蒙古沙鼠幽门螺杆菌相关性胃炎Sonic hedgehog基因、IL-1β及TNF-α的表达

目的研究形态基因Sonic hedgehog(Shh)以及IL-1β和TNF-α在H pylori相关性胃炎中表达的相关性及作用.方法♂蒙古沙鼠50只给予悉尼菌株灌胃造成H pylori感染模型,另设50只♂蒙古沙鼠作为对照.应用RT-PCR的方法对沙鼠胃黏膜组织中的Shh,IL-1β以及TNF-α mRNA表达水平进行检测;应用免疫组化的方法对于Shh蛋白进行细胞定位以及半定量分析其表达水平.结果H pylori灌胃36和48 wk后,Shh mRNA表达水平明显降低(0.28 vs 0.48,t=3.24,P＜0.05;0.18 vs 0.45,t=3.01,P＜0.05).Shh mRNA表达水平与IL-1β,TNF-α mRNA表达之间以及与炎症分级之间呈显著负相关(r=-0.37,P＜0.01;r=-0.30,P＜0.05;r=-0.39,P＜0.001).Shh蛋白主要表达于胃体壁细胞胞质中,H pylori灌胃36和46 wk,表达Shh抗原的阳性细胞数明显减少(Z=4.84,P＜0.001;Z=4.57,P＜0.001).Shh蛋白的表达与IL-1βmRNA,TNF-α mRNA的表达以及慢性炎症分级之间也呈显著负相关(r=-0.321,P＜0.05;r=-0.313,P＜0.05;r=-0.371,P＜0.001).结论蒙古沙鼠胃黏膜感染H pylori后,IL-1β和TNF-α表达上调,并与炎症程度呈显著正相关;Shh表达下调,并与炎症分级及IL-1β和TNF-α表达呈显著负相关.     

幽门螺杆菌相关胃炎中TNF-α和IL-1β分泌的原位研究

目的 :原位检测幽门螺杆菌 (Hp)感染时胃黏膜活检标本中肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白介素 1 β(IL 1 β)的产生情况。方法 ;采集 1 3例Hp阴性受检者和 32例Hp阳性受检者的胃黏膜活检标本 ,通过放免法、免疫组织化学法观察并比较两组胃黏膜活检标本中细胞因子TNF α和IL 1 β的产生。结果 :胃黏膜活检标本中TNF α和IL 1 β的分泌在Hp阳性组显著高于Hp阴性组 (P <0 .0 1 ) ,但其分泌与胃黏膜的病理分型似无显著相关性 (P >0 .0 5)。TNF α和IL 1 β的组织表达在Hp阳性组也显著高于Hp阴性组 (P <0 .0 5)。结论 :Hp感染可以使局部细胞因子TNF α和IL 1 β产生增加 ,可能在Hp相关胃炎中起致病作用     

IL-10、COX-2在幽门螺杆菌相关性胃炎组织中的表达及相关性研究

目的了解IL-10、COX-2在幽门螺杆菌（H.pylori）相关性胃炎组织中的表达及相关性,为免疫治疗H.pylori相关性胃炎及预防胃癌发生提供临床和实验依据。方法收集因上腹部不适等症状于我院行胃镜检查诊断为胃炎者110例,取胃窦部黏膜活检标本3块,分别行快速尿素酶试验、Warthin-Starry嗜银染色、HE染色。根据H.pylori科研诊断标准,110例标本中符合实验研究的共74例,其中H.pylori阳性59例,H.pylori阴性15例。免疫组化方法检测74例标本中IL-10、COX-2蛋白的表达情况。结果IL-10、COX-2在H.pylori（＋）胃炎中的阳性表达率分别为49.15%、59.32%,与H.pylori（-）组的13.33%、20.00%相比,两种因子的阳性表达率均显著增加（P〈0.05）。H.pylori（＋）组,IL-10、COX-2在慢性活动性胃炎中的阳性表达率分别为32.26%、74.19%,在非活动性胃炎的阳性表达率分别为67.86%、42.86%。IL-10在慢性活动性胃炎的阳性表达率低于非活动性胃炎（P〈0.02）;COX-2在慢性活动性胃炎的阳性表达率高于非活动性胃炎（P〈0.03）。H.pylori（＋）组,IL-10、COX-2在慢性浅表性胃炎中的阳性表达率分别为64.00%、44.00%,慢性萎缩性胃炎分别为38.10%、61.90%,肠化生及异型增生分别为38.46%、84.62%。IL-10在3组之间差异无显著性（P〉0.05）;COX-2的表达呈递增趋势,在肠化及异型增生组表达显著增高,与浅表性胃炎相比,差异显著（P〈0.05）,其余各组两两相比无显著性差异（P〉0.05）;H.pylori（＋）组,IL-10与COX-2的表达呈显著负相关,相关系数r=-0.566（P〈0.001）。结论 IL-10、COX-2两种因子的产生与H.pylori感染相关;COX-2与胃癌的发生有关,是胃癌发生的早期事件,IL-10可能抑制了COX-2的过度表达及活性,在H.pylori相关胃炎及胃癌癌前病变中发挥保护作用。     

