SIRT1在变应性鼻炎中的作用及其研究进展

变应性鼻炎是IgE介导的鼻黏膜的非感染性炎性疾病,Th1/Th2/Th17/Treg细胞的失衡是变应性鼻炎的重要免疫学特征。沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)作为III类组蛋白去乙酰化酶,在DNA修复和凋亡、肌肉和脂肪分化、神经元增殖分化、代谢、炎症反应、氧化应激中发挥重要作用。目前关于SIRT1在变应性疾病中的研究主要集中在类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及哮喘中,对于其在变应性鼻炎中的研究较少,本文就近年来SIRT1在变应性鼻炎中的相关研究进展作一综述。     

SIRT1基因突变致感音神经性聋的研究及其与年龄的相关性

目的 探讨不同年龄段人群沉默信息调节因子相关酶1(silent mating type information regulator 1,SIRT1)基因多态性与感音神经性聋的相关性。方法 以2021年3月～2022年12月我院就诊的105例感音神经性聋患者为观察组,同期在我院体检的同龄105例健康人群为对照组。根据年龄将观察组分为A组（<60岁）和B组（≥60岁）,对照组分为C组（<60岁）和D组（≥60岁）。对所有患者进行DNA提取和SIRT1 rs7895833、rs7069102、rs2273773三个位点的基因多态性检测,分析其与感音神经性聋的相关性。结果 （1）观察组和对照组rs2273773、rs7069102基因型/等位基因分布差异无统计学意义（P>0.05）。（2）4个亚组rs2273773、rs7069102基因型/等位基因分布差异无统计学意义（P>0.05）。（3）观察组和对照组rs7895833基因型/等位基因分布差异具有统计学意义,观察组rs7895833 GG型显著高于对照组（P<0.05）。（4）A组和C组rs7895833基因...     

组蛋白去乙酰化酶在慢性鼻窦炎伴鼻息肉上皮中的表达研究

目的　从组织学层面对比研究慢性鼻窦炎伴鼻息肉（chronic rhino sinusitis with nasal polyps,CRSwNP）黏膜上皮和正常鼻黏膜上皮中组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDACs）的表达情况,并将鼻息肉依据组织中嗜酸性粒细胞（Eos）所占比例进一步分组对比研究。方法　在首都医科大学附属北京同仁医院鼻过敏科手术患者中,收集5例正常对照鼻黏膜和17例CRSwNP患者鼻息肉,应用实时荧光定量PCR（real-time f luorescence quantitative PCR,RT-PCR）和免疫组化染色分别检测HDAC1、HDAC9和SIRT7 mRNA和蛋白的表达情况。结果  RT-PCR结果显示HDAC1、HDAC9和SIRT7mRNA在鼻息肉中表达较正常对照组上调,并且呈现Eos比例越高,表达越多的趋势;免疫组化染色显示同样发现CRSwNP中HDAC1、HDAC9和SIRT7 表达增强,并且增强程度与Eos 所占比例呈一定相关性。结论　CRSwNP患者鼻息肉黏膜上皮多种HDACs表达上升,Eos浸润程度可能对其有一定的影响,并进一步影响黏膜上皮屏障功能。     

中耳积液中纤维蛋白原含量与分泌性中耳炎疗效的关系

目的探讨中耳积液中纤维蛋白原含量与分泌性中耳炎病情迁延的关系及巴曲酶治疗分泌性中耳炎的可能机制。方法用凝固法对156例分泌性中耳炎患者治疗过程中的中耳积液中纤维蛋白原含量进行动态检测。鼓室抽液2次（间隔1周），积液复发者随机分成巴曲酶组及地塞米松组，穿刺后分别用0．5ml巴曲酶（2BU／ml）或0．5ml地塞米松（2mg／ml）行鼓室内注射治疗，观察治疗效果。结果积液复发组第1、2次复发中耳积液中纤维蛋白原含量均明显高于痊愈组，且第2次复发者的中耳积液纤维蛋白原含量更高（P〈0．01）。巴曲酶组治疗有效率为91．6％，较地塞米松组（有效率为62．5％）差异有统计学意义（P〈0．001）。治疗后6个月巴曲酶组平均气导听阈值（0．5、1．0、2．0kHz）变化与地塞米松组比较，治疗1周后2组中耳积液中纤维蛋白原含量差异，均有统计学意义（P〈0．01）。结论纤维蛋白原可能在分泌性中耳炎发生发展中起重要作用；鼓室内注射巴曲酶比注射地塞米松治疗分泌性中耳炎，疗效差异有统计学意义，其机制可能是通过降解纤维蛋白原以解除其对咽鼓管表面活性物质的抑制作用或（和）阻止其转变成不溶性纤维蛋白聚合体。     

