EasylyteNa／K离子分析仪自配标准液

ＥａｓｙｌｙｔｅＮａ／Ｋ离子分析仪自配标准液福建宁德地区第二医院检验科（３５２１００）张秋文，肖文海ＥａｓｙｌｙｔｅＮａ／Ｋ离子分析仪应用的试剂由标准Ａ、Ｂ液及Ｗａｓｈ液组成。标准Ａ液：ＭｇＡＣ·４Ｈ２Ｏ８．００ｍｍｏｌ／Ｌ，ＫＣｌ４．００ｍｍｏｌ／...     

血清1,5脱水葡萄糖醇全酶的测定

目的 建立一种测定血中１，５－脱水葡萄糖醇（１，５－ＡＧ）的方法，辅助诊断糖尿病。方法 采用葡萄糖激酶去除血清样品内源葡萄糖干扰，以吡喃糖氧化酶（ＰＲＯＤ）氧化血清１，５－ＡＧ，生成１，５－脱水果糖和Ｈ２０２，后者用Ｔｒｉｎｄｅｒ反应进行比色测定。结果 该方法ＰＲＯＤ用量为８０ＫＵ／Ｌ，反应（终点）时间１０分钟，最低检测限为１．９８μｍｏｌ／Ｌ，１，５－ＡＧ在６３３．３μｍｌｏ／Ｌ以内线性良好。高     

术后短期使用ALG预防移植肾60例急性排斥反应的效应评估

目的：探索抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）的合理使用方案。方法：随机选择肾移植患者６０例，根据使用ＡＬＧ的时间不同分两组，观察病人外周血ＣＤ３细胞数变化，急性排斥反应及并发症发生率，结果：两组病人急性排斥反应率，术后５天内ＣＤ３细胞数无统计学差异，但Ｂ组（ＡＬＧ３００ｍｇ／ｄ，７天以上）的巨细胞病毒病及一般感染率明显高于Ａ组（ＡＬＧ３００ｍｇ／ｄ，３～６天）结论：术后连续３～６天使用常规剂量ＡＬＧ是一种     

As2O3诱导K562细胞凋亡过程中酪氨酸蛋白激酶活性的变化

目的：阐明Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡的可能机制，为Ａｓ２Ｏ３治疗白血病的推广应用提供一定的理论基础。方法：采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及生物化学等方法，观察在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶（ＰＴＫ）活性及某些内源性蛋白酪氨酸磷酸化的变化。结果：在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白ＰＴＫ活性降低，分子量为１８万和１２．５万的蛋白酪氨酸磷酸化减少。结论：Ａｓ２Ｏ３可能通过降低细胞内某些蛋白，尤其ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白的ＰＴＫ活性，减少蛋白酪氨酸磷酸化，从而阻断ＢＣＲ／ＡＢＬ抗凋亡信号的传导，诱导Ｋ５６２细胞凋亡     

As2O3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响

目的　进一步阐明Ａｓ２Ｏ３ 诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为Ａｓ２Ｏ３ 在临床上的应用提供理论依据。方法　采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、生物化学及免疫荧光等方法研究了Ａｓ２Ｏ３对ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果　１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但０ ．１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;Ａｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸酶（ＰＴＰ） 活性未见明显影响;Ａｓ２Ｏ３ 下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达,但对ＳＴＡＴ１ 和ＳＴＡＴ２ 蛋白的表达以及ＳＴＡＴ１ 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;Ａｓ２Ｏ３ 亦不影响凋亡相关蛋白Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ／Ｓ、Ｂａｘ、ＩＣＨ１Ｌ、ｐ５３、ＰＡＲＰ的表达,Ａｓ２Ｏ３ 亦使Ｋ５６２ 细胞的ＰＭＬ蛋白降解。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化和（ 或）下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达而干扰ＢＣＲ／ＡＢＬ致癌信号的传导,引起Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长。     

应用单克隆抗体的脂蛋白(a)免疫比浊测定

目的建立血清脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］单克隆抗体免疫比浊测定法。方法应用四株载脂蛋白（ａ）［ａｐｏ（ａ）］单克隆抗体，配制成全液体、双试剂，于自动分析仪二点反应法检测Ｌｐ（ａ）。结果检测试剂与纤维蛋白溶酶原和ａｐｏＢ无交叉反应，甘油三酯（１５ｍｍｏｌ／Ｌ）、胆红素（１５０μｍｏｌ／Ｌ）、血红蛋白（５００ｍｇ／Ｌ）对测定无干扰，检测范围０～１０００ｍｇ／Ｌ。该法与ＥＬＩＳＡ对照，结果无显著差异，ｒ＝０．９９。批内ＣＶ分别为２．５％［脂蛋白（ａ）７８５ｍｇ／Ｌ］和３．５％［脂蛋白（ａ）３００ｍｇ／Ｌ］，批间ＣＶ分别为３．９％和５．５％。结论ａｐｏ（ａ）单克隆抗体免疫比浊测定血清Ｌｐ（ａ）具有特异、灵敏、简便、快速和适用于自动分析等优点。     

