KRAS 基因突变与结直肠癌转移模式相关性的研究简

目的：研究结直肠癌患者KRAS基因突变与根治后转移的相关性。方法：检测132例结直肠癌根治术患者石蜡组织中的KRAS基因,回顾性分析患者根治术后3年内转移、复发情况,采用单因素及多因素分析KRAS突变与转移的相关性。结果：各转移组KRAS基因突变率分别为：肺（63．2％）、脑（66．7％）、肝（30．4％）及无转移组（34．7％）。单因素分析提示肺、脑转移组KRAS基因突变率显著高于肝转移组及无转移组（P〈0．05）。纳入年龄和性别校正后采用Logistic回归分析提示KRAS突变显著增加肺转移及脑转移风险（P〈0．05）,而肝转移风险无显著升高（P〉0．05）。结论：结直肠癌转移模式与KRAS突变有关,检测KRAS突变状态有助于更加有效地制定复发监视策略。     

KRAS、BRAF基因突变在大肠锯齿状病变中的临床应用

目的研究KRAS、BRAF基因突变在大肠锯齿状病变中的临床应用。方法选取100例大肠锯齿状病例经切除术后的石蜡标本进行研究。应用直接测序技术对KRAS、BRAF基因的突变进行检测分析。结果大肠锯齿状病变中KRAS基因突变率为40.00%,BRAF基因突变率为6.67%。所有大肠锯齿状病变患者中有40例检出KRAS基因突变,突变率为40.00%,其中KRAS基因12、13密码子突变率分别为30.00%以及10.00%。KRAS基因突变率与患者性别、年龄、病变部位、分化程度以及淋巴结转移等临床病理特征均无关(P>0.05)。BRAF基因突变在>65岁患者以及大肠近端情况较多见(P<0.05)。结论随着KRAS、BRAF基因突变的研究不断深入,对指导临床进行随访及药物治疗预后的判定具有重要的临床意义。     

结直肠癌Ras、BRAF和PIK3CA基因突变分析及与临床病理特征的关系

目的 分析结直肠癌患者中Ras（K-Ras／N-Ras）、BRAF和PIK3CA基因突变情况及其与临床病理特征的关系。方法 回顾性分析2013年12月至2014年10月于北京大学肿瘤医院消化肿瘤内科接受诊治的200例结直肠癌患者的肿瘤组织标本,采用PCR扩增-直接测序法检测Ras,包括K-Ras（第2、3、4外显子）、N-Ras（第2、3、4外显子）、BRAF（第15外显子）及PIK3CA（第9、20外显子）基因的突变状态,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果 200例患者中存在Ras基因突变92例（46.0％）,其中K-Ras基因突变87例（43.5％）,主要发生在外显子2,N-Ras基因突变5例（2.5％）;其中1例患者存在K-Ras、N-Ras基因同时突变。存在BRAF基因突变15例（7.5％）,突变类型均为V600E,且与K-Ras突变存在排他性。存在PIK3CA基因突变9例（4.5％）,可与Ras或BRAF基因突变共存。Ras（K-Ras／N-Ras）基因在年龄≥65岁患者中的突变率明显高于＜65岁者（P＜0.05）,其表达与性别、原发部位、组织学类型、分化程度、TNM分期、区域淋巴结转移、远处转移、术后复发转移均无关（P均＞0.05）。BRAF、PIK3CA基因在原发部位为右半结肠患者中的突变率明显升高（P＜0.05）,但与年龄、性别、组织学类型、分化程度、TNM分期、区域淋巴结转移、远处转移、术后复发转移均无关（P＞0.05）。结论 N-Ras、PIK3CA基因在中国结直肠癌患者中的突变率较低。K-Ras、N-Ras基因突变与年龄相关,BRAF、PIK3CA基因与肿瘤原发部位相关;对结直肠癌患者进行Ras（K-Ras／N-Ras）、BRAF及PIK3CA基因的联合检测将会为提高临床靶向治疗的疗效提供更加可靠的依据。     

