改良脱钙液在骨骼组织切片中的应用

在日常病理工作中,骨骼组织做病理切片之前,要进行脱钙处理.通常用的脱钙液有硝酸、盐酸、甲酸为主配制的脱钙液,还有铬酸和螯合剂配制的脱钙液[1].现介绍一种对脱钙组织损伤较小而且配制简便的脱钙液,固定脱钙组织时不需要配制专用固定液,只用10％中性甲醛液即可,方便了脱钙组织和其他组织共同进行固定、脱水,经过这种脱钙液脱钙后的组织制作出的切片完整,染色效果好,组织形态结构清晰,是一种适合于日常骨骼组织病理制片工作的脱钙液.     

RapidCal．Immuno脱钙剂在石蜡组织制片中的应用

我们在日常石蜡组织切片时经常会遇到一些诸如子宫肌瘤、角化严重的皮肤纤维瘤等硬韧组织或脱钙不佳的骨组织石蜡标本.对此类组织往住不易获得较好的石蜡组织切片.我们在工作中试用了RapidCal.Immuno脱钙剂,可以迅速和方便地软化此类硬韧的石蜡组织块,也可以对脱钙不佳的骨组织石蜡标本直接重复脱钙,易于切取较好的组织切片,从而提高HE染色质量.     

快速微波技术在骨组织脱钙中的应用

在常规病理技术工作中,通常使用硝酸、盐酸、甲酸为主的脱钙液以及以铬酸和螯合剂配制的脱钙液等。有些脱钙液对组织损害小但脱钙速度缓慢,还有些脱钙液配制繁琐操作步骤多,如AFIP甲酸-柠檬酸钠液等。我们采用快速微波     

EDTA脱钙液在原位杂交中的应用

脱钙是含钙组织进行常规病理染色、免疫组化染色及原位杂交染色过程中必不可少的重要环节。由于脱钙液的种类很多，本研究发现，10％的EDTA脱钙液（内含1‰的DEPC水）能有效的保护组织内的核酸不受破坏，报告如下。     

Rapidcal. Immuno在骨髓脱钙中的应用

近年来血液病呈高发趋势,骨髓穿刺活检更广泛地应用于临床。骨髓活检标本制片的质量及免疫组化染色的准确表达,对骨髓病理诊断起着极其重要的作用。骨髓组织中含有丰富的钙盐、脂肪及大量造血细胞,成分复杂,软硬程度不一致。在去除不利于制片的钙盐成分的同时,又要保证造血细胞形态的完好及其免疫原性的完整保留。     

复合配方脱钙液处理兔股骨髁标本

背景:兔骨缺损修复模型被广泛应用于骨替代材料的研究中,在实验过程中经常需要对兔股骨髁标本进行脱钙制作病理切片,但普遍存在脱钙困难的问题。目的:尝试应用一种复合脱钙液实现软骨覆盖兔股骨髁有效脱钙。方法:取兔股骨髁标本12个,分为2组,分别用自制复合脱钙液和普通甲酸脱钙液进行常温条件下的脱钙处理,复合脱钙液的组成比例如下:盐酸8mL,甲酸10mL,醋酸5mL,中性甲醛固定液100mL。在经过1周的常规脱钙过程之后,进行标准化的脱水、包埋、切片和染色程序。统计切片的完整率,观察苏木精-伊红染色后切片的质量和细微结构,并对两种脱钙液的经济性进行比较。结果与结论:复合脱钙液组的切片完整率显著高于甲酸组,差异有显著性意义(74%vs18%,P<0.05)。复合脱钙液组的切片着色优良,背景清亮,微观结构清晰,细微结构保存完整,不同组织染色对比鲜明。该复合脱钙液的应用成本较常用的甲酸脱钙液降低65%。提示自制复合脱钙液可有效解决兔骨缺损修复模型实验中的脱钙困难问题,且复合脱钙液配置简便,成本低。     

即时脱钙液在切片中的应用

在日常病理制片过程中,我们常遇到一些需要即时处理的蜡块,比如骨组织脱钙不全,含少量骨组织没做脱钙处理的,病变软组织中带点状或小灶或灶状钙化组织,或在组织中间杂砂粒样组织等等,而这些组织往往伴有一些异常或异型性改变,尤其是软组织中带有钙化灶或其他含钙组织的蜡块,常伴有癌变组织,特别需要指出的是在卵巢组织,     

