缺血再灌注致心律失常大鼠模型钙调蛋白介导的L型离子通道电流的变化

目的：探讨缺血再灌注致心律失常大鼠钙调蛋白（CaM）的变化及其对L型离子通道电流的影响。方法：选取健康SD大鼠48只,以单盲法随机分为4组（n=12）;空白组不做任何处理,模型组以左冠状动脉前降支结扎法制备缺血再灌注致心律失常模型,干预组在制备缺血再灌注致心律失常模型前肌注钙调蛋白抑制剂W-7（100μmol／kg）,假手术组仅进行开胸手术和动脉套线,无结扎。模型制备成功后,取大鼠心脏组织,以免疫印迹法检测L型钙离子通道主要亚型CaV1．2功能决定性亚单位α1C和CaM的表达水平;同时分离大鼠心肌细胞,以膜片钳技术进行L型离子通道电流（ICa,L）测定。结果：模型组大鼠心肌组织的a1C、CaM的表达水平,以及ICa,L均高于空白组和假手术组,差异具有统计学意义（P〈0．05）;较模型组相比,干预组CaM的表达水平和ICa,L均有降低,差异具有统计学意义（P〈0．05）;I—V曲线有所上移,a1C的表达水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：ICa,L过激所致Ca抖内流和细胞超载为缺血再灌注后心肌损伤和心律失常的重要因素之一,CaM在该病理过程中能够发挥不依赖于L型离子通道表达水平的调节作用,可作为其临床治疗的新靶点。     

活性氧对神经母细胞株SH-SY5Y细胞L型钙通道电流的影响

①目的 探讨氧自由基导致神经元钙超载的发生机制。②方法 在神经母细胞SH—SY5Y细胞体外培养的基础上，采用全细胞膜片钳技术，观察H2O2对SH—SY5Y细胞L型钙通道电流(ICa,L)的影响。③结果 H2O2能够明显增加峰值ICa,L，且该作用具有浓度依赖性。H2O2使ICa,L的I-V相关曲线下移，但对其形状和最大激活电位无明显影响。④结论 H2O2对L型钙通道有明显增强作用，此可能是其导致神经元钙超载的机制之一。     

次乌头碱对心肌细胞Ca2+调控蛋白mRNA表达的影响

目的 考察次乌头碱(HA)对原代培养乳大鼠心肌细胞L-钙通道、钙调蛋白(CaM)、肌质网雷诺定受体(RyR2)mRNA表达的影响.方法 体外培养乳大鼠心肌细胞,采用RT-PCR法测定L-钙通道α1C亚基、CaM及RyR2 mRNA的表达.结果 HA作用15 min时,60、120 μΜ/L能提高心肌细胞膜L-钙α1C ...     

丹参复方液对大鼠肥大心肌L型钙电流的影响

【目的】探讨丹参复方液对高血压性肥大心肌L型钙电流的影响。【方法】利用腹主动脉缩窄法建立高血压性心肌肥大模型,利用灌胃法给予丹参复方液,采用离体大鼠心脏Langendorff灌注法急性分离心肌细胞,利用膜片钳全细胞技术记录L型钙电流,比较正常对照组、高血压未治疗组和丹参复方液组之间的区别。【结果】高血压未治疗组的L型钙电流密度显著高于正常对照组（P〈0．05）,丹参复方液组显著小于高血压未治疗组（P〈0．05）,丹参复方液组与正常对照组相比无显著性差异（P〉0．05）。【结论】丹参复方液具有逆转高血压性肥大心肌L型钙电流的药理作用。     

增龄性心房颤动心房电重构与钙电流分子机制的研究进展

随着心房颤动(房颤)电生理机制研究的广泛深入,心房电重构被认为与增龄性房颤密切相关,电重构与钙超载有关,其发生为心房肌细胞L-型钙电流与通道以及肌质网钙调控蛋白异常表达引起。增龄心房组织的细胞电生理和分子生物学的改变是否是老年人较成年人易发房颤的分子机制尚不十分明确。现就增龄性房颤心房电重构与钙电流分子机制的研究进展予以综述。     

