LncRNA PTPRG-AS1通过靶向miR-5590-3p调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的研究

目的探讨LncRNA PTPRG-AS1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法以正常乳腺上皮细胞MCF-10A为对照,qRT-PCR法检测乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和BT549)中 LncRNA PTPRG-AS1 和 miR-5590-3p 表达。分别转染 si-LncRNA PTPRG-AS1、miR-5590-3p mimics、共转染si-LncRNA PTPRG-AS1与anti-miR-5590-3p至乳腺癌MCF-7细胞,用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法检测细胞中CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA PTPRG-AS1和miR-5590-3p的调控关系。结果与MCF-10A细胞比较,乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D和BT549)中LncRNA PTPRG-AS1表达升高,差异有统计学意义(P<0.05),miR-5590-3p表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。敲减LncRNA PTPRG-AS1或过表达miR-5590-3p后,MCF-7细胞增殖活性、迁移数、侵袭数及细胞中CyclinD1、MMP2和MMP9蛋白表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。LncRNA PTPRG-AS1靶向负调控miR-5590-3p。敲减miR-5590-3p逆转了敲减LncRNA PTPRG-AS1对MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论 LncRNA PTPRG-AS1可能靶向下调miR-5590-3p促进乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平检测及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34a-5p水平检测及临床意义。方法选取2011年3月-2014年8月义乌市中心医院宫颈癌患者154例为观察组,分别于手术前以及术后3～4周采集全血,另选健康体检者123例为对照组,体检时采血,测定其血清miR-329-3p和miR-34a-5p及癌胚抗原(CEA)表达水平。结果术前观察组miR-329-3p、miR-34a-5p水平低于对照组,CEA水平高于对照组(P0. 05);术后观察组miR-329-3p、miR-34a-5p水平高于术前观察组,CEA水平低于术前观察组(P0. 05);不同年龄、肿瘤最大径、肿瘤数目特征组中血清miR-329-3p、miR-34a-5p水平相近(P0. 05);而病理学分级越高、TNM分期越高、有淋巴血管间隙浸、有淋巴结转移、有复发,血清miR-329-3p、miR-34a-5p表达水平越低(P0. 05); CEA与miR-329-3p、miR-34a-5p呈负相关(P0. 05); miR-329-3p、miR-34a-5p两者AUC相近(P0. 05),两者诊断结宫颈癌的灵敏度、特异度相近(P0. 05); miR-329-3p、miR-34a-5p阳性组3年生存率及生存期均明显高于miR-329-3p、miR-34a-5p阴性组(P0. 01)。结论 miR-329-3p、miR-34a-5p在宫颈癌患者血清的表达量降低,miR-329-3p、miR-34a-5p在宫颈癌的发生发展过程中起抑制作用,miR-329-3p、miR-34a-5p高表达可提高宫颈癌患者预后; miR-329-3p、miR-34a-5p具有较高的灵敏度、特异度,可作为诊断宫颈癌的生物学标志物。     

宫颈癌患者血清miR-329-3p和miR-34 a-5p水平检测及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清miR-329-3 p和miR-34 a-5 p水平检测及其临床意义。方法选取2017年2月至2018年2月在鄂东医疗集团黄石市中心医院(湖北理工学院附属医院)手术切除的39例宫颈癌组织标本为研究对象。根据癌旁黏膜组织有无癌前病变将其分组。利用免疫组化对39例标本中的p 53、c-erbB-2、bax表达进行检测。结果 miR-329-3 p和miR-34 a-5 p在宫颈癌组织中表达水平明显低于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌低分化标本miR-329-3 p和miR-34 a-5 p表达水平明显低于分化较好组,差异有统计学意义(P<0.05)。有高危人乳头瘤病毒感染或淋巴转移的宫颈癌标本中miR-329-3 p和miR-34 a-5 p表达水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-329-3 p和miR-34 a-5 p可作为宫颈癌患者预后判断的重要参数指标,其对判断宫颈癌的发展有重要意义。     

干扰lncRNA RHPN1-AS1表达通过靶向miR-339-5p对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA PCNA1(lncRNA RHPN1)反义AS1(RHPN1-AS1)对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法:将si-NC(lncRNA RHPN1-AS1阴性对照组)、si-RHPN1-AS1(沉默lncRNA RHPN1-AS1组)、pcDNA(真核表达载体组)、pcDNA-RHP...     

