应用α-葡萄糖苷酶抑制剂高通量筛选模型筛选降血糖中药

目的 建立筛选α-葡萄糖苷酶抑制剂的体外高通量筛选模型,并对30味常用清热解表中药进行筛选.方法 应用大鼠小肠上段提取的α-葡萄糖苷酶,以蔗糖作为底物,通过测定反应体系中葡萄糖的生成量来检测α-葡萄糖苷酶的活性.通过优化酶促反应条件,建立检测α-葡萄糖苷酶活性的比色测定法及其抑制剂体外筛选的方法,并对30味中药共72个样品进行高通量筛选.结果 阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性与文献报道相近;筛选发现鸭跖草、山慈菇和桑叶等3味中药的不同极性提取物对α-葡萄糖苷酶有可重复的抑制作用.结论 应用比色法建立的筛选模型可进行α-葡萄糖苷酶抑制剂的高通量筛选及中药相关活性物质的发现.     

不同生长期罗汉果皂苷对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用研究

目的研究不同生长期罗汉果皂苷对α-葡萄糖苷酶的体外抑制作用。方法选用果实生长期为30d、50d、90d的罗汉果皂苷提取物,在α-葡萄糖苷酶与4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)作为底物的反应体系中筛选出具有良好抑制作用的罗汉果提取物,并观察罗汉果皂苷对Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果罗汉果皂苷对α-葡萄糖苷酶活性抑制作用与剂量正相关,50d罗汉果皂苷提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用强于30d和90d罗汉果皂苷。经酶动力学研究发现,50d罗汉果皂苷对α-葡萄糖苷酶的抑制作用属于混合型抑制。50d罗汉果皂苷在0.05~50μg/ml范围内对Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶活性呈现先促进后抑制的趋势。浓度为5.0μg/ml和10.0μg/ml时的罗汉果皂苷能一定程度上抑制Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶活性。结论生长期50d的罗汉果皂苷类提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用强于其他生长期(30d、90d)的罗汉果皂苷提取物,能在体外剂量依赖性地直接抑制α-葡萄糖苷酶的催化活性,并抑制Caco-2细胞α-葡萄糖苷酶活性。     

番石榴叶水提取物对糖尿病小鼠小肠α-葡萄糖苷酶活性的影响

目的 研究番石榴叶水提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用.方法 蒸馏水浸提、浓缩、干燥制备番石榴叶水提取物.昆明小鼠链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型,以小鼠小肠粘膜生理盐水匀浆液作为α-葡萄糖苷酶,与双糖底物孵育,比色法测定葡萄糖产量代表α-葡萄糖苷酶的活性.比较正常小鼠和糖尿病小鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶活性,以及番石榴叶水提取物对小肠粘膜α-葡萄糖苷酶活性的影响,Lineweaver-Burk作图判断水提物对α-葡萄糖苷酶抑制作用类型.结果 番石榴叶水提取物对小肠α-葡萄糖苷酶活性具有较强的抑制作用,并呈剂量效应关系;对蔗糖酶和麦芽糖酶的半数抑制浓度(IC50)分别为1.0 g/L和3.0 g/L,抑制作用类型为竞争性和非竞争性混合型.结论 番石榴叶水提取物具有抑制糖尿病小鼠小肠粘膜α-葡萄糖苷酶作用.     

桂花(晚银桂、窈窕淑女和贵妃红)α-葡萄糖苷酶抑制活性

目的:对3个品种(桂花贵妃红、晚银桂和窈窕淑女)的桂花叶和花石油醚提取物α-葡萄糖苷酶抑制作用进行研究。方法:采用索氏提取法提取桂花的叶和花提取物,以96微孔板法测定α-葡萄糖苷酶抑制作用。结果:3种桂花的叶和花均有较好的α-葡萄糖苷酶抑制作用,其中以贵妃红叶提取物的活性最好(IC50=68.26 mg/L),其次为晚银桂叶和窈窕淑女叶部分提取物(IC50=145.25 mg/L和145.08 mg/L),远低于阳性对照Acarbose(IC50=1081.27 mg/L)。结论:3个品种的叶和花部分提取物对α-葡萄糖苷酶活性的抑制效果均很好。     

玉蜀黍苞叶和玉米棒提取物α-糖苷酶抑制活性

目的评价玉蜀黍苞叶和玉米棒各提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法通过建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,对玉蜀黍苞叶和玉米棒各提取物进行活性筛选,并对提取物浓度与抑制活性关系进行研究。结果玉蜀黍苞叶和玉米棒乙酸乙酯部位抑制α-葡萄糖苷酶活性(IC50=275.5和233.5mg/L)均高于阳性对照阿卡波糖(IC50=1 103.1mg/L),且苞叶乙酸乙酯部位抑制活性低于玉米棒乙酸乙酯部位。结论玉蜀黍苞叶和玉米棒乙酸乙酯部位均有好的α-葡萄糖苷酶抑制活性。     

