活性氧在线粒体凋亡信号传导中的调节作用

活性氧(reactive oxygen species ROS)是一类氧的单电子还原产物,包括单线态氧、超氧化物、过氧化物、氢氧自由基、次氯酸及一氧化氮等.活性氧的研究大致分为三个阶段[1]:第一阶段,通过酶促反应发现ROS,并发现ROS可以引起多种氧化损伤;第二阶段,发现超氧化物歧化酶(SOD),并大量研究了ROS对DNA、蛋白质、脂质和其他成分的损伤;第三阶段,氧自由基的生理学功能成为研究的热点,如ROS作为第二信使参与对各种刺激的信号传导.随着对线粒体在凋亡中的作用的进一步认识,对ROS在凋亡中的作用的研究也越来越深入,本文综述了近年来活性氧在凋亡途径尤其是在线粒体凋亡途径中扮演的角色.     

心肌细胞凋亡的信号传导途径

凋亡是细胞死亡的一种形式 ,受遗传和分子程序控制。凋亡存在于各种心血管疾病中。致细胞凋亡的主要因素有 :氧自由基 (包括NO)、细胞因子 (FAS/TNF α受体信号 )、应激状态(化学或物理、辐射 )、血管紧张素Ⅱ等。心肌细胞凋亡对泵衰竭、心律失常和心肌重塑的发展有重要作用 ,     

严重胸部撞击伤后肺泡细胞NIX表达与肺泡细胞凋亡的关系及意义

目的 探讨急性肺损伤(acute lung injury,ALI)后肺泡细胞的NIX基因及蛋白表达水平与创伤后肺泡细胞凋亡的关系及意义. 方法 建立大鼠严重胸部撞击伤模型,利用免疫组化、免疫印迹、RT-PCR等分子生物学技术分别检测创伤后6,12,24,48,72,96 h肺泡细胞NIX基因及其蛋白表达,通过Tunel试剂盒检测各时相点的肺泡细胞凋亡变化情况. 结果 (1)创伤组与对照组均存在NIX蛋白表达,NIX在伤后6h开始表达增高,并在48 h达到峰值,随后逐渐下降,96 h后接近致伤前水平.(2)除肺泡细胞外,NIX在血管内皮细胞及间质纤维细胞中也有较强表达;(3)伤后24 h肺泡细胞凋亡以支气管、血管内皮和肺泡上皮为主.伤后肺泡细胞凋亡率显著高于伤前水平(P＜0.01),于伤后72 h达到峰值,随后逐渐下降.(4)肺组织中NIX蛋白表达变化与肺泡细胞凋亡率变化呈显著性正相关(r=0.303,P＜0.01). 结论 NIX的上调参与了创伤后肺泡细胞凋亡的病理生理过程,其表达曲线与肺泡细胞凋亡率变化呈现一致性,这可能是创伤后肺泡细胞凋亡的分子学基础之一.     

肿瘤坏死因子在内毒素诱导小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用

肺泡上皮细胞具有许多重要的功能 ,包括调节表面活性物质代谢、离子转运以及损伤后肺组织修复等[1 ] 。细菌内毒素 (ＬＰＳ)是革兰阴性菌引起的急性肺损伤的重要致病因素。研究表明 ,急性肺损伤可导致肺血管内皮细胞和上皮细胞凋亡[2 ] 。然而 ,ＬＰＳ对肺泡Ⅱ型上皮细胞 (ＡＥＣⅡ )的损伤效应和机制尚有待阐明。继往研究提示 ,肿瘤坏死因子(ＴＮＦ)在体外可诱导内皮细胞凋亡[3 5] 。但ＴＮＦ在ＬＰＳ诱导的ＡＥＣⅡ凋亡中的作用至今仍不清楚。笔者旨在明确内源性ＴＮＦ在ＬＰＳ诱导ＡＥＣⅡ凋亡中的作用。一、材料与方法1.试剂和实验动物 …     