大鼠心室肌细胞单通道钙电流的记录及其电生理学特性分析

 目的分离大鼠心室肌细胞,记录大鼠心室肌细胞的单通钙电流,并分析其基本电生理学性质。方法胶原酶法分离大鼠心室肌细胞;应用膜片钳技术细胞贴附式和内膜向外式记录L-型钙通道的电流,并用pClamp10分析软件进行分析。结果分离得到了大鼠心室肌细胞,细胞存活形态良好,呈杆状或柱状,具有清晰的横纹。记录到的L-型钙通道单通道电流,平均电流幅度为（1.13±0.01）pA,电导为19pS,平均开放时间常数为（1.35±0.03）ms,平均关闭时间常数为（46.75±10.04）ms。此外,还记录到了L-型钙通道的Run-down现象。结论本实验分离得到的大鼠心室肌细胞适用于膜片钳单通道记录模式;记录到的L-型钙通道的基本电生理学性质与文献报道相符。     

舒张性心力衰竭兔Ca2+调控蛋白相关基因表达的变化

目的探讨舒张性心力衰竭(DHF)时Ca2+调控蛋白相关基因表达的变化,以阐明DHF发生的分子机制.方法建立DHF兔模型,并设假手术为对照组,分别测定2组兔心肌细胞内Ca2+含量和肌浆网(SR)Ca2+-ATPase(钙泵)活性,并以定量RT-PCR和Westernblot技术检测Ca2+调控蛋白相关基因的转录和蛋白质表达水平.结果(1)DHF兔心肌细胞内Ca2+含量(μg/ml)显著高于对照组(1728±545vs633±168,P＜0.01);(2)DHF兔SR钙泵活性,细胞膜L型Ca2+通道和SR钙泵mRNA水平(μmol*mg-1*h-1)明显低于对照组(10.5±2.8vs21.1±5.7;0.75±0.11vs1.20±0.33;0.76±0.12vs1.24±0.38,P＜0.05～0.01);(3)DHF兔细胞膜L型Ca2+通道mRNA水平与左室舒张末压中度负相关(r=-0.74,P＜0.05),SR钙泵mRNA水平与左室舒张末压和左室松弛时间常数中度负相关(r分别为-0.81、-0.64,P＜0.05～0.01);DHF兔兰尼碱受体mRNA水平与左室松弛时间常数负相关(r=-0.71,P＜0.05);(4)DHF兔SR钙泵的蛋白质表达明显低于对照组(0.75±0.06vs1.02±0.09,P＜0.05).结论细胞膜L型Ca2+通道和SR钙泵mRNA和蛋白质表达减低是导致心肌细胞内Ca2+超负荷及DHF发生的重要因素.     

继发性右室肥厚患者钙调蛋白基因表达的研究

探讨继发性右室肥厚(RVH)患者心肌细胞内Ca     

Torsades de pointes, a common arrhythmia, induced by medication.

Between May 1980 and April 1981 four patients were referred to one hospital with syncope or recurrent ventricular fibrillation while taking antiarrhythmic or phenothiazine drugs. In all the patients ventricular tachyarrhythmias with the characteristics of torsades de pointes were documented in association with prolonged QT intervals. With removal of the offending agent (in all the patients) supplemented by temporary overdrive pacing (in two patients) the tachyarrhythmias subsided. This study suggests that drug-induced torsades de pointes is an important clinical entity that occurs more frequently than has been suspected.     

人参皂苷单体Rb1对缺血心室肌细胞动作电位及L-型钙离子通道的影响

目的: 观察人参皂苷单体Rb₁对豚鼠缺血心室肌细胞动作电位（AP）和L-型钙离子通道的影响。方法: Langendorff离体心脏逆向灌流法分离豚鼠心室肌细胞，随机选取心室肌细胞分为正常对照组、缺血组及Rb₁100、200和400 μmol•L^-13个剂量组。应用全细胞电流钳模式记录心室肌细胞动作电位，应用电压钳模式记录L-型钙离子通道电流（I_ca-L。结果: Rb₁ 100、200和400 μmol•L^-1组缺血心室肌细胞动作电位复极50%（APD₅₀）和动作电位复极90%（APD₉₀）明显低于给药前（P<0.05或P<0.001），缺血后的心室肌细胞L-型钙离子通道峰值电流明显低于给药前（P<0.05或P<0.01）。Rb₁抑制缺血心室肌细胞钙离子通道的开放，随浓度增加钙电流显著降低，具有浓度依赖性。结论：Rb₁缩短缺血心肌细胞AP时程和抑制钙通道的作用，可能是其抗心肌缺血的机制之一。     

埋藏式心内除颤器应用4例报告

对４名器质性心脏病继发顽固、重症室性心动过速和／或心室纤颤（ＶＴ／Ｖｆ）患者采用埋藏式心内除颤器治疗,得左锁骨下静脉穿刺。将ＩＣＤ心内三级导管引入右室心尖部。将ＩＣＤ埋入左上胸囊袋,借助程控电脑诱发ＶＴ／Ｖｆ,确认ＩＣＤ确能有效感知和终上ＶＴ／Ｖｆ后缝合切口。结果：４例患者平均随访７月,均未再发晕厥,共发生ＶＴ１９次。均被ＩＣＤ在１１ｓ内成功终止,未发生与ＩＣＤ相关的并发症,结果表明：ＩＣＤ的疗效     

Ventricular arrhythmias.

