miR-100抑制乳腺癌细胞迁移的作用和机制

目的:探究miR-100对乳腺癌细胞株MDA-MB-231迁移能力的调节与机制.方法:Real time-PCR检测人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和乳腺癌细胞株MDA-MB-231中miR-100的基础表达水平.应用脂质体法将 miR-100 mimic及阴性对照分别转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231,通过real time-PCR检测转染后miR-100的表达水平,细胞划痕实验检测过表达miR-100对MDA-MB-231细胞迁移能力的影响,Western blot方法检测slug、snail和E-cadherin等EMT蛋白表达水平的变化.结果:miR-100在乳腺癌细胞株MDA-MB-231中的表达明显低于人正常乳腺上皮细胞MCF-10A.转染miR-100 mimic的乳腺癌细胞株MDA-MB-231的miR-100表达水平明显增高,细胞划痕实验显示过表达miR-100的MDA-MB-231细胞划痕愈合速度明显减慢.过表达miR-100的MDA-MB-231细胞E-cadherin蛋白表达水平明显增加,而slug和snail蛋白表达水平明显降低.结论:miR-100抑制乳腺癌细胞株MDA-MB-231的迁移能力与其上调E-cadherin,下调slug、snail蛋白表达,抑制EMT有关.     

miR-384靶向HMGA2对肝癌细胞生物学行为的影响及其机制

目的 探讨miR-384靶向高迁移率蛋白A2(HMGA2)对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 对数生长期HUH7细胞分为对照组、miR-384 NC组和miR-384 mimic组,qRT-PCR法检测miR-384表达情况,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,双荧光素酶基因报告法检测靶向关系,蛋白印迹法检测HMGA2、上皮钙粘蛋白(E-cad)、神经钙粘蛋白(N-cad)和波形蛋白(Vimentin)相对表达量。结果 人肝癌细胞HEP3 B、BEL-7402和HUH7中miR-384表达水平低于人肝脏正常上皮细胞THLE3中miR-384表达水平。对照组和miR-384 NC组miR-384表达水平、细胞存活率、迁移和侵袭细胞数以及HMGA2、E-cad、N-cad和Vimentin蛋白相对表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05);与miR-384 NC组比较,miR-384 mimic组miR-384表达水平升高,细胞存活率降低,迁移和侵袭细胞数减少,HMGA2、N-cad和Vimentin蛋白相对表达量降低,E-cad蛋...     

miR-144-3p 通过靶向FZD4 阻断Wnt/β-catenin 通路抑制肝癌Huh-7 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的: 探讨miR-144-3p 通过阻断卷曲受体4（FZD4）/Wnt/β-catenin 信号通路对肝癌Huh-7 细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法：收集2012 年3 月至2017 年7 月在柳州市工人医院手术切除的18 例肝癌患者的癌组织及相应的癌旁组织标本,以及肝癌细胞系Huh-7、SMMC7721 和MHCC97 和人正常肝上皮细胞株THLE-3,用qPCR 检测肝癌组织及细胞系中miR-144-3p 的表达水平。将miR-144-3p mimics/inhibitor 和FZD4 敲降载体转染至Huh-7 细胞中,用CCK-8、Transwell、划痕愈合实验和Annexin V-FITC/PI 染色流式细胞术检测Huh-7 细胞的增殖、迁移和凋亡水平。用双荧光素酶报告基因验证miR-144-3p 和FZD4 的靶向关系。结果：在肝癌组织和细胞系中miR-144-3p 均呈低表达（P<0.05 或P<0.01）。过表达miR-144-3p 可显著抑制Huh-7 细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡（均P<0.01）。双荧光素酶报告基因实验证明miR-144-3p 靶向作用FZD4 并下调其表达水平。体外实验进一步证实,过表达miR-144-3p 靶向FZD4 并阻断Wnt/β-catenin 通路,进而抑制Huh-7 细胞增殖、迁移和促进细胞凋亡（均P<0.01）。结论：miR-144-3p 通过阻断FZD4/Wnt/β-catenin 通路抑制肝癌Huh-7 细胞的恶性生物学行为,为肝癌诊断或治疗提供了潜在分子靶点。     

