杜仲多糖抗肝纤维化作用的实验研究

目的 研究杜仲多糖对CCl₄致肝纤维化大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法 采用大鼠首次背部sc纯CCl₄ 5 mL/kg,以后sc 40% CCl₄花生油3 mL/kg,共8周,制备大鼠肝纤维化模型。杜仲多糖ig给药8周,测定大鼠肝脏及脾脏指数,检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性及总蛋白（TP）、白蛋白(ALB)水平,计算ALB与球蛋白（GLOB）的比值（A/G）;检测血清中透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、III型前胶原（PCIII）、IV型胶原（IV-C）水平;检测肝脏组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活性、羟脯氨酸（Hyp）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）的水平;并检测肝脏中转化生长因子β1（TGF-β1）的表达。结果 杜仲多糖能明显对抗CCl₄所致的肝纤维化大鼠肝脏、脾脏指数的升高(P＜0.01）;显著抑制血清中ALT、AST活性的升高（P＜0.01）,降低血清中HA、LN、PCIII、IV-C、GLOB的量（P＜0.01）,升高血清中的TP、ALB的量和A/G的值（P＜0.01）;降低肝组织中MDA的水平和Hyp的量（P＜0.01）,亦能升高肝组织中SOD的活性和GSH-Px的水平（P＜0.01）,明显降低肝组织中TGF-β1的表达。杜仲多糖高剂量组抗肝纤维化的效果最好,并呈现明显的剂量依赖性。结论 杜仲多糖具有显著的抗肝纤维化作用。     

贝母辛抗大鼠肝纤维化的作用研究

目的 观察贝母辛对四氯化碳（CCl₄）致大鼠肝纤维化的保护作用。方法 实验设对照组,模型组,贝母辛低、中、高剂量（2.5、5、10 mg/kg）组。除对照组外,其他组大鼠每隔3天ip给予CCl₄ 1次,连续8周,贝母辛各组于造模第4周开始给药,每天1次,给药至造模结束后4周。通过观察肝纤维化大鼠肝组织病理学变化,血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰氨基转移酶（GGT）、透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、III型前胶原（PC-III）、IV型胶原（IV-C）水平,以及肝组织中羟脯氨酸（Hyp）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）量的变化,考察贝母辛对肝纤维化大鼠的影响。结果 与模型组相比,贝母辛组肝纤维化大鼠肝病理组织学改变得到明显改善,血清中ALT、AST、ALP、GGT、HA、LN、PC-III、IV-C水平显著降低（P＜0.05、0.01）;肝组织中Hyp、MDA的量显著减少（P＜0.01）,SOD的量增加（P＜0.01）。结论 贝母辛对CCl₄致大鼠肝纤维有较好的保护作用,其机制可能与抑制肝内胶原合成、降低自由基生成、减轻脂质过氧化有关。     

蒿鳖养阴软坚方抗CCl4复合因素所致大鼠肝纤维化的作用

目的 观察蒿鳖养阴软坚方抗CCl₄复合因素致大鼠肝纤维化的作用。方法 Wistar大鼠随机分为对照组,模型组,蒿鳖养阴软坚方低、中、高剂量组,复方鳖甲软肝片及秋水仙碱阳性对照组。CCl₄复合因素法建立肝纤维化模型,比色法测定血清丙二醛（MDA）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）的量及肝组织羟脯氨酸（Hyp）水平,明胶酶谱法检测肝组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）的活性,免疫组化法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 与模型组相比,随着剂量的增加,蒿鳖养阴软坚方组大鼠血清MDA水平逐渐下降,血清TP、ALB的量逐渐增加,肝组织Hyp的量和MMP-2活性逐渐下降,MMP-9活性变化不明显,肝组织α-SMA的表达下降。结论 蒿鳖养阴软坚方能够对抗CCl₄复合因素诱发的大鼠肝纤维化。     

雄芍汤抗大鼠免疫性肝纤维化作用研究

目的 研究雄芍汤抗大鼠免疫性肝纤维化的作用。方法 84只SD大鼠随机分为对照组、模型组、扶正化瘀胶囊阳性对照组、雄芍汤预防组和雄芍汤高、低剂量（生药15.8、7.9 g/kg）组（造模后给药）。采用ip猪血清法制备大鼠肝纤维化模型,观察雄芍汤对肝纤维化大鼠血清肝功能指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、白蛋白（ALB）、白蛋白与球蛋白比值（A/G）和肝纤维化血清标志物透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、III型前胶原（PCIII）、IV型胶原（CIV）水平,以及肝组织病理学的影响。结果 与模型组比较,雄芍汤各给药组血清ALT、AST、HA、LN、PCIII水平明显降低（P＜0.05、0.01）,血清ALB水平和A/G值明显升高（P＜0.01）;雄芍汤预防组血清CIV水平明显降低（P＜0.05）;所有给药组肝细胞变性和坏死程度轻微,肝组织纤维增生较少,雄芍汤高剂量组和预防组的作用尤为明显。结论 雄芍汤能减轻免疫性肝纤维化大鼠的肝细胞损伤,改善肝功能,调节细胞外基质的代谢,阻止或逆转肝纤维化。     