咪唑安定联合miR-135a-5p影响宫颈癌细胞HeLa增殖 迁移及侵袭的机制研究

目的 探讨咪唑安定对宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移及侵袭的影响及分子机制。方法 以RPMI-1640培养基对HeLa细胞常规培养，分别用25、50、100μmol/L的咪唑安定处理，记为低、中、高剂量组，常规培养的细胞作为NC组；将miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞，记为anti-miR-135a-5p组、anti-miR-NC组；miR-135a-5p抑制剂及阴性对照转染至HeLa细胞后用100μmol/L的咪唑安定处理，记为anti-miR-135a-5p+高剂量组、anti-miR-NC+高剂量组。CCK-8检测细胞活性；Western blot法检测蛋白表达；克隆形成实验检测细胞克隆；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-135a-5p表达水平；Transwell检测细胞迁移和侵袭。结果 不同剂量咪唑安定处理后，HeLa细胞活性、CyclinD1、MMP2、MMP9表达、细胞克隆、迁移和侵袭数量、miR-135a-5p表达降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。下调miR-135a-5p降低HeLa细胞活性、MMP2、CyclinD1、M...     

miR-7159-5p介导TRIM26表达对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:观察微小RNA(miRNA)-7159-5p在胃癌组织中的表达,探讨其对胃癌细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制。方法:收集湖北六七二中西医结合骨科医院2018年3月至2019年11月手术切除的29例胃癌患者的癌组织和癌旁组织。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-7159-5p在癌组织和癌旁组织、癌细...     

miR-181b靶向鼠双微体-2对宫颈癌Caski细胞侵袭、迁移的影响及机制

目的探讨miR-181b靶向鼠双微体-2 (MDM2)对宫颈癌Caski细胞侵袭、迁移的影响及机制。方法应用RTPCR检测宫颈癌组织miR-181b mRNA表达,RT-PCR及免疫组化法检测MDM2表达。用miRcramble、miR-181b mimics、阴性对照siRNA (NC组)及靶向抑制MDM2的si NRA (si-MDM2)转染人宫颈鳞癌Caski细胞,通过转染miR-181b mimics后MDM2表达及转染si-MDM2后miR-181b表达检测初步证实miR-181b与MDM2的靶向关系,miR-NC、Wt-MDM2+miR-181b mimics和Mut-MDM2+miR-181b mimics共转染后双荧光素酶活性检测确定MDM2是否为miR-181b的靶基因。应用Transwell小室检测过表达miR-181b或抑制MDM2表达后Caski细胞侵袭及迁移能力,应用Western blotting检测MDM2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、STAT3及p-STAT3的蛋白表达。结果 miR-181b在宫颈癌中的表达显著低于正常宫颈组织(P0. 05),MDM2在宫颈癌中的表达显著高于正常宫颈组织(P0. 05)。MDM2是miR-181b的靶基因。miR-181b mimics和si-MDM2均可抑制Caski细胞侵袭及迁移能力,下调MMP-2、MMP-9和p-STAT3的蛋白表达(P0. 05)。结论 miR-181b可靶向MDM2抑制宫颈癌Caski细胞侵袭及迁移能力,机制与下调STAT3信号有关。     

miR-627-3p靶向调控CK2β对上皮性卵巢癌细胞增殖凋亡 侵袭的影响及机制研究

目的 探讨miR-627-3p靶向调控CK2β对上皮性卵巢癌细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及潜在的作用机制。方法 采用qRT-PCR和Western blot检测正常卵巢上皮细胞HOSE和卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2及OVCAR3中miR-627-3p和CK2β的表达；采用双荧光素报告基因实验验证miR-627-3p和CK2β之间的靶向关系；建立miR-627-3p过表达及miR-627-3p和pcDNA-CK2β共转染的SKOV3细胞株，采用CCK-8法检测细胞活性，采用流式细胞术检测细胞凋亡率，采用Transwell法检测细胞侵袭能力。结果 HOSE组、SKOV3组、ES-2组及OVCAR3组miR-627-3p的表达水平分别为(1.00±0.12)、(0.21±0.04)、(0.41±0.07)及(0.32±0.06),差异有统计学意义(F=183.037,P<0.05)。与正常卵巢上皮细胞HOSE相比，卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2及OVCAR3中miR-627-3p表达显著降低，CK2β表达显著增加，差异均有统计学意义(均P<0.05);CK2β是miR-627...     