miR-144对肝癌细胞生物学功能的影响及其临床意义

目的探讨miR-144在肝癌组织中的表达水平及其对肝癌细胞生物学功能的影响,并分析其临床意义。方法通过qRT-PCR法检测肝癌及其癌旁组织中miR-144的表达,以瞬时转染建立人肝癌细胞过表达miR-144模型,采用CCK-8和细胞克隆形成实验检测转染后肝癌细胞的增殖和细胞克隆形成能力,采用流式细胞术、Transwell法检测肝癌细胞的细胞周期和迁移能力,分析miR-144的表达水平对肝癌细胞生物学功能的影响及其与临床病理特征的关系。结果 miR-144在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.05);与未处理及阴性对照的肝癌细胞相比,过表达的miR-144均能有效抑制肝癌细胞的增殖、细胞克隆形成及迁移能力(P均<0.05),并诱导细胞周期阻滞在S期(P<0.05);miR-144高表达组的肝癌患者术后生存时间长于低表达组(P<0.05),miR-144的表达与患者性别、年龄、乙肝病毒感染、肿瘤大小、肿瘤个数、AFP、临床分期等临床病理特征无明显相关(P均>0.05)。结论 miR-144在肝癌组织中低表达且与预后相关,过表达的miR-144能够抑制肝癌细胞的增殖和迁移。     

miR-29a靶向调控CLDN1抑制肝癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨miR-29a在肝癌组织中的表达水平,及其对人肝癌细胞增殖能力的影响。方法:通过RT-PCR测定肝癌组织及非肝癌组织中miR-29a的表达水平;将携带miR-29a的脂质体miR-29a mimic、空载体miR-NC以及miR-29a抑制剂anti-miR-29a转染入肝癌细胞系HepG2和HLE,通过RT-PCR方法检测miR-29a对肝癌细胞系HepG2、HLE增殖能力影响;通过Targetscan软件预测miR-29a靶基因,采用Western blot及荧光素酶实验验证。结果:与非肝癌组织比较,miR-29a在肝癌组织中表达下调,MTT实验提示:miR-29a高表达组肝癌细胞增殖能力较弱,miR-29a低表达组肝癌细胞增殖能力提高。Targetscan软件提示:CLDN1可能为miR-29a靶基因,Western blot及荧光素酶实验提示:与阴性对照组相比,miR-29a高表达组内CLDN1表达下降,相反miR-29a低表达组内CLDN1表达增加。结论:miR-29a在肝癌细胞及组织中表达下调,并且可能通过调控CLDN1影响肝癌细胞增殖能力。     

miR-149-3p 通过靶向FOXP3 抑制宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为

目的：探索miR-149-3p 对宫颈癌HeLa 细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制。方法: HeLa 细胞随机分为5组：未转染(HeLa)组、mimic-scramble 组、miR-149 mimic 组、FOXP3 过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimicscramble为miR-149 mimic 的阴性对照随机序列。荧光素酶实验验证miR-149-3p 与FOXP3 的靶向结合关系。实时定量PCR(qRT-PCR)检测HeLa 细胞中miR-149-3p 表达及FOXP3 的mRNA水平,Western blotting 检测FOXP3 的蛋白水平。CCK-8 检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell 实验检测细胞侵袭,划痕实验分析细胞迁移。结果: 荧光素酶实验显示miR-149-3p可靶向结合FOXP3。与未转染组相比miR-149 mimic 组miR-149-3p 表达升高、FOXP3 mRNA水平下降(P<0.01),而且miR-149mimic 组FOXP3 蛋白水平低于未转染组(P<0.01)、pc-FOXP3 组FOXP3 蛋白水平高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3 组相比mimic+pc-FOXP3 组FOXP3 蛋白水平降低(P<0.01)。miR-149 mimic 组细HeLa 胞增殖倍数低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3 组细胞增殖倍数高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3 组相比mimic+pc-FOXP3 组细胞增殖倍数下降(P<0.01);miR-149 mimic 组HeLa 细胞凋亡率高于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3 组细胞凋亡率低于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3 组相比mimic+pc-FOXP3组细胞凋亡率上升(P<0.01);miR-149 mimic 组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3 组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3 组相比mimic+pc-FOXP3 组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率下降(P<0.01)。结论：miR-149-3p 通过靶向FOXP3 抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和迁移,同时促进细胞凋亡。     

