人早幼粒白血病细胞HL60能够产生具有凝集活性的物质

正常淋巴细胞和恶性肿瘤细胞膜表面都具有植物凝集素受体,能与植物凝集素相结合。不同肿瘤及分化程度不同的肿瘤细胞,其细胞膜表面植物凝集素受体的数量和种类也各不相同。许多恶性肿瘤细胞膜表面都具有与植物凝集素类似的内源性凝集素,其表达的数量和种类也随肿瘤的恶性程度而变化。抗肿瘤细胞膜表面凝集素单克隆抗体的荧光标记表明,正常细胞膜表面荧光染色很低,肿瘤细胞膜表面荧光染色很深。肿瘤细胞的凝集素,介导着肿瘤细胞的粘附和转移,并与其增殖活性有关。关于肿瘤细胞能否向其生存环境中释放     

氮芥抗药性人早幼粒白血病HL60细胞亚系的建立及其生物特性

用逐步递增药物浓度和软琼脂细胞克隆技术，药物连续作用１４个月后获得氮芥（ＨＮ２）抗药性人早幼粒白血病ＨＬ６０细胞亚系，抗件达５～７倍（ＨＬ６０／ＮＨ２６），在无ＨＮ２培养液中５倍以上抗性维持１０个月以上，抗性细胞亚系的生物学特性除倍增时间稍长和克隆形成率略低外其生长曲线，细胞周期细胞ＤＮＡ指数，形态学，组织化学和染色体分析均与亲代细胞相似。     

补骨脂素对HL60细胞凋亡及细胞内Ca2+浓度影响的探讨

目的:探讨补骨脂素对HL60细胞凋亡的影响,以及细胞内Ca2 浓度与凋亡之间关系。方法:采用MTT比色分析法测定补骨脂素对HL60的细胞毒性影响,流式细胞仪及激光共聚焦显微镜测定HL细胞内Ca2 浓度和凋亡比率。结果:补骨脂素对HL60细胞生长具有抑制作用,补骨脂素促进细胞凋亡比率,细胞凋亡与Ca2 浓度成正相关。结论:补骨脂素影响HL60细胞凋亡,Ca2 介导的细胞凋亡是补骨脂素抑制肿瘤细胞生长的可能机制之一。     

人干扰素对HL60,K562细胞生长及细胞周期的影响

用人干扰素(α和γ)与HL60、K562细胞共同培养后,对细胞生长有不同程度抑制作用。IFN_r对细胞生长抑制作用强于IFN_r,IFN_r和IFN_r联合应用有协同作用,在K562细胞,细胞在细胞周期中的分布也发生改变,G_0/G_1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,在HL60细胞则无明显的细胞周期再分布情况。提示细胞在S期的堆积是细胞生长受抑的原因之一。     

Isoverbascoside对HL—60细胞生长和超微结构的影响

ＨＬ－６０细胞经５μｍｏｌ／Ｌ剂量的Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ处理后，细胞生长显著受抑，生长抑制率达到３４．５％，电镜观察结果表明，处理后的细胞，部分细胞核呈肾形，高尔基体发达，线粒体嵴数目增多，表明Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ能使ＨＬ－６０细胞的恶生程度降低。     

异搏定促进VP16诱导HL—60细胞凋亡机制的初步探讨

目的 深入了解异搏定对鬼臼乙叉甙增敏作用的机制。方法 以人急性髓性白血病细胞株ＨＬ－６０为研究对象,运用ＤＮＡ电泳、流式细胞仪两种方法观察细胞凋亡现象,用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法测定凋亡相关蛋白ｂｃｌ－２表达水平。结果 ５ｍｇ／ＬＶＥＲ可增强ＶＰ１６的诱导细胞凋亡作用,并可下调ｂｃｌ－２蛋白表达。结论 ＶＥＲ对ＶＰ１６具有增敏作用与其具有增强ＶＰ１６诱导ＨＬ－６０细胞凋亡作用有关,Ｂｃ     

