塞来昔布对胃癌BGC823细胞的放射增敏作用

目的：探讨环氧化酶2（COX-2）抑制剂塞来昔布对人胃癌BGC823细胞株的放射增敏作用及其机制。方法：MTT实验测定塞来昔布对胃癌BGC823细胞株的抑制率,计算半数抑制浓度（IC50）。克隆形成实验检测塞来昔布联合不同剂量X线照射后细胞的存活率,计算放射敏感性相关参数,评价增敏效果。流式细胞仪（FCM）分析细胞周期分布情况。结果：MTT实验显示塞来昔布对BGC823细胞作用24h、48h、72h的IC50分别是162.6μmol/L、95.4μmol/L、62.1μmol/L;克隆形成实验测得联合组的D0、Dq及SF2均明显低于单纯照射组（1.705VS 2.185,1.032VS 2.327,0.495 VS 0.745）,SER为1.3。流式细胞仪检测联合组G0/G1期细胞增多,S期细胞减少。结论：塞来昔布能增强胃癌BGC823细胞的放射敏感性,其机制可能与减少肿瘤细胞亚致死性损伤修复和细胞周期再分布有关。     

胃癌细胞SGC7901凋亡的PI3K/Akt通路介导作用及雷帕霉素的作用机制分析

目的：分析雷帕霉素对胃癌细胞中PI3K/Akt蛋白表达的影响作用,以为临床治疗提供参考。方法将生长状态良好的胃癌细胞SGC7901随机分为4组：对照组,雷帕霉素低剂量组、中剂量、高剂量组（n=8）。采用DAPI染色法分析各组细胞的凋亡情况;采用免疫印迹法和Real-time PCR检测PI3K/AKT信号通路中相关蛋白PI3K、AKT、mTOR蛋白及mRNA的表达。结果雷帕霉素低、中、高剂量组均可抑制细胞的增殖,差异具有统计学意义（P﹤0.05）;雷帕霉素下调了胃癌细胞中PI3K、AKT、mTOR蛋白及mRNA的表达,且与对照组比较,差异均有统计学意义（P﹤0.05）。结论雷帕霉素主要通过抑制PI3K、AKT及mTOR的过表达发挥肿瘤抑制作用。     

塞来昔布通过PI3K/Akt通路调控胃癌细胞凋亡

探讨塞来昔布通过PI3K/Akt信号通路调控胃癌细胞凋亡的机制。方法：塞来昔布体外处理人胃癌细胞株SGC-7901后,透射电镜观察细胞超微结构的改变,实时荧光定量RT-PCR法和Western Blot法检测蛋白激酶B（Akt）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-8（Caspase-8）、Caspase-9的表达。结果：塞来昔布处理细胞后,透射电镜下观察到典型凋亡小体和自噬体;实验组Akt mRNA表达水平的改变无统计学意义,P-Akt蛋白的表达下调并呈时间和剂量依赖性,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;Caspase-8 mRNA表达水平上调,呈时间和剂量依赖性,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;Caspase-9 mRNA表达水平较对照组均上调,但125 μmol/L塞来昔布作用24 h组mRNA表达量与对照组相比差异无统计学意义,48 h和72 h组与对照相比差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。塞来昔布作用72 h后,75 μmol/L组Caspase-9 mRNA表达量与对照组相比差异无统计学意义,100 μmol/L和125 μmol/L组与对照相比差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;procaspase-8和procaspase-9蛋白被活化,表达量下调,呈时间和剂量依赖性,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：1）塞来昔布可能通过PI3K/Akt通路诱导细胞凋亡和细胞自噬两种程序性死亡方式导致细胞死亡。2）塞来昔布诱导胃癌细胞凋亡的分子机制为线粒体途径和死亡受体途径。     

