miRNA-335基因启动子区甲基化与胃癌细胞不良生物学行为的关系

目的:探讨miR-335基因启动子区异常甲基化状态对胃癌细胞系中miR-335表达水平的影响,以及miR-335基因启动子区甲基化状态对胃癌细胞侵袭,迁移,以及增殖能力的影响。方法:1株永生化胃黏膜上皮细胞系(GES-1)和4株胃癌细胞系(SGC-7901,MKN-45,BGC-823和AGS)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胃癌细胞株miR-335及CRKL的表达水平。甲基化特异性PCR(MSP)方法检测胃癌细胞株miR-335的基因启动子区甲基化状态。应用MTT方法检测恢复miR-335表达对胃癌细胞增殖能力的影响,Transwell侵袭迁移实验及划痕愈合实验分析恢复miR-335表达对胃癌细胞系侵袭及迁移能力的影响。结果:MSP实验结果表明,MKN-45、SGC-7901和BGC-823细胞系均存在基因启动子区异常的高甲基化状态,AGS细胞系基因启动子区亦呈部分高甲基化状态。去甲基药物5-aza-2′-deoxycytidine处理后胃癌细胞miR-335的表达水平可升高2~3倍。Transwell侵袭迁移实验及划痕愈合实验表明miR-335表达水平恢复后SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力明显降低。MTT实验结果表明5-aza-2′-deoxycytidine处理后的SGC-7901细胞系与对照组相比,增殖能力显著降低。结论:miR-335启动子区的异常高甲基化状态抑制了miR-335在胃癌细胞系中的表达,恢复miR-335的表达水平可以抑制胃癌细胞的增殖,迁移和侵袭能力。miR-335为胃癌的肿瘤抑制因子。     

miR-133在胃癌组织中的表达及对胃癌细胞恶性行为的影响

目的 探讨microRNA-133（miR-133）在胃癌组织及细胞系中的表达情况,并探讨其对胃癌细胞凋亡和侵袭的影响。方法 采用实时定量PCR（qPCR）检测64例胃癌组织及对应癌旁组织中的miR-133水平,分析miR-133表达与临床病理参数（性别、年龄、肿瘤位置、临床分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移）的关系,并检测其在胃癌细胞株AGS、SGC-7901、MKN-1、MKN-45、MGC-803和BGC-823及正常胃黏膜细胞GES-1细胞的表达情况,同时选取miR-133水平最低的胃癌细胞并转染过表达miR-133的真核重组质粒pCDNA3.1+miR-133,转染后分别采用流式细胞仪PI/Annexin V双染法及Transwell法检测miR-133对细胞凋亡和侵袭能力的影响。结果 胃癌组织的miR-133相对表达量为0.347±0.024,低于癌旁组织（P＜0.05）,且其表达与临床分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关均有关（P＜0.05）;与GES-1细胞相比（其miR-133表达水平设为1.00）,胃癌细胞的miR-133水平均较低（P＜0.05）,且MKN-45的表达水平最低;与对照组和空转染组相比,过表达组转染48、96 h后的细胞凋亡水平均升高,且穿膜细胞数均降低（P＜0.05）。结论miR-133在胃癌组织和细胞中均为低表达,上调miR-133水平可抑制胃癌细胞的侵袭并诱导凋亡。     