丙型肝炎国产诊断试剂第三代进口试剂的临床比较研究

目的 考察丙型肝炎（丙肝）国产改进酶标诊断试剂与国外第三代主流试剂的灵敏度与特异性。方法 用改进后的国产新伟凯公司丙肝试剂（ＸＷＫ）和两种国外第三代主流试剂（Ａ３，Ｏ３）检测了２８８２份血员血样和５５６份各种肝炎病人血样。结果 ３种试剂（ＸＷＫ，Ａ３，Ｏ３）分别检出３８０，３７８和３７１份阳性样品，经免疫印迹条法（ＲＩＢＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法确证，３种试剂的假阳性数分别为７，６和１份，假     

脑脊液蛋白质氯烃基二甲基代苯甲胺比浊测定法

氯烃基二甲基代苯甲胺（ｂｅｎｚａｌｋｏｎｉｕｍｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＢＡＣ）季胺化合物能与蛋白质反应形成浊度［１］，据此，用于脑脊液蛋白质含量的测定。１　材料与方法１．１　试剂１．１．１　ＢＡＣ贮存液　于９０ｍｌ蒸馏水中溶解ＢＡＣ（Ｓｉｇｍａ，Ｂ－６２９５）１１３ｍｇ，ＥＤＴＡ二钠盐３．６５ｇ，ＮａＯＨ８ｇ，然后用１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ调ｐＨ至１２．８，最终加蒸馏水至１００ｍｌ。１．１．２　ＢＡＣ应用液　取ＢＡＣ贮存液１份加０．１５ｍｏｌ／ＬｐＨ７．０磷酸盐缓冲液４份。１．１．３　蛋白标准液　总蛋白标…     

乌鲁木齐温泉水质分析与医疗作用

探讨乌鲁木齐温泉水对人体的医疗作用。方法测定矿泉水中ＨＣＯ３－、ＣＯ３２－、钠、氟、硼、硫化氢含量。结果ＨＣＯ３－８３９ｍｇ／Ｌ、ＣＯ３２－１３９６ｍｇ／Ｌ、钠２４１９ｍｇ／Ｌ、氟１４ｍｇ／Ｌ、硼（以ＨＢＯ２计）３９５ｍｇ／Ｌ、硫化氢５２ｍｇ／Ｌ。结论根据测定结果，该泉水可命名为氟—硼—硫化氢水，对多种疾病都有一定的疗效。     

硝酸盐还原酶测定血清和尿中硝酸盐浓度

目的 建立一氧化氮间接测定方法，方法 硝酸盐还原酶还原硝酸盐（ＮＯ＾－３）至亚硝酸盐（ＮＯ＾－３）过程中所消耗ＮＡＤＰＨ量与ＮＯ＾－３浓度呈正比，用３４０ｎｍ处ＮＡＤＰＨ吸光度下降值推荐ＮＯ＾－３的存在量。结果 血清ＮＯ＾－３浓度为５７．４９±３．５７μｍｏｌ／Ｌ时，批内变异系数（ＣＶ）＝６．２１％，批间ＣＶ＝８．７５％，５０μｍｏｌ／Ｌ和１００μｍｏｌ／ＬＫＮＯ３标准其回收率分别为９７．０２％和     

Comparison of current methods for high-density lipoprotein cholesterol quantitation.

We compared six precipitation methods for high-density-lipoprotein cholesterol quantitation with an ultracentrifugation method, the accuracy of which was improved by correcting for 4% manipulative loss in the d greater than 1.063 fractions. For purposes of comparison, the apoprotein B-associated cholesterol (average 56 mg/L) measured by immunoassay in the d greater than 1.063 fractions was subtracted. In 65 plasma samples from men, women, and children, a heparin-Mn2+ procedure with Mn2+ at 46 mmol/L produced results slightly higher (+16 mg/L), while results with Mn2+ at 92 mmol/L averaged slightly lower (-8 mg/L) than the comparison ultracentrifuge method. Results that were about 5% low were obtained by the dextran sulfate 500-Mg2+ (-25 mg/L) and phosphotungstate-Mg2+ (-31 mg/L) methods. A heparin-Ca2+ method produced results 10% high (+58 mg/L). Results by a polyethylene glycol-6000 precipitation method were 12% low (-64 mg/L). Precision was better with the two heparin-Mn2+ and the dextran sulfate 500-Mg2+ procedures, with CVs of 4%, intermediate with phosphotungstate-Mg2+ and polyethylene glycol-6000 (CV 6-7%), and poorest with heparin-Ca2+ (CV 10%). Precipitation by phosphotungate-Mg2+ appeared more sensitive to reagent concentration and temperature variations than either the heparin-Mn2+ or dextran sulfate 500-Mg2+ methods. We conclude that these precipitation methods are not equivalent, but give rise to significant systematic differences in high-density-lipoprotein cholesterol quantitation.     

