宫颈脱落细胞DKK-3基因甲基化在宫颈癌中的意义

目的检测宫颈脱落细胞Dickkopf相关蛋白3(DKK-3)基因启动子甲基化并研究其在宫颈癌中的临床意义。方法选择宫颈癌患者(CER组)和健康女性(CON组)为研究对象,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测两组研究对象宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化,比较DKK-3基因启动子甲基化率在不同临床病理因素中的差异。结果 CER组宫颈癌患者宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化率明显高于CON组健康女性(53.8%vs.0.0%,P0.01)。CER组宫颈癌患者宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化率在HPV感染、组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和国际妇产科联盟(FIGO)分期中的差异均有统计学意义(均P0.05),有HPV感染、组织学分级高、肿瘤最大径大于或等于4cm、有淋巴结转移、有远处转移和FIGO分期晚的宫颈癌患者DKK-3基因启动子甲基化率明显高于无HPV感染、组织学分级低、肿瘤最大径小于4cm、无淋巴结转移、无远处转移和FIGO分期早的患者。结论宫颈癌患者宫颈脱落细胞DKK-3基因启动子甲基化与HPV感染、组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和FIGO分期有关,可用于评估宫颈癌的病情严重程度和预后。     

淋巴结 RU NX3基因甲基化与胃癌临床病理因素的关系研究

目的：研究胃癌患者淋巴结 RU NX3基因甲基化与临床病理的关系。方法选择2010年1月至2013年1月长江航运总医院手术治疗的60例胃癌患者为研究对象,采用甲基化特异性PCR（MSP）检测胃癌患者病理组织学证实肿瘤转移的淋巴结RUNX3基因启动子甲基化状态,分析在不同临床病理因素中RUNX3基因启动子甲基率的差异。结果 RUNX3基因启动甲基化率为66．7％,其在性别、年龄、吸烟史、酗酒史、家族史、幽门螺旋杆菌（HP）感染和肿瘤部位中的差异无统计学意义（P＞0．05）,在Lauren′s分型、组织学分级、肿瘤最大径、远处转移、T N M分期和手术方式中的差异有统计学意义（ P＜0．05）,弥漫型、G3～G4、肿瘤最大直径大于或等于5 cm、有远处转移、TNM分期晚和姑息手术患者淋巴结RUNX3基因启动子甲基化率明显高于肠型、G1～G2、肿瘤最大径小于5 cm、无远处转移、TNM分期早和根治手术患者（P＜0．05）。结论胃癌淋巴结RUNX3甲基化与Lauren′s分型、组织学分级、肿瘤最大径、远处转移、TNM 分期和手术方式密切相关,可作为胃癌病情及预后评估的标志物。     

外周血RUNX3基因甲基化在胃癌中的临床价值

目的研究外周血人类RUNX相关转录因子(RUNX3)基因甲基化在胃癌中的临床价值。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)检测胃癌患者(GAC组)及健康者(CON组)外周血RUNX3基因启动子甲基化状态,比较两者间的差异并分析RUNX3基因启动子甲基化与临床病理因素的关系。结果 GAC组患者外周血RUNX3基因启动子甲基化率为56.0%,对照组甲基化率为4.0%,胃癌组患者甲基化率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。GAC组患者外周血RUNX3基因启动子甲基化率在性别、年龄、酗酒史、家族史、幽门螺杆菌(HP)感染和肿瘤部位中的差异无统计学意义(P>0.05),在Lauren′s分型、组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者外周血RUNX3基因启动子甲基化与临床病理因素密切相关,可作为胃癌诊断、病情及预后评估的标志物。     

胃癌外周血DKK3基因启动子甲基化检测及其临床价值

目的检测胃癌患者外周血DKK3基因启动子甲基化并研究其临床意义。方法选择80例胃癌患者(GAC组)和40例正常健康人(CON组)为研究对象,检测两组研究对象外周血DKK3基因启动子甲基化并比较其差异。分析GAC组胃癌患者DKK3基因启动子甲基化与临床病理的关系。比较GAC组患者DKK3基因启动子甲基化与未甲基化患者预后的差异。结果 GAC组患者DKK3基因甲基化率显著高于CON组(P0.05)。GAC组胃癌病变分布全胃、低分化、肿瘤最大径≥5 cm、淋巴结转移、远处转移和Ⅲ+Ⅳ患者DKK3基因启动子甲基化率显著高于病变分布局部、中高分化、肿瘤最大径5 cm、无淋巴结转移、无远处转移和Ⅰ+Ⅱ患者(均P0.05)。GAC组中DKK3基因启动子甲基化患者R0切除率、3年生存率及总生存时间均显著低于DKK3基因启动子未甲基化患者(P0.05),并发症发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论胃癌患者外周血DKK3基因启动子处于高甲基化状态,与病情严重程度及预后密切相关,外周血DKK3基因启动子甲基化检测可用于病情及预后的评估。     