miR-377在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、侵袭和EMT的影响

目的 观察miR-377在宫颈癌组织和细胞中的表达,探讨miR-377对宫颈癌发展的影响。方法 检测miR-377在宫颈癌组织和Hela、SiHa和Caski细胞、H8细胞中的表达;过表达或下调miR-377后,CCK-8、细胞侵袭实验、Western blot和细胞划痕愈合实验分别检测miR-377对Hela细胞增殖、侵袭、上皮间质转化(EMT)和迁移能力的影响。下调CUL4A表达后,检测Hela细胞增殖、侵袭、迁移和EMT;Western blot检测过表达CUL4A对cAMP/PKA通路的影响。结果 miR-377在宫颈癌组织的表达(0.58±0.24)低于癌旁正常组织(1.05±0.35),miR-377在宫颈癌Hela、Siha和Caski细胞中的表达(0.36±0.09、0.72±0.18、0.75±0.37)低于H8细胞(1.43±0.28),差异均有统计学意义(P<0.01)。过表达miR-377抑制了Hela细胞增殖、侵袭、迁移与EMT,下调miR-377则起到相反作用。miR-377靶向和负调控CUL4A,下调CUL4A抑制了Hela细胞发展;过表达CUL4A...     

miR-142-3p抑制甲状腺癌细胞增殖的研究

目的 研究甲状腺癌细胞株中miR-142-3p的表达水平,探讨miR-142-3p不同表达水平对甲状腺癌细胞增殖能力的影响.方法 采用RT-PCR检测人甲状腺癌细胞K1、TPC-1、BCPAP和人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中miR-142-3p的表达水平.观察K1细胞分别转染miR-142-3p mimics,...     

多发性骨髓瘤患者血清中miR-223-3p和miR-140-5p表达水平与肾功能损害的相关性分析

目的 探讨血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平与多发性骨髓瘤患者肾功能损害的相关性。方法 选取本院于2019年7月—2022年6月收治的165例多发性骨髓瘤患者,按照入院时诊断结果中存在肾损伤与未见肾损伤分为观察组与对照组。比较2组血清中血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白水平以及胱抑素C(Cys-C),检测血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平,分析血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平与多发性骨髓瘤患者肾功能损害的相关性。结果 与对照组比较,观察组患者血清miR-223-3p和miR-140-5p表达水平均降低(P<0.05),血清中Scr、BUN、24 h尿蛋白以及Cys-C水平升高(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤细胞形态、患者血清miR-223-3p、miR-140-5p表达水平差异无统计学意义(P>0.05),低肿瘤分化及与Ⅲ期患者血清miR-223-3p、miR-140-5p表达水平低于高、中分化及Ⅰ期、Ⅱ期患者(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清miR-22...     

宫颈癌患者血清miR-3607-3p水平与人乳头瘤病毒感染相关性

目的：探究宫颈癌患者血清中微小RNA-3607-3p(miR-3607-3p)表达水平及其与人乳头瘤病毒(HPV)感染相关性。方法：选取2018年8月-2020年2月本院行宫颈活检的74例患者临床资料,根据病理检查结果分为宫颈炎患者18例(宫颈炎组)、宫颈鳞状上皮内病变(SIL)患者31例(SIL组)和宫颈癌患者25例(宫颈癌组)。检测3组血清miR-3607-3p水平及宫颈脱落细胞中HPV-DNA、HPV E6/E7 mRNA表达,Spearman分析miR-3607-3p与HPV感染的相关性;多因素lLogistic回归分析影响宫颈癌发生的危险因素。结果：血清中miR-3607-3p水平宫颈炎组(0.98±0.16)、SIL组(0.64±0.15)、宫颈癌组(0.34±0.13)依次降低,HPV阳性表达率、HPV E6/E7 mRNA高载量率依次升高(均P<0.05)。宫颈癌患者血清miR-3607-3p水平与HPV阳性表达、HPV E6/E7 mRNA表达呈负相关(r=-0.541、-0.492,P=0.000),miR-3607-3p水平是宫颈癌发生的保护因素,HPV阳性...     