结直肠癌患者KRAS和BRAF基因突变检测及其临床意义

目的探讨结直肠癌患者组织中KRAS和BRAF基因突变情况,分析突变与临床病理特征的关系。方法应用荧光PCR-优化寡核苷酸探针法检测304例结直肠癌石蜡包埋标本中KRAS基因2号外显子的12和13密码子、BRAF基因的15号外显子的突变情况,分析KRAS和BRAF基因突变与临床病理特征的关系。结果 KRAS和BRAF基因在结直肠癌的突变率分别为38.8%(118/304)和4.3%(13/304)。KRAS基因突变阳性标本中12密码子的突变率为78.0%,其中p.G12D发生率最高,占总突变的45.3%;13密码子的突变率为22.0%。高年龄组(≥60岁)患者的KRAS基因突变率为47.2%(58/123),高于低年龄组(<60岁)的33.1%(60/181),差异有统计学意义(P<0.05)。转移性结直肠癌患者19例,其KRAS基因突变率为36.8%(7/19),与285例原发性结直肠癌患者的突变率(38.9%,111/285)差异无统计学意义(P>0.05)。BRAF基因在结肠、低分化、黏液腺癌患者中的突变率明显高于直肠、中或高分化和管状腺癌的患者。结论结直肠癌患者中KRAS基因突变的发生率较高,与年龄相关,而与性别、部位、病理类型和分化程度不相关。BRAF基因突变与肿瘤部位、病理类型和分化程度有关。原发性与转移性结直肠癌患者KRAS基因突变率无明显差异。     

朗格汉斯细胞组织细胞增生症中 BRAF V600E 和 MAP2K1基因突变的分析及其临床意义

目的：探讨我国朗格汉斯细胞组织细胞增生症（Langerhans cell histiocytosis,LCH）中 BRAF V600E 和MAP2K1基因突变发生状况及其临床意义。方法：随机选取35例 LCH 组织标本,采用桑格测序法检测其中BRAF V600E 和 MAP2K1基因突变状况,免疫组化法检测 BRAF V600E 蛋白的表达。分析 BRAF V600E、MAP2K1基因突变与 LCH 临床基本资料（年龄、性别、单／多系统）的关系。结果：在35例 LCH 患者中,男女比例为1．7∶1,82．9％侵及骨组织,97．1％是单系统 LCH（single system LCH,SS －LCH）,2．9％是多系统 LCH （multi －system LCH,MS －LCH）。桑格测序法检测 BRAF V600E 基因突变率为17．1％,MAP2K1基因突变率为14．3％,MAP2K1与 BRAF V600E 基因突变有互异性;免疫组化法检测 BRAF V600E 阳性表达率为28．6％,涵盖了桑格测序法测得的突变病例。BRAF V600E 和 MAP2 K1基因突变更多出现在未成年组（35．7％和28．6％）,其中 BRAF V600E 突变在未成年人组与成人组间有显著性差异（P ＝0．028）;BRAF V600E 和MAP2K1基因突变对生存的影响无统计学差异（P ＞0．05）。结论：我国 LCH 患者大部分都是 SS －LCH,主要侵及的部位是骨组织,且预后良好,5年生存率为97．1％。桑格法所测的 BRAF V600E 和 MAP2K1基因突变率均低于西方报道,两者存在互异性,分别为17．1％和14．3％。所有 MAP2K1基因突变都是点突变,没有框内缺失突变,发现一个新的突变位点：c．112 G ＞A p．E38K;BRAF V600E 和 MAP2K1基因突变主要发生于未成年组中,提示各年龄层中 LCH 的发病机理可能不同,可能 RAS ／RAF ／MEK／ERK 通路在未成年人 LCH 中发挥更重要的作用;另外这两种突变对 LCH 的生存无影响。     