宫颈脱落细胞RASSF1A基因甲基化在宫颈癌中的临床意义

目的研究宫颈脱落细胞RAS相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子甲基化在宫颈癌中的临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应检测宫颈癌患者和健康女性宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化,分析与病理因素间的关系。结果宫颈癌患者宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化率为64.0%,高于健康女性的1.3%(P<0.05)。宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化率在宫颈癌不同组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、器官转移、Figo分期患者间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈脱落细胞RASSF1A基因启动子甲基化与宫颈癌病理因素密切相关,可作为宫颈癌病情判断和预后评估的标志物。     

死亡相关蛋白激酶1基因启动子甲基化在宫颈癌中的临床意义

目的研究死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)基因启动子甲基化在宫颈癌中的临床意义。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)检测宫颈癌癌组织和癌旁正常组织中DAPK1基因启动子甲基化,比较在二者间的差异及其与临床病理因素之间的关系。结果宫颈癌组织中DAPK1基因启动子甲基化率为62.5%,癌旁组织中甲基化率为5.0%,宫颈癌组织中DAPK1基因启动子甲基化率显著高于宫颈癌癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌癌组织DAPK1基因启动子甲基化率在组织学分级、肿瘤最大径、淋巴结转移、器官转移、FIGO分期中的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DAPK1基因启动子在宫颈癌中呈高甲基化状态,可作为宫颈癌的病情和预后评估的生物学标志物。     

Runx3基因在肝细胞癌中甲基化状态分析及临床意义

目的通过检测肝细胞癌组织中Runx3基因启动子区域甲基化状态,探讨Runx3基因启动子区域异常甲基化在肝细胞癌发生、发展过程中的临床意义。方法采用DNA甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）（MSP）技术对81例肝细胞癌患者肿瘤组织及其癌旁正常组织Runx3基因启动子区域甲基化状态进行检测。结果在肝细胞癌组织中,Runx3基因启动子区域甲基化率占43．2％（35／81）,而在相对应的癌旁正常组织中,Runx3基因启动子区域仅发现1例异常甲基化现象,其甲基化率占1．2％（1／81）（P〈0．01）;Runx3基因启动子区域甲基化状态与临床病理参数的关系差异均无统计学意义。结论Runx3基因启动子区域甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一,与肝细胞癌发生早期密切相关,可作为肝细胞癌早期诊断的分子标记物及分子治疗的靶点。     

Runx3基因启动子甲基化检测对乳腺癌患者早期诊断的临床意义

目的 探讨血浆Runx3基因启动子甲基化检测对诊断早期乳腺癌的临床意义.方法 2009年10月～2010年10月收集经病理确诊的乳腺癌患者60例,采用DNA甲基化特异性PCR方法检测60例乳腺癌患者的癌组织、癌旁正常组织及血浆中Runx3基因启动子异常甲基化情况.GraphPad Prism 4统计软件对乳腺癌组织和血浆中Runx3基因甲基化行x2检验分析.结果 癌旁正常组织中Runx3异常甲基化为6.67％,癌组织中Runx3异常甲基化率为58.33％,血浆中为78.33％,血浆中甲基化改变与癌组织甲基化改变具有显著相关性.Runx3基因甲基化与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小无相关性(x2分别为0.951,0.287,P＞0.05),而与患者临床分期和淋巴结转移密切相关(x2=5.188,P=0.023),其中癌组织中Ⅰ期+Ⅱ期患者甲基化率与Ⅲ期+Ⅳ期患者甲基化率比较差异显著(x2=8.625,P=0.003).结论 血浆Runx3基因启动子甲基化检测对早期诊断乳腺癌有一定诊断参考价值.     

Runx3基因启动子区甲基化与胃癌的关系

目的通过检测胃癌Runx3基因启动子区域甲基化状态，来探讨Runx3基因启动子区域甲基化在胃癌发生和发展过程中的临床意义。方法采用DNA甲基化特异性PCR（MSP）技术对37例胃癌患者手术切除肿瘤组织及其癌旁组织Runx3基因启动子区域甲基化进行检测。结果Runx3基因在37例胃癌及其癌旁组织中甲基化率分别为40．5％（15／37）和8％（3／37）。结论Runx3基因启动子区甲基化可能是肿瘤特异性的（P＜0．05），可作为胃癌早期诊断的分子标记物。     