miR-106a靶向调控TIMP2对人胃癌细胞增殖、转移及EMT的影响

目的 探讨微小RNA-106a(miR-106a)在人胃癌组织中的表达及其与癌细胞增殖、转移的关系。方法 收集人胃癌和配对癌旁福尔马林固定-石蜡包埋样本共50对,Real-time PCR法检测miR-106a在人胃癌组织中的表达;培养人低分化胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MKN-45和永生化人胃黏膜上皮细胞GES-1,Real-time PCR法检测miR-106a在人胃癌细胞中的表达;MTT法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,生物信息学和双荧光素酶法鉴定miR-106a靶基因,Western blot检测靶蛋白TIMP2、MMP2、MMP9、E-cadherin、N-cadherin表达。结果 Real-time PCR检测显示,与癌旁组织比较,miR-106a在人胃癌组织中高表达,差异有统计学意义(P＜0.001);与GES-1细胞比较,miR-106a在人胃癌细胞SGC-7901、BGC-823、MKN-45中普遍高表达,差异有统计学意义(P＜0.001)。MTT检测显示抑制miR-106a后胃癌细胞SGC-7901、BGC-823增殖能力下降(P＜0.01)。Transwell显示胃癌细胞BGC-823迁移、侵袭能力下降(P＜0.001)。双荧光素酶法显示TIMP2野生型报告基因与miR-106a mimic共转后,其荧光素酶活性较miR-106a NC组明显下降(P＜0.001),但TIMP2突变型报告基因无明显变化。Western blot显示抑制miR-106a后TIMP2表达升高,MMP2、MMP9表达下降,E-cadherin表达升高,N-cadherin表达下降。结论 miR-106a在人胃癌中的高表达可能通过靶向TIMP2而影响癌细胞的增殖、转移和上皮-间质转化。     

PTEN在胃癌细胞中的表达及其CpG岛甲基化状态的研究

目的检测抑癌基因PTEN在四种胃癌细胞中mRNA和蛋白表达水平及其5’启动子区CpG岛甲基化状态。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation-specific PCR,MSP)检测四种不同分化程度的胃癌细胞(HGC-27,MGC-803,BGC-823,SGC-7901)中PTEN基因启动子区域甲基化状态,RT-PCR和Westernblot法分别检测其mRNA和蛋白表达水平。结果除SGC-7901外,其他三种细胞可检测到PTEN基因启动子的甲基化。PTENmRNA和蛋白表达水平依次为:SGC-7901最高(P<0.01),BGC-823、MGC-803次之(两者间无显著性差异,P>0.05),HGC-27表达水平最低(P<0.01),其表达与细胞分化程度呈正相关趋势。结论PTEN基因启动子区异常甲基化可能导致该基因转录表达失活,使其蛋白表达减少甚至缺失,这可能是导致胃癌发生、发展的原因之一。     

miR-203基因在食管鳞癌中的表达及其甲基化状态的研究

[摘要] 目的：检测食管鳞状细胞癌（Esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）中miR-203基因的表达及其甲基化状态,探讨miR-203基因在食管鳞癌发生及发展中的作用。方法：分别应用实时定量RT-PCR（Real-Time RT-PCR, qRT-PCR）以及甲基化特异性PCR（Methylation specific PCR, MSP）的方法检测DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycitydine, 5-aza-dC）处理前后的食管癌细胞系（TE1、TE13、YES-2、EC109、T.TN）以及食管鳞癌组织及相应癌旁正常组织中miR-203基因的表达和甲基化状态。结果：未经5-aza-dC处理的五种食管癌细胞系中miR-203基因的表达均相对较低,经5-aza-dC处理后,五种食管癌细胞系中miR-203基因的表达均增高。五种食管癌细胞系在5-aza-dC处理前表现为miR-203基因高甲基化状态,应用5-aza-dC处理后,YES-2细胞系中miR-203基因甲基化程度降低,非甲基化程度增加,其余四种细胞系中miR-203基因均表现为非甲基化状态。miR-203基因在食管鳞癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织（P＜0.05）,并与TNM分期和组织学分化程度密切相关（P＜0.05）。食管鳞癌组织中miR-203基因的启动子区甲基化率为62.7%（52/83）,显著高于癌旁正常组织（7.22%, 6/83） （P＜0.05）,并与TNM分期和组织学分化程度密切相关（P＜0.05）。发生miR-203基因甲基化的食管鳞癌组织中miR-203基因的表达显著低于未发生甲基化的食管鳞癌组织（P＜0.05）。结论：miR-203基因在食管鳞癌中的异常低表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一。     