SIRT1调控Nrf2信号通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响

目的 探讨SIRT1调控Nrf2信号通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响.方法 选取宫颈癌细胞株Hela细胞,将Hela细胞株分为:空白对照组、SIRT1阴性对照组(negative control group,NC组)和SIRT1抑制组;采用Western Blot和qRT-PCR法检测各组细胞SIRT1的表达...     

卵巢癌患者血清miR-124-3p和miR-150检测的临床意义分析

目的探讨卵巢癌患者血清miR-124-3p和miR-150检测水平变化情况及临床意义。方法选取2016年1月-2017年1月该院肿瘤科收治的68例卵巢癌患者作为研究组,另选取同期在该院体检健康者68例作为对照组。采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)方法检测所有受试者血清miR-124-3p和miR-150表达水平,分析二者表达与卵巢癌病理特征之间的关系,进一步分析二者对卵巢癌患者生存时间及预后的影响。结果研究组血清miR-124-3p和miR-150表达水平明显低于对照组(P0. 05); miR-124-3p和miR-150表达与年龄、病理类型、肿瘤直径均无相关性(P0. 05),与FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移密切相关(P0. 05); miR-124-3p高表达组预后5年存活率为40. 54%,低表达组预后5年存活率为22. 58%,高表达组存活率高于低表达组(χ2=4. 541,P=0. 033); miR-150高表达组预后5年存活率为42. 86%,低表达组预后5年存活率为27. 27%,高表达组存活率高于低表达组(χ2=4. 669,P=0. 031);年龄与卵巢癌预后无关(P 0. 05); FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移、miR-124-3p、miR-150是影响卵巢癌患者预后的危险因素(P0. 05)。结论 miR-124-3p和miR-150在卵巢癌患者血清中均表达下调,并与FIGO分期、肿瘤分级、淋巴结转移有关,可作为卵巢癌患者预后的检测指标。     

miR-203a-3p靶向调控VEGF-C表达对卵巢癌恶性生物学特征的影响

目的 探究miR-203a-3p通过靶向调控血管内皮生长因子C(VEGF-C)表达影响卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的机制.方法 收集2019年2月至10月在清华大学第一附属医院就诊的20例卵巢癌患者手术切除的癌组织及对应癌旁组织.使用实时荧光定量聚合酶链式反应检测20例手术切除的卵巢癌组织及对应癌旁组织中miR-203a-3p的表达.体外培养SKOV3细胞,将miR-203a-3p和pc-VEGF-C单独或者共同转染于SKOV3细胞,实验分为:Control组、miR-203a-3p组、pc-VEGF-C组和miR-203a-3p+pc-VEGF-C组.在miRNA靶向数据库TargetScanHuman中,对miR-203a-3p与VEGF-C的靶向关系进行预测,并利用双荧光素酶报告基因实验对其靶向关系进行验证;利用克隆形成实验检测各组SKOV3细胞的克隆形成率以观察其体外增殖活性,并利用Western blot实验检测增殖标志蛋白PCNA相对表达水平;利用划痕实验检测各组24h内划痕愈合率以观察其迁移能力;Transwell实验检测侵袭能力;Western blot检测侵袭、迁移相关蛋白表达.结果 卵巢癌组织中miR-203a-3p表达(0.47±0.10)较正常癌旁组织中miR-203a-3p表达(0.99±0.09)显著下调(t=17.112,P<0.05).miR-203a-3p与VEGF-C存在可结合的位点,相比Control组,miR-203a-3p组VEGF-C蛋白相对表达水平、荧光素酶活性显著降低(q值分别为12.430、5.047,P<0.05);miR-203a-3p组卵巢癌细胞克隆形成率、PCNA蛋白相对表达水平均显著降低(q值分别为11.773、12.246,P<0.05);miR-203a-3p组单位面积细胞侵袭数和细胞愈合率均显著降低(q值分别为6.258、5.325,P<0.05);miR-203a-3p组E-cadherin表达显著升高,Vimentin、N-cadherin表达均显著降低(q值分别为4.082、7.746、7.570,P<0.05).结论 miR-203a-3p可以通过靶向调控V EG F-C表达抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移,其机制可能与抑制增殖相关蛋白和调控上皮间质化过程相关.     