SIRT1抗视网膜色素上皮细胞氧化应激作用的实验研究

目的 观察去乙酰化酶-1(SIRT1)对视网膜色素上皮细胞(RPE)氧化应激的防护作用.方法 应用50 μmol/L H₂O₂与ARPE-19细胞孵育24 h诱导RPE产生氧化应激病理生理过程,观察细胞增殖及凋亡率、细胞活性氧水平(ROS), 氧化剂诱导RPE细胞衰老状况,了解氧化应激对RPE的损伤;进一步采用SIRT1激动剂白藜芦醇(RSV)及抑制剂烟酰胺(NA)分别处理经H₂O₂干预的RPE细胞,观察SIRT1抗RPE氧化应激效果.结果 ①与对照组相比,H₂O₂干预RPE后细胞增殖显著下降(P=0.020),凋亡率及内生ROS水平均显著增高(P=0.013, P=0.040),细胞衰老水平显著升高(P=0.045);②NA可显著提高H₂O₂的毒性作用,降低RPE细胞增殖率(P=0.049),刺激凋亡(P=0.028),使ROS累积和衰老速度增加;③RSV具有显著的抗H₂O₂毒性作用;④RT-qPCR分析显示,SIRT1mRNA水平显著下调.结论 氧化应激状况下SIRT1表达下调,表明SIRT1对氧化应激诱发的视网膜色素上皮细胞损伤有显著的防护作用.适当提高SIRT1活性也许是延缓AMD的一种治疗策略.     

白藜芦醇减轻衰老小鼠听皮层线粒体氧化损伤

目的 研究沉默信息调节因子2相关酶1(sirtuin1, SIRT1)激动剂白藜芦醇对D-半乳糖诱导的衰老小鼠听皮层线粒体氧化损伤的作用。方法 24只5周龄雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后随机分成3组（8只/组）：(1)对照组：小鼠每日皮下注射生理盐水1次,连续6周;(2) D-半乳糖组：小鼠每日皮下注射1000mg/kg D-半乳糖1次,连续6周;(3) D-半乳糖+白藜芦醇组：小鼠每日皮下注射1000mg/kg D-半乳糖1次,饲料中添加白藜芦醇400mg/kg,连续6周。造模结束后,我们利用听性脑干反应（auditory brain response, ABR）检测各组小鼠听功能,利用免疫印迹检测各组小鼠听皮层SIRT1蛋白水平的表达,利用酶化学法检测H2O2水平和总超氧化物歧化酶（Total superoxide dismutase, T-SOD）活性,利用免疫组织化学检测DNA氧化损伤标记物8-羟基-2-脱氧鸟苷（8-hydroxy-2-deoxyguanosine, 8-OHdG）的水平,利用透射电镜观察各组小鼠听皮层线粒体超微结构。结果 和对照组相比较,D-半乳糖...     