miR-6803和PPP6R1在食管鳞状细胞癌组织和细胞中的表达及其甲基化状态与患者临床病理特征的关系

目的:探讨微小RNA-6803(miR-6803)及其宿主基因蛋白磷酸酶6调节亚单位1(protein phosphatase 6 regulation subunit 1,PPP6R1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达和PPP6R1基因启动子区甲基化状态及其在ESCC发生及发展中的作用.方法:采用2013年至2014年间河北医科大学第四医院生物标本库的72例ESCC手术患者癌组织及对应的癌旁组织标本,用实时荧光定量PCR法检测miR-6803和PPP6R1在ESCC组织及其癌旁组织和DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)处理前后的ESCC细胞株TE1、TE13、Eca109、T.TN、Kyse170中的表达水平.用甲基化特异性PCR(MSP)法检测ESCC细胞系和组织及其癌旁组织中PPP6R1的甲基化状态,分析其与患者临床病理特征的关系.结果:ESCC组织中miR-6803和PPP6R1的表达水平显著低于癌旁组织(0.318±0.156,0.408±0.177 vs 1.000±0.001,均P＜0.05),miR-6803表达水平与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期密切相关(均P＜0.05);PPP6R1表达水平与TNM分期和组织学分化程度密切相关(均P＜0.05).ESCC组织中miR-6803和PPP6R1基因的表达具有显著相关性(P＜0.05).ESCC组织中PPP6R1的启动子区甲基化率显著高于癌旁组织(56.94％ vs 36.11％,P＜0.05),并与TNM分期和组织学分化程度密切相关(均P＜0.05),miR-6803-和PPP6R1基因的低表达与PPP6R1启动子区甲基化明显相关(P＜0.05).经5-Aza-dC处理后,5种ESCC细胞中miR-6803和PPP6R1的表达均升高,并且TE1、TE13、Kyse170细胞中PPP6R1基因甲基化程度降低,非甲基化程度增加,其余2种细胞中PPP6R1基因均表现为非甲基化状态.结论:miR-6803及其宿主基因PPP6R1的低表达可能与ESCC的发生发展密切相关,其启动子区甲基化可能是miR-6803和PPP6R1表达沉默的机制之一.     

光辉霉素对胃癌细胞周期、凋亡的影响及可能机制

目的 探讨光辉霉素（MTM）对胃癌细胞周期、凋亡的影响及可能的机制。方法 体外培养胃癌BGC-823、SGC-7901、MKN-28、AGS和正常胃黏膜GES-1细胞，采用实时荧光定量（QPCR） 和Western blotting检测SP1 mRNA和蛋白表达。0、25、50、100 nmol／L MTM处理BGC-823细胞24 h，QPCR和Western blotting检测SP1、p53、p21 mRNA和蛋白表达。流式细胞术检测50 nmol／L MTM处理BGC-823细胞周期和凋亡的变化。结果 QPCR检测胃癌BGC-823、 SGC-7901、MKN-28、AGS细胞系中SP1 mRNA表达量为6.12±0.15，5.42±0.24，3.33±0.21，3.01±0.12，均显著高于GES-1细胞（P＜0.05）；Western blotting检测SP1 蛋白表达与mRNA表达一致。0、25、50、100 nmol／L MTM处理BGC-823细胞，SP1 mRNA和蛋白表达逐渐降低， p53、p21 mRNA和蛋白表达逐渐升高。50 nmol／L MTM组SP1表达量最低（mRNA：0.48±0.12；蛋白：0.28±0.09）， p53表达量最高（mRNA：5.37±0.45；蛋白：1.29±0.20）；100 nmol／L MTM组p21表达量最高（mRNA：4.92±0.53；蛋白：0.86±0.15）；与0 nmol／L MTM组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。流式细胞术结果显示，50 nmol／L MTM组BGC-823细胞G0／G1比例为（63.71±2.14）％和凋亡率为（24.68±1.09）％，均明显高于0 nmol／L MTM组［（57.39±1.83）％和（9.23±0.75）％］，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 MTM通过降低SP1、上调p53、p21表达水平来增加胃癌细胞周期阻滞，诱导凋亡。     