miR-10b对脑胶质瘤恶性生物学行为的调控及其机制

脑胶质瘤（胶质瘤）具有高发病率、高病死率、高复发率及低治愈率的特点,胶质瘤细胞的无限增殖能力和高侵袭迁移 能力是胶质瘤治疗的难点,近年来微小核糖核酸（microRNA,miRNA）的出现为研究胶质瘤的发生及侵袭迁移机制提供了新的思 路。miRNA是一类内生的、长约20~24个核苷酸的非编码小RNA,可通过与其靶基因mRNA的3’UTR区域互补结合,从而在转 录后水平调控基因的表达。多项研究证实,miR-10b在胶质瘤组织和胶质瘤患者血清中高表达,并影响患者预后情况。miR-10b 可能通过影响其靶基因如PTEN、CDKN、P53、HOXD10等的表达,参与胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移等过程。深入研究miR- 10b对胶质瘤的调控作用及其机制,对该病的诊断、治疗和预后评估等均具有重要意义。     

circFBXL5通过靶向miR-515-5p影响膀胱癌T24细胞的恶性生物学行为及其分子机制

目的：探讨circFBXL5通过靶向miR-515-5p影响膀胱癌T24细胞的增殖、迁移、侵袭及其分子机制。方法：收集2020年4月至2020年6月间在苏州市中西医结合医院手术切除的41例膀胱癌组织及其癌旁组织,采用qPCR法检测circFBXL5、miR-515-5p的表达;双荧光素酶报告实验验证circFBXL5与miR-515-5p之间的靶向关系,体外培养人膀胱癌T24细胞,实验分为si-NC组、si-circFBXL5组、anti-miR-NC⁺si-circFBXL5组和si-circFBXL5⁺anti-miR-515-5p组;MTT法、细胞克隆形成实验、FCM、Transwell实验和WB法分别检测转染后T24细胞的增殖、细胞克隆形成、迁移、侵袭和凋亡及BAX、Bcl-2蛋白水平。结果：膀胱癌组织中circFBXL5呈高表达,miR-515-5p呈低表达(均P<0.05);circFBXL5靶向且负向调控miR-515-5p的表达;敲减circFBXL5后T24细胞的增殖抑制率、凋亡率和BAX蛋白水平均显著增高(均P<...     

下调miR-221表达抑制子宫颈癌细胞恶性生物学行为及其作用机制

目的:探讨下调miR-221表达对子宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制.方法:运用脂质体2000转染法将miR-221抑制剂和阴性对照核苷酸片段(NC)转染子宫颈癌细胞HeLa、C33A、SiHa和Caski细胞,用Western blotting和Real-time PCR分别检测ARID1A(miR-221靶蛋白)、cleaved caspase 3、caspase 3、cleaved PARP、PARP、MMP-9、MMP-13、TIMP-3蛋白表达水平和miR-221、MMP-9、MMP-13、TIMP-3 mRNA的表达水平;用MTT法、克隆形成实验、AnnexinV-FITC/PI染色结合流式细胞术分别测定细胞增殖、克隆形成率和细胞凋亡率.结果:与阴性对照组比较,(1) miR-221抑制剂转染的HeLa、CC3A、SiHa和Caski细胞miR-221表达量均显著降低[(0.23±0.01)、(0.31±0.02)、(0.34±0.01)、(0.37±0.02),F=25.44,P＜0.05];(2)转染的细胞随着培养时间的增加细胞存活率逐渐下降,具有时间依赖效应,48 h之后细胞存活率显著低于阴性对照组(F=37.42,P＜0.05);细胞的克隆形成率显著降低(F=43.58,P＜0.05);培养72 h时细胞凋亡率分别为:HeLa(27.92±3.47)％、C33A(20.84±4.31)％、SiHa(18.81±2.18)％、Caski(19.86±3.82)％,均显著高于对照组(F =54.78,P＜0.05);(3)转染细胞下调miR-221表达后促进cleaved caspase 3、cleaved PARP、TIMP-3蛋白表达,抑制MMP-13蛋白表达;降低MMP-13 mRNA表达(=37.50,P＜0.05),增加TIMP-3 mRNA表达(t=46.30,P＜0.05).结论:下调miR-221表达能抑制子宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制与激活caspase信号通路从而诱导细胞凋亡以及调控MMP-13和TIMP-3的表达有关.     