塞来昔布对乳腺癌细胞株的放射增敏作用

背景与目的:塞来昔布(celecoxib)能有效增强放射线对肿瘤的作用,但其作用机制尚不清楚.本研究探讨塞来昔布对人乳腺癌MDA-MB-231细胞放射增敏的作用机制.方法:取对数生长期MDA-MB-231细胞株2×106个,分为对照组、药物组、照射组及实验组(照射线联合塞来昔布),流式细胞分析法(flowcytometry,FCM)检测各组细胞凋亡率;克隆形成实验检测放射增敏作用;Western blot法检测Akt、pAkt蛋白表达.结果:实验组凋亡率[(31.20±1.27)%]显著高于照射组[(17.99±1.01)%](t=14.01,P<0.05);与照射组相比较,实验组反映放射敏感性的指标准域剂量(Dq)、平均致死剂量(D0)、2 Gy照射的存活分数(SF2)值均显著降低(0.437 vs 1.175,1.874 vs 2.394,0.52 vs 0.79),放射增敏比(SERD0)为1.277;各组Akt蛋白表达无明显差异,但塞来昔布能抑制pAkt的表达,而放射线能上调其表达,两者联合使用对pAkt表达有明显抑制作用(P<0.05).结论:塞来昔布对人乳腺癌MDA-MB-231细胞有放射增敏作用,其可能的机制是阻断PI3K/Akt信号通路的活化,从而提高乳腺癌放射敏感性.     

PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素敏感性的影响

目的 研究PI3K/Akt/mdm2信号通路活化对胃癌细胞阿霉素(DOX)敏感性的影响.方法 分别用DOX和PI3K特异性抑制剂wortmannin处理胃癌细胞株SGC7901,采用流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡,免疫沉淀法检测PI3K活性,Western blot法检测PI3K-p85、phospho-Akt(S473)、phospho-mdm2(S166)、Akt和p53的表达.结果 DOX能诱导胃癌细胞SGC7901凋亡,且凋亡率与作用时间密切相关,联合应用wortmannin后,可促进胃癌细胞凋亡.DOX作用SGC7901细胞3、6、12和24 h后, PI3K活性逐渐增强,分别为(8.4±1.7)%、(12.7±2.1)%、(17.4±3.2)%和(16.8±2.4)%;同时,还促进Akt、mdm2磷酸化和p53表达.wortmannin可以抑制mdm2磷酸化,进一步增强p53的表达.结论 DOX可以诱导PI3K/Akt通路异常激活,并通过促进mdm2磷酸化降低胃癌细胞化疗敏感性.     

雷帕霉素单独及联合化疗药物应用对胃癌细胞生长的影响

目的:研究mTOR抑制剂雷帕霉素对SGC-7901胃癌细胞增殖的影响及其可能的机制,并探讨其与传统化疗药物的联合作用。方法:体外培养胃癌SGC-7901细胞,取对数生长期的细胞进行试验,用不同浓度的mTOR抑制剂雷帕霉素以及长春新碱分别作用于胃癌SGC-7901细胞24、48、72小时,用MTT法检测雷帕霉素单独以及联合化疗药物对其生长的影响。用流式细胞术检测mTOR抑制剂雷帕霉素、长春新碱单独以及联合应用对胃癌SGC-7901细胞周期的影响。结果:MTT法结果显示:雷帕霉素单独能够显著抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,其作用随着药物浓度以及作用时间的增加而增加,呈现时间-剂量效应关系;与化疗药物长春新碱联合应用其抑制效应明显增强。流式细胞术检测结果显示:雷帕霉素、长春新碱单独作用胃癌细胞将细胞周期主要阻滞在G0/G1期,而联合给药时G0/G1期比例增加。结论:mTOR抑制剂雷帕霉素能够显著抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,其机制可能与通过阻滞细胞周期在G0/G1期相关;并且雷帕霉素可提高传统化疗药物长春新碱对胃癌细胞的敏感性。     