Runx3基因甲基化与大肠癌发生和转移的关系

目的 探讨Runx3基因启动子甲基化与大肠癌发生发展过程的关系。方法 采用蛋白印迹技术（Western-Blot）检测30例大肠癌组织及肿瘤周围正常黏膜组织中Runx3mRNA的表达，同时用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测Runx3基因启动子甲基化情况。结果 30例大肠癌组织标本中Runx3基因的表达（6409．1042±298．2028）较肿瘤周围正常组织中表达明显下调（34565．3921±1108．2163），差异有统计学意义（P〈0．01）。正常黏膜组织中未发现有Runx3基因启动子的甲基化，30例大肠癌组织中有16例检测到Runx3基因启动子的甲基化，大肠癌组织Runx3基因启动子甲基化率显著增高（P〈0．05）。大肠癌标本中Runx3蛋白的表达与其病理临床特征密切相关，在低分化和有淋巴结转移大肠癌组织标本中Runx3蛋白的表达显著下调（P〈0．05）。结论 Runx3基因启动子甲基化是导致Runx3基因失活的主要原因之一，并且与大肠癌的发生发展密切相关。     

骨肉瘤PTEN启动子特定区域甲基化的研究

目的:检测骨肉瘤组织中人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)启动子特定区域的甲基化状态,初步探索PTEN在骨肉瘤发生、发展中的作用。方法:应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)方法,检测并分析32例骨肉瘤患者的病理组织中及17名正常对照者的外周血中抑癌基因PTEN启动子003区域CpG岛的甲基化状态。结果:骨肉瘤好发于股骨远端(20.9%)、胫骨近端(20.9%)和肱骨远端(16.3%)。骨肉瘤组织中抑癌基因PTEN启动子003区域CpG_1、CpG_3.4、CpG_9、CpG_11.12,CpG_13和CpG_18.19.20的甲基化率高于其在正常人外周血样中的甲基化率(P<0.05)。结论:PTEN基因启动子高甲基化导致的PTEN基因失活可能参与了骨肉瘤的发生、发展。     

胃镜活检组织RASSF1基因启动子甲基化检测及其临床意义分析

目的：探讨胃镜活检组织RAS相关结构域蛋白1（RASSF1）基因启动子甲基化水平及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测胃癌患者胃镜活检癌组织、癌旁组织及健康者正常胃组织RASSF1基因启动子甲基化状态,并比较其差异;分析胃癌患者RASSF1基因启动子甲基化与不同临床病理因素的关系。结果胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率为62．7％,癌旁组织甲基化率为4．0％,健康者正常胃组织甲基化率为2．7％,癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织（P＜0．05）。胃癌患者癌组织RASSF1基因启动子甲基化率在不同性别、年龄、病变部位及幽门螺杆菌感染患者间比较差异无统计学意义（P＞0．05）,在不同分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和 TNM 分期患者间,比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论胃癌患者胃镜活检癌组织RASSF1基因启动子甲基化率高于癌旁组织和正常胃组织,且甲基化率与癌组织分化程度、肿瘤最大径、淋巴结转移、远处转移和TNM分期有关,可反映胃癌患者的病情及预后。     

MS-HRM检测结直肠癌患者外周血AKAP12基因及其临床意义

目的 探讨MS-HRM法定量检测结直肠癌患者外周血中AKAP12基因甲基化程度及其临床意义.方法 采用MS-HRM法定量检测80例结直肠癌患者和20名健康人外周血中AKAP12基因的甲基化水平,并分析评价其与病理分期分级的关系.同时对MS-HRM法的重复性和与传统MSP法检测的灵敏度和检出率进行比较.结果 MS-HRM法从80例结直肠癌患者中检测到38例(47.5%)AKAP12基因启动子区域不同程度的甲基化患者(甲基化1%～20%的24例,20%～60%的12例,60%～100%的2例),20名健康人中仅检测到甲基化<10%的2名.MS-HRM法检测AKAP12基因甲基化的灵敏度(1%)优于传统的MSP法(10%).AKAP12基因甲基化水平与结直肠癌患者的年龄、性别的差异无统计学意义(x2分别为3.13、1.70,P均>0.05),但与结直肠癌的Dukes分期和分化程度的差异均有统计学意义(x2分别为5.93、8.41,P均=0.01).结论 外周血MS-HRM定量检测AKAP12基因甲基化程度的方法比传统MSP法灵敏度更高,AKAP12基因甲基化有望成为结直肠癌进展评估的分子指标.     