miR-99b通过下调mTOR的表达抑制胃腺癌细胞系SGC-7901的增殖及迁移

目的:探讨hsa-miR-99b在胃腺癌细胞系的表达及其影响胃腺癌细胞系增殖和迁移的潜在作用机制.方法:Real-time PCR检测miR-99b在人胃上皮细胞系GES-1和人胃腺癌细胞系SGC-7901、BGC-823、MGC-803中的表达.用人工合成的miR-99b模拟物转染SGC-7901细胞构建过表达miR-996细胞系,转染对照模拟物作为对照组,CCK-8法检测过表达miR-99b的SGC-7901细胞的增殖情况,Transwell法检测SGC-7901细胞系的迁移情况,Western blotting检测SGC-7901细胞系中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的表达情况.结果:miR-99b在胃腺癌细胞系中的表达水平显著低于胃上皮细胞系,其中以SCG-7901细胞最甚.转染miR-99b模拟物48 h后,实验组SCG-7901细胞增殖能力低于对照组(0.20±0.00 vs 0.27±0.02,P＜0.05);与转染对照模拟物的细胞相比,转染24 h后,实验组SCG-7901穿膜细胞数低于对照组[(226.67 ±25.17) vs (523.33±25.17)个,P＜0.05].miR-99b可下调人胃腺癌细胞系SGC-7901中mTOR蛋白的表达.结论:miR-99b在胃腺癌细胞系中的表达明显下调,miR-99b抑制人胃腺癌细胞系SGC-7901增殖和迁移的作用可能与下调mTOR表达有关.     

lncRNA 00707 通过miR-613 调控胃癌MGC-803、SGC-7901 细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的:探讨长链非编码RNA 00707（lncRNA 00707）和微小RNA-613(miR-613)对胃癌细胞增殖和转移的调控作用及其相关机制。方法：收集2014 年1 月至2018 年6 月青海省人民医院肿瘤外科89 例原发性胃癌组织及癌旁组织标本以及胃癌MGC-803、SGC-790、BGC-823 细胞,采用qPCR实验检测胃癌组织和细胞系中lncRNA 00707、miR-613 的表达水平。分别建立lncRNA00707 低表达和过表达细胞模型,采用CCK-8 实验检测MGC-803、SGC-7901 细胞增殖能力,Transwell 法检测MGC-803、SGC-7901 细胞迁移和侵袭能力。用双荧光素酶基因报告实验验证lncRNA 00707 与miR-613 的靶向关系。结果：与癌旁组织相比,胃癌组织中lncRNA 00707 呈明显高表达(P<0.01),lncRNA 00707 表达水平与WHO分期呈正相关(P<0.05);与正常细胞系GES-1 相比,胃癌细胞系中lncRNA 00707 表达明显上调(P<0.05)。敲低lncRNA 00707 可明显抑制SGC-7901 细胞的增殖、侵袭和迁移能力(均P<0.05);lncRNA 00707 过表达可明显提高MGC-803 细胞的增殖和迁移能力(P<0.05)。与阴性对照组相比,lncRNA00707 过表达显著降低了miR-613 荧光素酶报告载体的荧光素酶活性,而下调MGC-803 和SCG-7901 细胞中lncRNA 00707,miR-613 的表达显著增加（均P＜0.01）。结论：lncRNA 00707 在胃癌组织和细胞系中发挥促癌效应,其可以通过抑制miR-613 而促进胃癌MGC-803 和SCG-7901细胞的增殖和转移。     