三白草提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性

目的:对三白草提取物α-葡萄糖苷酶抑制活性进行研究.方法:通过建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,对三白草提取物进行活性筛选,并对提取物浓度与抑制活性关系进行研究.结果:三白草提取物均有较好的α-葡萄糖酶抑制作用,其中以三白草乙酸乙酯部位的活性最好(IC50=122.7 mg/L),其次为石油醚部位和正丁醇部位(IC50=...     

加拿大蓬α-葡萄糖苷酶抑制作用

目的:评价加拿大蓬提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法:通过建立体外α-葡萄糖苷酶抑制模型,对加拿大蓬甲醇、石油醚、乙酸乙酯提取物进行活性筛选,并对提取物浓度与抑制活性关系进行研究。结果:加拿大蓬石油醚提取物(IC50=197.98 mg/L)与乙酸乙酯提取物(IC50=823.92 mg/L)的α-葡萄糖苷酶抑制活性高于阳性对照Acarbose(IC50=1081.27 mg/L),而甲醇提取物的活性(IC50=1655.51 mg/L)低于Acarbose,3种提取物抑制率均随浓度增加而增长。结论:加拿大蓬3种提取物均有一定的α-葡萄糖苷酶的高抑制活性,其中石油醚提取物的活性最高。     

苍术提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的：研究苍术不同提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法：分别用水、60%乙醇、乙酸乙酯为溶剂提取苍术的活性成分,以PNPG（4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷）为底物,测定各提取物对α-葡萄糖苷酶活性的作用。结果：苍术的水、乙醇、乙酸乙酯提取物对α-葡萄糖苷酶活性的最大抑制率分别为62.23%、100%和55.6%,IC50值分别为0.25mg.mL、0.38mg.mL和0.41mg.mL-1。结论：苍术提取物对α-葡萄糖苷酶具有抑制作用,其中乙醇提取物抑制作用最强。     

中药提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

目的:研究2种中药提取物对α-葡萄糖苷酶活性的影响。方法:以4-硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)为底物,用分光光度法测定反应体系的吸光度值,判定对α-葡萄糖苷酶活性的影响作用。结果:天麻素和川芎嗪对α-葡萄糖苷酶活性的最大抑制率分别为89.1%和84.0%,IC50值分别为2.4μg/mL和3.0μg/mL,天麻素抑制机制为混合性而川芎嗪抑制机制为竞争性。结论:天麻素和川芎嗪对α-葡萄糖苷酶均具有较强的抑制作用。     

夏枯草提取物对α-葡萄糖苷酶抑制作用研究

目的 从夏枯草中提取α-葡萄糖苷酶抑制剂.方法 采用水提和水提醇沉方法 得到夏枯草水提物、粗多糖、浸膏.通过PNPG比色法检测α-葡萄糖苷酶活性.结果 不同浓度夏枯草水提物、粗多糖对该酶抑制率与浸膏相比差异显著(P<0.01);夏枯草水提物、粗多糖IC50与浸膏IC50相比差异显著(P<0.01),夏枯草水提物与粗多糖IC50之间无显著性差异(P>0.05).结论 夏枯草提取物有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用.     

α-葡萄糖苷酶抑制剂筛选模型的研究进展

α-葡萄糖苷酶抑制剂（alpha-glucosidase inhibitors,α-GI）是可用于治疗2型糖尿病的一类新型药物,广泛存在于植物果实、叶片和种子等组织器官中。近15年来,国内外从中草药中寻找新的α-GI的研究渐趋活跃,逐渐成为防治糖尿病的热点。随着α-GI的不断发现,构建更加符合人体糖尿病病理生理特征、更加具有临床意义的α-GI高通量体外筛选模型,对降糖药的研发具有重要的意义。本文综述了以中草药为来源的α-GI筛选研究进展,并对各种方法存在的问题和今后研究思路进行了探讨。     