人非小细胞肺癌组织中HIN-1基因甲基化的检测与分析

目的:检测HIN-1(high in normal-1)基因在非小细胞肺癌中的甲基化情况,探讨其与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法:采用基因甲基化特异性PCR检测73例非小细胞肺癌和20例正常肺组织中HIN-1基因启动子的甲基化情况,分析HIN-1基因甲基化水平与非小细胞肺癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:非小细胞肺癌患者HIN-1基因甲基化的检出率为68.49%,而正常对照组中未检出HIN-1基因的甲基化,两者有显著差异(P<0.01)。HIN-1基因甲基化情况与肺癌患者的临床分期、有无淋巴结转移、肿瘤分级及患者的预后相关(P<0.01),而与患者的性别、年龄及肿瘤的组织学类型无关(P>0.05)。结论:HIN-1基因甲基化在非小细胞肺癌中检出率较高,其启动子高甲基化可能与非小细胞肺癌的发展及预后具有一定的关系。     

未成熟性畸胎瘤30例临床病理特征及预后分析

目的 探讨未成熟性畸胎瘤的临床病理特征及预后。方法 收集西北妇女儿童医院2013-03—2023-03未成熟性畸胎瘤30例进行回顾性分析。结果 22例卵巢原发患者年龄7～73岁,8例非卵巢原发患者均为孕期体检发现。肿物直径5～30 cm,组织学分级G1 12例、G2 12例、G3 6例。年龄、性别、肿物最大径、部位、FIGO分期与组织学分级无关(P>0.05),混合生殖细胞肿瘤与组织学分级有关(P<0.05)。单因素分析显示性别、肿物最大径、部位、手术方式、FIGO分期、组织学分级是影响患者预后的因素(P<0.05),多因素分析显示肿物最大径是影响患者的独立预后因素(P<0.001)。结论 未成熟性畸胎瘤预后差,手术联合化疗在其治疗中起重要作用,FIGO分期和组织学分级是影响预后的重要参数。     

p16基因甲基化在胃癌发病机制中的作用

目的通过检测胃癌组织p16基因的启动子Cp G岛甲基化状态,探讨其在胃癌发病机制中的作用,及其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法选取经胃镜检查诊断为胃癌的74例患者(胃癌组)及36例胃黏膜组织正常者(对照组),应用甲基化特异性PCR(MSP)检测正常胃黏膜组织和胃癌组织p16基因的启动子Cp G岛的甲基化状态,并分析p16基因甲基化与胃癌临床病理特征之间的关系。结果胃癌组p16基因的甲基化阳性率为56.8%,对照组未发现p16基因甲基化,差异具有统计学意义(P0.05);p16基因甲基化表达与胃癌患者的淋巴结转移、远处转移及病变的浸润深度有关(P0.05),但与性别、年龄、肿瘤大小、部位和组织学类型无关。结论在胃癌发生发展中,p16基因甲基化修饰起着非常重要的作用,可作为反映胃癌侵袭转移的生物学指标。     

胰腺癌细胞中Runx3基因表达及甲基化的研究

目的观察胰腺癌细胞中Runx3基因表达的情况,探讨其出现表达异常的机制。方法 (1)RT-PCR检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞及正常胰腺组织中Runx3mRNA表达情况(2)Western blotting检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中Runx3蛋白表达情况;(3)甲基化特异性PCR(MSP)检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、As-PC-1细胞及正常胰腺组织中Runx3基因启动子区CpG岛的甲基化水平。结果 (1)Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中未检测到Runx3基因mRNA表达,而正常胰腺组织可检测到Runx3基因mRNA表达;(2)Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中未检测到Runx3蛋白表达;(3)Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中Runx3基因启动子区CpG岛均发生甲基化,而正常胰腺组织中Runx3基因启动子区CpG岛未检测到甲基化。结论胰腺癌细胞中存在Runx3基因失表达,其机制可能与Runx3基因启动子区CpG岛发生甲基化有关。     

DAPK基因甲基化模式在白血病诊断中的价值初步研究

目的:筛选抑癌基因DAPK特异的甲基化模式并评价其作为白血病诊断分型标志物的价值。方法:通过亚硫酸氢盐测序法(BSP)分析DAPK基因启动子区Cp G岛在正常人外周血白细胞和HL-60、U937及Jurkat白血病细胞株中甲基化的状态及模式,选择特异的甲基化位点应用甲基化特异性PCR法(MSP)在白血病细胞株和患者外周血标本中验证DAPK基因异常甲基化模式诊断白血病的效能。结果:DAPK基因Cp G岛不同细胞基因组甲基化模式图谱显示,在正常细胞基因组中去甲基化程度高于白血病细胞株,各白血病细胞株甲基化模式存在差异,能找到特异的Cp G甲基化位点并应用MSP检测区分HL-60与其它3种细胞,而临床标本中MSP检测可区分急性非淋巴细胞白血病(ANLL)与其他类型白血病,其诊断的灵敏度、特异度和准确度分别为59.1%、100%和82.7%,没有发现MSP甲基化诊断与临床病理分型之间的关系。结论:DAPK基因启动子区异常甲基化模式作为白血病诊断分型的潜在肿瘤标志物之一,丰富了白血病诊断的方法,为今后寻找各类肿瘤甲基化标志物提供了思路并奠定了研究基础。