海带多糖对心理应激大鼠血管舒张功能的保护作用

目的 探讨海带多糖对心理应激大鼠血管舒张功能的保护作用及相关机制。方法 采用愤怒心理应激的方法制备血管内皮损伤大鼠模型,实验分为对照组、模型组、海带多糖低和高剂量组及低分子肝素组。造模后取血,采用ELISA法检测血浆肾上腺素（Adr）水平、血管性血友病因子（vWF）水平,采用放射免疫化学法检测血浆皮质醇、6-酮-前列腺素F_1α（6-keto-PGF_1α）的水平,采用化学法检测血浆NO水平。取血后,制备大鼠血管环,观察各组大鼠血管环对累计浓度乙酰胆碱（Ach）的内皮依赖性舒张反应。结果 与对照组比较,模型组、海带多糖组和低分子肝素组血浆皮质醇和Adr水平明显升高（P＜0.05）;海带多糖高剂量组血浆vWF水平与模型组比较明显降低（P＜0.05）;海带多糖高剂量组血浆NO水平与模型组比较显著升高（P＜0.05）;海带多糖组血浆6-keto-PGF_1α水平与模型组比较显著升高（P＜0.05）;与模型组比较,海带多糖高剂量组血管舒张反应明显增强（P＜0.05）。结论 海带多糖对心理应激大鼠血管舒张功能具有一定的保护作用。     

麝香保心丸对肝硬化大鼠心肌组织即早基因与结缔组织生长因子的影响

目的 研究麝香保心丸对肝硬化致心肌重构的抑制作用及其机制。方法 以sc体积分数40% CCl₄橄榄油溶液3 mL/kg,每周2次,共8周的方法制备大鼠肝纤维化模型,第2周末随机取5只大鼠肝组织作HE染色,观察肝纤维化程度,造模大鼠分别ig麝香保心丸22.5、45 mg/kg,共给药6周,第8周末分别取各组大鼠肝组织、左室心肌组织行组织病理学及透射电镜观察,观察各组大鼠肝脏、心肌组织病理及心肌组织超微结构改变;以RT-PCR和免疫组化染色分析心肌组织中c-fos和c-jun mRNA以及结缔组织生长因子（CTGF）、I型和III型胶原的表达变化。结果 造模大鼠均存在不同程度的肝纤维化及心肌损伤。与模型组比较,低剂量麝香保心丸组大鼠肝纤维化程度无明显差异（P＞0.05）,但心肌损伤程度减轻,心肌组织中c-fos mRNA、c-jun mRNA、CTGF、I型和III型胶原表达明显降低（P＜0.05、0.01）。高剂量麝香保心丸组大鼠肝纤维化及心肌损伤程度较低剂量组减轻（P＜0.05）,心肌组织中c-fos mRNA、c-jun mRNA、CTGF、I型和III型胶原表达均低于低剂量组（P＜0.05、0.01）。结论 肝硬化大鼠心肌组织心肌即早基因活化、诱导CTGF过度表达而致心肌重构,麝香保心丸可通过抑制心肌即早基因表达,降低心肌CTGF水平而发挥心肌保护作用,其效应呈剂量依赖性。     