PHGDH对胃癌细胞BGC823增殖和化疗药物敏感性的影响

目的 磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)催化糖酵解中间产物3-磷酸甘油酸生成3-磷酸羟基丙酮酸,将糖酵解中间产物引入丝氨酸生物合成途径,它在包括乳腺癌和结肠癌等多种肿瘤中表达升高.本研究旨在探讨PHGDH的表达对胃癌细胞(BGC823)增殖以及对化疗药物顺铂敏感性的影响.方法 免疫组织化学染色检测PHGDH蛋白在75例配对的胃癌和癌旁正常组织中的表达情况;siRNA转染胃癌细胞BGC823干扰PHGDH表达,蛋白质印迹法验证siRNA对PHGDH蛋白表达的干扰效率;CCK-8法和平板克隆实验检测PHGDH基因沉默对胃癌细胞BGC823增殖和克隆形成能力的影响;流式细胞术检测PHGDH基因沉默对BGC823细胞周期的影响;流式细胞术检测凋亡评估PHGDH基因沉默对胃癌细胞BGC823对化疗药物顺铂反应性的影响.结果 PHGDH在胃癌组织中的阳性表达率为72.0%(54/75),显著高于癌旁正常组织的41.3%(31/75),差异有统计学意义,χ2=14.36,P<0.01;在转染siRNA后,实验组BGC823-siPHGDH细胞中的PHGDH/β-actin蛋白表达相对灰度比值为0.09±0.02,显著低于阴性对照组的0.70±0.05和空白对照组的0.74±0.06,差异有统计学意义,F=62.35,P<0.01;CCK-8实验结果显示,细胞铺板后5 d,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞各组在第5天时BGC823细胞增长倍数分别为11.13±0.35、11.30±0.72和5.58±0.66,差异有统计学意义,F=48.61,P<0.01;平板克隆形成实验结果显示,细胞培养14 d后,BGC823-Mock、BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞形成的克隆数分别为182.67±11.85、173.33±7.26和28.33±10.93,差异有统计学意义,F=71.85,P<0.01;细胞周期检测结果显示,阴性对照组BGC823-siNC的G0/G1期细胞百分比为(70.3±2.4)%,实验组BGC823-siPHGDH的G0/G1期细胞百分比为(87.5±1.3)%,说明实验组BGC823-siPHGDH的G0/G1期细胞增多,PHGDH基因沉默引起胃癌细胞发生G0/G1细胞周期阻滞;细胞凋亡检测结果显示,经1 μg/mL的顺铂处理BGC823-siNC和BGC823-siPHGDH细胞24 h后,BGC823-siNC凋亡率为(28.8±2.5)%,BGC823-siPHGDH组为(45.0±5.1)%,提示PHGDH基因沉默能够增加胃癌细胞BGC823对顺铂的敏感性.结论 PHGDH基因沉默抑制胃癌细胞BGC823的增殖,引起细胞周期阻滞,增加对化疗药物顺铂的敏感性,这不仅为胃癌临床治疗提供一个新的靶点,而且为肿瘤代谢在肿瘤发生和发展中的作用提供了新的实验证据.     

Akt/c-Myc通路对胃癌细胞化疗效果的影响

背景与目的：Akt信号通路是调节原癌基因c-myc蛋白表达水平的主要机制之一,Akt信号通路激活后可降低胃癌细胞的化疗敏感性。然而,目前对Akt/c-Myc通路在胃癌化疗过程中的作用尚不明确。因此,本课题通过观察Akt/c-Myc信号通路对胃癌细胞化疗效果的影响并探讨其作用机制。方法：依托泊苷作用于胃癌SGC7901和BGC823细胞,MTT法检测细胞的生存率;分别采用流式细胞仪和Hoechst33258荧光染色法检测细胞周期分布和凋亡;Akt活性的检测采用非放射性蛋白激酶活性分析法;Western印迹法检测c-Myc和p-AktSer473蛋白的表达水平;RT-PCR法检测c-MycmRNA的表达;同时观察PI3-K/Akt通路抑制剂Wortmannin对依托泊苷诱导的上述变化的影响。结果：依托泊苷呈时间-剂量依赖性抑制SGC7901和BGC823细胞的生长,明显诱导细胞的凋亡;同时上调SGC7901和BGC823细胞中Akt活性及p-AktSer473蛋白表达水平,并增强c-Myc蛋白和mRNA的表达。Wortmannin可明显增强依托泊苷的细胞生长抑制作用并提高细胞的凋亡水平;抑制依托泊苷诱导的c-Myc蛋白的表达,但对c-MycmRNA表达没有明显的影响。结论：依托泊苷激活SGC7901和BGC823细胞中的Akt信号通路,并上调c-Myc蛋白的表达水平而影响胃癌的化疗效果。Akt信号通路可能主要是通过转录后调节来调控c-Myc蛋白的水平。     

PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂对白血病细胞株增殖及其PHLPP表达的影响

目的:观察PI3K/Akt/mTOR通路抑制剂wortmannin或rapamycin对白血病细胞株增殖及其PHLPP(PH domainleucine-rich repeat protein phosphatase)蛋白表达的影响。方法:以不同浓度的wortmannin或rapamycin分别作用于人类髓细胞白血病细胞系K562、HL-60,采用WST-1法检测细胞的增殖活性,AnnexinⅤ-FITC双染流式细胞术检测细胞凋亡,Westernblotting法检测细胞中p-Akt、Akt、PHLPP蛋白的表达。结果:Wortmannin以时间以及剂量依赖方式抑制K562、HL-60细胞的增殖(P<0.05),48 h的IC50值分别为(187.6±48.4)、(185.5±48.1)nmol/L。100 nmol/L wortmannin作用于K562细胞、50nmol/L wortmannin作用于HL-60细胞12和24 h后,细胞凋亡率均较对照细胞显著升高[(12.4±0.7)%、(17.6±2.3)%vs(5.0±0.6)%,P<0.05;(11.0±0.2)%、(17.9±1.6)%vs(6.8±0.4)%,P<0.05]。Wortmannin分别作用于K562、HL-60细胞12、24、36 h后,p-Akt、PHLPP的蛋白表达水平明显降低;rapamycin同样可使K562、HL-60细胞中PHLPP蛋白的表达水平降低。结论:PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制剂抑制白血病细胞株增殖的同时降低其PHLPP蛋白的表达。     

PI3K/Akt途径在朊蛋白介导胃癌耐药中的作用研究

目的:探讨PI3K/Akt途径在朊蛋白(PrPc)介导胃癌耐药中的作用.方法:脂质体基因转染法建立高表达PrPc的胃癌细胞亚系.Western印迹检测转染细胞中Akt蛋白的表达.噻唑蓝(MTT) 比色法测定单独或联用PI3K抑制剂LY294002时转染细胞对化疗药物的敏感性.流式细胞仪检测单独或联用LY294002时转染细胞内阿霉素蓄积和潴留.结果:将PrPc正义载体pcDNA-PrP转入SGC7901,成功建立PrPc高表达胃癌细胞亚系并命名为PS;空载体转染细胞命名为BS.Western-Blot显示磷酸化Akt在PS中的表达较BS及SGC7901增高,而三者的总Akt则无差别.未经LY294002处理时,在阿霉素或长春新碱的作用下,PS的存活率分别为91.4%±3.4%和89.4%±3.8%,较BS(79.2%±4.3%和75.9%±2.1%)明显增高(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量分别为4.4±0.3和4.2±0.4,明显低于BS(8.2±0.5和8.0±0.3)(均 );当联合LY294002处理后,PS在两种药物作用下的存活率均随着LY294002浓度的增加逐渐降低,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ),PS细胞内阿霉素蓄积量和潴留量逐渐增高,并均在LY294002为30μmol/L时接近BS(均 ).结论:PrPc介导的胃癌耐药与PI3K/ Akt途径活性密切相关,抑制PI3K/ Akt途径活性可逆转PrPc介导的胃癌耐药.     

Pharmacogénétique des fluoropyrimidines. La méthylènetétrahydrofolate réductase

Résumé: Lefficacité optimale des fluoropyrimidines nécessite des concentrations élevées en 5-10 méthylènetétrahydrofolate (CH₂FH₄), contrôlées par la méthylènetétrahydrofolate réductase (MTHFR) qui convertit irréversiblement le CH₂FH₄ en 5-méthyltétrahydrofolate (CH₃FH₄). Les polymorphismes 677CT et 1298AC du gène MTHFR sont associés à une baisse dactivité de lenzyme. Les tumeurs «MTHFR mutées» devraient donc être plus sensibles aux fluoropyrimidines que les tumeurs «MTHFR sauvages». Les études expérimentales et cliniques publiées à ce jour tendent à montrer une plus grande sensibilité au 5-FU (associé ou non à lacide folinique) dans les tumeurs MTHFR mutées par rapport aux tumeurs sauvages. Ces résultats montrent la nécessité de poursuivre ces recherches afin de confirmer limpact de ces polymorphismes sur lefficacité des fluoropyrimidines.     

Oncogénétique et psycho-oncologie, une collaboration recommandée...

