高速逆流色谱分离纯化天然产物中生物碱类成分应用进展

高速逆流色谱（hight-speed counter current chromatography,HSCCC）技术是国际上较新型的液-液分配色谱技术,近几年被广泛应用于天然产物的分离纯化和研制方面,在分离纯化天然产物中生物碱类化合物尤为突出。该文对高速逆流色谱技术在分离纯化天然产物生物碱类化学成分、活性成分;pH-区带精制逆流色谱在分离纯化生物碱的应用状况;以及高速逆流色谱与其他分析检测技术的联用进行了综述。     

高速逆流色谱在天然产物活性成分分离制备中的应用

高速逆流色谱(HSCCC)是一种新型的液-液分配色谱技术,由于其克服了传统固相载体对样品的死吸附作用而被广泛用于天然产物的分离与制备中。本文从HSCCC样品制备、分离条件优化、技术进展以及近几年HSCCC在天然产物有效成分分离制备中的应用等方面进行了综述。     

高速逆流色谱在成分分离中的应用

高速逆流色谱(简称HSCCC)是美国国家医学院Yiochiro Ito博士于60年代首先创制的液一液分离技术,随着仪器的不断发展和改进,HSCCC已经成为逆流色谱技术中应用较为广泛的一部分,是成分分离的有效手段。当HSCCC仪开始工作时,互不相溶的两相溶剂在绕成线圈的聚四氟乙烯管中呈单向流体动力平衡性质。当聚四氟乙烯管在高速转动时,用其中的一相作固定相,另一相作流动相,流动相带着     

用高速逆流色谱技术分离纯化莪术中的姜黄素

摘以莪术粗提物为原料，应用高速逆流色谱（HSCCC）技术，通过对制备分离方法和溶剂系统的筛选，采用溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水和正己烷-乙醚-乙醇-水，转速880r／min，流速1.5mL／min，进样量30mg，检测波长254nm，记录仪衰减为200，分离得到姜黄素。通过外标物的对照，^1H-NMR进行结构鉴定，HPLC进行纯度分析，确定得到的物质为姜黄素，纯度为94.069%。     

高速逆流色谱及其在中药分析分离中的应用

高速逆流色谱是一种利用不同溶质在两种不相溶溶液间分配系数差异得以分离的新型分析分离技术。高速逆流色谱在中药有效成分分离中存在许多优点,已成为当前中药与天然药物分析分离领域中的一项重要技术。     

高速逆流色谱分离天然产物的溶剂体系选择

高速逆流色谱(HSCCC)是一种有效快速的分离方法.综述了近几年来关于HSCCC分离天然产物的研究进展,与以往综述按分离物质的种类对溶剂体系分类阐述不同,将按照溶剂体系的极性对其分类阐述,并且详细的论述了常用溶剂体系适合分离物质的特征,列举了大量的应用实例和被分离物质的结构及分配系数,对快速选择溶剂体系起到了一定的指导作用.最后介绍了一些新型的溶剂体系,对HSCCC的未来发展进行展望.     

应用高速逆流色谱分离黄芩茎叶中黄酮类化合物

高速逆流层析 (High Speed Countercurrent Chro-matography,简称 HSCCC)是近些年出现的一种高效快速的无载体液—液分配层析法 ,它利用聚四氟乙烯(PTFE)螺旋管行星式运动而产生一种特殊的流体动力学现象 ,使不相溶的两相溶剂在螺旋管内高速运动 ,充分混合和逆流传递 ,使样品中各组分由于分配系数的差异而得到有效的分离。黄芩茎叶黄酮是中药研究所多年研究的项目 ,在抗炎解热及心血管方面有广泛的生物活性。曾用高压液相等手段分离出几个单体成分 ,但量较少 ,仅供波谱解析结构用 ,若供药理筛选则用量较大 ,高压液相等手段难于胜任。…     