燕窝提取物抗H5N1禽流感病毒的作用及机理研究

【目的】观察燕窝提取物体外抑制H5N1禽流感病毒的作用。【方法】制备燕窝水提物、燕窝水提物人工胃液消化物、燕窝水提物人工肠液消化物。通过体外293T细胞转染方法,应用荧光素酶检测试剂盒检测3种燕窝提取物对H5N1禽流感假病毒、VSV-G假病毒活性的影响;观察禽流感病毒H5、H7、H9 3种亚型抗原凝血反应及3种燕窝提取物对其抑制作用;应用神经氨酸酶抑制剂筛选试剂盒检测3种燕窝提取物对N1型神经氨酸酶(NA)活性的影响。【结果】3种燕窝提取物对H5N1禽流感假病毒活性均有抑制作用,抑制作用的强度随燕窝提取物浓度增高而增加,其中人工肠液消化物作用最强,水提取物最弱,但对VSV-G假病毒活性均无显著抑制作用。H5、H7型抗原凝血价为1∶128,H9型抗原凝血价为1∶256,3种燕窝提取物在一定浓度条件下对H5、H7、H9抗原血凝反应均有抑制作用,但对NA均没有抑制作用。【结论】燕窝提取物抗病毒的作用可能是通过抑制血凝素的活性而实现的。     

In vitro inhibition activity of polyphenol-rich extracts from Syzygium aromaticum (L.) Merr. & Perry (Clove) buds against carbohydrate hydrolyzing enzymes linked to type 2 diabetes and Fe2+-induced lipid peroxidation in rat pancreas

Objective

To investigate and compare the inhibitory properties of free and bound phenolic extracts of clove bud against carbohydrate hydrolyzing enzymes (alpha-amylase & alpha-glucosidase) and Fe²⁺-induced lipid peroxidation in rat pancreas in vitro.

Methods

The free phenolics were extracted with 80% (v/v) acetone, while bound phenolics were extracted from the alkaline and acid hydrolyzed residue with ethyl acetate. Then, the interaction of the extracts with alpha-amylase and alpha-glucosidase was subsequently assessed. Thereafter, the total phenolic contents and antioxidant activities of the extracts were determined.

Results

The result revealed that both extracts inhibited alpha-amylase and alpha-glucosidase in a dose-dependent manner. However, the alpha-glucosidase inhibitory activity of the extracts were significantly (P<0.05) higher than their alpha-amylase inhibitory activity. The free phenolics (31.67 mg/g) and flavonoid (17.28 mg/g) contents were significantly (P<0.05) higher than bound phenolic (23.52 mg/g) and flavonoid (13.70 mg/g) contents. Both extracts also exhibited high antioxidant activities as typified by their high reducing power, 1,1 diphenyl-2- picrylhydrazyl (DPPH) and 2, 2-azinobis-3-ethylbenzo-thiazoline-6-sulfonate (ABTS) radical scavenging abilities, as well as inhibition of Fe²⁺-induced lipid peroxidation in rat pancreas in vitro.

Conclusions

This study provides a biochemical rationale by which clove elicits therapeutic effect on type 2 diabetes.     

地骨皮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及其降血糖作用机制探讨

目的:研究地骨皮提取物(CLE)对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,并对其降血糖的作用机制进行探讨。方法:提取大鼠小肠中α-葡萄糖苷酶,采用葡萄糖试剂盒测定酶活力;通过体外抑制实验和离体器官实验测定反应体系中葡萄糖浓度和淀粉光密度值,分别计算药物对蔗糖酶和淀粉酶的抑制率;以底物浓度的倒数作为横坐标,以反映速率的倒数作为纵坐标,双倒数作图判断CLE对α-葡萄糖苷酶抑制作用类型。结果:大鼠小肠酶活力值为77.4个活力单位;与正常对照比较,CLE低、中、高剂量组对蔗糖酶的抑制率明显增加(P<0.05,P<0.05,P<0.01);与正常对照比较,CLE低、中、高剂量组对淀粉酶抑制率明显增加(P<0.01,P<0.01,P<0.01);抑制曲线实验表明,最大反应速度随CLE浓度的变化而变化,但米氏常数Km不变。结论:CLE对α-葡萄糖苷酶具有良好的抑制作用。     

酢浆草的体外抑菌活性

目的研究酢浆草的体外抑菌活性。方法用水提法和醇提法制备酢浆草全草提取液,采用纸片扩散法和改良试管二倍稀释法对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、铜绿假单胞菌、短小芽孢杆菌等6种常见致病菌进行体外抑菌试验。结果酢浆草全草提取液除对乙型溶血性链球菌和大肠杆菌抑菌作用较弱外,对其它致病菌均呈中度或高度敏感,对金黄色葡萄球菌抑制作用尤为明显,且醇提液的抑菌效果优于水提液。结论酢浆草对常见致病菌抑菌效果良好,有进一步开发利用的价值。     