Sudden cardiac death claims thousands of Canadians annually. Ventricular tachycardia and fibrillation account for up to 85% of these deaths. Identifying the patients at risk remains a major challenge. Those who have recurrent ventricular tachycardia or have been resuscitated from ventricular fibrillation are generally considered to be at highest risk. Although ventricular premature beats in the absence of previous ventricular tachycardia or fibrillation are not helpful in identifying such patients in most cases, they can indicate increased risk for sudden cardiac death in the presence of a structural cardiac abnormality, particularly recent myocardial infarction; however, the need for treatment in such cases is speculative and is being investigated. Treatment is mandatory for survivors of an episode of ventricular fibrillation and those with recurrent sustained ventricular tachycardia or torsade de pointes ventricular tachycardia. The approach to management is either invasive or noninvasive. Selection of an antiarrhythmic agent is facilitated by knowledge of some basic electrophysiologic features of the heart and of the classification of antiarrhythmic drugs. However, drug therapy has to be individualized on the basis of efficacy, left ventricular function and adverse effects or potential adverse effects of the drug. Amiodarone therapy or nonpharmacologic therapy should be considered if a suitable antiarrhythmic agent cannot be found.     

Blocking effect of puerarin on calcium channel in isolated guinea pig ventricular myocytes

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｄｅｎｔｉｆｙｗｈｅｔｈｅｒＰｕｅｒａｒｉｎ（Ｐｕｅｒ）ｈａｓｂｌｏｃｋｉｎｇｅｆｆｅｃｔｓｏｎＬｔｙｐｅｃａｌｃｉｕｍｃｈａｎｎｅｌＭｅｔｈｏｄｓ　ＷｅｕｓｅｄｗｈｏｌｅｃｅｌｌｒｅｃｏｒｄｉｎｇｏｆｐａｔｃｈｃｌａｍｐｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｔｏａｎａｌｙｓｅｃａｌｃｉｕｍｃｈａｎｎｅｌｃｕｒｒｅｎｔｉｎｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒｍｙｏｃｙｔｅｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＬａｎｇｅｎｄｏｒｆｆｇｕｉｎｅａｐｉｇｈｅａｒｔｓｂｙｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅＲｅｓｕｌｔｓ　Ｉ…     

L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的表达

目的 研究L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏中的空间表达情况。方法制备成年大鼠心脏冰冻切片，结合大体位置和HE染色结果快速辨认出窦房结、房室结和结后延伸，采用免疫荧光和免疫印迹技术检测L型钙通道α1C亚单位在大鼠窦房结、房室结、结后延伸、右房、右室的表达，用共聚焦显微镜观察其表达部位，通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行分析。结果荧光呈现点状、斑状或不规则的短线状，主要分布于细胞膜及细胞内的膜性结构，其荧光强度由弱到强依次为窦房结、房室结、结后延伸、右心房、右心室，房室结和结后延伸之间无显著性差异（P〉0．05），其余两两相比均有显著差异（P〈0．05），其中右心房、有心室明显强于窦房结、房室结和结后延伸（P〈0．01）。各部位在相对分子质量200000左右可见一特异性蛋白条带。对蛋白条带进行灰度值分析，结果与免疫荧光相一致。结论L型钙通道α1C亚单位在成年大鼠心脏分布广泛，在不同部位表达量不同，在工作肌组织的表达量明显高于传导组织．提示钙电流在心脏不同部位有不同的分子基础.     

Antazoline therapy of recurrent refractory supraventricular arrhythmias--a preliminary report.

Seven patients with chronic or recurrent supraventricular tachyarrhythmias were selected for a trial of antazoline therapy because sinus rhythm or a controlled ventricular response could not be achieved with quinidine, procainamide, digitalis or propranolol. Sinus rhythm was established by either intravenous administration of antazoline or direct-current countershock, and has been maintained in all for 4 to 16 months by oral administration of antazoline. Side effects were minor. Antazoline is a sufficiently promising antiarrhythmic agent to warrant large-scale controlled studies.     