结直肠癌组织中KRAS和BRAF基因突变与临床病理特征及预后的关系

目的:探讨结直肠癌组织中KRAS和BRAF基因突变与临床病理和预后的关系。方法:采用扩增阻滞突变系统（ARMS）方法对134例结直肠癌组织进行回顾性分析。结果:134例CRC组织中KRAS基因突变率49.3%（66/134）,第2外显子突变率42.5%（57/134）,其中12及13密码子突变率分别为35.1%（47/134）和7.5%（10/134）,第3外显子61密码子突变率1.5%（2/134）,第4外显子117/146密码子突变率5.2%（7/134）,BRAF V600E突变率4.5%（6/134）。左半结肠KRAS基因突变率54.5%（54/99）高于右半结肠34.3%（12/35）,差异有统计学意义（P＜0.05）,右半结肠BRAF基因突变率14.3%（5/35）高于左半结肠1.0%（1/99）,差异有统计学意义（P＜0.05）,而KRAS和BRAF基因突变与性别、年龄、民族、肿块大小、分化程度、淋巴结转移及病理分期等临床病理特征,差异均无统计学意义（P＞0.05）。KRAS基因突变型CRC患者的中位生存时间48个月（39.9%）,与野生型47个月（46.2%）相比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。BRAF基因突变型CRC患者的中位生存时间21个月（26.7%）,与野生型48个月（44.7%）相比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。多因素COX回归风险模型结果显示,BRAF基因突变型是CRC患者预后不良的独立危险因素（B=1.664,OR=5.278,95%CI:1.505~18.516, P＜0.05）,而性别、年龄、民族、肿块大小、分化程度、肿瘤部位、淋巴结转移及病理分期均不是CRC患者生存时间的独立危险因素（P＞0.05）。结论:CRC组织中KRAS基因突变率高,BRAF基因突变率低。KRAS和BRAF基因突变型与肿瘤部位有关。BRAF基因突变型是CRC预后不良的独立危险因素。     

荧光检测外周血AFP mRNA的表达与肝癌的相关性研究

目的：研究定量检测原发性肝癌患者外周血单个核细胞（PBMC）甲胎蛋白信使核糖核酸（AFP mRNA)表达的意义。方法：应用荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）定量检测51例原发性肝癌，10例转移性肝癌，18例非肝癌的恶性肿瘤，16例慢性肝病患者的外周血单个核细胞（PBMC）甲胎蛋白mRNA。结果：AFP mRNA在非肝癌的恶性肿瘤患者无异常表达，在转移性肝癌（20％，2／10），慢性肝病（6．3％，1／16），原发性肝癌（37．3％，19／5）、AFP mRNA的基因拷贝数和肝癌TNM分期[1]，门静脉癌栓，肝外转移显著相关，而与肿瘤大小及血清AFP值无相关性。结论：巢式FQ－PCR检测肝癌患者外周血AFP mRNA异常预示有血源性转移的可能，可作为肝癌的诊断，肿瘤分期和有无肝外转移及愈合的指标。     

非小细胞肺癌十基因突变联合检测分析

目的：探讨运用扩增阻滞突变系统(Amplification Refractory Mutation System, ARMS)法检测EGFR、ALK、ROS1、RET、KRAS、NRAS、PIK3CA、BRAF、HER2和MET十基因在非小细胞肺癌的突变情况,分析其与临床病理的关系,探索十基因突变联合检测的临床应用价值。方法：收集2019年5月至2019年10月在四川省肿瘤医院病理确诊为非小细胞肺癌患者406例,其中石蜡包埋样本400例,细胞涂片6例,采取柱提法提取DNA和RNA,突变检测采用ARMS法。结果：非小细胞肺癌十基因联合检测的总突变频率为73.2%（297/406）,各驱动基因突变分布为：EGFR：51.0%（207/406)、KRAS：9.6%（39/406）、ALK融合：6.2%（25/406)、ROS1融合：2.5%（10/406）、RET融合 ：2.2%（9/406）、NRAS：0.2%（1/406）、PIK3CA：2.2% （9/406）、BRAF：1.0% （4/406）、HER2：2.2% （9/406）、MET 14外显子跳跃：0.7% （3/406）。肺腺癌EGFR突变频率高于肺鳞癌;女性患者EGFR与HER2 20ins突变频率高于男性,男性患者KRAS突变频率高于女性;年龄低于60岁的患者ROS1突变频率高于60岁以上的患者。十基因突变率在原发灶和转移灶之间无差异,冰冻后样本突变检出率高于其他类型样本。另外在30例样本中检出双突变,突变类型为18种,突变率达到7.4%;57%的双突变样本来源于初诊患者,没有观察到独特的组织病理特征。双突变患者在年龄和病理组织学分型上与单突变患者无差异,但易发生于女性患者。结论：ARMS法非小细胞肺癌十基因联合检测可一次获得更多基因突变信息,为分子靶向用药提供更加全面的指导信息,对于临床取材量少标本意义重大,多基因联合检测提供的共突变信息能够更全面地指导临床治疗。     