miR-6867及其宿主基因RAPGEFL1在食管鳞状细胞癌组织和细胞系中的表达及甲基化状态

目的:检测miR-6867及其宿主基因Rap型鸟苷酸交换因子1(rap guanine nucleotide exchange factor like l,RAPGEFL1)在食管癌细胞系及食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达水平及甲基化状态,并探讨其在ESCC发生发展中的作用.方法:选取河北医科大学第四医院2014年1月至2016年1月收治的ESCC手术患者组织标本87例.应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-6867及RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的表达水平,分析miR-6867和RAPGEFL1基因表达之间的相关性.应用甲基化特异性PCR法(MSP)检测RAPGEFL1在食管癌细胞系和ESCC组织及其相应癌旁组织中的甲基化状态.结果:miR-6867在ESCC组织中的相对表达量显著低于其相应癌旁组织(P＜0.05),并与淋巴结转移及TNM分期有关(P＜0.05);RAPGEFL1基因在ESCC组织中的表达显著低于其相应癌旁组织(P＜0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期相关(P＜0.05);miR-6867与RAPGEFL1在ESCC组织中的表达呈明显正相关(P＜0.05).5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine,5-Aza-dC)处理后,4种食管癌细胞系中miR-6867和RAPGEFL1基因的表达均增高,并且其甲基化程度明显降低.RAPGEFL1基因在ESCC组织中的甲基化率显著高于其相应癌旁组织(P＜0.05),并与淋巴结转移、组织分化程度及TNM分期有关(P＜0.05).结论:ESCC的发生发展可能与miR-6867和RAPGEFL1的异常低表达及RAPGEFL1高甲基化状态有关,miR-6867与RAPGEFL1表达具有一致性,且RAPGEFL1基因启动子区甲基化可能是导致miR-6867与RAPGEFL1表达沉默的机制之一.     

HB—EGF蛋白在胃癌组织和人胃癌细胞系中的表达

目的：研究HB—EGF蛋白在胃癌组织和多个胃癌细胞系中的表达及其与胃癌发生的相关性。方法：免疫印迹和免疫荧光法检测新鲜胃癌组织和不同胃癌细胞系中HB—EGF蛋白的表达。结果：在癌旁正常胃黏膜中,HB—EGF蛋白表达较低,而在胃癌组织中,蛋白表达明显升高（P〈0．05）;在正常胃黏膜上皮细胞系GES-1中,未检出HB—EGF蛋白的表达,而在4种人胃癌细胞系中,HB—EGF蛋白表达均为阳性（P〈0．01）;其中SGC7901和MKN45中的表达强于BGC823和MKN28中的表达。结论：HB—EGF蛋白在胃癌组织和多种胃癌细胞系高表达,其表达水平升高可能与胃癌的发生和发展相关。     

Methylation-associated silencing of MicroRNA-335 contributes tumor cell invasion and migration by interacting with RASA1 in gastric cancer

MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs that function as endogenous silencers of target genes, previous studies have shown that miR-335 play an important role in suppressing metastasis and migration in human cancer including gastric cancer (GC). However, the mechanisms which result in aberrant expression of miR-335 in GC are still unknown. Recent studies have shown that the silencing of some miRNAs is associated with DNA hypermethylation. In this study, we find the promoter of miR-335 we embedded in CpG island by accessing to bioinformatics data and the low expression of miR-335 in 5 gastric cell lines can be restored by 5-aza-2’-deoxycytidine (5-Aza-dC) treatment. So we postulated that the miR-335 genes undergo epigenetic inactivation in GC. Subsequently, in GC cells and tissues, we performed quantitative real-time PCR (RTQ-PCR) to assess the expression of miR-335, and methylation-specific PCR (MSP) and bisulfite sequence-PCR (BSP) to evaluate the DNA methylation status in the CpG islands upstream of MiR-335. The result showed that the expression of miR-335 was significantly reduce in gastric cancer cell lines and tumor tissues compared to matched normal gastric tissues, and cell lines, and which is inverse correlation with DNA hypermethylation of miR-335 both in GC cells lines and tissues, but not in normal tissues. In addition, we found that the lower miR-335 expression induced by abnormal methylation may be mainly involved in gastric cell invasion and metastasis in GC tissues. No statistical significance was found about miR-335 expression and methylation level between healthy individuals with and without H. pylori (HP) infection. Finally, we carry out miRNA transfection, RTQ-PCR and western blot assay to find the RAS p21 protein activator (GTPase activating protein) 1 (RASA1) may be the possible target genes which lead to the gastric cell invasion and metastasis, furthermore, the re-expression of endogenous miR-335 by 5-Aza-dC treatment can exert effects similar to exogenous miRNAs transfection. Taken together, our results suggest that miR-335 may be silenced by promoter hypermethylation and play important roles in gastric cell invasion and metastasis through its target genes, such as RASA1. Its methylation level might be a predictive epigenetic marker of GC and remodeling on the expression by demethylation can provided a potential therapeutic strategy.     

