血管紧张素Ⅱ、卡托普利及氯沙坦对血管内皮细胞凋亡的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对血管内皮细胞凋亡的作用及卡托普利和氯沙坦的影响。方法：采用流式细胞术测定在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下血管内皮细胞凋亡率的变化和卡托普利、氯沙坦的影响。结果：血管紧张素Ⅱ可明显促进血管内皮细胞凋亡，且其作用呈剂量依赖性和时间依赖性；单用氯沙坦对细胞凋亡无明显作用，卡托普利有一定的作用，二者合用时抑制作用较明显。结论：血管紧张素Ⅱ具有明显的促血管内皮细胞凋亡的作用；合用卡托普利和氯沙坦可明显抑制内皮细胞凋亡。     

脉平对离体内皮细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的 探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对内皮细胞凋亡率及凋亡调控基因的作用及脉平对其影响.方法 采用流式细胞仪测定在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下内皮细胞凋亡率及凋亡基因Fas和Bcl-2表达的变化和应用脉平后对其的影响.结果 血管紧张素Ⅱ可明显促进凋亡率及凋亡基因的表达,且其作用呈剂量依赖性和时间依赖性;经脉平处理后的内皮细胞对AngⅡ的反应完全不同,凋亡率明显降低,同时Fas的表达量随药物浓度增加和作用时间延长而降低,Bcl-2则增高.结论 血管紧张素Ⅱ具有明显的促进细胞凋亡和凋亡基因表达的作用,脉平对细胞凋亡和凋亡基因表达有一定的调节作用.     

脉平对血管紧张素II所致平滑肌细胞基质金属蛋白酶变化的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶（MMPs）变化的作用及药物对其影响。方法采用RT-PCR方法检测在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下血管平滑肌细胞MMPs的变化和卡托普利、氯沙坦及脉平对其影响。结果血管紧张素Ⅱ可诱导血管平滑肌细胞MMPs的表达,MMP-9表达较MMP-1和MMP-2出现早;应用药物后对血管紧张素Ⅱ的作用有明显的抑制作用。结论血管紧张素Ⅱ具有一定促进血管平滑肌细胞MMPs表达作用,尤其在大剂量作用较明显;脉平可明显抑制血管紧张素Ⅱ的作用。     

中药心康对AngII所致平滑肌细胞凋亡的影响

目的探讨血管紧张素I在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用及心康对其影响.方法采用流式细胞技术测定在血管紧张素II不同浓度和不同作用时间下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2表达的变化和应用心康后对其影响.结果血管紧张素II对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用;心康可抑制AngII作用,对细胞凋亡有一定的影响,同时可影响凋亡调控基因的表达.结论血管紧张素I具有一定促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用,尤其在大剂量作用较明显;心康可明显抑制AngI对血管平滑肌细胞的作用.     

卡托普利和氯沙坦对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞Bcl2和Fas基因表达的抑制作用

目的研究卡托普利（CP）和氯沙坦（LT）及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对Wistar大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡相关基因表达的影响。方法采用流式细胞技术检测CP、LT及CP与LT联合应用对在AngⅡ不同浓度、不同作用时间下体外培养的大鼠主动脉VSMC凋亡相关基因Bcl 2及Fas的表达量。结果随着AngⅡ作用浓度的增加和作用时间的延长, Bcl 2基因表达量增加且呈浓度和作用时间依赖(P<0.01);AngⅡ可使Fas 的表达量增加(P<0.05),但无明显时间和浓度依赖性;一定浓度的CP（5×10-6mol/L）和LT（5×10-6mol/L）可抑制AngⅡ对2个基因表达的影响。(P均<0.05或P均<0.01)。 结论CP和LT可以通过拮抗VSMC凋亡基因Bcl 2和Fas的表达促进异常增殖的VSMC凋亡,且这一作用与作用浓度和作用时间相关。     

血管紧张素Ⅱ对单核细胞凋亡的影响

目的　研究不同浓度的血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )对人单核细胞THP - 1凋亡的影响。方法　对培养的人单核细胞THP - 1予不同浓度的AngⅡ刺激 ,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率进行比较。结果　单核细胞的凋亡率随AngⅡ浓度的增加而增加。加用AngⅡ受体阻滞剂氯沙坦可部分阻滞这种作用。结论　AngⅡ促进单核细胞凋亡 ,并具有一定的时间、剂量依赖性     