云南地区结直肠癌患者RAS/BRAF/PIK3CA基因突变状态及与临床病理特征的关系

目的:本研究主要对结直肠癌患者的KRAS/NRAS/BRAF V600E/PIK3CA基因突变情况及与临床病理特征的关系进行探究。方法:我们对2018年01月至2020年01月在我院分子诊断中心进行基因检测的结直肠癌患者的KRAS/NRAS/BRAF V600E/PIK3CA突变情况进行回顾性分析,共纳入209例具有完整临床信息的患者,所有患者的基因检测都是采用高通量测序方法获得的,并对患者的人口统计学和临床信息进行分析。结果:209例结直肠癌患者中,KRAS、NRAS、BRAF V600E、PIK3CA突变例数分别为98例、7例、10例和25例,突变率分别为46.9%、3.3%、4.8%和12.0%。KRAS 2号外显子突变最常见,其中又以G12D亚型突变高发,肿瘤原发部位在直肠的患者和微卫星稳定的CRC患者KRAS突变率明显高于原发部位在左右半结肠和微卫星不稳定的患者(P<0.05);BRAF V600E在MSI-H的CRC患者中突变率显著高于MSS的患者(P<0.05);男性患者、既往没有吸烟史、有淋巴结转移、临床分期较早以及MSI-H的CRC患者有更高的PIK3CA...     

PIK3CA和C-KIT基因突变与伴腋窝淋巴结转移乳腺癌临床病理特征及预后的关系

目的 探讨PIK3CA和C-KIT基因突变与乳腺癌伴腋窝淋巴结转移患者临床病理特征及预后的关系。方法 收集84例乳腺癌伴淋巴结转移患者术后存档癌组织石蜡标本,采用Ion Torrent测序技术检测其PIK3CA、C-KIT基因的突变情况（突变率及突变位点分布）;分析两种基因突变与临床病理特征（年龄、月经、淋巴结转移数、癌栓、肿瘤大小、临床分期、ER／PR和HER-2表达情况）的关系;根据突变情况分组（突变组和未突变组）,随访3年无瘤生存率。结果 PIK3CA、C-KIT基因突变率分别为63.1％（53／84）和15.5％（13／84）,均为错义突变;其中PIK3CA第9、13和20号外显子突变依次有7、8和24例,第13、20号外显子双突变共14例,而C-KIT基因突变均位于第10号外显子。两基因突变均与HER-2表达有关,仅PIK3CA与临床分期和ER／PR表达有关,但其各外显子突变与临床病理特征无关。PIK3CA基因突变组的3年无瘤生存率为75.5％,未突变组为48.4％;而C-KIT基因突变组与未突变组分别为76.9％和62.0％,两种基因不同突变情况的差异均无统计学意义（P＞0.05）。年龄、月经、淋巴结转移数、肿瘤大小、临床分期、ER／PR表达、HER-2表达、PIK3CA基因突变和C-KIT基因突变均不是影响乳腺癌伴淋巴结转移患者预后的独立因素。结论 乳腺癌伴腋窝淋巴结转移患者PIK3CA的基因突变率较高,与临床分期、ER／PR及HER-2表达有关;C-KIT仅与HER-2表达有关,两种基因突变可能在乳腺癌的发生发展及腋窝淋巴结转移中起一定作用。     

KRAS, BRAF and PIK3CA mutations in human colorectal cancer: relationship with metastatic colorectal cancer