lncRNA MALAT1/miR-141-3p/ZEB1 分子轴调控胃癌SGC7901 细胞的侵袭、迁移及上皮间质转化

[摘要] 目的：探究lncRNA MALAT1/miR-141-3p/ZEB1 分子轴对胃癌（GC）SGC7901 细胞侵袭、迁移及上皮间质转化（EMT）的调控作用。方法：收集2014 年4 月至2017 年5 月武汉商职医院普外科手术切除的GC组织（非坏死部分）和配对癌旁组织（距肿瘤组织>5 cm）标本38 例,同时选取正常胃上皮细胞GES1 及GC细胞系SGC7901、HGC27、BGC823、MKN45 和MKN28。qPCR实验检测MALAT1、miR-141-3p 在GC组织和细胞系中的表达水平,CCK-8 和Transwell 实验检测敲降MALAT1 对SGC7901 细胞增殖、迁移和侵袭的影响,WB 实验检测ZEB1、E-cadherin、N-cadherin 和Vimentin 的表达情况。双荧光酶素报告基因验证MALAT1、miR-141-3p 和ZEB1 的靶向关系,CCK-8 和Transwell 实验检测MALAT1/miR-141-3p/ZEB1 分子轴对SGC7901 细胞生物学行为的影响。结果：MALAT1 在GC组织和细胞系中高表达（P<0.05 或P<0.01）。敲降MALAT1 显著抑制了SGC7901 细胞增殖、迁移、侵袭及EMT（P<0.05 或P<0.01）;MALAT1 与miR-141-3p、miR-141-3p 与ZEB1 均具有直接靶向关系;进一步研究表明,同时过表达miR-141-3p 和MALAT1 或ZEB1 能够逆转miR-141-3p 对SGC7901 细胞生物学行为的抑制作用。结论：MALAT1通过靶向下调miR-141-3p 对ZEB1 的抑制作用,进而促进SGC7901 细胞侵袭、迁移及EMT。     

下调 miR -181a 对人胃癌细胞生物学行为的影响

目的：探讨下调 miR -181a 对人胃癌细胞生物学行为的影响。方法：转染 miR -181a inhibitor 下调miR -181a 在人胃癌细胞 SGC -7901中的表达。通过 MTT 法、流式细胞仪、Annexin - V + PI 双染色法和 Tr-answell 实验,观察下调 miR -181a 表达对人胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭迁移等生物学行为的影响。结果：瞬时转染 miR -181a inhibitor 后胃癌细胞 SGC -7901中 miR -181a 的表达明显下调（P =0.0027）。转染 miR     

肿瘤干细胞标志物CD133在胃癌中的表达及其临床意义

目的：探讨CD133在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测38例手术切除的胃癌原发组织、癌旁正常胃粘膜组织和其中8例肝转移灶组织中CD133mRNA的表达，免疫组织化学方法检测肿瘤组织中CD133蛋白的表达情况，分析CD133的表达与临床病理参数的关系。结果：胃癌癌旁、原发、转移组织中CD133mRNA的灰度相对值分别为0．189±0．149、0．3054-0．118和0．359±0．139，癌旁与原发组织之间差异有统计学意义（P〈0．01），原发与转移组织之间差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化检测肿瘤组织中CD133蛋白表达，阳性细胞稀少。原发组织CD133mRNA的表达与肿瘤大小和Ki-67表达相关（P〈0．05），与性别、年龄、浸润深度、淋巴结转移分期、TNM分期、组织分化程度及p53表达均无关（P〉0．05）。结论：CD133的表达与胃癌的发生有关，与转移的关系有待进一步研究，可能在胃癌的诊断中起一定的作用。     

剪接因子SF3b6通过MAPK信号通路促进胃癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨剪接因子3b亚基6(splicing factor 3b subunit6,SF3b6)对胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等的影响及其作用机制.方法:通过组织芯片检测SF3b6在胃癌和癌旁组织中的表达,采用WB和qPCR检测SF3b6在正常永生化胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞系(HGC27、AGS、BGC8...     