大鼠关节组织硝酸、EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较

骨组织脱钙技术是病理实验室常用技术之一。它的应用,使难以切片或不能完整制片的骨或软骨组织达到完整制片的目的。适用组织化学、免疫组化等技术的染色。大鼠关节组织制片的关键步骤是脱钙,其直接影响到制片的成败。现在大鼠关节组织石蜡制片实验中,分别用10％硝酸和乙二胺四乙酸二钠（EDTA）复合液进行脱钙处理后,石蜡包埋、制片、染色。对用两种方法脱钙处理的大鼠关节组织石蜡制片后染色,镜下观察形态及着色效果。     

髓心减压联合脱钙骨基质植入治疗早期股骨头坏死的围手术期护理

<正>股骨头缺血性坏死是一种致残性疾病,其发病率有逐渐增高的趋势,发病原因至今未明,常见诱因有外伤、长期饮酒、过量服用激素等。如不治疗,80%的患者将会在发病4年内出现股骨头塌陷和骨关节炎。因此,在出现股骨头塌陷并继发骨关节炎前,应采取各种保存股骨头的治疗方法延缓病程     

大鼠关节组织硝酸、EDTA脱钙对石蜡制片的影响及比较

骨组织脱钙技术是病理实验室常用技术之一.它的应用,使难以切片或不能完整制片的骨或软骨组织达到完整制片的目的.适用组织化学、免疫组化等技术的染色.大鼠关节组织制片的关键步骤是脱钙,其直接影响到制片的成败.现在大鼠关节组织石蜡制片实验中,分别用10%硝酸和乙二胺四乙酸二钠(EDTA)复合液进行脱钙处理后,石蜡包埋、制片、染色.对用两种方法脱钙处理的大鼠关节组织石蜡制片后染色,镜下观察形态及着色效果.     

从兔股骨头中提取总RNA的方法特点

目的:建立一种高效、快速的骨组织总RNA提取方法。方法:实验于2005-01/2006-01在昆明医学院实验动物中心和中国科学院昆明动物研究所中科院细胞与分子进化重点实验室完成。取健康新西兰大白兔1只,截取其股骨头,迅速置于液氮罐中保存,于研钵中研磨,使骨组织始终保存于液氮中,继续研磨,如此重复3次,然后利用Trizol使骨细胞结构迅速破坏,将粉末转入离心管,室温静置5min。随后加入氯仿等有机溶剂处理、离心,使RNA与细胞DNA、蛋白质及其他成分分离从而得到总RNA。最后鉴定RNA的质量、纯度及产率,取2μL提取出的RNA在体积分数为0.008的甲醛变性琼脂糖凝胶上进行电泳,主要观察RNA的28S、18S及5S三个条带是否清晰,有无降解和DNA污染。以99μLDEPC水稀释1μLRNA样品,紫外分光光度计测量其吸光度(A)值,A260/A280之比值表示RNA的纯度,同时根据吸光度值计算其质量浓度。结果:①对提取的兔股骨头RNA进行琼脂糖凝胶电泳,可显示清晰的28S、18S两个条带,5S条带亦可见,表明了RNA是完整的。②用紫外分光光度法测定兔股骨头中提取出的RNAA260/A280,结果表明由本法提取的RNA纯度高,无DNA和蛋白质的污染。③经紫外分光光度计吸收定量,每毫克兔股骨头组织能提取1.0～1.2μg的总RNA。结论:本法提取骨组织总RNA方便、快捷,质量高,可用于骨组织的分子生物学研究。     

甲酸表面脱钙法在骨髓活检荧光原位杂交制片中的应用

目的 对骨髓活检组织使用甲酸溶液进行表面脱钙,提高其石蜡切片荧光原位杂交检测的成功率,为骨髓内淋巴瘤的精确诊治及预后判断提供分子生物学依据。方法 回顾性收集2015年1月至2022年5月间首都医科大学附属北京友谊医院病理科骨髓活检组织58例,其中套细胞淋巴瘤33例,弥漫大B细胞淋巴瘤21例,滤泡性淋巴瘤4例。根据常规制片前所用脱钙液和脱钙方式的不同,将实验分为3组：硝酸传统脱钙组(DG1)、硝酸表面脱钙组(DG2)和甲酸表面脱钙组(DG3)。其中DG2组和DG3组蜡块在荧光原位杂交制片前,需放入50%甲酸溶液中二次脱钙10 min,流水冲洗10 min。之后对3组蜡块进行连续切片,每例捞取组织面2张,分别用于苏木素和伊红染色和杂交检测。结果 DG1组、DG2组和DG3组杂交的成功率分别为5.6%(1/18)、94.7%(18/19)和95.2%(20/21)。与DG1组相比,DG2组和DG3组杂交成功率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。DG2组和DG3组成功率之间差异无统计学意义(P>0.05)。DG2组13例MCL和1例FL、DG3组8例MCL和2例FL中的CC...     