SIRT1激动剂白藜芦醇在眼部疾病中的研究进展

Sirtuins是一类组蛋白去乙酰化酶,它通过控制基因表达、DNA修复、代谢、氧化应激反应、线粒体功能等生物学进程来调节多种活动,而这类酶中,被研究最多的是沉默信息调节因子-1(sirtuin 1, SIRT1)。白藜芦醇作为上调SIRT1活性的天然多酚类化合物,具有很强的抗氧化和抗炎作用,在心脏保护、神经保护、化疗和延缓衰老等方面被广泛研究。而氧化应激和炎症在眼部疾病的发生和发展中起着关键的作用,这些疾病会导致视力渐进性丧失和(或)致盲。综述白藜芦醇在眼部疾病中的潜在用途及其应用的限制性。     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和SIRT1在获得性感音神经性听力损失中的研究进展[综述]

获得性感音神经性听力损失发病率高,严重影响患者生活质量,目前尚无有效治疗药物。近年来的大量研究已揭示烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+）和依赖NAD+的去乙酰化酶SIRT1在获得性感音神经性听力损失的防治中发挥重要作用,并被视为极具潜力的干预靶点。本文将总结NAD+和SIRT1在防治获得性感音神经性听力损失中的作用及机制。     

纤溶酶治疗突发性聋的疗效观察

目的：研究观察纤溶酶治疗突发性聋的临床疗效及安全性。方法：71例（77耳）突聋患者随机分成纤溶酶治疗组36例（38耳）和巴曲酶对照组35例（39耳）,在2组的一般治疗完全相同的基础上,治疗组接受以纤溶酶为主的综合治疗,而对照组则接受以巴曲酶为主的综合治疗。结果：治疗组有效率78．8％,对照组有效率81．5％,2组比较差异无统计学意义（P〉0．05）;2组均未出现明显不良反应。结论：纤溶酶治疗突发性聋与巴曲酶的疗效相同,无明显不良反应,但较巴曲酶相对价廉,值得进一步推广应用。     

一氧化氮-环磷酸鸟苷通路对耳蜗灵敏度的调节

目的探讨一氧化氮（NO，nitric oxide）-环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）通路对耳蜗功能的调节。方法健康杂色豚鼠100只，雌雄不限，用随机数字表法随机分为10组，每组10只：①第1组：人工外淋巴液组；②第2组：L-精氨酸组；③第3组：Ca^2＋-ATP酶抑制剂组；④第4组：Ca^2＋-ATP酶抑制剂＋L-精氨酸组；⑤第5组：Ca^2＋-ATP酶抑制剂＋cGMP；⑥第6组：Ca^2＋-ATP酶抑制刺＋L．精氨酸＋非选择性一氧化氮合酶（NOS）抑制剂组；⑦第7组：血管内皮性一氧化氮合酶（eNOS）抑制剂组；⑧第8组：Ca^2＋-ATP酶抑制剂＋eNOS抑制剂组；⑨第9组：Ca^2＋-ATP酶抑制剂＋eNOS抑制剂＋L．精氨酸组；⑩第10组：Ca^2＋-ATP酶抑制剂＋eNOS抑制剂＋L-精氨酸＋神经元性一氧化氮合酶（nNOS）抑制剂组。分别全耳蜗灌流以上各组药物120min，由圆窗龛每隔30min测1次耳蜗微音器电位（cochlear microphonic，CM）和耳蜗听神经复合动作电位（compound action potential，CAP）。第3，4组灌流后留置标本做透射电镜的标本固定。结果第3组灌流Ca^2＋-ATP酶抑制刺前后CAP阈移为28．5dB，第4组在此基础上加入L．精氨酸可使CAP阈移改善9dB，且与加入cGMP后作用相似。第8组多加入eNOS抑制剂抑制血管纹功能后CAP阈移为42．5dB，再加入L-精氨酸可使CAP阈移改善7dB，而第10组加入nNOS抑制剂后CAP阈移较第9组增加了6、5dB，与第8组无明显差异。提示L-精氨酸在nNOS作用下可通过NO-cGMP通路来拮抗Ca^2＋-ATP酶抑制剂引起的胞内Ca^2＋-升高。透射电镜的结果显示：在Ca^2＋-ATP酶抑制剂的基础上加入L-精氨酸减轻了由Ca^2＋-ATP酶抑制剂所造成的外毛细胞的空泡化。结论NO-cGMP通路可调节耳蜗电位，L-精氨酸通过nNOS改善Corti器的功能。     