miR-215抑制骨肉瘤细胞生长及其分子机制

目的:研究miR-215对骨肉瘤细胞143B生长的影响及其分子机制。方法:通过转染miR-215 agomir稳定升高143B细胞内miR-215表达水平，CCK-8实验、平板克隆形成实验以及流式细胞术检测143B细胞的增殖状况以及周期分布。利用生物信息学分析miR-215潜在的靶基因，并通过双荧光素酶报告基因实验、qPCR实验、Western blot实验验证miR-215靶基因。结果:在143B细胞内将miR-215表达水平上调数倍。CCK-8实验、平板克隆形成实验表明miR-215能够抑制143B细胞生长，流式细胞术实验表明miR-215能够延缓143B细胞周期进程。生物信息学、qPCR实验和Western blot实验表明转化生长因子β受体1（transforming growth factor β receptor 1，TGFβR1）是miR-215潜在的靶基因。结论:miR-215能够抑制骨肉瘤细胞生长，并且该抑制作用可能通过miR-215靶向抑制TGFβR1实现，为骨肉瘤早期诊断和靶向治疗提供了理论依据。     

MiR-126抑制肝癌细胞增殖的实验研究

目的:研究miR-126对肝癌细胞增殖能力及成瘤能力的影响,探索其影响肝癌细胞增殖的分子基因。方法:在肝癌细胞系中过表达和下调miR-126,通过细胞计数实验、MTT实验和异种移植瘤模型检测肝癌细胞的体外增殖能力和成瘤能力;利用miRNA靶基因预测数据库结合双荧光素酶报告技术获得miR-126的下游靶基因Sirt1,Western blot检测过表达和下调miR-126后,肝癌细胞中靶基因的表达。结果:过表达/干扰miR-126显著抑制/促进了肝癌细胞的增殖能力和成瘤能力（P＜0.05）。双荧光素酶报告系统实验证实:MiR-126过表达/干扰后,下游靶基因Sirt1的3' UTR区活性显著降低/增加（P＜0.05）。MiR-126过表达的肝癌细胞中,Sirt1的表达显著降低,反之,miR-126干扰的肝癌细胞中,Sirt1的表达显著增加。结论:MiR-126能够抑制肝癌细胞的增殖能力和成瘤能力,可能作为抑癌性microRNA分子在肝癌中发挥作用。     

Downregulation of microRNA-100 enhances the ICMT-Rac1 signaling and promotes metastasis of hepatocellular carcinoma cells

Metastasis is responsible for rapid recurrence of hepatocellular carcinoma (HCC) and poor survival of HCC patients. Here we showed that miR-100 downregulation in HCC tissues was significantly associated with venous invasion, advanced TNM stage, tumor nodule without complete capsule, poorer cell differentiation, and shorter recurrence-free survival. Both gain- and loss-of-function studies showed that miR-100 dramatically suppressed the ability of HCC cells to migrate and to invade through Matrigel in vitro. Analyses using mouse orthotopic xenograft model further revealed that xenografts of miR-100-stable-expressing HCC cells displayed a significant reduction in pulmonary metastasis, compared with control group. Subsequent investigations revealed that miR-100 directly inhibited the expression of isoprenylcysteine carboxyl methyltransferase (ICMT) and ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 (Rac1) by binding to their 3′-UTRs, and in turn suppressed lamellipodia formation and matrix metallopeptidase 2 (MMP2) activation. Furthermore, knockdown of ICMT and Rac1 phenocopied the anti-metastasis effect of miR-100, whereas overexpression of the constitutively active Rac1 (Q61L) antagonized the function of miR-100. Taken together, miR-100 represses metastasis of HCC cells by abrogating the ICMT-Rac1 signaling. Downregulation of miR-100 contributes to HCC metastasis and the restoration of miR-100 is a potential strategy for cancer therapy.     