改良骨及钙化组织快速脱钙法在病理诊断中的应用

目的:探讨骨及钙化组织改良快速脱钙法在病理诊断中的应用。方法:回顾性分析31例骨肿瘤患者需脱钙处理的骨组织病理切片资料。结果:改良骨及钙化组织快速脱钙法脱钙时间较常规脱钙法缩短48 h,切片厚薄均匀,平坦完整,结构清晰,着色均匀。结论:对骨及钙化组织脱钙方法进行改良,可缩短骨及钙化组织的制片时间、并制出优良切片。     

硝酸液对骨组织脱钙后方法的改良

常规骨及钙化组织石蜡切片其脱钙过程往往需要酸处理 ,酸必然在脱钙的同时对骨的有机物质引起一定的损害。在制作前一般先经无机酸稀溶液浸渍脱钙再用流水洗涤 2 4小时 ,除去组织内原性酸性物质 ,然后才能按常规制片染色。此种方法脱钙时间长、速度慢 ,在客观上延长了病理诊断和临床治疗 ,而且染色效果并不太理想。我们经过反复实践 ,探索出一种有效的快速脱钙方法。1　材料和方法骨及钙化组织 ,锯成 1.2 cm× 1.0 cm× 0 .3cm薄片 ;10 %～15 %中性福尔吗林固定 ,8%硝酸脱钙 ,水洗 1分钟 ,置入 3%氢氧化钠液浸渍 5分钟 ,经 A- F液、95 %乙…     

介绍一种改良的Neutral EDTA脱钙液

脱钙是制作骨组织切片的重要环节,尤其是要进行免疫组织化学染色的骨组织,如何达到骨组织既充分脱钙,又保护骨组织的抗原不受破坏的目的,我们参考有关文献[1,2],配制了一种改良的Neutral脱钙液,用于骨组织脱钙,并进行相应的免疫组化染色。该方法既不损害组织结构也不影响染色效果,简化了步骤,保证了质量。1材料与方法1·1材料24例来自大段同种异体骨愈合实验研究之兔骨。改良的Neutral脱钙液配制方法:将乙烯二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)250 g,溶于1 750 ml蒸溜水中,此时溶液呈灰白色浑浊状,不停摇晃使溶液彻底溶解。加入氢氧化钠25 g,继续摇…     

可注射性纤维蛋白凝胶/脱钙骨基质复合支架延缓兔骨关节炎软骨退变

背景:纤维蛋白凝胶及脱钙骨基质都有优良的生物相容性及生物降解性,因此可以作为软骨组织工程支架培养软骨种子细胞.这两种材料分别可以作为生长因子的载体缓慢释放生长因子,并达到持续发挥促软骨细胞生长的功能.目的:验证可注射性纤维蛋白凝胶,脱钙骨基质复合支架延缓骨性关节炎的可行性及有效性.方法:实验为同体对照动物实验.16只兔切断双后肢前交叉韧带制备兔膝关节骨性关节炎模型,兔一侧膝关节内注射复合支架材料与软骨细胞混悬液为实验组.另一侧膝关节内注射等量生理盐水为对照组,12周后取关节软骨,分别进行苏木精-伊红染色,Masson染色,Ⅱ型胶原免疫组化染色,并根据Wakitani标准及Outerbridge分类重新制定标准进行评分,评价实验组与对照组软骨退变的程度.结果与结论:实验组关节软骨表面尚光滑,可见软骨陷窝,结构软骨退变较对照组轻;软骨细胞及Ⅱ型胶原较正常软骨组织轻度减少,关节囊组织无明显Ⅱ型胶原表达.实验组综合评分低于对照组(P<0.01).表明可注射性纤维蛋白凝胶/脱钙骨基质复合支架为早期骨性关节炎及骨缺损修复提供了一种优良的复合支架材料.     