细胞凋亡的线粒体调控机制与电离辐射

线粒体在外界刺激(如电离辐射)诱发细胞凋亡中起中心调控作用。各种死亡信号通过Bcl-2家族蛋白或直接诱导线粒体膜通透性增加、细胞色素c释放和caspases激活,最终引起细胞凋亡。线粒体膜通透性改变的机制,目前还不完全清楚。简要综述细胞凋亡的线粒体调控机制及电离辐射在其机制中的可能作用。     

细胞凋亡的线粒体调控机制与电离辐射

线粒体在外界刺激(如电离辐射)诱发细胞凋亡中起中心调控作用。各种死亡信号通过Bcl-2家族蛋白或直接诱导线粒体膜通透性增加、细胞色素c释放和caspases激活，最终引起细胞凋亡。线粒体膜通透性改变的机制，目前还不完全清楚。简要综述细胞凋亡的线粒体调控机制及电离辐射在其机制中的可能作用。     

活性氧在热打击诱导肠上皮细胞凋亡中的作用

目的 观察热打击对大鼠肠上皮细胞(IEC-6)氧化应激反应、溶酶体损伤及细胞凋亡的影响,探讨中暑热损伤过程中肠道损伤的机制.方法 将IEC-6细胞分为对照组(细胞仅置于37℃、5%CO2细胞培养箱中孵育)、热打击组(细胞置于43℃、5%CO2细胞培养箱中1h,之后分别置于正常细胞培养箱中继续孵育0、1、3、6、12h)、药物干预组(于热打击前分别采用溶酶体抑制剂E-64和活性氧清除剂NAC预处理细胞1h).采用DCFH-DA法检测细胞内活性氧(ROS)的表达,吖啶橙(AO)染色法检测溶酶体膜稳定性,AnnexinⅤFITC/PI双染色法检测细胞凋亡率,CCK-8法检测细胞活力.结果 与对照组比较,热打击后复温1h即导致IEC-6细胞活力下降,凋亡增加,且在复温后12h时最为明显(P<0.05);热打击后即刻即引起细胞内ROS表达及"苍白细胞"数量增加,且在复温后12h时最为明显(P<0.05).与热打击组比校,采用NAC对细胞进行预处理可明显提高热打击后细胞活力,减轻溶酶体损伤,并降低细胞凋亡率(P<0.05);采用E-64对细胞进行预处理可明显提高热打击后细胞活力,并降低细胞凋亡率(P<0.05).结论 ROS介导了热打击诱导肠上皮细胞凋亡的调控,这可能是中暑导致肠道黏膜屏障功能损伤的重要机制之一.     

高原低氧和中草药作用后的家兔肺泡Ⅱ型细胞电镜观察

现代研究证实肺泡Ⅱ型细胞对于肺泡功能的正常行使起着至关重要的作用。关于在高原环境下,该细胞会发生那些形态结构的变化,已经有人做过一些观察报道。但是,上述文献多属定性分析资料,绝少较科学、准确的定量分析。我们的工作正是为了弥补这方面的不足,同时也为今后在高原医学领域开展形态计量研究,提供和积累一些参考数值。实验分析发现:高原环境确能引起肺泡Ⅱ型细胞体的增大,细胞游离面的微绒毛减少,长度变短,线粒体数量增加(上述几项指标的P值均小于0.05)。另外,中草药——异叶青兰对Ⅱ型细胞的影响也进行了对比研究。     

细胞凋亡信号通路调控与肿瘤辐射敏感性

电离辐射作用于细胞引起各种损伤而导致细胞死亡的主要机制是诱导细胞发生凋亡。高剂量（大于10Gy）的电离辐射会使细胞发生被动的坏死过程，而促发细胞凋亡所需要的辐射剂量远远低于促发细胞坏死所需剂量。在肿瘤放射治疗过程中，降低辐射剂量诱导肿瘤细胞发生凋亡，而使正常细胞受照剂量降低，减小损伤，具有重要的生物学意义。因此临床上利用放疗方法诱导肿瘤细胞凋亡成为众多肿瘤治疗的目标之一。但由于肿瘤细胞可对放射治疗产生耐受，导致疗效下降，提高肿瘤细胞对放疗的敏感性一直是科研人员关注的研究方向。     