人参皂苷Rb1对术后疲劳综合征大鼠中枢氧化应激的影响

目的 观察人参皂苷Rb₁对术后疲劳综合征大鼠中枢氧化应激的影响,探讨其抗疲劳机制。方法 采用70%中段小肠切除端吻合术法建立术后疲劳综合征大鼠模型。术前将大鼠按体质量随机分为对照组、模型组和人参皂苷Rb₁（10 mg/kg）组,每组再按术后第1、3、7、10天各时间点分为4小组,术前1 h给药,连续给药至各小组相应时间点。术后第2～7天大鼠进行水迷宫实验,第1、3、7、10天检测大鼠最大抓力及脑内丙二醛（MDA）的量、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性,电镜观察海马CA1区超微结构变化。结果 与对照组相比,模型组大鼠最大抓力在第3、7、10天明显下降（P＜0.05）,在水迷宫实验中总平均逃避潜伏期明显延长（P＜0.05）,穿越平台次数明显减少（P＜0.05）;与模型组相比,人参皂苷Rb₁组大鼠上述行为学指标得到明显改善（P＜0.05）。与对照组相比,模型组大鼠脑内MDA的量、SOD活性在术后第1、3天明显上升（P＜0.05）,GSH-Px活性在术后第7天明显上升（P＜0.05）;与模型组相比,人参皂苷Rb₁组大鼠MDA的量明显下降（P＜0.05）,SOD、GSH-Px活性明显上升（P＜0.05）。电镜观察可见人参皂苷Rb₁组大鼠海马CA1区神经元超微结构得到改善。结论 手术导致中枢氧化应激状态改变,人参皂苷Rb₁可通过增强中枢抗氧化酶活性减弱氧化应激损伤,保护中枢神经元,这可能是其抗术后疲劳的机制之一。     

丹参滴丸对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的影响及其作用机制

目的 观察丹参滴丸对CCl₄致大鼠肝纤维化的保护作用,并探讨其作用机制。方法 除对照组外,其余各组大鼠用CCl₄复合因素法诱导肝纤维化大鼠模型,丹参滴丸各组同时ig给予丹参滴丸700、350、175 mg/kg,阳性对照组给予扶正化瘀胶囊1 500 mg/kg,每天给药1次,连续给药7周,正常大鼠给予蒸馏水作为对照组。测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的活性及总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、IV型胶原的水平;测定肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和羟脯氨酸（Hyp）的量;HE和Masson染色观察肝组织病理形态学改变;免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 丹参滴丸能明显抑制肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、NAG活性的升高,降低IV型胶原的量,增加TP和ALB的量;降低肝组织中Hyp和MDA的量,提高SOD的活性,抑制胶原纤维的增加,亦能降低α-SMA的表达。结论 丹参滴丸有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制与其抗脂质过氧化、抑制胶原纤维的增加及降低α-SMA的表达等密切相关。     

PM2.5对雌鼠生殖内分泌水平和妊娠结局的影响

目的 研究PM_2.5对雌性大鼠生殖内分泌激素水平和妊娠结局的影响。方法 30只雌鼠随机分为对照组（生理盐水）、低剂量PM_2.5组（1.5 mg/kg）和高剂量PM_2.5组（37.5 mg/kg）。PM_2.5暴露10 d,采集孕前血液后合笼,妊娠第19天时,处死大鼠,采集并分离血清,用ELISA试剂盒测定妊娠前后血清中雌二醇（estradiol,E2）、孕酮（progesterone,PROG）、绒毛膜促性腺激素（chorionic gonadotropin,CG）、黄体生成素（luteinizing hormone,LH）和促卵泡生成素（follicle-stimulating hormone,FSH）激素水平;剖宫观察胎鼠情况。结果 对照组、低剂量组和高剂量组的活胎率分别为90.77%、59.49%和60.27%。与对照组相比,低剂量组和高剂量组胎鼠的活胎率均明显降低（P<0.05）。与对照组相比,PM_2.5能够明显降低各暴露组雌鼠妊娠前后血中E2、PROG、CG和LH水平（P<0.05）。与对照组相比,低剂量PM_2.5暴露组雌鼠妊娠前血中FSH变化不明显（P>0.05）,但高剂量组血中FSH明显降低（P<0.05）。结论 PM_2.5可能通过影响内分泌激素分泌水平而影响妊娠结局。     

清润方对糖尿病大鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR信号的影响

目的 研究清润方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠PI₃K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法 采用脂肪乳灌胃和腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）建立2型糖尿病胰岛素抵抗模型。将大鼠随机分成空白对照组、模型组、清润方大剂量组[11.2g/（kg·d）]、清润方中剂量组[5.6g/（kg·d）]、清润方小剂量组[2.8g/（kg·d）]、二甲双胍组[250mg/（kg·d）]。各组均灌胃给药。每天1次,连续8周。干预后检测血清中血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL-C）和高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL-C）,检测肝组织中p-AKT、p-PTEN及p70S6K的mRNA以及蛋白表达水平。结果 与模型组比较,清润方大剂量组和二甲双胍组的TC、TG和LDL-C降低,HDL-C升高（P<0.05）。清润方大剂量组的AKT和PTEN的mRNA表达升高（P<0.05）,p70S6K的mRNA表达下降（P<0.05）,与模型组比较,清润方大剂量组的p-AKT和p-PTEN的蛋白表达升高（P<0.05）,p-p70S6K的蛋白表达下降（P<0.05）。结论 清润方可能通过PI₃K/AKT/mTOR信号通路来改善胰岛素抵抗。     