应用高速逆流色谱分离纯化黄芩等中药有效成分的方法与价值分析

目的：探讨分析应用高速逆流色谱分离纯化黄芩等中药有效成分的方法与价值。方法：应用高速逆流色谱技术对中药材黄芩进行分离纯化,并对分离纯化的结果进行回顾性的分析。结果：对黄芩进行高速逆流色谱分离纯化后,所得有效成分为黄芩苷与汉黄芩苷,二者的纯度分别为99.20%与99.00%。结论：应用高速逆流色谱分离技术对黄芩进行分离纯化的效率较高,分离纯化后所得有效成分的纯度也较高,该技术值得在对其他中药有效成分的分离纯化中推广应用。     

高速逆流色谱分离茶叶中咖啡因和茶碱

高速逆流色谱(h igh-speed countercurrentchrom atography,HSCCC)是利用多层螺旋管行星式运动形成的特殊离心力场来实现两溶剂相在管柱里的单向性流体动力学分布状态,以使流动相在高速穿过管柱时保证固定相在管柱里达到较高的保留值,同时促进了两相间的充分混合和逆流传递。这种分离体系对不同物理性质的广泛溶剂系统具有较强的适应性,能够采用多样的体系条件和操作方式,因此逆流色谱在稀有金属、天然药物以及蛋白质的分离、纯化等很多方面有广泛的应用[1~3]。本实验采用HSCCC对茶叶中咖啡因和茶碱实现分离,同时考察相关因素的影响。1…     

国内应用高速逆流色谱技术用于植物成分分离的概况

逆流色谱(Counter—current chromatography简称CCC)技术是在逆流分溶的基础上由美国国家健康研究所Yiochiro lto．博士于60年代首先创制的。“随着仪器的不断发展和改进，80年代初开始使用高速逆流色谱(High-speed counter—current chromatograph简称HSCOC)这一国际上较新型的液-液分配技术”。仪器的工作原理为：互不相容的两相溶剂在绕成线圈的聚四氟乙烯管做高速运转时，     

高速逆流色谱分离纯化钩吻中钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱

目的 建立高速逆流色谱技术分离纯化钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱的方法。方法 采用高速逆流色谱分离技术分离纯化钩吻生物碱单体,以氯仿-甲醇-0.1 mol/L HCl(4∶4∶2)为溶剂体系;高效液相色谱技术分析所提产物的质量分数;核磁共振谱、质谱分析确证单体的化学结构。结果 从300 mg钩吻总碱中经过一次高速逆流色谱技术分离纯化获得19.4 mg钩吻素己和21.2 mg 1-甲氧基钩吻碱,质量分数分别为95.4％、98.6％;经过电喷雾质谱及核磁共振的结构鉴定分析,证实分离得到的两种生物碱分别是钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱。结论 高速逆流色谱技术可高效分离纯化钩吻素己和1-甲氧基钩吻碱,为钩吻生物碱的研发提供了制备技术。     

硅胶柱色谱结合高速逆流色谱法分离纯化丹参中丹参酮

目的 建立硅胶柱色谱结合高速逆流色谱（HSCCC）法分离纯化丹参中丹参酮的方法。方法 丹参粗提物经硅胶柱色谱分离,得到组分F1、F2,分别采用石油醚-醋酸乙酯-甲醇-水（4∶3∶4∶2）、（8∶5∶8∶3）的溶剂系统进行HSCCC分离,下相为流动相,体积流量2.0 mL/min,转速850 r/min,检测波长254 nm,所得产物采用ESI-MS、NMR进行结构鉴定。结果 80 mg组分F1分离得到丹参酮I（14 mg）、二氢丹参酮I（22 mg）、丹参酮II_A（26 mg）;80 mg组分F2分离得到二氢丹参酮（11 mg）、三叶鼠尾酮B（15 mg）、隐丹参酮（30 mg）;6个化合物进行HPLC分析,质量分数均大于96%。结论 硅胶柱色谱结合HSCCC是一种有效的分离制备丹参酮的方法。     

高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明

目的 建立高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明的方法。方法 使用正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水（5∶5∶7∶3）为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,体积流量2.0 mL/min,转速800 r/min,温度25 ℃,固定相的保留率为50%,检测波长300 nm,对草豆蔻粗提物进行分离。结果 从100 mg草豆蔻粗提物中一步分离纯化得到17.2 mg山姜素和25.1 mg 小豆蔻明。经HPLC分析,质量分数分别为98.1%、99.2%,其化学结构由¹H-NMR和¹³C-NMR鉴定。结论 与传统的、存在不可逆吸附现象的柱色谱法相比,高速逆流色谱分离纯化草豆蔻中山姜素和小豆蔻明的方法具有简单、高效、回收率高等优点。     