幽门螺杆菌感染胃炎组织中IL－1βmRNA的表达

以60例胃炎患者和60例健康者为研究对象,应用逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）技术检测白细胞介素1（IL－1）mRNA表达,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测幽门螺杆菌（Hp）抗体浓度。发现在胃体及胃窦部,Hp阳性组IL－1pmRNA表达阳性率均明显高于Hp阴性组,提示Hp可能通过影响胃窦部及胃黏膜IL-1β的产生量进而影响胃内酸分泌的途径,最终影响胃炎、胃癌的发展模式。     

IL-1B及IL-1RN基因多态性与幽门螺杆菌相关的胃十二指肠疾病

白细胞介素-1(Interlukin-1,IL-1)有两种类型IL-1α和IL-1β,以IL-1β为主,主要由活化的单核巨噬细胞产生,与IL-1受体(IL-1R)结合后产生生物学作用.IL-1β是一个非常重要的前炎症细胞因子,在炎症免疫损伤机制中起着主要的调节作用,同时具有强大的抑制胃酸分泌作用,在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H·py-lori)感染的胃黏膜损伤和萎缩性胃炎发展及胃癌发生中起重要作用.     

幽门螺杆菌感染与老年早期胃癌病程及IL-6、TGF-β1、TNF-α因子的相关性

目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与老年早期胃癌患者的病程及胃癌相关细胞因子白细胞介素(IL)-6、转化生长因子(TGF)-β1和肿瘤坏死因子(TNF)-α释放的关系。方法收集胃癌患者59例,均接受~(13)C呼气法检测Hp感染情况,依据Hp感染情况分为阳性与阴性两组,分析Hp感染对两组胃癌病程变化及胃癌相关细胞因子IL-6、TGF-β1、TNF-α的影响。结果 Hp感染以男性患者居多(t=4.32,P<0.05),Hp感染对胃癌分期的影响差异有统计学意义(t=5.77,P<0.05),感染阳性者凹陷型病例居多,Hp感染对老年早期胃癌的病理分型无明显影响(P>0.05),Hp阳性感染患者IL-6(t=6.15,P<0.05)及TGF-β1(t=8.27,P<0.05)均高于阴性组患者。结论老年早期胃癌患者应尽早接受Hp筛查,Hp感染对胃癌病程有影响,阳性感染者应尽早接受抑菌治疗,以有效排除其对胃癌病程的影响。     

益气健脾活血中药对萎缩性胃炎TNF-α、IL-2和EGF表达的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-2和表皮生长因子(EGF)在气虚血瘀型萎缩性胃炎(CAG)进程中的变化及益气健脾活血中药的干预效应.方法 将90只大鼠随机分为空白组(n=10)和模型组(n=80),除空白组外其余大鼠采用综合法复制气虚血瘀型CAG动物模型,并于造模中抽检大鼠,至第12w评估大鼠胃黏膜肠化生形成后,CAG模型大鼠采用随机数字表法分为模型组、益气健脾活血中药大、中、小剂量组和维酶素组,分别施药治疗90 d后对各组大鼠胃黏膜TNF-α、IL-2和血清EGF进行检测.结果 与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜TNF-α、IL-2和血清EGF水平显著升高(P＜0.01);与模型组比较,益气健脾活血中药可显著降低TNF-α、IL-2和EGF水平(P＜0.05),且大剂量组作用显著.结论 益气健脾活血中药具有改善胃黏膜血流量,减轻炎症反应和调整免疫功能的作用.     