Résumé: La possibilité depuis 1994, de connaître la probabilité individuelle de développer certains cancers a permis de proposer de nouvelles modalités de prévention, de traitements et contribué au développement actuel de loncogénétique. Une meilleure connaissance des répercussions psychologiques tant pour les patients que pour les apparentés est désormais possible et limplication des psycho-oncologues dans ce cadre de la réalisation des tests prédictifs, recommandée. La mission de «messager» qui incombe au «cas-index» doit faire lobjet dune attention particulière. La complexité de linformation et la dimension paradoxale que peut avoir parfois la communication à propos des choix, rend difficile lévaluation de la qualité du consentement. La situation particulièrement délicate dune aide à la décision à légard de la chirurgie prophylactique, exige une collaboration étroite des généticiens et des psycho-oncologues.Les soins de support en oncologie     

The role of papillomaviruses in human cancers

This review comprehensively evaluates the influence of gene-gene, gene-environment and multiple interactions on the risk of colorectal cancer (CRC). Methods of studying these interactions and their limitations have been discussed herein. There is a need to develop biomarkers of exposure and of risk that are sensitive, specific, present in the pathway of the disease, and that have been clinically tested for routine use. The influence of inherited variation (polymorphism) in several genes has been discussed in this review; however, due to study limitations and confounders, it is difficult to conclude which ones are associated with the highest risk (either individually or in combination with environmental factors) to CRC. The majority of the sporadic cancer is believed to be due to modification of mutation risk by other genetic and/or environmental factors. Micronutrient deficiency may explain the association between low consumption of fruit/vegetables and CRC in human studies. Mitochondrial modulation by dietary factors influences the balance between cell renewal and death critical in colon mucosal homeostasis. Both genetic and epigenetic interactions are intricately dependent on each other, and collectively influence the process of colorectal tumorigenesis. The genetic and environmental interactions present a good prospect and a challenge for prevention strategies for CRC because they support the view that this highly prevalent cancer is preventable.     

Antifungal combination therapy in localized candidosis

A mouse model of localized candidosis in air-filled subcutaneous cysts imitating thrush has been developed. We have now tested various antifungal combinations in this animal model. Flucytosine (5-FC) + amphotericin B (Amph B) showed the highest efficacy, a clear additive or even synergistic effect was seen. The combination of 5-FC + imidazole or triazole derivative was less efficacious, an additive effect was rare. The combination of 5-FC + Amph B was also tested against Candida albicans strains showing various degrees of 5-FC-resistance. A significant reduction in 5-FC-resistant mutants was seen after the treatment with the combination.     

Les génériques en cancérologie: à molécule identique, médicaments identiques? Les biosimilaires, des super-génériques?

Résumé: Les biosimilaires vont bientôt voir leur apparition en Europe. Comment un laboratoire peut-il aborder le développement de son dossier dAMM? Quelles sont les bases légales et les recommandations officielles? Comment la similarité et/ou le caractère générique peuvent-ils être démontrés? Les règles sont-elles identiques à celles des produits chimiques conventionnels pour lesquels, notamment en cancérologie, il existe des médicaments génériques? Comment faire pour que la sécurité et lefficacité des médicaments biosimilaires soient assurées pour les patients?     

PSA-Test zur Früherkennung des Prostatakarzinoms

Zusammenfassung Prostatakrebs ist hierzulande seit einigen Jahren die häufigste Krebserkrankung bei Männern. Da über die Ätiologie wenig gesichertes Wissen vorliegt und daher kaum Möglichkeiten zur primären Prävention bestehen, konzentrieren sich die Anstrengungen auf die Suche nach wirksamen Verfahren zur sekundären Prävention. Hierbei gilt die Verwendung des PSA-Tests zur Früherkennung des Prostatakarzinoms als derzeit aussichtsreichstes Verfahren. Bevor ein neues Früherkennungsverfahren zur breiten Anwendung empfohlen oder in das gesetzliche Früherkennungsprogramm aufgenommen wird, muss jedoch seine Wirksamkeit in hierfür geeigneten wissenschaftlichen Untersuchungen nachgewiesen werden. Bis jetzt gibt es bereits eine ganze Reihe epidemiologischer Studien zur Effektivität des PSA-Screenings, doch konnte ein Wirksamkeitsnachweis bisher nicht erbracht werden. Zwei große randomisierte Studien in Europa und den USA lassen für die Jahre 2005–08 erste Ergebnisse erwarten. Da epidemiologische Arbeiten belegen, dass durch PSA-Screening eine nicht unerhebliche Überdiagnostik und Übertherapie eintritt, d. h. Schaden angerichtet werden kann, ist das Ergebnis der genannten randomisierten Studien vor weitergehenden Entscheidungen unbedingt abzuwarten. Bis dahin sollte von der Anwendung des PSA-Tests zur Prostatakrebsfrüherkennung unmissverständlich abgeraten werden. Da für den Test bereits ausgiebig Werbung betrieben wurde, kommt einer gründlichen ärztlichen Aufklärung von an dem Test interessierten Personen eine Schlüsselrolle zu.     