乙酰紫草素诱导急性髓系白血病HL-60细胞发生铁死亡的作用及分子机制

目的:探究乙酰紫草素诱导急性髓系白血病HL-60细胞发生铁死亡的作用及分子机制。方法:采用1 μg/mL、2 μg/mL、4 μg/mL和8 μg/mL的乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h和48 h,CCK-8实验检测乙酰紫草素对HL-60细胞增殖活力的影响;Western blot检测铁死亡相关蛋白［转录调节因子p53、胱氨酸/谷氨酸反向转运体(XCT）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、膜蛋白转铁蛋白受体1(TFR1/CD71)、铁蛋白重链1(FTH1)］的表达水平;采用GSH/GSSG检测试剂盒检测不同浓度乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h后细胞内GSH、GSSG的含量变化;采用4 μg/mL的乙酰紫草素和0.1 μmol/L细胞铁死亡抑制剂（Ferrostatin-1,Fer-1）共同干预HL-60细胞24 h,Western blot检测铁死亡相关蛋白p53、XCT、GPX4、CD71、FTH1的表达水平。结果:与对照组和DMSO组相比,不同浓度的乙酰紫草素对HL-60细胞的增殖均具有较强的抑制作用;乙酰紫草素显著升高p53和CD71的表达水平,显著降低XCT、GPX4和FTH1的表达水平,其中4 μg/mL乙酰紫草素干预HL-60细胞24 h,各蛋白表达水平变化最明显;乙酰紫草素显著减少GSH的含量（P＜0.000 1）,显著提高GSSG/GSH的比值（P＜0.000 1）;Fer-1将显著升高的p53和CD71以及显著降低的XCT、GPX4和FTH1的表达水平逆转。结论:乙酰紫草素一方面可能通过上调p53的表达,抑制XCT的表达,减少GSH含量,进而抑制GPX4的表达,促进HL-60细胞发生铁死亡;另一方面通过上调CD71（TFR1）的表达,下调FTH1的表达,从而影响HL-60细胞内铁稳态促进铁死亡的发生。     

土贝母苷甲对人HL-60髓性白血病细胞周期与凋亡的影响

目的:研究土贝母苷甲(下称苷甲)对人髓性白血病细胞HL-60的细胞周期及凋亡的影响。方法:采用MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测苷甲对HL-60细胞生长的影响;形态学方法(荧光显微镜和透射电镜)、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在苷甲作用下HL-60细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况;蛋白印迹免疫法检测细胞凋亡及周期相关基因bcl-2、cyclinB1表达的变化。结果:苷甲显著抑制HL-60细胞的生长,其抑制效果与浓度及时间呈依赖关系。15μmol·L-1苷甲作用24小时可将HL-60细胞阻滞于G2/M期,进而诱导其凋亡,凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征,琼脂糖凝胶电泳可见明显的梯状区带。bcl-2表达无明显变化,cyclinB1表达降低。结论:苷甲对细胞周期起阻滞作用,并诱导其凋亡,其作用机制可能与cyclinB1表达降低有关。     

FHIT对急性髓系白血病细胞HL60影响的研究

目的:进行外源FHIT基因转染人白血病细胞缺乏FHIT表达的HL60,研究FHIT基因对转染细胞生长的生物学影响。方法:构建pEGFP-FHIT真核表达质粒(实验组)与质粒pEGFP-N1(对照组)。分别电穿孔法转染HL60细胞。应用荧光显微镜、RT-PCR、Westernblot检测转染基因的转录和表达情况。四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术研究转染基因对HL60细胞体外增殖、凋亡情况的影响,并与转染对照质粒的细胞株进行比较。结果:经PCR、酶切和DNA测序证实pEGFP-FHIT真核载体构建成功。荧光显微镜下实验组HL60细胞可见绿色荧光,转染率为40%。RT-PCR和Westernblot分别从mRNA和蛋白水平检测到FHIT的表达。MTT检测结果显示:转染后实验组抑制率明显升高,细胞增殖受到抑制(P<0.05)。流式细胞术结果显示:实验组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论:转染FHIT基因对白血病细胞HL60的生长有抑制作用,并能诱导其凋亡。     

FHIT对急性髓系白血病细胞HL60影响的研究

目的:进行外源FHIT基因转染人白血病细胞缺乏FHIT表达的HL60,研究FHIT基因对转染细胞生长的生物学影响。方法:构建pEGFP-FHIT真核表达质粒（实验组）与质粒pEGFP-N1（对照组）。分别电穿孔法转染HL60细胞。应用荧光显微镜、RT-PCR、Western blot检测转染基因的转录和表达情况。四甲基偶氮唑盐（MTT）法、流式细胞术研究转染基因对HL60细胞体外增殖、凋亡情况的影响,并与转染对照质粒的细胞株进行比较。结果:经PCR、酶切和DNA测序证实pEGFP-FHIT真核载体构建成功。荧光显微镜下实验组HL60细胞可见绿色荧光,转染率为40%。RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测到FHIT的表达。MTT检测结果显示:转染后实验组抑制率明显升高,细胞增殖受到抑制（P＜0.05）。流式细胞术结果显示:实验组细胞凋亡率明显增加（P＜0.05)。结论:转染FHIT基因对白血病细胞HL60的生长有抑制作用,并能诱导其凋亡。     

Transport mechanism of anthracycline derivatives in human leukemia cell lines: uptake and efflux of pirarubicin in HL60 and pirarubicin-resistant HL60 cells