肝纤维化指标和血清铁蛋白在肥胖儿童非酒精性脂肪肝病中的临床意义

目的：研究肝纤维化指标透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、血清Ⅲ型前胶原肽（PCⅡ）、Ⅳ型胶原（CIV）及血清铁蛋白（SF）在肥胖儿童非酒精性脂肪肝病（NAFLD）中的临床意义。方法：对101例在本院内分泌科住院的6～15岁肥胖儿童和30例9～14岁正常健康儿童进行腰围（WC）、体块指数（BMI）、肝转氨酶（ALT、AST）、肝纤维化指标、血清铁蛋白、肝脏B超等各项检查，根据诊断标准将其分为单纯性肥胖组（SOC）、单纯性非酒精性脂肪肝组（SNAFL）、非酒精性脂肪肝炎组（NASH）和正常对照组，比较各组间肝酶、肝纤维化指标和血清铁蛋白情况。结果：与正常对照组相比，S（）C组的HA、PCⅢ水平明显升高（P〈0．05），尤其以PCⅢ明显；SNAFL和NASH组的HA、PCⅡ、SF、ALT、AST水平均明显高于正常对照组（P〈0．05）。随着单纯性肥胖向单纯性脂肪肝、脂肪肝炎发展，SF、PCⅡ、ALT、AST逐步升高，差异显著（P〈0．05）；经两两相关分析发现：SF与PCⅢ、ALT、AST相关（r=0．33、0．63、0．69，P〈0．05），PCⅡ与ALT、AST相关（r=0．55、0．56，P〈0．05）；所有病例中SF≥300μg／L者6例，均为NASH患者，且其均值与NASH组其他惠儿相比，在肝纤维化指标和肝转氨酶上都明显增高（P〈0．05）。结论：纤维化指标中PCⅡ是一早期敏感的指标，与非酒精性脂肪肝病的发展密切相关。血清铁蛋白的增加是反应肝损伤的另一个重要指标，其可能是NASH发生发展的重要因子之一。     

注射用丹酚酸A防治肝纤维化的实验研究

目的探讨注射用丹酚酸A抗肝纤维化的作用,为丹酚酸A的临床应用提供理论依据。方法采用CCl4体外诱导肝细胞损伤,观察丹酚酸A对肝细胞活性及其细胞培养上清液ALT、AST、LDH水平和细胞裂解液中SOD活性和MDA含量的变化;另采用皮下注射CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,观察丹酚酸A对肝纤维化大鼠血清LN、HA、SOD和MDA含量的影响以及肝脏组织病理改变情况。结果与模型对照组比,丹酚酸A高、低剂量组和Vit E组的细胞存活率显著提高(P0.01),丹酚酸A高剂量组ALT、AST和LDH活性显著降低(P0.01),丹酚酸A高剂量组和Vit E组SOD活性明显升高(P0.05),MDA含量显著降低(P0.05);体内试验发现,与模型对照组比,丹酚酸A高剂量组纤维化大鼠的血清LN和HA水平显著降低(P0.05),高、低剂量组SOD活性显著升高(P0.05,P0.01),MDA含量显著降低(P0.01,P0.05),并能改善肝脏病理形态。结论注射用丹酚酸A可通过抗脂质过氧化作用,起到保护肝细胞,减轻肝纤维化的作用。     

Comparison on efficacy between Astragalus-Polygonum Anti-Fibrosis decoction and Jinshuibao () capsule in Treating liver fibrosis of chronic hepatitis B) capsule in Treating liver fibrosis of chronic hepatitis B

Objective: To observe the efficacy of Astragalus-Polygonum Anti-Fibrosis decoction (APAFD) and Jinshuibao capsule (JSBC) in treating liver fibrosis of chronic hepatitis B.Methods: Ninety-two cases of liver fibrosis of chronic hepatitis B were randomly divided into group A and group B. Patients in group A received APAFD for 48 weeks, and in group B, they received JSBC for 48 weeks. The effects on the level change of hyaluronic acid (HA), laminin (LN), pro-collagen III (PCIII) and collagen IV (CIV) as well as liver functional tests and liver biochemical parameters before and after treatment were observed.Results: Level of serum HA, LN, PCIII and CIV in group A declined more obviously than that of group B, the difference was significant (P < 0.01). The liver functional tests such as total bilirubin (TB), alanine aminotransferase (ALT), albumin/ globulin (A/G) ratio, hepatitis related serum biochemical parameters such as cholylglycine (CG), serum ferritin (SF), prealbumin (PC) of group A were all improved more significantly than that of group B (P < 0.01).Conclusion: APAFD is more effective than JSBC in treating liver fibrosis of chronic hepatitis B and in the inhibition of hepatic inflammation, hence it is a good composite Chinese herbal preparation against liver fibrosis.     