AT的信号传导

基因缺陷所致共济失调－毛细血管扩张症（AT）表现为免疫缺陷，进行性共济失调，性腺发育异常，辐射敏感和易患癌症等。本综述了AT的信号传导，包括AT基因突变和临床症状，电离辐射诱导的信号传导通路中的一些转录因子，细胞周期检控点异常，持续和氧应激和细胞凋亡等。     

AT的信号传导

基因缺陷所致共济失调-毛细血管扩张症(AT)表现为免疫缺陷、进行性共济失调、性腺发育异常、辐射敏感和易患癌症等。本文综述了AT的信号传导,包括AT基因突变和临床症状、电离辐射诱导的信号传导通路中的一些转录因子、细胞周期检控点异常、持续的氧应激和细胞凋亡等。     

角质形成细胞凋亡的分子机制

细胞程序性死亡称为凋亡,很多学者认为角质形成细胞的分化是一种特殊形式的细胞凋亡。许多皮肤病如银屑病、扁平苔藓、湿疹等与角质形成细胞的凋亡异常密切相关,本文综述了角质形成细胞凋亡中起重要作用的基因及其调控的具体分子机制等有关方面的问题。     

X射线诱导细胞凋亡的机制

细胞凋亡是在基因凋控下的细胞主动死亡过程。X射线作为一种电离辐射，其诱导细胞凋亡的机制目前仍未完全明了，可能存在着与P53、Cty-c、AIF、Bcl-2、Caspase酶等物质密切相关的传导系统。随着对此机制认识的不断深入，必能更好地指导临床对肿瘤等疾病的治疗。     

晚期糖基化终产物的病理学作用及其信号传导机制

慢性肾功能衰竭（Chronic renal failure CRF）患者心血管并发症发生率较同龄正常人高10—20倍，且发病年龄提前，被称为“加速性动脉粥样硬化”。Miyata等在罹患动脉粥样硬化的CRF患者动脉血管壁中发现晚期糖基化终产物（advanced glycation end products AGE）沉积。AGE与细胞表面AGE受体相互作用产生多种效应，被认为参与了CRF患者远期并发症如心血管病变、动脉粥样硬化及透析相关性淀粉样变的发生和发展。作为一种“尿毒症毒素”，AGE越来越引起人们重视。AGE修饰蛋白作用于不同类型细胞或诱导不同生物学效应，其经由通路可能不同。对AGE及其介导众多病理生理作用进行深入研究，将有助于阐明AGE的致病作用。     

骨桥蛋白与力学信号传导研究进展

骨桥蛋白是一种与细胞粘附、迁移密切相关的磷酸化糖蛋白,其生理功能在免疫、癌症和骨相关研究中被广泛报道。近年的研究提示,骨桥蛋白同样是一种对力学刺激敏感的蛋白,且参与了细胞力学信号传导。本文综述了不同力学刺激方式对骨桥蛋白所产生的影响,其中可能的调控途径以及骨桥蛋白在力学信号传导过程中所起的作用。     

MiR-514与胃癌细胞凋亡的关系及机制

目的 探讨微小RNA-514（microRNA-514,miR-514）与胃癌细胞凋亡的关系及机制。方法 实时定量PCR检测80例胃癌组织及癌旁正常胃黏膜组织中miR-514的表达情况,分析miR-514与患者各病理参数之间的关系。应用miR-514模拟物转染人胃癌细胞株MGC803,检测转染前后细胞凋亡率及凋亡相关基因的情况。结果 胃癌组织中miR-514水平（0.3619±0.2103）明显低于癌旁正常胃黏膜（0.6943±0.3032）（t=-8.0573;P<0.001）;miR-514表达与肿瘤的淋巴结转移有关（t=-2.5620,P=0.012 3）;miR-514模拟物转染人胃癌细胞株MGC803后细胞的活性明显降低而凋亡率明显增高（P<0.05）;转染后凋亡相关基因Bcl-2、xIAP的mRNA和蛋白表达明显降低,而Bax的mRNA和蛋白表达明显增高（P<0.05）。结论 胃癌组织中miR-514的表达减弱,miR-514可能通过调节一些凋亡基因表达而参与肿瘤的凋亡过程。     