酸性成纤维细胞因子复合部分脱蛋白骨修复兔早期股骨头缺血性坏死的影像学评价

背景：酸性成纤维细胞因子（aFGF）具有较好的促进血管形成的作用以及成骨作用。目的：探讨酸性成纤维细胞因子复合部分脱蛋白骨对兔股骨头缺血性坏死修复的修复作用及X线表现,并与单纯生物衍生骨进行比较。设计、时间及地点：随机对照动物实验,于2008-01~2009-01在南华大学生命科学院完成。材料：健康成年新西兰大白兔24只,双侧股骨头颈交界处开窗,挖除股骨头内约50%松质骨,加用95%酒精灌注30min,建立双侧股骨头坏死骨缺损模型。经脱脂、脱蛋白、部分脱钙和冻干等一系列的物理、化学方法处理后制备生物衍生骨支架材料。酸性成纤维细胞因子复合制备组织工程骨支架材料。方法：按随机数字表法,48髋随机分为A组空白对照组,B组单纯部分脱蛋白骨（PDPB）植入组,C组aFGF/PDPB复合人工骨植入组,并将PDPB、 aFGF/PDPB复合人工骨同期手术植入。主要观察指标：术后分别于2周、4周、8周取材,进行大体标本观察、X线照片。以均值±标准差表示,全部数据采用SPSS13.0 统计软件分析,以α=0.05作为检验标准。结果：A组整个过程都呈低密度影;8周时有2例出现股骨头塌陷,缺损区仍呈X线低密度影。B组2周和4周时植骨区与周围正常清晰可见,8周时1例股骨头X线表现正常,2例缺损区与周围正常骨组织仔细辨别可区分,但已模糊不清。C组4周时移植物与周围正常骨组织界限不清,需仔细辨别才能区分;8周时所有股骨头缺损区与周围正常骨组织融合,与宿主骨界限不清。X线评分结果显示, C组优于A组（p〈0.05）,B组和C组之间有差异C组优于B组,但差异无统计学差异（p〉0.05）。结论：aFGF与PDPB复合构建组织工程化人工骨对兔早期股骨头缺血坏死具有较好的修复作用,但与单纯PDPB组比较X线表现差异无统计学意义。     

超声处理在含血吸虫卵沉着标本脱钙中的应用

病理制作技术是确诊胃肠道组织是否有血吸虫卵沉着的主要技术手段之一。常规方法脱钙需5～6h,超声处理可使脱钙时间大大缩短,25min内即可完成,且组织结构完整,切片染色清晰。     

同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质在桡骨临界骨缺损兔模型中的价值

目的探讨同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质对桡骨临界骨缺损兔模型的价值。方法纳入18只成年雄性大白兔,切取双上肢桡骨干中段部分骨质,制备双侧上肢桡骨临界骨缺损模型。将18只兔子随机分为对照组、实验组1和实验组2。对照组未予任何干预,实验组1在骨缺损部位植入脱钙骨基质,实验组2在骨缺损部位植入同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质。第8、12周时行X线、病理切片和解剖学检查,明确骨缺损的修复效果。结果骨缺损修复后,8、12周时对桡骨行X线检查,对照组骨缺损修复差; 8周时实验组1部分修复,12周时大部分修复,但仍有1只兔子存在小块骨缺损;8周时实验组2大部分修复,12周时全部修复,实验组2可见髓腔通畅。8、12周时,实验组1和实验组2的Lane-Sandhu组织学评分均显著高于对照组,实验组2的Lane-Sandhu组织学评分均显著高于实验组1(P 0. 05)。造模12周后,对照组骨缺损区多为纤维组织,实验组1有编织骨形成,但骨小梁紊乱;实验组2有板成骨形成,骨小梁排列紧密有序。结论同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨基质对桡骨临界骨缺损兔模型有一定的价值。     

人冻干脱钙骨在上颌窦提升术中的应用

目的:对人同种异体冻干脱钙骨应用于上颌窦提升术中的临床效果进行评价。方法:采用人冻干脱钙骨作为植骨材料对20例患者共22侧上颌窦行上颌窦提升术,同期或延期行牙种植术。种植体修复后随访36～48个月。结果:植骨后6～8个月X线检查发现,移植物和正常骨组织界线逐渐变模糊,植入材料吸收少,新形成的牙槽骨高度符合牙种植要求。同期或延期植入的33颗种植体中有1颗骨结合失败,其余种植体均形成良好骨结合。观察期内种植义齿行使功能良好。结论:人同种异体冻干脱钙骨应用于上颌窦提升术中可获得良好的临床效果。