miR-424-5p靶向KIF23调控细胞周期并抑制肝癌细胞的增殖和迁移能力

目的 探究miR-424-5p、KIF23对肝癌细胞的作用机制,为探索新的肝癌靶向治疗途径提供思路。方法 实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-424-5p的表达水平,生物信息学技术和萤光素酶报告基因验证KIF23与miR-424-5p在肝癌中的结合关系。qRT-PCR和蛋白免疫印迹(western blot, WB)分别检测KIF23 mRNA和蛋白表达水平。CCK8实验、克隆形成实验、迁移实验和流式细胞术评估miR-424-5p和KIF23对肿瘤细胞的增殖、迁移能力,以及对细胞周期进展的影响。结果 与正常肝组织比较,miR-424-5p在肝癌组织和细胞中显著低表达(P<0.05);KIF23是miR-424-5p的直接下游靶点,在肝癌组织和细胞中的表达显著上调(P<0.05)。过表达KIF23会促进肝癌细胞增殖和迁移,并将细胞周期阻滞于G2/M期。过表达miR-424-5p能显著减弱过表达KIF23对细胞增殖、迁移和细胞周期分布的影响(P<0.05)。结论 miR-424-5p可以通过靶向下调KIF23,从而抑制肝癌细胞增殖和迁移能力,影响细胞周...     

lncRNA SNHG3靶向调控miR-340对卵巢癌细胞上皮间质转化的影响

目的 探究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因3(lncRNA SNHG3)对卵巢癌细胞恶性生物学行为的调控机制。方法 体外培养人卵巢癌细胞株(SKOV3、A2780、SW626和OVCAR3)和正常卵巢上皮细胞(HOSEpiC),将对数生长期的OVCAR3细胞分为对照组、si-NC组、SNHG3沉默组、miR-NC组、miR-340-5p过表达组、SNHG3沉默+anti-miR-NC组、SNHG3沉默+anti-miR-340-5p组。RT-qPCR检测细胞中lncRNA SNHG3、miR-340-5p表达;双荧光素酶实验验证SNHG3和miR-340-5p的调控作用;CCK-8法、划痕实验和Transwell小室实验检测各组细胞增殖、迁移、侵袭能力;Western blot检测各组细胞中上皮间质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)相关蛋白[E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(VIM)]表达。裸鼠成瘤实验检测沉默SNHG3的OVCAR3细胞体内生长情况;免疫组织化学法和RT-...     

SLC4A11通过JAK信号通路对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨溶质转运家族4成员11蛋白(SLC4A11)在卵巢癌增殖、迁移和侵袭中的生物学作用机制。方法：RT-qPCR检测卵巢癌细胞中SLC4A11表达。将SKOV3细胞分为对照组(转染siRNA-NC序列)、SLC4A11-siRNA组(干扰SLC4A11表达)和SLC4A11-siRNA+JAK组(干扰SLC4A11表达+激活JAK信号通路)。采用CCK-8、伤口愈合实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。RT-qPCR和Western blot检测Janus激酶2(JAK2)和信号传导及转录激活因子3(STAT3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达。结果：SLC4A11在卵巢癌组织中高表达(P<0.05)。SLC4A11-siRNA组SKOV3细胞中p-JAK2/JAK2(0.286±0.048)、p-STAT3/STAT3(0.571±0.042)、Bcl-2(0.335±0.040)均低于对照组(1.001±0.093、1.004±0.089、1.005±0.142),也低于SLC4A11-siRNA+JAK组[p-JAK2/JAK2(1.001±0...     

MTSS1基因对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制研究

目的探讨MTSS1基因在骨肉瘤组织中的表达情况,对骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其机制。方法 qRT-PCR、Western blot和免疫组化染色分别检测骨肉瘤组织及其对应的癌旁组织样本中MTSS1的mRNA和蛋白表达水平。构建MTSS1表达载体在骨肉瘤细胞株MG63中过表达MTSS1,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况;通过Transwell细胞迁移和侵袭实验分别检测对细胞迁移和侵袭能力的影响;检测MMP2和MMP9的表达情况。结果骨肉瘤组织中MTSS1 mRNA和蛋白表达显著低于癌旁组织。MTSS1高表达能够抑制MG63细胞的增殖,抑制细胞凋亡。MTSS1表达上调显著降低细胞的迁移和侵袭能力。MG63细胞中过表达MTSS1可以降低MMP2和MMP9的表达。结论 MTSS1基因在骨肉瘤中低表达,MTSS1能够降低MG63细胞的增殖并促进细胞凋亡,可能通过抑制MMP2和MMP9的表达调控骨肉瘤的侵袭和转移。