改良缺血修饰白蛋白测定方法（白蛋白-钴结合试验）的建立

目的建立改良的缺血修饰白蛋白（IMA）测定方法[白蛋白-钴结合（ACB）试验]。方法以1-亚硝基-2-萘酚（NN）代替二硫苏糖醇（DTT）作为显色剂,确定试验的基本条件（最佳波长、反应时间、试剂稳定性等）,并对该试验的精密度、敏感性、线性等进行评价。测定急性心肌梗死（AMI）和胸痛患者的IMA值并进行统计学分析。结果改良ACB试验最佳吸收波长为410 nm,反应体系0～25 min时吸光度值变化稳定,试剂在室温和4℃30 d内性能稳定,反应体系线性良好。批内变异系数（CV）为2.67%,批间CV为5.44%。应用显色剂NN对钴离子（Co2＋）的最低检出限为0.488 mg/L,应用DTT为7.812 mg/L。三酰甘油（TG）〈2.02 mmol/L、血红蛋白（Hb）〈6.9 g/L、总胆红素（TBil）〈66.0μmol/L时无干扰。AMI组为（1.195±0.320）吸光度单位（ABSU）,胸痛组为（0.855±0.068）ABSU,二者差异有统计学意义（P〈0.01）。结论以NN作为显色剂测定IMA的ACB试验灵敏、方便、简单,适合批量测定。     

Performance characteristics of beta-2-microglobulin measurements on a Beckman Immage analyzer with the DakoCytomation reagent kit

Objective

Evaluation of serum beta-2-microglobulin (β2M) in an automated analyzer.

Design and methods

The DakoCytomation β2M kit is an antibody based reagent intended for quantitative determination of β2M in serum and plasma by rate nephelometry.

Results

The limit of blank is 0.16 mg/L. The method is linear up to 17.9 mg/L. The imprecision ranged from 2.1% to 7.9% at the concentrations of 1.77 and 7.19 mg/L, respectively. Method comparison yielded slope = 1.009, r = 0.998. No interference was observed from hemolytic or icteric specimens. Reference interval of a healthy population was 1.13 mg/L to 3.04 mg/L.

Conclusion

The DakoCytomation reagent is acceptable to measure serum β2M.     

斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估

目的建立斑点免疫金渗滤法（DIGFA）定量测定血清淀粉样蛋白A（SAA）并评估其分析性能。方法选用2株商品化抗SAA单克隆抗体，分别结合于硝酸纤维素膜和胶体金，制备免疫金渗滤试剂板条（SAA—DOT）以定量检测SAA。按照EP文件，评估SAA—DOT的分析性能（检测限、精密度、准确性、线性范围等）。结果SAA—DOT最低检测限为5mg／L；10和100mg／L的批内变异系数（CV）分别为9．07％和10．21％，天间CV分别为11．33％和11．53％；线性范围为5—230mg／L；SAA—DOT的测定结果与商品化乳胶增强速率散射比浊法（LERN）试剂具有良好的相关性（r=0．995，P〈0．05）。表观健康者血清SAA浓度中位数为5．7mg／L，95％可信区间为0—9．6mg／L。结论基于DIGFA的SAA-DOT简便、快速，能在5min内完成检测，各项分析性能指标达到国家食品药品监督管理局（SFDA）对体外诊断试剂的要求，可用于临床患者血清标本的检测。     