氯沙坦对血管紧张素Ⅱ促原代急性髓系白血病细胞凋亡的诱导作用

目的:观察氯沙坦联合柔红霉素对血管紧张素Ⅱ作用下急性髓系白血病(acute myeloid leuke-mia,AML)细胞增殖的抑制作用,检测氯沙坦联合柔红霉素对血管紧张素Ⅱ作用下AML细胞凋亡的影响。方法 :采用噻唑蓝(MTT)比色法检测氯沙坦联合柔红霉素对血管紧张素Ⅱ作用下AML细胞增殖的抑制作用,用流式细胞仪检测联合用药组间细胞凋亡率。结果:氯沙坦联合柔红霉素作用于AML细胞后,在体外呈浓度、时间依赖性显著抑制原代AML细胞的生长,半数抑制浓度为(16.2±1.3)μg/mL,与单用柔红霉素对照组间有显著性差异(P<0.05)。氯沙坦联合柔红霉素作用于AML后,随浓度的增加,细胞凋亡率增加,分别为2%、16.7%、21.1%、26.1%。结论:氯沙坦联合柔红霉素对血管紧张素Ⅱ作用下AML细胞增殖有抑制作用,可能与其诱导细胞的凋亡机制有关。     

缺氧条件下血管紧张素-2对血管内皮细胞内皮素分泌的影响及茶多酚的保护作用

目的:观察缺氧条件下血管紧张素-2对培养的血管内皮细胞分泌内皮素的影响及茶多酚的保护作用。方法:将培养的血管内皮细胞分为空白对照组、单纯缺氧组、血管紧张素-2组和血管紧张素-2+茶多酚组,采用低压舱对培养的血管内皮细胞进行缺氧,采用放射免疫方法测定各组样本细胞培养液中的内皮素浓度。结果:血管紧张素-2组的内皮素浓度显著高于单纯缺氧组,加入茶多酚后,血管内皮细胞的内皮素浓度显著降低。结论:缺氧条件下,血管紧张素-2可显著增加培养的血管内皮细胞的内皮素浓度,茶多酚可显著降低血管紧张素-2引起的内皮素浓度的增加,从而起到保护作用。     

氯沙坦、卡托普利联合对兔心肌缺血再灌注诱导内皮细胞损伤的影响

目的:研究氯沙坦联合卡托普利对兔心肌缺血再灌注损伤内皮细胞的保护作用及其机制。方法:结扎兔左冠状动脉前降支制作心肌缺血再灌注损伤模型,随机分为空白对照组、缺血再灌注组和联合组。联合组在心肌缺血前10min给予氯沙坦和卡托普利。观察各组缺血再灌注过程中心电图的动态改变,以及氯沙坦和卡托普利联合对血管性血友病因子及丙二醛和血清一氧化氮含量、损伤兔血浆及心肌组织血管紧张素的水平的影响。结果:缺血再灌注组和联合组均造成明显的心电图动态改变,与空白对照组比较,联合组心电图ST段出现有效改变。缺血再灌注组和联合组血浆和心肌组织血管紧张素水平呈时间依赖性升高,血管性血友病因子活性和丙二醛水平较缺血再灌注组显著降低,而血清一氧化氮水平明显提高。结论:氯沙坦和卡托普利的联合使用对心肌缺血再灌注损伤内皮细胞有明显的保护作用,其作用与多层面的清除氧自由基的膜脂质过氧化及拮抗血管紧张素受体AT1有关。     