MicroRNA-100 promotes the autophagy of hepatocellular carcinoma cells by inhibiting the expression of mTOR and IGF-1R

We found that restoration of miR-100 expression resulted in accumulation of LC3B-II and decrease of p62 in hepatocellular carcinoma (HCC) cells, whereas antagonism of miR-100 reduced the level of LC3B-II. Moreover, a significant correlation between miR-100 downregulation and p62 upregulation was observed in human HCC tissues, suggesting an autophagy-promoting effect of miR-100. Subsequent investigations disclosed that knockdown of Atg7 but not Beclin-1 attenuated the miR-100-induced LC3B-II elevation. Furthermore, miR-100 overexpression caused massive cell death, which was abrogated by both the Atg7 silencing and chloroquine treatment. Simultaneously, miR-100 expression led to increased fraction of cells with Annexin V-staining and loss of mitochondrial potential, implying that miR-100 may promote the Atg7-dependent autophagy and subsequent apoptotic cell death. Consistently, mouse xenograft models revealed that miR-100 inhibited the in vivo growth of HCC cells. We further showed that miR-100 suppressed the expression of mTOR and IGF-1R by binding to their 3′ untranslated region, and knockdown of mTOR or IGF-1R phenocopied the pro-autophagy effect of miR-100, indicating that miR-100 may promote autophagy by reducing mTOR and IGF-1R level. Collectively, our data uncover a new regulatory mechanism of autophagy and a novel function of miR-100, and provide a potential therapeutic target for HCC.     

过表达CHD5基因对肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响

目的:探讨过表达CHD5基因对人肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响。方法:采用脂质体法将CHD5过表达质粒及对照质粒分别转染SMMC-7721细胞,Western blotting检测SMMC-7721细胞中CHD5蛋白的表达情况,CCK-8法检测SMMC-7721细胞生长增殖能力的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:转染CHD5过表达质粒后,SMMC-7721细胞CHD5蛋白表达水平显著增高（P<0.01）,抑制了细胞增殖、迁移和侵袭（P<0.05）,促进了细胞凋亡（P<0.05）。结论:过表达CHD5基因可抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导其凋亡。     

miR-3612靶向SEMA4C调控肝细胞癌细胞的恶性生物学行为

目的：探讨miR-3612靶向信号素（SEMA）4C对肝细胞癌细胞增殖与侵袭能力的影响。方法:收集2020年5月至2021年9月间在皖南医学院第一附属医院弋矶山医院手术切除的肝细胞肝癌的40对癌组织和相应癌旁组织,常规培养肝细胞癌Hep3B和Huh7细胞,将其分为对照组、miR-3612 mimics-NC组、miR-3612 mimics组、miR-3612 inhibitor-NC组、miR-3612 inhibitor组、si-NC组、si-SEMA4C组、mimics-NC+pcDNA-NC组、miR-3612 mimics+pcDNA-NC组和miR-3612 mimics+pcDNA-SEMA4C组,用转染试剂将相应的核酸和质粒转染各组细胞。qPCR法检测miR-3612和SEMA4C mRNA在肝细胞癌组织和Hep3B和Huh7细胞中的表达,双荧光素酶报告基因实验和免疫共沉淀（RIP）实验验证miR-3612与SEMA4C的结合及调控关系,qPCR法和WB法检测转染后各组Hep3B和Huh7细胞中miR-3612、SEMA4C mRNA和蛋白的表达,CCK-8法、细胞划痕...     