 We studied the transport mechanism of pirarubicin (THP) in HL60 and its THP-resistant (HL60/THP) cells, which showed no expression of mdr1 mRNA on Northern blot analysis. Under physiological conditions, the uptake of THP by both types of cell was time- and temperature-dependent. The amount of drug transport in the resistant cells was significantly less than that in the parent cells within 3 min of incubation. THP uptake was significantly higher in the presence than in the absence of 4 mM 2,4-dinitrophenol (DNP) in glucose-free Hanks’ balanced salt solution in both HL60 and HL60/THP cells and the increases were approximately equal. In the presence of DNP, the uptake of THP by both types of cell was concentration-dependent, and there were no significant differences in the apparent kinetic constants (Michaelis constant (K _m), maximum velocity (V _max) and V _max/K _m) for THP uptake between HL60 and HL60/THP cells. Additionally, THP transport was competitively inhibited by its analogue doxorubicin. The efflux of THP from HL60/THP cells was significantly greater than that from HL60 cells, and the release from both types of cell was completely inhibited by decreasing the incubation temperature to 0°C and by treatment with DNP in glucose-free medium. In contrast, the P-glycoprotein inhibitors verapamil and cyclosporin A did not inhibit THP efflux. However, genistein, which is a specific inhibitor of multidrug resistance-associated protein (MRP), increased the THP remaining in the resistant cells, and the value was approximately equal to that of the control group in the sensitive cells. These results suggest that THP is taken up into HL60 and HL60/THP cells via a common carrier by facilitated diffusion, and then pumped out in an energy-dependent manner. Furthermore, the accelerated efflux of THP by a specific mechanism, probably involving MRP, other than the expression of P-glycoprotein, resulted in decreased drug accumulation in the resistant cells, and was responsible, at least in part, for the development of resistance in HL60/THP cells. Received: 28 July 1994/Accepted: 10 February 1995     

异丙酚调控小儿急性髓系白血病细胞增殖、凋亡的机制研究

目的:研究异丙酚对急性早幼粒细胞白血病细胞HL60增殖、凋亡的影响，并探讨其机制。方法:不同浓度的异丙酚（0、1.5、2.2、3.2 μl/ml）处理的HL60细胞，分被标记为 C组、P1、P2、P3组；运用MTT法检测各组细胞的细胞抑制率；流式细胞术检测各组细胞的凋亡率；Western blot检测各组细胞中Cleaved PARP、cytochrome c的蛋白表达；比色法检测各组细胞caspase 3、caspase 9活性。结果:与C组相比，P1、P2、P3组细胞抑制率、细胞凋亡率、caspase 3和caspase 9活性及Cleaved PARP、cytochrome c的蛋白表达均显著升高（P<0.05），与P1组相比，P2、P3组细胞抑制率、细胞凋亡率、caspase 3和caspase 9活性及Cleaved PARP、cytochrome c的蛋白表达均显著升高（P<0.05），与P2组相比，P3组细胞抑制率、细胞凋亡率、caspase 3和caspase 9活性及Cleaved PARP、cytochrome c的蛋白表达均显著升高（P<0.05）。结论:异丙酚可抑制HL60细胞增殖并促进凋亡，其机制可能与上调Cleaved PARP、cytochrome c，激活caspase 3和caspase 9有关，将为异丙酚作为新药治疗急性早幼粒细胞白血病的开发提供依据。     

SLC7A11在急性髓系白血病患者中的表达及抑制HL-60细胞增殖的机制

目的:探讨SLC7A11 siRNA及Erastin对人急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）细胞株HL-60细胞活性的影响。方法:应用生物信息学方法分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)中AML患者样本的数据,比较SLC7A11不同表达水平患者的预后。利用实时荧光定量聚合酶联反应（quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白质印记法(Western-blot)检测SLC7A11在AML患者和缺铁性贫血（iron deficiency anemia,IDA）患者中mRNA和蛋白的表达水平。培养人AML细胞株HL-60,用病毒介导的siRNA转染HL-60细胞,建立SLC7A11基因沉默的HL-60细胞株(siSLC7A11),用Erastin和DMSO分别处理HL-60细胞。利用qRT-PCR和Western-blot方法检测HL-60细胞和siSLC7A11细胞中SLC7A11的mRNA和蛋白的表达水平。利用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况。结果:SLC7A11的mRNA和蛋白表达水平在AML患者中明显高于IDA患者(P＜0.05)。siSLC7A11细胞中SLC7A11的mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组(P＜0.05)。siSLC7A11细胞增殖率明显低于对照组(P＜0.05)。结论:SLC7A11在AML患者中表达增加,通过siRNA或Erastin抑制SLC7A11能明显抑制人AML细胞株HL-60细胞增殖,SLC7A11基因可能成为治疗AML的新靶点。     