钩藤总生物碱干预大鼠血管内皮细胞衰老研究

目的;探讨钩藤总生物碱对血管紧张素Ⅱ、D半乳糖诱导的大鼠主动脉内皮细胞增殖、衰老的抑制效应及相关机制。方法;分别建立血管紧张素Ⅱ、D半乳糖诱导的大鼠主动脉内皮细胞增殖、衰老模型,分别通过MTT法、流式细胞术观察钩藤总生物碱对其增殖、细胞周期的影响。结果;钩藤总生物碱呈浓度依赖性抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠主动脉内皮细胞增殖;在钩藤总生物碱作用下,D半乳糖诱导的大鼠主动脉内皮细胞处于G₀/G₁期细胞数减少,S期细胞数增多。结论;钩藤总生物碱可剂量依赖性地抑制AngⅡ的促内皮细胞增殖效应,对D半乳糖介导的内皮细胞衰老具有明显的抑制作用。      

氯沙坦和卡托普利对兔动脉粥样斑块形成的影响

目的：研究血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂氯沙坦和血管紧张素转换酶抑制剂卡托普利对兔动脉粥样硬化斑块形成的干预作用。方法：31只雄性新西兰兔分为正常对照组（4只）、高胆固醇组（7只）、氯沙坦组（6只）、卡托普利组（7只）和联合用药（氯沙坦 卡托普利）组（7只），饲养16周处死动物，分别测定（或计算）内皮素、一氧化氮、主动脉中胆固醇含量、主动脉粥样斑块面积比及血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）调亡率等指标。结果：与高胆固醇组比较，各服药组动态粥样斑块面积和主动脉胆固醇含量显著减少，以联合用药组疗效最佳，内皮素水平下降，一氧化氮含量增加；氯沙坦组及联合用药组VSMC调亡率增加。结论：氯沙坦和卡托普利可显著延缓高胆固醇饮食诱导的动脉粥样硬化进程，其作用机制与促进VSMC凋亡和内皮功能保护有关；小剂量联合用药疗效更佳。     

PPAR-γ激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响,并与AngⅡⅠ型受体(AT1R)拮抗剂losartan相对照,即从细胞水平进一步揭示PPARγ与高血压病的关系.方法 以脐静脉内皮细胞为研究对象,观察PPARγ激动troglitazone对内皮细胞分泌内皮素-1(ET-1)和NO的影响,及其对AngⅡ刺激内皮细胞分泌ET-1和NO的影响,并与losartan相对照.结果 10 μmol/L和50μmol/L troglitazone使人脐静脉内皮细胞分泌ET-1含量与对照组相比虽有下降但无统计学意义,而NO与对照组相比明显升高(P＜0.05);50μmol/L troglitazone可明显抑制AngⅡ(1×10-6 mol/L)刺激的ET的分泌(P＜0.05);两种浓度troglitazone均能抑制AngⅡ对内皮细胞生成NO的减低作用(P＜0.05);losartan抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1增加和抑制AngⅡ减弱内皮细胞合成和分泌NO的作用比troglitazone更为明显(P＜0.05).结论 PPARγ激动剂troglitazone可抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1的增加和NO的减少,但其作用并没有losartan明显,提示troglitazone通过影响血管活性因子的分泌而调节血压的作用并非完全是通过AT1R途径.     

氯沙坦对高糖状态下内皮细胞的保护作用及其机制探讨

目的：探讨高糖环境下氯沙坦对内皮细胞的保护作用及其机制。方珐：比色法测定内皮细胞条件培养上清中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的活性和丙二醛（MDA）水平，RT—PCR方法分析细胞yEGFmRNA的表达水平，ELISA方法检测细胞分泌的VEGF蛋白。结果：在高糖处理的细胞条件培养上清中SOD和CAT活性降低，而MDA含量升高（P〈0．05），同时细胞yEGF mRNA和蛋白质表达增加（P〈0．05）；而氯沙坦可削弱上述变化，降低内皮细胞MDA含量、增强SOD与CAT活性，以及下调VEGF mRNA和蛋白质表达（P〈0．05）。结论：高糖可诱导内皮细胞活性氧产生增多，抗氧化酶活性下降，导致细胞氧化平衡失调，使yEGF mRNA表达与蛋白分泌增加，促进高糖时内皮细胞病变的进展，提示氯沙坦对高糖状态下的内皮细胞的保护作用可能与调节内皮细胞氧化平衡和抑制内皮细胞的活化有关。     

Apoptosis, myocardial fibrosis and angiotensin Ⅱ in the left ventricle of hyp ertensive rats treated with fosinopril or losartan