中药体外抑制大肠杆菌实验研究

目的:探讨中药提取物对大肠杆菌的体外抑菌作用。方法:选用五倍子、白芷、金钗石斛、丁香、川芎、当归6种中药,采用醇提法和水提法提取其有效成分,并使用平板打孔法和二倍比稀释法测定中药提取物对大肠杆菌的抑菌效果。结果:五倍子和丁香的醇提取物和水提取物都有显著的抑菌效果,最小抑菌浓度分别为0.390 625 g·L~(-1)、0.781 25g·L~(-1),金叉石斛的醇提取物也有显著的抑菌效果,其最低抑菌浓度为6.25 g·L~(-1),而其他3种药物抑菌作用相对较弱。结论:6味中药对大肠杆菌均有不同程度的抑制作用,其中五倍子的作用最强,其次是丁香和金叉石斛,其他3种抑菌效果弱。     

新疆3种植物提取物对二肽基肽酶Ⅳ活性的影响

目的探讨葫芦巴、鹰嘴豆、石榴皮水提物对二肽基肽酶Ⅳ(DPP-4)体外活性的影响。方法采用DPP-4体外抑制模型,对新疆具有降糖作用的葫芦巴、鹰嘴豆、石榴皮3种植物水提取物进行筛选,选择抑二肽素A(IIe-pro-IIe)作为阳性对照药物,比较3种水提物的IC50差异。结果 IIe-pro-IIe的IC50为(0.01±0.01)mg/mL,葫芦巴水提物IC50为(0.03±0.01)mg/mL,石榴皮水提物IC50为(0.19±0.13)mg/mL,鹰嘴豆水提物IC50为(0.09±0.07)mg/mL。结论葫芦巴、石榴皮、鹰嘴豆的水提取物对DPP-4有一定程度的抑制作用。     

大豆异黄酮对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用

[目的 ]研究大豆异黄酮类对α 葡萄糖苷酶 (EC 3.2 .1.2 0 )和α 淀粉酶 (EC 3.2 .1.1)的抑制作用 ,以期为揭示大豆异黄酮类在糖尿病中的作用及机理提供依据 .[方法 ]以C18柱层析和高效液相色谱法分离大豆异黄酮类 ,以薄层色谱法、高效液相色谱法和核磁共振检测各组分 ,并用比色法测定各单体组分对酵母α 葡萄糖苷酶和猪α 胰淀粉酶的抑制活性 .抑制酶活性 5 0 %时所需的抑制剂浓度定义为半抑制浓度 .[结果 ]大豆异黄酮具有很强的α 葡萄糖苷酶抑制作用 ,其半抑制浓度值为 2 0～ 15 0μmol/L,其中金雀异黄素的为最强 ,而大豆异黄酮葡萄糖苷形式对α 葡萄糖苷酶的抑制活性较其游离配糖体形式为弱 ,其半抑制浓度值为 2 0 0～ 6 0 0 μmol/L .大豆异黄酮及其糖苷形式均具有α 淀粉酶抑制作用 ,当抑制剂浓度为 1g/L时 ,对α 淀粉酶的抑制率为 10 %～ 2 0 % .大豆异黄酮的丙二酰葡萄糖苷形式则无α 葡萄糖苷酶和α 淀粉酶抑制作用 .[结论 ]大豆异黄酮类具有α 葡萄糖苷酶和α 淀粉酶抑制活性 ,且呈剂量依赖性 .表明 ,食用富含异黄酮类的大豆及其制品对改善非胰岛素依赖型糖尿病症状、防止血糖升高有利     

Isolation and screening of glucosidase inhibitors from Chinese medicines

To search for glueosidase inhibitors from Chinese medicines. Methods: Six kinds of widelyused Chinese medicines with the activity of decreasing blood glncose were prepared by the process of boiling, condensing, precipitating, exchanging with resins and rinsing. In vitro glucosidase inhibitory activities were examined by photometric hioassay derived from rats, yeast and almond of all the Chinese medicine extracts. Diabetic ICR mice models were establishedby intraperitoneal injection of STZ (200 mg/kg). To investigate the in vivo effect of lowering blood glucose, the mouse blood tglucose level was assayed at 30 rain after being given 2.5 g/kg starch and acarhose or varied concentrations of different constituents of some Chinese medicines by stomach tube. Results: The constituents of Sangye, Sangzhi, Sangbaipi, Dihuang and Yuzhu showed potent inhibitory activities against glucosidase. Furthermore, the first kind of constituents was proved to be beneficial in reducing blood glucose by in vivo glucose tolerance experiments. Conclusion: The constituents of Chinese medicines with reducing blood glucose effect have been discovered, thus providing a clue to novel drugs.