胃癌及胃腺癌细胞系中PPAR-y的表达及其临床意义

目的观察过氧化酶体激活物增殖受体y（PPAR-y）在胃癌组织及胃腺癌细胞系（SGC7901）中的表达,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法,检测50例胃癌、癌旁组织以及SGC7901中PPAR-y的表达。结果PPAR-y蛋白在胃癌中的表达为58％,明显高于癌旁组织的表达（28％）（P〈0．01）。PPAR-y蛋白在SGC7901细胞系中呈阳性表达。PPAR-y蛋白在低分化癌组织、侵及浆膜层、有淋巴结转移（P〈0．01）和分期晚（P〈0．05）的胃癌组织中表达增高,与性别、年龄、肿瘤大小及肿瘤部位无关（P〉0．05）。结论PPAR-y蛋白在胃癌组织表达上调,提示PPAR-y蛋白不仅与胃癌的发生有关,而且与其进展有关,有可能作为检测胃癌的分子标志物并可提示其预后。     

胃癌细胞株中GnT-V表达水平的检测

目的检测正常胃黏膜细胞株GES-1和胃癌细胞株GnT-V的mRNA和蛋白质的表达水平。方法体外培养胃癌细胞株BGC823、SGC7901、MKN45和正常胃黏膜细胞株GES-1,应用RT-PCR、Real-time PCR、Westem blot等技术检测胃癌细胞株及正常胃黏膜细胞GnT-V mRNA和蛋白质表达的水平。结果检测显示3株胃癌细胞（BGC823、SGC7901、MKN45）均表达CmT-V mRNA,其中BGC823、SGC7901呈高表达,MKN45则低表达GnT-V（P〈0．05）。各细胞相对正常对照组GnT-V的相对表达倍数分别为18．25,13．36,9．25。Western blot结果显示3株胃癌细胞均不同程度的GnT-V蛋白表达,而正常对照组不表达GnT-V蛋白。结论胃癌细胞不同程度表达GnT-V,各细胞中以BGC823表达量最高,SGC7901表达量居中,MKN45呈低表达,提示GnT-V可能对于胃癌的发生发展有一定的影响。     

Relationship between VEGF, EGF and invasion, metastasis of gastric cancer cells

Objective: To investigate the relationship between expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), epidermal growth factor (EGF) and the biological properties of gastric cancer cells such as invasion and metastasis.Methods: RT-PCR was performed to semi-quantitatively detect the mRNA expressions of EGF, EGFR, VEGF and VEGFR in four kinds of gastric cancer cell lines BGC823, MGC803, HGC27 and SGC7901, which were classified by their differentiation degree in our experiment. We obtained cell line growth curves from MTT assays. The migration of gastric cancer cells was observed under inverted phase contrast microscope. The changes of invasion and adhesion were detected by a Transwell assay.Results: The growth rates slowed down sequentially in MGC803, HGC27, BGC823 and SGC7901(P＜0.05). The ability of migration, invasion and adhesion were reduced sequentially, and the difference was significant. The expressions of EGF, EGFR, VEGF and VEGFR were significantly stronger in MGC803 and HGC27 than in BGC823 and SGC7901 cells, and the difference was statistically significant(P＜0.05).Conclusion: The expressions of VEGF and EGF had close relationship with the properties of migration, adhesion and invasion of gastric cancer cells in vitro. Thus, targeting VEGF and EGF may be a potential therapeutic strategy for inhibiting peritoneal metastasis of gastric cancer.