Cancer immunotherapy

Unprecedented progress has seen made in the last decade in the field of cancer immunotherapy. The recent approval of nivolumab （Opdivo）, the first anti-programmed cell death-1 （PD-1） antibody, for metastatic melanoma in Japan, marked a milestone in the rapidly advancing field of cancer immunotherapy. Nivolumab together with ipilimumab （Yervoy）, the anti-cytotoxic T-lymphocyte-associated antigen-4 （CTLA-4） antibody, are the first 2 drugs in the class of ＂immune checkpoint inhibitors＂ that have delivered impressive responses in patients with metastatic melanoma and renal cell cancer （RCC） as well as a variety of solid tumors.     

异基因造血干细胞移植后患者肝损害病因与临床特征分析

 【摘要】　目的　总结异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后患者肝损害的发生率、发生原因、诊断方法与治疗选择。方法　回顾性分析郑州大学附属肿瘤医院2006～2010年接受allo-HSCT的83例良、恶性血液病患者中Ⅱ～Ⅳ级肝损害的发生率、各种病因的构成比、临床表现以及诊断方法,分析移植后不同时期肝损害病因的差异、治疗方法、疗效。结果　83例allo-HSCT患者中,发生Ⅱ～Ⅳ级肝损害45例（54.2 %）。按肝损害致病病因分类,预处理化疗所致7例,环孢素所致9例,肝静脉闭塞病（HVOD）所致2例,肝脏移植物抗宿主病（GVHD）所致24例,乙型肝炎病毒再激活所致2例,多器官衰竭所致1例。发生于移植后1个月内者20例（44.4 %）,以药物性肝损害为主,1个月～100 d者13例（28.9 %）,101 d～1年者12例（26.7 %）,均以肝脏GVHD为主。经减停肝损害药物、抗排异、保肝等治疗后,27例治愈,10例好转,2例未愈,6例死于原发病复发或移植相关并发症。结论　肝损害是allo-HSCT后常见的并发症,药物及肝脏GVHD是其最主要的致病原因,肝损害与其发生时间的相关性可作为肝损害病因学诊断的参考依据。根据肝损害的病因选择针对性的治疗方法,可取得较好的疗效。     

Pharmacokinetics and dosage of fluconazole in continuous hemofiltration (CAVH, CVVH) and hemodialysis (CAVHD, CVVHD)

Continuous haemofiltration (CAVH, CVVH) and haemodialysis (CAVHD, CVVHD) are increasingly used in patients with acute renal failure (ARF). The elimination rates of fluconazole vary considerably among the different procedures. In CVVHD, the elimination rate is, depending on the combined dialysate/ultrafiltrate flow rate, the most marked compared to CVVH and intermittent dialysis with a fluconazole clearance exceeding the values of healthy persons in CVVHD 2 L/h. To achieve therapeutic plasma levels during continuous renal replacement therapy, the same loading dose as in patients without renal failure should be applied, followed by the adjusted maintenance dose for anuric patients multiplied by a factor taking the extracorporeal elimination of the absorbed dose into account (CAVH, CVVH: x 2.2, ultrafiltrate flow 0.5 L/h; CAVHD, CVVHD: x 3.8, combined dialysate/ultrafiltrate flow 1.5 L/h). Despite the broad therapeutic margin of fluconazole, drug monitoring is recommended with respect to the very limited number of investigations with relatively low dosages up to 200 mg/day and--which is of paramount importance--to achieve therapeutic drug levels in vital indications.