲甙对病毒性心肌炎的治疗作用可能与其抑制单核细胞趋化蛋白1表达有关.     

SIRT3对SD大鼠体外循环心功能的影响

目的 探讨心肌线粒体去乙酰化酶 SIRT3对大鼠体外循环(CPB)所致急性心功能下降的影响及机制。方法 Sprague-Dawley(SD)成年大鼠30只,随机分为3组:对照组(sham组)、体外循环组(CPB组)、外源性烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)治疗体外循环组(NAD+治疗组),每组10只（n=10）。麻醉复苏后1 h,采用彩色多普勒超声诊断仪检测左心室收缩末期内径(LVIDs)、左心室舒张末期内径(LVIDd)、短轴缩短率(FS)及左心室射血分数(LVEF)。然后处死SD大鼠,取心肌组织,检测 AMPK、p-AMPK和心肌细胞膜Glut-4的蛋白表达及SIRT3和AMPK的活性。结果 与sham组相比,CPB组在CPB后血糖升高(P<0.05),心功能下降(P<0.05),具体表现为LVIDs和LVIDd值升高(P<0.05)、FS和LVEF值下降(P<0.05),CPB后SD大鼠心肌的SIRT3活性下降(P<0.05),下游的AMPK磷酸化水平及AMPK活性下降以及心肌细胞膜Glut-4的蛋白表达下降（均P<0.05）;预先采用外源性NAD+治疗,可显著降低血糖水平(P<0.05),提高CPB后SD大鼠心肌SIRT3的活性,促进心肌AMPK的磷酸化和该酶活性的升高(均P<0.05),并增加CPB大鼠心肌细胞膜Glut-4蛋白表达(P<0.05);与CPB组相比,NAD+治疗组心功能降低有所改善,表现为LVIDs和LVIDd值下降、FS和LVEF值升高(均P<0.05)。结论 NAD+治疗可明显改善SD大鼠CPB后的心功能,其机制可能与激活SIRT3,进而增加下游AMPK的磷酸化和该酶活性,以及增加心肌细胞膜Glut-4蛋白表达,并促进CPB术后心肌对葡萄糖的摄取和利用以及ATP的生成有关。     

坎地沙坦对自发性高血压大鼠骨骼肌胰岛素敏感性的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂(ARB)坎地沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)骨骼肌胰岛素敏感性的影响及其机制。方法 30只SHR随机分为模型组、坎地沙坦高剂量组(Can 1组)及坎地沙坦低剂量组(Can 2组),每组10只,另选10只WKY大鼠作为对照组。均给予果糖喂养,Can 1组(0.8 mg/kg)、Can 2组(0.4mg/kg)分别给予坎地沙坦灌胃干预,观察第8周末各组大鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和AngⅡ的水平,以及骨骼肌蛋白激酶B(Akt)的基因及蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠AngⅡ、HOMA-IR及血清空腹胰岛素(FINS)明显升高,骨骼肌中Akt mRNA表达及P-Akt蛋白表达显著减少,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,Can 1组大鼠FINS、HOMA-IR明显降低,Can 1组和Can 2组骨骼肌Akt mRNA表达及P-Akt表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 AngⅡ通过下调SHR骨骼肌的Akt蛋白表达引起胰岛素抵抗,而坎地沙坦通过抑制AngⅡ的这种作用改善骨骼肌胰岛素抵抗。     

ApN/TNF-α信号途径在有氧运动防治ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化过程中的抗炎症作用

目的观察有氧运动对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化(AS)的防治效果,探讨脂联素(ApN)/肿瘤坏死因子(TNF)-α信号途径的抗炎症作用。方法 8周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为对照组(C,10只)和运动组(E,10只)。14 w运动干预结束后取材观察主动脉管壁的病理变化,检测脂肪组织ApN mRNA表达和血清ApN水平及主动脉脂联素受体(AdipoR)1、TNF-α蛋白表达水平。结果 C组小鼠主动脉血管壁纤维板断裂,可见大量泡沫细胞浸润和纤维斑块,E组小鼠较C组主动脉病变有所延缓;E组小鼠ApN mRNA表达及血清水平显著高于C组(P0.05);E组小鼠主动脉AdipoR1蛋白表达显著高于C组(P0.05),主动脉TNF-α蛋白表达显著低于C组(P0.05)。结论有氧运动通过增强ApoE-/-小鼠ApN信号途径,抑制主动脉TNF-α蛋白表达,发挥防治AS的抗炎症作用。     

桑叶总黄酮对2型糖尿病大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α和腺苷酸活化蛋白激酶α2蛋白表达的影响

目的探讨桑叶总黄酮对2型糖尿病(T2DM)大鼠肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α和腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α2蛋白表达的影响及机制。方法建立高脂饲料喂养且用链脲佐菌素诱导T2DM雄性Wistar大鼠模型,将模型大鼠随机分为5组:模型组、二甲双胍组(100 mg/kg灌胃)、桑叶总黄酮组(200,100,50 mg/kg灌胃),同时设立正常对照组。4 w后检测大鼠空腹血糖(FPG)、血清胰岛素(FINS)水平,Western印迹检测肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达。结果桑叶总黄酮能降低T2DM大鼠的FPG、FINS水平,Western印迹显示模型组大鼠肝脏PPARα和AMPKα2蛋白表达较正常对照组均明显下降(P<0.01)。经桑叶总黄酮干预治疗后,AMPKα2蛋白表达较模型组显著增加(P<0.01),PPARα蛋白水平改变不明显(P>0.05)。结论桑叶总黄酮对T2DM大鼠有一定的治疗作用,可能与其增加大鼠肝脏AMPKα2蛋白表达有关。