HP感染患者血清TNF-α、IL-6、sICAM-1含量的变化及意义

许多研究表明，幽门螺杆菌(HP)是引起慢性活动性胃炎、消化性溃疡的重要致病因素，且与胃癌及胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤的发生密切相关。2002年5月至2003年5月，我们对310例HP感染患者血清中α—肿瘤坏死因子(TNF—α)、白细胞介素—6(IL—6)、可溶性黏附分子1(sICAM—1)进行检测，探讨其在胃部疾病发病中的意义。现报告如下。     

不同分型幽门螺杆菌感染对消化性溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平的影响

目的探究不同分型幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染对消化性溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平表达的影响及意义。方法选取消化性溃疡患者158例,其中HP阳性109例(HP I型组58例,HP II型组51例),HP阴性组49例。观察IL-10、IL-17及TNF-α水平,比较各组中胃溃疡与十二指肠溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α表达水平。结果 HP I型组、HP II型组IL-10、IL-17及TNF-α水平高于HP阴性组(P均0.05);HP I型组IL-10、IL-17及TNF-α水平又高于HP II型组(P均0.05)。HP I型感染者中,十二指肠溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平显著高于胃溃疡患者(P均0.05)。HP II型感染者中,胃溃疡与十二指肠溃疡患者IL-10、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P均0.05);十二指肠溃疡患者血清IL-17水平高于胃溃疡患者,差异具有统计学意义(P0.05)。HP阴性患者中十二指肠溃疡患者与胃溃疡患者血清IL-10、IL-17、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P均0.05)。结论不同分型HP感染的消化性溃疡患者血清IL-10、IL-17及TNF-α水平存在显著的差异,对于临床诊断具有一定的参考价值。     

IL-1B及IL-1RN基因多态性与幽门螺杆菌相关的胃十二指肠疾病

白细胞介素-1(Intedukin-1，IL-1)有两种类型：IL-1α和IL-1β，以IL-1β为主，主要由活化的单核巨噬细胞产生，与IL-1受体(IL-1R)结合后产生生物学作用。IL-1β是一个非常重要的前炎症细胞因子，在炎症免疫损伤机制中起着主要的调节作用。同时具有强大的抑制胃酸分泌作用，在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)感染的胃黏膜损伤和萎缩性胃炎发展及胃癌发生中起重要作用。IL-1受体拮抗剂(IL-1Rα)是IL-1家族的另一成员．     

幽门螺杆菌相关性胃炎患者趋化因子IP-10、Mig的表达

目的 探讨幽门螺杆菌（Hp）相关性胃炎患者胃粘膜内趋化因子IP-10、Mig的表达水平。方法 28例胃炎患者行胃镜检查钳取胃粘膜标本,依据HE染色、快速尿素酶试验及石炭酸染色,分为正常胃粘膜组、Hp阴性胃炎组及Hp阳性胃炎组,并对Hp阳性胃炎组的炎症活动程度进行分级。以ELISA法检测胃粘膜内IP-10、Mig的表达水平。结果 正常对照组、Hp阴性组、Hp阳性组的IP-10、Mig含量分别为（30.5±14.6）、（60.4±23.8）、（179.9±30.2）ng?L-1和（24.1±14.4）、（49.5±19.4）、（160.6±34.6）ng?L-1,与正常对照组相比,差异显著（分别P<0.05、P<0.01）,且Hp阳性组IP-10、Mig的表达水平与胃粘膜炎症活动程度均呈正相关（r＝0.9811, P<0.001和r＝0.9938, P<0.001）。结论 IP-10、Mig介导了Hp相关性胃炎炎症细胞的浸润,造成胃粘膜组织损伤,在Hp相关性胃炎发病机制中起一定作用。     

幽门螺杆菌相关性十二指肠球溃疡与胃癌中NF-κB、VEGF、Bcl-2、IL-1β的表达及意义

目的 探讨H.pylori相关性十二指肠溃疡与胃癌病例中NF-κB、Bcl-2、VEGF、IL-1β表达的差异及相互关系,进一步了解H.pylori致胃癌与十二指肠溃疡的发病机制.方法 选取胃镜检查的胃黏膜活检标本,十二指肠溃疡患者33例,胃癌患者63例,通过免疫组化SP法测定NF-κB、Bcl-2、VEGF、IL-1β在H.pylori感染与非感染的胃癌及十二指肠溃疡患者胃黏膜中的表达情况.结果 十二指肠溃疡组和胃癌组中,H.pylori感染者NF-κB、VEGF与IL-1β的表达水平高于H.pylori阴性者(P＜0.01或0.05),Bcl-2的表达无显著差异(P＞0.05);H.pylori感染病例中,NF-κB、Bcl-2、VEGF在胃癌组的表达水平高于十二指肠溃疡组(P＜0.01或0.05),IL-1β的表达无显著差异(P＞0.05);胃癌组与球溃疡组中,NF-κB的表达水平与VEGF均呈正相关(P＜0.05);胃癌组中,NF-κB和VEGF的表达水平与Bcl-2呈正相关(P＜0.05),与IL-1β表达水平无明显相关性(P＞0.05);球溃疡组中,NF-κB和VEGF的表达水平与IL-1β表达水平呈正相关(P＜0.05),与Bcl-2表达水平无明显相关性(P＞0.05).结论 幽门螺杆菌感染可上调宿主胃黏膜上皮NF-κB、VEGF及IL-1β的表达,三者表达水平具有协同性,其中NF-κB、VEGF表达的差异与十二指肠溃疡与胃癌两种不同的疾病转归相关.     