Many abnormal gene expressions and dysregulated signaling pathways have been found in human colorectal cancer. Activating mutations of the KRAS, BRAF or PIK3CA oncogenes are frequently found in colorectal cancer. The aim of the study was to investigate the molecular occurrence of KRAS, BRAF and PIK3CA mutations in the colorectal tumorigenesis and to study the association of these events with clinicopathological parameters. In our study, DNA was extracted from 200 cases of human colorectal cancer tissue samples. KRAS, BRAF and PIK3CA mutation analysis was performed by PCR and pyrosequencing. Using statistical methods, we analyzed the relationships between the gene mutations and clinicopathological parameters. KRAS point mutations were detected in 63/200 patients (31.5%), with codon 12 mutations in 52/200 patients (26%), codon 13 mutations in 10/200 patients (5%) and codon 12.13 bi-mutations in 1/200 patients (0.5%). The V600E mutations of BRAF were detected in 14/200 patients (7%). PIK3CA point mutations (exon 9, exon 20) were detected in 25/200 (12.5%) patients, exon 9 mutatons in 12/200 patients (6%) and exon 20 mutations in 13/200 (6.5%). Our study suggested that both KRAS and BRAF mutations are exclusive, but KRAS and PIK3CA mutations are coexistent. The mutational status of BRAF did not correlate with Dukes' staging, histological type, age and gender. However, strong associations were found between KRAS, PIK3CA mutations and Dukes' staging (staging D, 12/25, 48%). Notably, our data indicated that colorectal cancers with KRAS and PIK3CA bi-mutations are more likely to develop into liver metastasis.     

启东肝癌高发区肝癌患者血清中p53突变研究

目的　研究启东地区肝癌患者血清中 p5 3基因突变 ,并确定其对肝癌诊断的意义。 方法　收集 2 5例肝癌 ,2 0例肝硬化 ,30例健康对照者的血标本 ,提取DNA ,应用限制性酶切及直接序列分析方法测定 p5 3基因第七外显子突变。 结果　显示 p5 3基因第七外显子的 2 49密码子产生突变 ,ARG变为SER ,肝癌 ,肝硬化 ,健康者中发生率分别为 44 % ( 11/2 5 ) ,2 0 % ( 4/2 0 ) ,7% ( 2 /30 ) (P <0 .0 1)。结论　启东地区肝癌患者血清中p5 3突变与肝癌发生密切相关 ,其可作为新的肝癌早期诊断标志。     

BRAF Mutation is associated with early stage disease and improved outcome in patients with low‐grade serous ovarian cancer

BACKGROUND:

Low‐grade serous (LGS) ovarian cancer is a chemoresistant disease that accounts for 10% of serous ovarian cancers. Prior studies have reported that 28% to 35% of serous borderline (SB)/LGS ovarian tumors harbor a BRAF mutation, suggesting that BRAF inhibitors may be a rational therapeutic approach for this disease. In the current study, the authors sought to determine whether BRAF or KRAS mutation status was associated with disease stage and/or histology in patients with SB and LGS ovarian cancer.

METHODS:

Genetic profiles were constructed for 75 SB and LGS ovarian tumors to determine BRAF and KRAS mutation status. The incidence and identity of BRAF and KRAS mutations were defined, and the results were correlated with disease stage, response to treatment, and overall survival.

RESULTS:

Of 75 samples examined, 56 tumors (75%) had SB histology, and 19 tumors (25%) had LGS histology. Fifty‐seven percent of tumors harbored either a KRAS mutation (n = 17) or a BRAF mutation (a valine‐to‐glutamate substitution at residue 600 [V600E]; n = 26). The BRAF V600E mutation was associated significantly with early disease stage (stage I/II; P < .001) and SB histology (P = .002). KRAS mutations were not associated significantly with disease stage or histology. Of the 22 patients (29%) who required chemotherapy, 20 had tumors with wild‐type KRAS/BRAF, 2 had KRAS mutant tumors, and none had tumors that harbored a BRAF mutation. All patients with BRAF tumors remained alive at a median follow‐up of 3.6 years (range, 1.9–129.3 months).