CD133 positive hepatocellular carcinoma cells possess high capacity for tumorigenicity

Recently increasing reported data have suggested that only a small subset of cancer cells possess capability to initiate malignancies including leukemia and solid tumors, which was based on investigation in these cells displaying a distinct surface marker pattern within the primary cancers. CD133 is a putative hematopoietic and neuronal stem-cell marker, which was also considered as a tumorigenic marker in brain and prostate cancer. We hypothesized that CD133 was a marker closely correlated with tumorigenicity, since it was reported that CD133 expressed in human fetal liver and repairing liver tissues, which tightly associated with hepatocarcinogenesis. Our findings showed that a small population of CD133 positive cells indeed exists in human hepatocellular carcinoma (HCC) cell lines and primary HCC tissues. From SMMC-7721 cell line, CD133+ cells isolated by MACS manifested high tumorigenecity and clonogenicity as compared with CD133- HCC cells. The implication that CD133 might be one of the markers for HCC cancer stem-like cells needed further investigation.     

MiR-100在卵巢癌中的表达及调控作用

目的:探讨微小RNA-100（miR-100）与卵巢癌之间的相关性,以及miR-100调控卵巢癌细胞功能的机制。方法:采用实时荧光定量反转录PCR技术（qRT-PCR）对7例卵巢癌组织样本和细胞株A2780、Skov3进行检测,分析组织和细胞中miR-100的表达差异。通过细胞功能实验分析miR-100调控卵巢癌发生发展的机制。结果:卵巢癌患者组织中miR-100的相对表达水平显著低于正常对照组织（P<0.05）,在两种卵巢癌细胞株中miR-100的相对表达水平也显著低于对照组人永生化卵巢上皮细胞（P<0.05）。细胞功能实验显示,过表达miR-100能显著抑制卵巢癌细胞株的细胞增殖和迁移,促进细胞凋亡。结论:MiR-100在卵巢癌中表达降低,揭示其可能在卵巢癌的发生发展过程中发挥着抑癌基因的功能。     

综合性分析miR-224在肝癌中的表达及其生物学作用

目的:分析miR-224在肝癌患者肿瘤组织和血浆中的表达水平及其与临床病理特征、诊断和预后之间的相关性,并进一步通过生物信息学方法和体外实验分析其在肝癌发生发展中的作用机制.方法:利用基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中大样本数据分析miR-224在肝癌患者肿瘤组织及正常组织中的表...     

miR-4465 通过靶向下调HMGA1的表达抑制肝细胞癌Hep3B细胞的恶性生物学行为

目的：探讨miR-4465 靶向高迁移率族蛋白A1（HMGA1）对肝细胞癌 Hep3B 细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法：收集2020 年5 月至2021 年9 月在皖南医学院第一附属医院确诊为肝细胞癌患者的16 对癌组织和癌旁组织样本,采用qPCR 分析miR-4465 在肝细胞癌组织和Hep3B、Huh7细胞中的表达情况,双荧光素酶报告基因实验验证miR-4465 与HMGA1的调控关系。按转染物的不同将 Hep3B 细胞分为 mimics-NC 组 、miR-4465-mimics 组、inhibitor-NC 组、miR-4465 inhibitor组、si-NC 组、si-HMGA1 组;另外分组转染mimics-NC+pcDNA-NC、miR-4465 mimics+pcDNA-NC 和miR-4465 mimics+pcDNA-HMGA1进行回复实验。采用qPCR和WB法检测各组细胞中HMGA1 mRNA和蛋白水平的变化,CCK-8法检测各组细胞增殖能力的变化,划痕实验检测各组细胞迁移能力的变化,Transwell 实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果：miR-4465 在肝细胞癌组织和细胞中的表达水平显著低于癌旁组织和正常肝细胞（P<0.05或P<0.001）。转染48 h后,过表达miR-4465 的Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著下降（P<0.05、P<0.01或P<0.001）;敲低miR-4465 后细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显升高（P<0.05、 P<0.01或P<0.001）。双荧光素酶报告实验验证了HMGA1-3''UTR 与miR-4465 的靶向结合关系,miR-4465 可以靶向下调HMGA1 mRNA 和蛋白质的表达（均P<0.01）。过表达HMGA1 能部分逆转过表达 miR-4465 对细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及HMGA1 表达的抑制作用（均P<0.05）。结论：miR-4465 通过靶向下调HMGA1 在肝细胞癌Hep3B 细胞中的表达,从而抑制Hep3B细胞的恶性生物学行为。