慢性萎缩性胃炎并幽门螺杆菌感染患者吹气定量测定值与G-17、IL-32、sIL-2R水平及胃镜下病理变化的关系

背景幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)是公认的胃癌致病因子,慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)并H.pylori感染的诊治一直是临床研究重点.目的探讨CAG并H.pylori,感染患者吹气定量检测值(delta over baseline,...     

幽门螺杆菌临床菌株2148 bp的cagA基因片段克隆、表达及免疫性鉴定

目的　克隆幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)临床菌株的cagA基因片段 ,构建原核表达系统 ,鉴定重组表达产物的免疫原性。方法　由于cagA基因核苷酸序列变异较大 ,选择序列相对稳定的 2 14 8bp为目的片段 (cagA1)。采用高保真PCR扩增幽门螺杆菌临床分离菌株Y0 6中的目的片段cagA1,T -A克隆后测序。构建 pET32a的cagA1片段表达载体 ,在E coliBL2 1DE3宿主菌中用不同浓度的IPTG诱导表达。采用Ni-NTA亲和层析法收集表达的目的重组蛋白 (rCagA1)。采用Hp全菌抗体的Westernblot鉴定rCagA1免疫反应性 ,免疫双扩散试验鉴定rCagA1免疫家兔的抗血清效价。 结果　PCR获得预期大小的目的扩增条带。与文献报道比较 ,克隆的cagA1核苷酸和氨基酸序列同源性分别为 94 83%和93 30 %。所构建的原核表达系统 pET32a -cagA1-E coliBL2 1DE3目的重组蛋白 (rCagA1)表达量为细菌总蛋白的 30 %左右。Westernblot证实rCagA1能与Hp全菌抗体发生特异性免疫结合反应。兔抗rCagA1血清的免疫双扩散效价为 1∶4。结论　本文成功地构建了HpcagA基因片段cagA1的高效原核表达系统 ,所表达的rCagA1具有良好的免疫原性和免疫反应性 ,为进一步研制cagA及其抗体检测试剂盒奠定了基础。     

幽门螺杆菌相关性十二指肠球溃疡与胃癌中NF—KB、VEGF、Bcl-2、IL-1β的表达及意义

目的探讨Hpylori相关性十二指肠溃疡与胃癌病例中NF—KB、Bcl-2、VEGF、IL-1β表达的差异及相互关系，进一步了解Hpylori致胃癌与十二指肠溃疡的发病机制。方法选取胃镜检查的胃黏膜活检标本，十二指肠溃疡患者33例，胃癌患者63例，通过免疫组化sP法测定NF—KB、Bcl-2、VEGF、IL-1β在H．pylori感染与非感染的胃癌及十二指肠溃疡患者胃黏膜中的表达情况。结果十二指肠溃疡组和胃癌组中，H．pylori感染者NF—KB、VEGF与IL-1β的表达水平高于npylori阴性者（P〈0．Ol或0．05），Bcl-2的表达无显著差异（P〉0．05）；H．pylori感染病例中，NF—KB、Bcl-2、VEGF在胃癌组的表达水平高于十二指肠溃疡组（P〈0．01或0．05），IL-1β的表达无显著差异（P〉0．05）；胃癌组与球溃疡组中，NF—KB的表达水平与VEGF均呈正相关（P〈0．05）；胃癌组巾，NF—KB和VEGF的表达水平与Bcl-2呈正相关（P〈0．05），与IL-1β表达水平无明显相关性（P〉0．05）；球溃疡组中，NF—KB和VEGF的表达水平与IL-1β表达水平呈正相关（P〈0．05），与Bcl-2表达水平无明显相关性（P〉0．05）．结论幽门螺杆菌感染可上调宿主胃黏膜上皮NF—KB、VEGF及IL-1β的表达，三者表达水平具有协同性，其中NF—KB、VEGF表达的差异与十二指肠溃疡与胃癌两种不同的疾病转归相关，     