PTEN肿瘤抑制基因和细胞间信号传导研究进展

PTEN基因是定位于人染色体10q23．3区段的唯一具有磷酸脂酶活性的肿瘤抑制基因,它的第5功能外显子编码的氨基酸序列具有双特异性磷酸酯酶活性,其中酯性磷酸酶活性通过负性调节磷酸酰肌醇三磷酸酯信号的传导,抑制肿瘤细胞的增殖能力;而蛋白磷酸酶活性通过负性调节FAK(／P130^Cas和整合素相关激酶信号的传导,在整合素介导的细胞黏附、迁移和转移过程起抑制作用,最终通过引起细胞周期G1期阻滞、促进凋亡和抑制细胞非锚定性生长能力来发挥肿瘤抑制效应的。近来研究发现,其还在多种细胞信号传导中起作用。     

芥子气诱发细胞凋亡分子机制研究进展

芥子气属糜烂性毒剂，具有强大的杀伤效应，目前仍是外军主要装备的化学毒剂之一。迄今为止，尚无芥子气的特效抗毒剂，仅采用对症和支持疗法。芥子气诱发细胞凋亡的分子机制是近年来其毒理学研究领域的热点．本文综述了该领域的研究进展，以期为全面认识芥子气凋亡机制及制订有效的凋亡干预策略提供思路。     

Ⅱ型肺泡上皮细胞在大鼠放射性肺损伤中的变化

采用光镜、电镜及半定量方法，连续观察了大鼠经胸部照射３０Ｇｙ后Ⅱ型肺泡上皮细胞的变化，结果显示照射后Ⅱ型肺泡上皮细胞数目增多，３个月达高峰，细胞内板层小体数目增多，体积增大，可见巨大板层体出现。Ⅱ型肺泡上皮细胞线粒体肿胀，膜破裂，嵴断裂。对Ⅱ型肺泡上皮细胞与放射性肺损伤的关系亦进行了讨论。     

MS-275与姜黄素联用阻断细胞生存信号通路诱导前列腺癌细胞凋亡

目的探讨小剂量姜黄素和组蛋白去乙酰化酶抑制剂MS-275联用诱导前列腺癌细胞系DU145凋亡的作用机制。方法 DU145细胞分为对照组,MS-275组(分别用1、2、4、8μmol/L的MS-275单独处理细胞24、48h)、姜黄素组(分别用10、20、40、80μmol/L的姜黄素处理细胞24、48h)、MS-275+姜黄素组(1μmol/LMS-275+20μmol/L姜黄素处理细胞24、48h)。采用MTT比色法测定药物单用或联用对细胞的杀伤效应,流式细胞术分析细胞周期的改变,Westernblotting检测细胞内蛋白表达水平的变化。结果 MS-275和姜黄素单用都能够呈剂量和时间依赖性地杀伤DU145细胞;小剂量MS-275(1μmol/L)+姜黄素(20μmol/L)联用时能够协同杀伤细胞,两种药物联合处理细胞48h后,细胞的生存率仅为45.9%;细胞周期检测表明MS-275和姜黄素联用导致细胞出现明显的亚G1峰,提示DU145细胞被诱导凋亡;Western blotting结果证实联合用药48h后,细胞内生存信号蛋白激酶Akt和ERK的磷酸化水平下降,同时凋亡标志蛋白PARP发生剪切。结论 MS-275和姜黄素联用可以协同杀伤DU145细胞,并通过抑制细胞内Akt和ERK生存信号通路的活性来诱导细胞凋亡。