胶乳增强免疫比浊法两种定量试剂检测D-二聚体的评价

目的应用胶乳增强免疫比浊法对两种定量试剂(西门子,九强)检测D-二聚体(D-D)的准确度、精密度及检测结果的一致性进行评价。方法收集新鲜凝血标本50份,应用两种不同试剂在sysmex CA-7000全自动凝血分析仪进行D-二聚体检测,比较其检测结果的一致性,通过对质控品的测定来比较两种试剂的精密度和准确度。结果准确度通过检测自身质控品和对方质控品进行评价,西门子试剂检测D-二聚体的相对偏差分别为-2.0%和-8.7%,九强试剂检测D-二聚体的相对偏差分别为-2.2%和26%;精密度通过20次室内质控结果进行评价,西门子试剂的检测均值为4.9±0.19 mg/L,CV为3.88%,差异无统计学意义(t=0.117,P>0.05),九强试剂检测的均值为4.5±0.17 mg/L,CV为3.69%,差异无统计学意义(t=0.132,P>0.05);检测结果一致性的对比显示:在D-D<0.5　mg/L时,两种定量试剂差异无统计学意义(P>0.05);在0.5　mg/L0.05);但在D-D>5　mg/L时,九强试剂显著高于西门子试剂,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论两种试剂的精密度良好,准确度在检测对方质控品时结果不令人满意,九强试剂在D-D>5 mg/L时的准确度尚需进一步论证。     

水井“加氯消毒”投药量的选择

<正> 水井为广大群众最常用的饮用水源之一,肠道传染病流行时,对井水进行消毒处理,就显得极为重要。过去对水深度超过4 m的井,向其中直接加含氯消毒剂消毒时,一般都以全井水量计算投药量。在实际工作中我们发现,如此投药处理后较长时间,有时超过12小时,水面尚可测得较高余氯,影响使用。对水井直接加药时,氯可能分布到多深的水层,如何计算投药量较为适宜等问题,我们曾提出过看法。     

Sensitive, direct colorimetric assay for copper in serum

We have developed a sensitive procedure for determination of serum copper by use of the color reagent 4-(3,5-dibromo-2-pyridylazo)-N-ethyl-N-sulfopropylaniline. After mixing serum sample and reagent, and incubating at 37 degrees C for 5 min, we measure the absorbance of the resulting chelate complex at 580 nm (molar absorptivity, 80,000 L.mol-1.cm-1). Results of the method varied linearly with copper concentration to at least 5 mg/L; the lower limit of detection was 0.1 mg/L. Within-run CVs were 1.6% and 3.3% for copper concentrations of 1.03 and 0.72 mg/L, respectively (n = 10 each). Between-run CV was 2.8% at 1.22 mg/L (n = 14). Results of the proposed method (y) correlated well with those determined by standard atomic absorption spectrophotometric techniques (x): y = 0.99x - 0.02 mg/L; Syx = 0.08; r = 0.977; n = 56. Iron, zinc, cadmium, cobalt, and lead do not interfere.     

Semiquantitative analysis of urinary low protein levels using silver dot blot assay.

We designed a semiquantitative analysis of urinary low protein levels using silver dot blot assay. In this method, 3 microl of urine are blotted to one dot onto a cellulose acetate membrane, which is stained by a colloidal silver staining reagent, and the optical density of the silver stained urinary protein is measured at 500 nm using a densitometer. There was a good linearity between 2.5 mg/L and 100 mg/L and a gentle linearity between 100 mg/L and 200 mg/L, and the minimum sensitivity was 2.5 mg/L. This method is suitable for semiquantitative analysis of urinary protein levels less than 300 mg/L, which can not be determined precisely by dipstick.     

尿酸原装试剂与国产试剂性能对比研究

目的研究国产尿酸试剂取代原装试剂在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上应用的可行性。方法通过考察国产尿酸试剂的精密度、线性范围、干扰实验等产品性能,并与原装试剂在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上做临床比对实验。结果国产尿酸试剂的批内精密度及天间精密度均在5%以下,线性范围0～1 000μmol/L,干扰物质胆红素含量达15mg/dL,抗坏血酸含量达7mg/dL,血红蛋白含量达3.75g/L时,相对偏差在10%以内,属于临床可接受范围。与原装试剂在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上进行临床比对实验,决定系数r2为0.999 5,相关性良好。结论在奥林巴斯AU-640全自动生化分析仪上可用国产尿酸试剂替代原装试剂。     

糖化血清蛋白测定的自动分析

目的建立双试剂测定糖化血清蛋白的自动分析方法.方法根据测定条件的优化实验采用双试剂酶法直接测定.结果该法180 s达反应终点,线性达1 306μmol/L(y=0.983 5X+0.124,r=0.999 7);批内CV＜1.45%,日间CV＜3.56%,总CV＜4.19%;平均回收率100.3%;加入TG＜7.6mmol/L,BIL＜456 μmol/L,Hb＜200g/L,UA＜1 240 μmol/L,GLU＜75.2 mmol/L时无显著干扰.结论该法适合全自动分析.