Objective To investigate the different effects of an angiotensin Ⅱ type 1 (AT(1)) receptor antagonist, losartan, and an angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor, fosinopril, on cardiomyocyte apoptosis, myocardial fibrosis, and angiotensin Ⅱ (AngⅡ) in the left ventricle of spontaneously hypertensive rats (SHRs). Methods SHRs of 16-week-old were randomly divided into 3 groups: SHR-L (treated with losartan, 30 mg·kg(-1)·d(-1)), SHR-F (treated with fosinopril, 10 mg·kg(-1)·d(-1)), and SHR-C (treated with placebo). Each group consisted of 10 rats. Five rats, randomly selected from each group, were killed at the 8th and 16th week after treatment. Cardiomyocyte apoptosis, collagen volume fraction (CVF), perivascular collagen area (PVCA) and AngⅡ concentrations of plasma and myocardium were examined. Results Compared with the controls at the 8th and 16th week, systolic blood pressures were similarly decreased in both treatment groups. Left ventricular weight and left ventricular mass indexes were significantly lower in both treatment groups. However, the latter parameter at the 16th week was reduced to a less extent in the fosinopril group than that in the losartan group. Compared with the controls, cardiomycyte apoptotic index was significantly reduced at the 8th week only in the fosinopril group, and at the 16th week in both treatment groups. The index of the fosinopril group was lower than that of the losartan group at the latter endpoint examined. Compared with the controls, the left ventricular collagen volume fraction and perivascular collagen area at the 8th and 16th weeks were significantly reduced in the SHRs treated with either fosinopril or losartan. However, the collagen volume fraction at the latter endpoint in the fosinopril group was lower than that in the losartan group. Compared with the controls at endpoints, plasma and myocardium Ang Ⅱ levels were significantly increased in the losartan group. However, plasma Ang Ⅱ concentrations were not altered, and myocardium AngⅡ concentrations at the 8th and 16th weeks were significantly reduced in the fosinopril group. Conclusions Both losartan and fosinopril could effectively inhibit cardiomyocyte apoptosis and myocardial fibrosis and reverse heart hypertrophy. Fosinopril may be more effective in these cardioprotective effects, suggesting that the effects of both drugs are related to the inhibition of myocardium renin-angiotension-aldsterone system.     

Early and chronic captopril or Losartan therapy reduces infarct size and avoids congestive heart failure after myocardial infarction in rats

BACKGROUND: Angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitors and angiotensin II AT1-receptor antagonists prolong survival in experimental postischemic heart failure (CHF) in rats. The aim of this study was to investigate whether potential beneficial effects of early and long-term therapy with low doses of captopril or losartan occur in hemodynamics and heart morphometry, as well as in infarct size during establishment of CHF after myocardial infarction. METHODS: Male Wistar rats were subjected to myocardial infarction by left coronary ligation. Subsequently, 24 h after surgery captopril (2.5 mg/kg/day/28 days) or losartan (3 mg/kg/day/28 days) was administered by mini-osmotic pump release. Hemodynamics, infarct size, and heart morphometry were measured in sham, untreated, and treated operated rats. RESULTS: Morphometric and hemodynamic parameters were modified after myocardial infarction indicating hypertrophy of the heart and CHF establishment; however, either captopril or losartan partially avoided hypertrophy. Captopril reverted hemodynamics to sham values, while losartan induced further decrease in systolic blood pressure. Both drugs were able to drastically reduce infarct size produced by myocardial infarction. CONCLUSIONS: Data show that early and chronic therapy with low doses of captopril or losartan prevent CHF establishment, probably by limiting extension of infarcted area after coronary occlusion, and suggest AT1 receptor pathway involvement in this pathology.     