保肝汤对小鼠四氯化碳致慢性化学性肝损伤的保护作用

[目的] 研究保肝汤对四氯化碳（CCl₄）致慢性化学性肝损伤的保护作用。[方法] 将84只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、护肝片组、保肝汤高、中、低剂量组共6组,每组14只。除正常组外,其余各组分别在实验第1、3、10、16、22、25、28天腹腔注射0.5% CCl₄;于造模后第10天开始灌胃,其中正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,护肝片及保肝汤高、中、低剂量组给予灌胃药液。第30天灌胃2 h后称质量、处死,并收集各组肝组织及血清标本,检测指标含量,计算肝脏指数并进行肝组织病理学检查。[结果] 与正常组比较,模型组丙氨酶转氨酶（ALT）、天门冬氨酶氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）明显升高（P<0.05）。模型组肝组织病理学,可见多处大片肝细胞脂肪变性,并见多处灶状坏死;与模型组比较,保肝汤高、中、低剂量组ALT、AST降低,AST/ALT升高（P<0.05）,保肝汤中、低剂量组MDA降低（P<0.05）;保肝汤各剂量组明显改善肝组织及形态结构。[结论] 保肝汤能够减轻CCl₄对肝细胞的损伤程度,以保肝汤中剂量组作用最优;作用机制与抑制肝损伤后脂质过氧化反应有关。     

慢性病毒性肝炎PCIII HA及Ln检测的临床意义

目的　 探讨慢性病毒性肝炎血清纤维化指标III型前胶原 (PCIII) ,透明质酸 (HA)及层粘蛋白 (Ln)水平与肝纤维化程度的关系。方法　 采用放射免疫分析法测定 80例慢性病毒性肝炎患者血清PCIII、HA及Ln的水平。结果　 发现PCIII、HA及Ln的水平在重度慢性病毒性肝炎中均明显升高 ,与轻、中度及正常对照组相比具有显著差异 (P <0 .0 1) ,PCIII与Ln在轻度与正常对照组相比无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,HA含量在轻、中度和正常对照组相比较有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　 对慢性病毒性肝炎PCIII、HA及Ln的检测 ,从不同角度反映了肝纤维化的严重程度 ,避免了肝脏病理活检的创伤 ,对慢性病毒性肝炎病程发展的估计、判断预后均有一定的意义     

HD肝病治疗仪在肝硬化患者中的应用效果观察

目的观察HD肝病治疗仪在肝硬化治疗过程中的临床效果,探讨其稳定肝功能、抵抗纤维化的机制。方法选择2009年2月至2011年2月在我科治疗的肝硬化57例,随机分为对照组28例和观察组29例,对照组行常规保肝治疗,观察组在此基础上加用HD肝病治疗仪治疗,比较两组患者治疗前后临床症状、肝功能及纤维化指标的变化。结果观察组患者在肝区隐痛、腹胀、食欲减退改善明显优于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义;经血清学检查反应肝功能的指标,两组患者ALT差异不明显(P>0.05),无统计学意义;观察组患者纤维化指标AST、GGT、ALP比对照组改善更为明显(P<0.05),差异具有统计学意义;观察组患者肝纤维化指标均明显优于对照组(P<0.05),差异具有统计学意义。结论 HD肝病治疗仪能明显改善患者的临床症状,恢复肝功能,降低肝纤维化指标,值得临床推广使用。     

肝爽颗粒通过Nrf2/HO-1信号通路缓解慢性肝损伤作用及机制研究

[目的]探讨肝爽颗粒(GSG)对四氯化碳(CCL4)所导致的慢性肝损伤(CLI)模型小鼠的保护作用及机制.[方法]将50只雄性BALB/c小鼠平均分为正常组、模型组以及肝爽颗粒低、中、高剂量组.除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20％CCL4橄榄油溶液(2 mL/kg),每周2次,持续6周,成功建立CLI模型小鼠后,正常...