间羟胺对大鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的观察α肾上腺素能受体激动剂间羟胺对大鼠心室肌动作电位及L-型钙电流的影响。方法采用全细胞膜片钳方法,记录离体大鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙电流。结果 200μmol/L间羟胺可使心室肌细胞L-型钙电流增大（P〈0.05）,动作电位时程（APD）明显延长（P〈0.01）,动作电位复极50%和90%时间（APD50and APD90）明显延长（P〈0.01）。100μmol/L酚妥拉明可使增大的的L-型钙电流和APD、APD50、APD明显恢复。结论间羟胺可明显延长大鼠心室肌动作电位时程,而酚妥拉明可不同程度地拮抗此效应。     

犬心房肌细胞分离及其L型钙通道电流检测的研究

目的探讨一种稳定可靠的犬心房肌细胞的分离方法,提高膜片钳的实验成功率并检测L型钙通道电流。方法采用改良Langderoff灌流系统行主动脉逆行灌注,采用选择性冠状动脉插管的方法,获得单个心房肌细胞。在显微镜下观察细胞形态,并应用膜片钳全细胞模式记录L型钙通道电流。结果分离细胞存活率为70%～80%,复钙后细胞存活率为30%～40%,耐钙细胞形态呈杆状,折光性强,横纹清晰,并能稳定记录L型钙通道电流。结论改良Langderoff技术有助于稳定分离出存活率高、具有正常电生理特性的犬心房肌细胞,能用于心房肌细胞离子通道的研究。     

枳实提取液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的 :探讨枳实提取液 (CAE)对豚鼠心室肌细胞膜L型钙通道电流 (ICa L)的影响。方法 :用酶解法分离单个心室肌细胞 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察枳实提取液对豚鼠心室肌细胞膜ICa L的影响。结果 :①CAE(4×10 3 ,2× 10 2 ,4× 10 2 ,1× 10 1)g/ml增大ICa L,增加率分别为 15 .89%,2 9.0 1%,5 2 .0 3%和 5 9.76 %(P <0 .0 5 )。②CAE 2× 10 1g/ml和 4× 10 1g/ml分别可使峰值ICa L减少 17.33%和 30 .0 9%(P <0 .0 5 )。CAE只改变电流幅度 ,不改变I V曲线形状。结论 :低浓度CAE ,可浓度依赖性的增大豚鼠心室肌细胞L型钙电流 ,有促进钙通道开放的作用。高浓度CAE ,可抑制心室肌细胞L型钙电流 ,有抑制钙通道开放的作用。     

枳实提取液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

OBJECTIVE: To determine the effect of citrus aurantium extract (CAE) on L-type calcium currents (ICa-L) in ventricular myocytes of guinea pigs. METHODS: Single myocytes were dissociated by enzymatic dissociation method. The whole-cell patch-clamp recording technique was used to record the change of calcium current after the administration of CAE. RESULTS: 1. CAE 4 x 10(-3), 2 x 10(-2), 4 x 10(-2), and 1 x 10(-1) g/ml increased the ICa-L by 15.89%, 29.01%, 52.03% and 59.76% (P < 0.05), respectively. 2. CAE 2 x 10(-1) and 4 x 10(-1) g/ml decreased the ICa-L by 16.61% and 30.87% (P < 0.05), respectively. CAE changed the ICa-L significantly, but did not change the shape of I-V curves. CONCLUSIONS: CAE 4 x 10(-3)-1 x 10(-1) g/ml can increase the L-type calcium current in guinea pig ventricular myocytes significantly in a concentration-dependent manner, and promote the opening of calcium channel. CAE 2 x 10(-1)-4 x 10(-1) g/ml may inhibit the L-type calcium channels of ventricular myocytes, and depress the opening of calcium channel.     

电风暴的治疗新进展

电风暴的最新定义为24 h内发作3次或3次以上明确的室性心动过速或心室纤颤,需要电除颤(或抗心动过速起搏)治疗的临床综合征。其首发症状多表现为晕厥或猝死,心电图显示为持续性或反复发作的室性心动过速和心室纤颤,对Ⅰ类和Ⅲ类抗心律失常药物不敏感,通常需要多次电除颤,病死率极高。电风暴的发生机制与交感神经的过度兴奋有关,急性期最有效的治疗方法是静脉注射β受体阻滞剂;对于非急性期的患者还可选择射频消融、置入型心律转复除颤器、双侧交感神经阻滞术。