CONCLUSIONS:

V600E BRAF mutations were present in 35% of patients who had SB/LGS ovarian cancers. The presence of the BRAF V600E mutation in SB/LGS ovarian cancer was associated with early stage disease and improved prognosis. The authors concluded that patients with SB/LGS ovarian cancer who require systemic therapy are unlikely to have BRAF mutant tumors. Cancer 2013. © 2012 American Cancer Society.     

原发小细胞肺癌中BRAF/KRAS以及PIK3CA突变的基因特征及临床特征

目的 在中国人群小细胞肺癌(SCLC)标本中检测BRAF/KRAS以及PIK3CA基因突变频率,分析这些基因突变的基因特征和临床特征。方法 2009-2014年共收集557例单纯SCLC患者组织样本。利用双脱氧测序法进行BRAF、KRAS、PIK3CA、NRAS、MEK1基因突变检测。χ²检验分析临床因素与基因突变的相关性,Kaplan-Meier法生存分析,Cox模型多因素预后分析。结果 在557例标本中检测到13例BRAF突变,突变类型包括V600E (n=5)、V600A (n=2)、V600M (n=1)、D594G (n=1)、G464E (n=1)、K601R (n=2)、S605N (n=1)。6例KRAS突变,突变类型包括G12C (n=3)、G12A (n=1)、G12D (n=1)、G13D (n=1)。4例PIK3CA突变,突变类型包括E545G (n=2)、H1047R (n=2)。另外1例NRAS突变(Q61R)和1例MEK1突变(D61Y)。这些突变基因与患者年龄、性别、吸烟状态、临床分期均无相关性。单因素生存分析结果显示基因突变组患者的生存时间比无此类突变者生存时间差,中位生存时间分别为(10.30±0.75)个月(95%CI为8.83~11.77个月)和(12.80±0.54)个月(95%CI为11.74~13.86)(P=0.011)。结论 在单纯SCLC中存在小比例的BRAF/KRAS、PIK3CA基因突变群体,这些基因突变与患者的临床特征无明显统计学相关性,但单因素生存分析显示与患者生存预后呈负相关。     

Clinical Significance of Somatic Mutations in RAS/RAF/MAPK Signaling Pathway in Moroccan and North African Colorectal Cancer Patients

Background: Mutations in RAS (KRAS, NRAS) and BRAF genes are the main biomarker predicting response to anti-EGFR monoclonal antibodies in targeted therapy in colorectal cancer (CRC). Objective: Our study aims to evaluate the frequencies of KRAS, NRAS and BRAF mutations and their possible associations with clinico-pathological features in CRC patients from Morocco. Methods: DNA was extracted from 80 FFPE samples using the QIAamp DNA FFPE-kit. RAS and BRAF mutations were assessed by pyrosequencing assays using Qiagen, KRAS Pyro®kit 24.V1, Ras-Extension Pyro®kit 24.V1 and BRAF Pyro®Kit 24.V1, respectively, and carried out in the PyroMark-Q24. Results: RAS mutations were identified in 57.5% (56.2% in KRAS, 8.8% in NRAS). In KRAS gene, exon 2 mutations accounted for 93.3% (68.9% in codon 12, 24.4% in codon 13). Within codon 12, G12D was the most prevalent mutation (37.7%), followed by G12C (13.4%), G12S (8.9%) and G12V (6.6%). Within codon 13, the most frequently observed mutation was G13D (22.3%). The mutation rates of exon 3 and 4 were 15.6% and 13.3%, respectively. In exon 3 codon 61, 2.3% patients were detected with two concurrent mutations (Q61R, Q61H), and 4.4% with three concurrent mutations (Q61R, Q61H, Q61L). In NRAS gene, the mutation rates of exon 2, 3 and 4 were 57.1%, 28.6%, and 14.3%, respectively. G13A and Q61H were the most common mutations, accounting for 42.9% and 28.5%, respectively. There were 13% patients with concurrent KRAS/NRAS mutation and 4.3% wt KRAS with NRAS mutations. No mutations were identified in BRAF gene. In both sexes, KRAS codon 12 mutations were associated with higher stage III/IV tumors. Moreover, Patients whose tumor is in the proximal colon (56.3%) are more likely to harbor KRAS mutations than those tumor located in rectum (25%). Conclusion: RAS mutations could be useful in future target anti-EGFR therapy and molecular CRC screening strategy in Morocco.     