高速逆流色谱分离制备广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的研究

Objective High speed counter-current chromatography (HSCCC) was applied to the preparative separation of polymethoxylated flavonoids (PMFs) with high purity from Pericarpium Citri Reticulatae. Methods After various parameters of preparative HSCCC were optimized preliminarily, the crude extract of the EtOAc part of Pericarpium Citri Reticulatae was separated with a two-phase solvent system composed of petroleum ether-EtOAc-methanol -water (1∶0.8∶0.7∶0.8). The upper phase was chosen as the stationary phase, while the lower phase was chosen as the mobile phase. Results Three PMFs including nobiletin, 3, 5, 6, 7, 8, 3′, 4′-heptamethoxy flavone, and tangeretin could be obtained from 300 mg crude extracts in one-step separation in 260 min with their purities as 96.25％, 97.10％, and 99.22％, respectively. And their structures were identified by EI-MS and ¹H-NMR. Conclusion The results demonstrate that the adopted methods are simple, feasible, economical, and efficient for rapid preparative isolation of PMFs from species of Citrus L. The compounds obtained in the experiment could be used as reference substances for quality control of Pericarpium Citri Reticulatae. Furthermore, the adopted methods may be used as strong research tools for taxonomy in botanical sciences of Citrus L.     

HPLC-柱后生物活性检测在线联用技术在天然活性成分筛选中的应用

HPLC由于分离度和灵敏度高,其在柱后与生物活性检测联用形成的天然活性成分筛选技术,具有操作简单、耗费低、灵敏度和专属性高等优点,已用于天然产物中抗氧化剂、乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制剂、磷酸二酯酶（PDE）抑制剂、血管紧张素转移酶（ACE）抑制剂、细胞色素P450抑制剂等的筛选。综述了HPLC-柱后生物活性检测在线联用技术在天然活性成分筛选研究中的应用,同时对其优点和不足进行了总结。     

硅胶柱色谱-高速逆流色谱法分离纯化羌活中佛手柑内酯

目的 以羌活的根和根茎为原料,建立硅胶柱色谱-高速逆流色谱（HSCCC）法制备分离羌活中佛手柑内酯的方法。方法 羌活粗提物先经过硅胶柱色谱初步分离,富集目标化合物;组分Q₅再经过HSCCC分离,以正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水（5∶5∶4∶5）为溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相;经气-质及核磁共振氢谱、碳谱鉴定化合物的结构。结果 经过HSCCC分离后,从300 mg Q₅样品中一次性分离得到佛手柑内酯37.6 mg,经HPLC检测其质量分数达到99.1%。结论     

高速逆流色谱法从多花蒿中分离制备阿格拉宾

目的 采用高速逆流色谱法分离制备多花蒿中阿格拉宾。方法 多花蒿乙醇提取物经硅胶柱色谱分离,所得组份Fr. 1用高速逆流色谱进一步分离,采用正己烷–醋酸乙酯–甲醇–水（1.2∶0.8∶1.5∶0.5）为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,主机转速850 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长为254 nm。采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,HPLC法测定产品的纯度。结果 从500 mg组分Fr. 1中得到260 mg质量分数为99.5%的阿格拉宾。结论 该方法操作简单,可用于阿格拉宾化学对照品的分离制备。     

莲子心生物碱树脂法分离纯化工艺研究

目的 筛选适用于分离纯化莲子心生物碱的大孔吸附树脂。方法 考察吸附性能较好的D101、AB-8、DA201 3种大孔吸附树脂对莲心碱的吸附能力及洗脱参数,并用HPLC定量分析了莲心碱的量。结果 D101树脂对莲子心中生物碱有较好的吸附分离效果。先用水洗除杂,再用6倍树脂体积、乙醇体积分数为80%、pH 3的洗脱剂洗脱,浓缩干燥,产品中莲心碱的质量分数为10.2%、产品收率为24.6%。结论 该工艺简单可行,分离效果好,适合莲子心生物碱的分离纯化。