幽门螺杆菌对肠化生胃黏膜Cdx2和肿瘤坏死因子-α蛋白表达的影响

目的探讨幽门螺杆菌对慢性浅表性胃炎伴肠化生胃黏膜尾型同源异型核基因(Cdx)2和肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达的影响。方法选择30例慢性浅表性胃炎、30例轻度肠化生,35例中度肠化生和35例重度肠化生患者进行幽门螺杆菌(Hp)检查,并检测各组在不同Hp感染情况、Hp阳性Hp根除前后Cdx2和TNF-α蛋白的表达情况。结果 Cdx2、TNF-α蛋白在慢性浅表性胃炎组(胃炎组)、轻、中、重度肠化生组的表达阳性率逐渐升高,且Cdx2表达在不同组间比较差异均有统计学意义(P0.05);TNF-α表达在胃炎组及不同程度肠上皮化生组间比较差异均有统计学意义(P0.05),随着肠化生加重,Hp感染率呈增加趋势,不同Hp感染情况时各组内Cdx2表达差异均无统计学意义(P0.05),TNF-α表达差异均有统计学意义(P0.05); Hp阳性经Hp根除后Cdx2阳性表达率下降,但仅有轻度肠化生组差异有统计学意义(P0.05);Hp阳性经Hp根除后TNF-α蛋白表达率下降,轻度肠化生组、中度肠化生组差异均有统计学意义(P0.05),重度肠化生组差异无统计学意义(P0.05)。结论监测Cdx2、TNF-α蛋白表达水平有助于判断肠上皮化生程度,胃黏膜轻度肠化生根除Hp后可逆转,中度肠化生胃黏膜根除Hp后胃黏膜炎症可减退。     

脂欣康胶囊对载脂蛋白E基因敲除小鼠TNF-α、IL-1β干预作用

目的观察脂欣康胶囊对载脂蛋白E（ApoE）基因敲除小鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）的影响。方法将6周龄ApoE基因敲除小鼠随机分为模型组与脂欣康组，相同遗传背景的同龄正常C57BL／6J小鼠为正常对照组。脂欣康组灌服脂欣康胶囊内之药粉，模型组、正常对照组均灌服生理盐水。连续灌胃2周后（8周龄），各组随机取出半数小鼠，雌雄各半。麻醉后由腹腔静脉抽血。另一部分继续灌胃4周后（12周龄）由腹腔静脉抽血。离心分离血清，ELISA法检测TNF-α和IL-1β结果灌服2周后，脂欣康组小鼠血清TNF-α和IL-1β显著低于模型组（P〈0．05），模型组显著高于正常对照组（P〈0．05）；继续用药4周后，TNF-α和IL-1β无明显增高，脂欣康组显著低于模型组（P〈0.05），模型组显著高于正常对照组（P〈0．05）。结论脂欣康胶囊具有显著抑制ApoE基因敲除小鼠血清TNF-α与IL-1β增高的作用。     

肺气虚模型大鼠血ET、IL-1β及TNF-α含量的变化

目的 观察肺气虚模型大鼠血内皮素(ET)、白介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的变化.方法 用气管内注入脂多糖及熏香烟方法复制肺气虚大鼠模型,观察症状、体征以及24 h尿量、比重;放免法测定血ET、IL-1β及TNF-α含量;HE染色观察形态学变化.结果 模型组大鼠出现咳嗽、气急、鼻部潮红,精神萎靡、蜷伏不动、毛失光泽、食量减少、便稀等症状,同时伴有尿量减少、比重增加;血ET、 IL-1β与TNF-α均有升高;肺组织符合慢性支气管炎、肺气肿病理变化.结论 血ET、IL-1β及TNF-α含量升高,可作为肺气虚模型大鼠的客观指标.     

微创血肿清除术对大鼠脑出血灶周围组织TNF-α、IL-1β表达的影响

目的观察微创血肿清除术对大鼠脑出血灶周肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β表达的影响。方法将90只Wistar大鼠随机分为三组各30只,模型组及微创组均制备脑出血模型。造模成功后4 h微创组行微创血肿清除术,模型组不作干预,分别在各个时间点断头取脑,对照组颅内注入50μL的生理盐水。采用免疫组化染色法检测出血后6、12、24、48、72 h血肿周围组织中TNF-α、IL-1β水平。结果模型组6、12、24、48、72 h TNF-α、IL-1β水平明显高于假手术组及微创组,P均<0.05;假手术组与微创组各时点比较均无统计学差异。结论颅内血肿微创血肿清除术可以减少出血灶周围TNF-α、IL-1β的表达。