肺腺癌患者EGFR和KRAS基因突变与预后的相关性研究

目的 探讨肺腺癌患者表皮生长因子受体(EGFR)和KRAS基因突变与预后的相关性.方法 选取134例肺腺癌患者的肺腺癌组织标本,应用探针扩增阻滞突变系统在PCR仪上进行EGFR和KRAS基因突变检测,分析EGFR和KRAS基因突变与肺腺癌患者临床病理特征及预后的关系.结果 134例患者中,EGFR基因突变53例,突变率为39.55%,KRAS基因突变6例,突变率为4.48%.肺腺癌患者EGFR基因突变率与年龄、吸烟史有关(P﹤0.01).EGFR基因突变型患者的KRAS基因突变率低于EGFR基因野生型患者(P﹤0.05).EGFR基因突变型患者的无进展生存期(PFS)长于EGFR基因野生型患者(P﹤0.05),KRAS基因野生型患者的PFS长于KRAS基因突变型患者(P﹤0.05).结论 EGFR基因突变的肺腺癌患者KRAS基因更倾向于野生型,EGFR基因突变型或KRAS基因野生型的肺腺癌患者PFS更长.     

靶向高通量测序在非小细胞肺癌中的临床应用

  目的  对8种与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）个性化治疗高度相关的驱动基因进行检测,分析基因变异与临床病理特征的关系。  方法  收集天津医科大学肿瘤医院2016年6月至2017年8月212例NSCLC患者样本,对EGFR、KRAS、BRAF、ALK、MET、ERBB2、ROS1、RET 8种基因进行高通量测序。  结果  8种基因中EGFR基因变异率高达52.8%,其次为KRAS（8.5%）、ALK（8.0%）、ERBB2（6.1%）、MET（3.8%）、BRAF（1.4%）、RET（0.9%）、ROS1（0.9%）,75%样本检出至少1个驱动基因变异,驱动基因变异间呈现强烈互斥。最常见的EGFR突变为19外显子缺失和L858R突变,EGFR T790M突变与前面两个突变位点伴随出现。19外显子缺失患者携带非EGFR T790M突变比例低于L858R突变患者携带非EGFR T790M突变比例（P=0.04）。15.2%EGFR突变伴EGFR扩增,携带EGFR扩增且EGFR突变率 > 40%患者比例高于无EGFR扩增且EGFR突变率 > 40%患者（P < 0.01）。女性、不吸烟、腺癌患者易发生EGFR特别是EGFR敏感突变（P < 0.01）。肺腺癌（P=0.013）、临床分期晚（P=0.048）、淋巴结转移（P=0.027）患者携带EGFR扩增比例高。男性（P=0.009）、左侧肺癌（P=0.048）,吸烟患者（P=0.037）KRAS突变发生率较高。携带非KRAS突变、ALK融合的患者更年轻（P=0.005,P=0.031）,而携带KRAS突变患者年龄较高（P=0.055）。  结论  高通量测序可同时高效检测NSCLC患者中8种与靶向治疗相关驱动基因的变异谱,为临床医生的个体化诊疗提供参考,以多基因为基础的高通量测序为NSCLC诊疗提供更多的可能性。      

外周血AFP mRNA表达与原发性肝癌转移的关系

目的 通过检测手术或介入治疗前后的肝癌患者外周血甲胎蛋白信使核糖核酸（ＡＦＰ ｍＲＮＡ）的表达,了解原发生性肝癌的血行播散情况及肝癌综合治疗的病理生理基础。方法 采用巢式逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测技术,对５４例原发性吕患者外周血样本ＡＦＰｍＲＮＡ的表达进行了研究。结果 ５４例样本中,２６例（４８．１％）ＡＦＰ ｍＲＮＡ阳性,２０例正常人及１０例良性肝病患者分别只有１例阳性。１６例伴