蝮蛇抗栓酶滴鼻治疗慢性鼻炎的疗效观察

我们于1993年4月～1995年12月应用蝮蛇抗检酶液滴鼻治疗慢性鼻炎78例，获得较为理想的效果，现报告如下。临床资料全部病例均根据《耳鼻咽喉科学》（第三版．北京：人民卫生出版社，1990．41～43．）的诊断标准确诊为慢性鼻炎。133例患者随机分为蚊蛇抗栓酶液滴鼻组（治疗组）和庆大霉素液滴鼻组（对照组）。治疗组78例中男49例，女29例；年龄2～52岁，平均16．5岁；病程2个月～32年，平均病程14岁以下儿童1．5年，15岁以上5．8年。双侧60例，采侧18例；单纯型64例，肥厚型14例。对照组55例中男33例，女22例；年龄2～51岁，平均17．8岁；病…     

微小RNA通过SIRT1调控小鼠耳蜗老化HEI-OC1细胞凋亡的研究

目的 构建小鼠耳蜗毛细胞株HEI-OC1(house ear institute-organ of Corti 1)老化模型,探索微小RNA-96(miR-96)可否通过SIRT1调控老化HEI-OC1凋亡。方法 CCK-8筛选D-半乳糖浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测p53、p38、caspase-3蛋白表达。q RT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达,Western blot检测SIRT1蛋白表达。miR-96模拟物转染HEI-OC1细胞,qRT-PCR检测miR-96、SIRT1 mRNA表达,Western blot检测SIRT1、caspase-3蛋白表达。结果 HEI-OC1细胞在15 mg/ml D-半乳糖条件下培养72 h后,凋亡较对照组显著增加（P<0.01）,且p53、p38(P<0.05)及caspase-3(P<0.0001)蛋白表达明显增加。老化组miR-96与SIRT1 mRNA和蛋白表达均明显减低（P<0.05）。miR-96过表达后,SIRT1 mRNA及蛋白较对照组表达升高,caspas...     

质膜钙ATP酶异构体1～3在新生大鼠耳蜗基底膜的表达

目的：通过 Western blot 方法检测质膜钙 ATP 酶异构体1～3（plasma membrane Ca2＋－ATPase isoforms 1～3,PMCA1～3）在新生大鼠耳蜗基底膜（basilar membrane,BM）的表达,并检测PMCA2在单个新生大鼠耳蜗毛细胞纤毛的表达量。方法①取出生后2天（P2）和8天（P8）健康SD大鼠各4只,断头后分离出BM,提取总蛋白,分别取20μg,通过 Western blot法检测BM的PMCA1～3表达。②取P2和P8大鼠BM总蛋白3μg,通过 Western blot方法检测BM的PMCA2的表达。③取4只P8大鼠,分离出BM,提取总蛋白,分别取5、10、20μg总蛋白并取100、400和800 ng牛血清白蛋白（BSA）作为对照组,跑完电泳后将胶分为2部分,部分泳道用于SYPRO染胶,其余泳道用于 Western blot检测PMCA2的表达。结果①在20μg 的 P2和 P8大鼠BM总蛋白中,PMCA1仅有微弱的表达（分别为0．126±0．024、0．131±0．012）,PMCA2表达水平较高（分别为4．16±0．528、4．25±0．319）,PMCA3几乎没有表达（均为0）,三者间差异有统计学意义（P＜0．05）。②在3μg 的P2和P8大鼠BM总蛋白中,P8大鼠PMCA2的表达水平（4．571±0．336）高于P2大鼠（3．622±0．285）,差异有统计学意义（P＜0．05）。③PMCA2在单个P8大鼠BM的含量约为2．5 ng。结论 PMCA1～3在新生大鼠耳蜗BM的表达水平不同,PMCA2表达量最大,这可能是由于耳蜗毛细胞对这几种PMCA亚型有不同的Ca2＋调节需求。     