全反式维甲酸和亚硒酸钠对HL-60细胞Rb基因的RNA表达及其产物磷酸化的影响

目的：观察全反式维甲酸（ＲＡ）和亚硒酸钠对ＨＬ６０的Ｒｂ基因的ＲＮＡ及其产物磷酸化的联合效应。方法：以ＨＬ６０细胞为实验对象，利用狭线杂交、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ和流式细胞仪进行研究。结果：狭线杂交实验表明ＲＡ和硒单独或联合都对Ｒｂ基因的ＲＮＡ无明显影响。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ结果显示：ＲＡ和硒可影响该细胞ＲＢ蛋白磷酸化与去磷酸化状态。在第４天０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ可使去磷酸化ＲＢ蛋白增加４７％；５．８μｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３可使磷酸化ＲＢ蛋白减少４９％，对去磷酸化ＲＢ蛋白仅轻度增加。联合后去磷酸化ＲＢ蛋白明显增加，较对照组增加了１２７％，明显高于两单独组。实验中ＲＢ蛋白磷酸化状态与细胞分化和细胞周期关系与文献报道一致。结论：ＲＡ和硒联用对ＨＬ６０细胞的ＲＢ蛋白产物去磷酸化作用比单独作用更强。加用硒有可能减少对ＲＡ的抗药性     

miR-127-3p通过靶向KIF3B抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭及迁移

目的:探讨miR-127-3p对卵巢癌细胞生物学行为的影响及其与KIF3B的关系。方法:选取SKOV3、HOSEpiC细胞。SKOV3细胞根据转染不同物质分为NC组、miR-NC组（miR-NC）、miR-127-3p组（miR-127-3p-mimics）、si-NC组（si-NC）和si-KIF3B组（si-KIF3B）。MTT评估增殖;Transwell分析迁移、侵袭;实时荧光定量PCR分析miR-127-3p、KIF3B mRNA含量;Western blot分析KIF3B蛋白表达。生物学、荧光素酶报告评估miR-127-3p与KIF3B的作用。结果:SKOV3细胞miR-127-3p水平低于HOSEpiC细胞（P＜0.01）,SKOV3细胞KIF3B蛋白、基因mRNA含量高于HOSEpiC细胞（P＜0.01）。与NC组、miR-NC组相比,48和72 h时miR-127-3p组细胞增殖、迁移和侵袭能力下降（P＜0.05）,与NC组、si-NC组相比,48和72 h时si-KIF3B组细胞增殖、迁移和侵袭能力下降（P＜0.05）。与NC、miR-NC组比较,miR-127-3p组KIF3B蛋白表达水平下降（P＜0.01）。与WT-KIF3B组相比,miR-127-3p+WT-KIF3B组细胞荧光素酶活性下降（P＜0.01）。结论:卵巢癌细胞低表达miR-127-3p,高表达KIF3B,miR-127-3p上调可能通过KIF3B抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移。     

1,25-dihydroxyvitamin D3 inhibits proliferation of human promyelocytic leukaemia (HL60) cells and induces monocyte-macrophage differentiation in HL60 and normal human bone marrow cells

1,25-dihydroxyvitamin D₃ induces monocyte-macrophage differentiation and inhibits proliferation of cells from the human promyelocytic leukaemia cell line HL60. Similarly human bone marrow progenitor cells differentiate preferentially along the monocyte-macrophage pathway when incubated in the presence of 1,25-dihydroxyvitamin D₃. We suggest that the inhibition of growth which occurs after addition of the vitamin to HL60 might be paralleled in vivo by inhibition of proliferation of leukaemic cells; also we speculate that the vitamin may be involved in the control of both monocyte-macrophage and osteoclast production in vivo.     

Alteration of polypeptide synthesis and composition during differentiation of human leukemia cell line HL60

Using two-dimensional gel electrophoresis, we have analyzed the polypeptide alteration of the human myeloid leukemia cell line HL60 during differentiation induced by dimethylsulfoxide (DMSO) and 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA). Three polypeptides increased in synthesis after DMSO treatment, while 5 polypeptides increased after TPA treatment. Most other polypeptides were synthesized at a reduced rate though their net amounts remained unchanged, indicating that myeloid differentiation was associated not only with an increased synthesis of a few specific polypeptides but also with overall depression of most other polypeptides. One of the early differentiation marker proteins (mol. wt approx. 20,000, pl approx. 6.0) of granulopoietic cells was increased specifically after DMSO treatment, while one of the monocyte specific marker proteins (mol. wt approx. 46,000, pl approx. 4.8) was detected after TPA treatment. But, the pattern of HL60 cells did not necessarily become similar to that of normal mature granulocytes after DMSO treatment, indicating that HL60 cell differentiation might be partial or incomplete.