血管紧张素Ⅱ调控bax mRNA表达诱导内皮细胞凋亡

目的　研究AngⅡ诱导凋亡细胞内机制。方法　健康胎儿脐静脉内皮细胞培养至第三代,用不同浓度AngⅡ作用不同时间,用TUNEL和ELISA检测AngⅡ能否诱导凋亡及有否剂量依赖性;用RT—PCR检测bax的mRNA表达。结果　AngⅡ同AT2 受体激动剂CGP42 1 1 2A一样可以诱导内皮细胞凋亡;并且凋亡强度与AngⅡ成典型的剂量依赖关系。在AngⅡ与CGP42 1 1A作用1 8小时后,baxmRNA显著增加。结论　AngⅡ在转录水平上诱导baxmRNA高表达,使得Bax蛋白高表达,致Bax Bcl- 2比值极显著地增加,细胞内促凋亡因素占优势地位而诱发凋亡。     

FoxO4在血管紧张素Ⅱ诱导的内皮祖细胞凋亡中的机制研究

目的探讨转录因子FoxO4参与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的内皮祖细胞（EPCs）凋亡的机制。方法从人脐静脉血中提取单个核细胞,血管内皮生长因子（VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导培养7d后鉴定为EPCs。AngⅡ诱导EPCs凋亡,加入AT受体拮抗剂（氯沙坦钾＋PD123319）进行干预。实验分为对照组、AngⅡ组和AngⅡ＋氯沙坦钾＋PD123319干预组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;免疫组织化学方法观察FoxO4在各组EPCs的表达水平。结果AngⅡ可以诱导EPCs凋亡,通过AT受体拮抗剂阻断干预降低了EPCs的凋亡。免疫组织化学显示FoxO4在对照组中低表达,AngⅡ组表达最高,AngⅡ＋氯沙坦钾＋PD123319干预组中表达水平显著降低,其表述趋势与各组EPCs凋亡率的变化一致。结论AngⅡ可诱导EPCs凋亡,FoxO4转录因子参与了高浓度AngⅡ诱导的EPCs凋亡过程。     

Linc01635对川崎病血管内皮细胞凋亡的影响

目的：探讨linc01635对川崎病（KD）血管内皮细胞凋亡的影响。方法：通过生物信息学网站预测和RNA FISH检测来分析linc01635的亚细胞定位。用KD患者血浆或健康儿童血浆刺激人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,qRT-PCR检测HUVECs内linc01635的相对表达量。通过慢病毒过表达或siRNA敲减HUVECs中的linc01635,流式细胞术分析细胞凋亡情况。用KD血浆诱导细胞凋亡,检测linc01635在KD诱导血管损伤中的作用。结果：Linc01635在HUVECs中主要分布于细胞核和细胞质。与健康对照相比,KD血浆培养的HUVECs中的linc01635相对表达量下降（P＜0.01）。Linc01635过表达抑制了HUVECs的凋亡（P＜0.01）,而linc01635敲减使HUVECs凋亡增加（P＜0.01）。KD血浆能促进HUVECs凋亡,而过表达linc01635能抑制KD血浆诱导的凋亡（P＜0.01）。结论：KD血浆处理会导致血管内皮细胞中linc01635表达量下降,而linc01635的减少会促进血管内皮细胞凋亡。     

肝细胞生长因子抗糖基化终产物诱导内皮细胞凋亡及分子机制

目的：探讨肝细胞生长因子抑制糖基化终产物诱导内皮细胞凋亡的作用及其相关分子机制。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞，分为实验对照组、糖基化终产物及糖基化终产物＋肝细胞生长因子组，采用MTT法测定各组血管内皮细胞生长抑制率；瑞氏-吉姆萨染色观察细胞形态学变化、流式细胞术测定细胞凋亡率；蛋白免疫印迹法分析各组凋亡基因Ban、Bcl-2蛋白的表达及酶联反应法测定caspase-3活性。结果：糖基化终产物诱导培养的内皮细胞出现明显的凋亡形态学改变，内皮细胞凋亡率与糖基化终产物的浓度和作用时间呈依赖关系，肝细胞生长因子干预后可显著降低不同时间的内皮细胞凋亡率；肝细胞生长因子作用内皮细胞抗凋亡基因Bcl-2表达明显升高，而促凋亡基因Bax表达无明显变化；caspase-3活性显著降低。结论：肝细胞生长因子抑制糖基化终产物诱导内皮细胞凋亡，其作用机制可能是上调抗凋亡基因Bcl-2水平、抑制caspase-3的激活．