Sirtuin 1激活在氯化钴诱导的离体耳蜗缺氧损害中的作用研究

目的观察氯化钴（CoCl2）对耳蜗毛细胞和神经节细胞的损伤模式并探讨Sirtuin 1（SIRT1）在耳蜗缺氧过程中的作用。方法采用CoCl2作用于离体培养的新生大鼠耳蜗组织,通过细胞化学染色和免疫荧光染色确定CoCl2对耳蜗毛细胞存活的影响,采用实时定量PCR方法检测CoCl2作用耳蜗组织后Sirtuin 1mRNA表达的变化。同时使用Sirtuin1激活剂白藜芦醇和Sirtuin 1抑制剂Sirtinol,观察SIRT1在缺氧介导的耳蜗损伤过程中的作用。结果300μmol／L以上浓度CoCl2作用于耳蜗24h可引起内外毛细胞缺失。细胞肿胀明显,神经元胞体变得不规则,数目明显减少,有些神经纤维甚至断裂。CoCl2处理后可引起早期耳蜗组织Sirtuin1基因表达增强,6h达到峰值。白藜芦醇预处理可以显著提高外毛细胞（P〈0．01）和内毛细胞的存活率（P〈0．05）。同时给予Sirtuin1抑制剂Sirtinol,白藜芦醇的保护效应被抵消。结论CoCl2导致耳蜗组织缺氧损害。耳蜗在缺氧过程中Sirtuin1早期上调,可保护耳蜗组织对抗缺氧诱导的细胞损伤。     

大鼠耳蜗一氧化氮合酶的分布和表达

目的 本实验先用组织化学法，通过观察还原型辅酶Ⅱ－黄递酶（NADPH－黄递酶）的性了解一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）在大鼠耳蜗内分布。再用亲合免疫细胞组织化学技术，研究大鼠耳蜗内神经元型NOS（neuronal NOS,nNOS）与内皮型NOS（endthelial NOS,eNOS）的表达。方法 组化组大鼠耳蜗切片用辅酶Ⅱ孵育液在37℃条件下孵育1小时。免疫组化组大鼠耳蜗切片经消除内源性过氧化物酶，3％山羊正常血清封闭非正常结合点后，用兔抗nNOS抗体、兔抗eNOS抗体，室温下孵60发钟，再用生物素标记的山羊抗兔第二抗体孵育、滴加ABC试剂，以DAB试剂显色。结果 大鼠耳蜗血管球内皮细胞有明显NADPH－黄递酶活性，血管纹及螺旋神经节细胞也有NADPH－黄递酶活性反应。大鼠耳蜗内、外毛细胞、螺旋神经节细胞nNOS、eNOS的表达呈阳性。血管纹细胞处有阳性nNOS、eNOS的表达。耳蜗血管球的内皮细胞无nNOS的表达，但eNOS的表达呈强阳性。结论 由nNOS及eNOS合成的NO在维持耳蜗正常神经传导及耳蜗毛细血管张力和正常血液供应中起着重要作用。     

质膜钙ATP酶异构体1～4的剪接体在新生大鼠前庭器官的表达

目的：研究质膜钙 ATP 酶异构体（plasma membrane Ca2＋－ATPase isoforms,PMCAs）1～4（PM-CA1～4）的 A 端和 C 端剪接变异体在新生大鼠前庭器官的表达。方法取出生2天的健康 SD 大鼠10只,断头后分离出前庭器官（椭圆囊斑和球囊斑）,提取总 RNA,通过逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法,检测 PMCA1～4的 A 端和 C 端剪接变异体的表达。结果在新生大鼠的椭圆囊斑和球囊斑 PMCA1～4表达的剪接体分别为PMCA1x／b,PMCA2w／（a、b）,PMCA3z／（a、b、c）和 PMCA4（x、z）／b。结论在新生大鼠前庭器官,PMCA1、PM-CA2、PMCA3和 PMCA4之间表达的 A 端和 C 端剪接变异体类型均不同,这可能是由于椭圆囊斑和球囊斑对这些 PMCA 亚型有着不同的 Ca2＋调节需求。     

巴曲酶治疗突发性聋的疗效观察

巴曲酶（Ｂａｔｒｏｘｏｂｉｎ）治疗突发性聋与扩管药组进行疗效对比。巴曲酶治疗有效率为７３％。其中治愈率４１％。而扩血管药治疗有效率与治愈率依次为６４％和２３％。阐述了巴曲酶主要药理作用，且介绍该药应用的适应症、禁忌证和副作用，讨论了突聋与预后的影响因素。     

实验性冲击波负压暴露后豚鼠耳蜗基底膜AChE和SDH活性的变化

目的 探讨冲击波负压（BUP）暴露对豚鼠耳蜗基底膜乙酰胆碱酯酶（AChE）和琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的影响。方法 中等强度BUP重复暴露3次后2h～3d检测豚鼠听性脑干反应（ABR）阈值，然后处死并应用酶组织化学技术观察其耳蜗基底膜两种酶的活性产物的变化。结果 负压峰值为-44．5kPa～-48．8kPa的BUP暴露后2h，耳蜗基底膜外毛细胞下神经末梢区域AChE活性产物明显减少，在负压暴露后24h和3d时有所恢复，但仍低于正常对照组。基底膜SDH活性下降主要发生于外毛细胞，且以第二转第三排最为明显；BUP暴露后2h活性下降幅度最大，至24h和3d时有所恢复。上述两种酶活性产物的变化，与动物的ABR阈移幅度变化是一致的。结论 BUP暴露后豚鼠耳蜗基底膜的AChE和SDH活性有不同程度的下降，这可能是造成BUP暴露后听力损失的一个主要原因。     

喉鳞癌中NO、iNOS的测定及其临床意义

目的：探讨一氧化氮（NO）、诱生型一氧化氮酶（iNOS）在喉鳞癌中的表达及其临床意义，方法：采用硝酸还原酶法测定健康人和喉癌患者血清NO3和NO2^-之和；采用逆转录－聚合酶锭反应（RT－PCR）技术检测40例不同病理分化程度，临床分期和喉鳞癌组织，癌旁组织及10例喉乳头状瘤、7例正常喉粘膜中诱生型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA的表达。结果：喉鳞癌患者血清NO含量显著高于正常对照组，喉癌组织iNOSmRNA阳性表达率为85．00％，较对照组癌旁组织（20．00％），良性肿瘤组（40．00％）、正常人组（0／7）明显增高（P＜0．0001，P＜0．005，P＜0．0001），有淋巴结转移组（19／19）显著高于无淋巴结转移组（71．42％）（P＜0．05），iNOSmRNA阳性表达与肿瘤原发部位及T分级无关，与细胞分化程度呈负相关。结论：喉鳞癌组织中存在iNOS，它可能通过合成一氧化氮（NO）在分子水平参与了参与了咆癌的发生、发展。     

乙酰肝素酶、蛋白激酶CK2β与缺氧诱导因子-1α仪在鼻咽癌组织中的表达及其相关性研究

目的：检测乙酰肝素酶（HPA）、蛋白激酶CK2β（CK2β）、缺氧诱导因子-α（HIF-1α）在鼻咽癌（NPC）组织中的表达及其与临床特征之间的关系;并分析三者在NPC组织中表达的相关性。方法：采用免疫组织化学染色技术Super-Vision法检测49例NPC组织标本及15例慢性鼻咽炎（CNT）组织标本中HPA、CK2β及HIF-1α的表达水平。结果：HPA、CK2β与HIF-1α在NPC组织中的表达水平均高于CNT组织中的表达,差异均有统计学意义（P〈O．05）;HPA、CK2β与HIF-β的表达与NPC临床分期、治疗后有无复发或转移相关（P〈0．05）,与患者的性别无关（P〉0．05）;HIF-1α的表达水平与NPC患者的年龄密切相关（P％0．01）,而HPA、CK2β的表达水平则与NPC患者的年龄无关（P〉0．05）;HPA、CK2β与HIF-1α任意两者间在NPC组织中的表达均呈正相关性（P〈O．05）。结论：HPA、CK2β和HIF-1α参与了NPC的发生和发展、浸润及转移;在NPC的发生发展过程中,HPA、CK2β和HIF-1α之间可能存在协同作用。