靶向高通量测序在非小细胞肺癌中的临床应用

  目的  对8种与非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）个性化治疗高度相关的驱动基因进行检测,分析基因变异与临床病理特征的关系。  方法  收集天津医科大学肿瘤医院2016年6月至2017年8月212例NSCLC患者样本,对EGFR、KRAS、BRAF、ALK、MET、ERBB2、ROS1、RET 8种基因进行高通量测序。  结果  8种基因中EGFR基因变异率高达52.8%,其次为KRAS（8.5%）、ALK（8.0%）、ERBB2（6.1%）、MET（3.8%）、BRAF（1.4%）、RET（0.9%）、ROS1（0.9%）,75%样本检出至少1个驱动基因变异,驱动基因变异间呈现强烈互斥。最常见的EGFR突变为19外显子缺失和L858R突变,EGFR T790M突变与前面两个突变位点伴随出现。19外显子缺失患者携带非EGFR T790M突变比例低于L858R突变患者携带非EGFR T790M突变比例（P=0.04）。15.2%EGFR突变伴EGFR扩增,携带EGFR扩增且EGFR突变率 > 40%患者比例高于无EGFR扩增且EGFR突变率 > 40%患者（P < 0.01）。女性、不吸烟、腺癌患者易发生EGFR特别是EGFR敏感突变（P < 0.01）。肺腺癌（P=0.013）、临床分期晚（P=0.048）、淋巴结转移（P=0.027）患者携带EGFR扩增比例高。男性（P=0.009）、左侧肺癌（P=0.048）,吸烟患者（P=0.037）KRAS突变发生率较高。携带非KRAS突变、ALK融合的患者更年轻（P=0.005,P=0.031）,而携带KRAS突变患者年龄较高（P=0.055）。  结论  高通量测序可同时高效检测NSCLC患者中8种与靶向治疗相关驱动基因的变异谱,为临床医生的个体化诊疗提供参考,以多基因为基础的高通量测序为NSCLC诊疗提供更多的可能性。      

辽宁沈阳地区非小细胞肺癌EGFR基因突变分析

目的:探讨辽宁沈阳地区非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变情况及其与临床病理特征的关系。方法:采用扩增耐突变系统（Amplification Refractory Mutation System,ARMS）检测辽宁沈阳地区471例NSCLC患者EGFR基因第18,19,20及21外显子突变情况。结果:471例NSCLC患者共检出EGFR突变253例（53.7%）,其中19缺失和L858R突变占总突变数的42.3%,51.8%。女性患者突变率67.9%明显高于男性（37.4%）,两者之间差异有统计学意义（P=0.000）。腺癌患者突变率57.2%明显高于非腺癌患者（18.6%）,差异有统计学意义（P=0.000）。结论:辽宁沈阳地区NSCLC患者EGFR突变多见于女性,腺癌患者,突变类型以19缺失和21外显子的L858R突变为主。     

中国新疆维吾尔族人群中肺癌驱动基因的表达

背景与目的：肺癌的发病率和肿瘤相关死亡率居当前世界各地恶性肿瘤的首位。肺癌亦存在多种驱动基因。各民族间的差异反映出肺癌的不同基因突变存在差异。该研究旨在探讨新疆维吾尔族患者中肺癌驱动基因的表达状况。方法：收集维吾尔族肺癌患者组织标本43例,采用扩增受阻突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)检测EGFR基因表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测K-ras、ALK、ROS1、BRAF及PIK3CA基因表达,分析肺癌驱动基因突变与新疆维吾尔族肺癌患者临床病理特征之间的相关性。结果：43例标本中,EGFR基因突变率为11.63%,其中腺癌及鳞癌EGFR基因突变检出率分别为26.67%和4.76%;大细胞癌、腺鳞癌及小细胞肺癌均未测出EGFR基因突变。肺腺癌患者EGFR基因突变率为26.67%,明显高于非腺癌者的3.57%,差异有统计学意义(P=0.024)。K-ras12/13杂合突变6例,突变检出率为16.28%(6/43);PIK3CA杂合突变2例,突变检出率为4.65%(2/43)。1例发生EGFR基因与K-ras基因同时突变。维吾尔族肺癌患者EGFR基因突变与年龄、性别、吸烟状况、TNM分期、ECOG评分均无关。43例标本中均未见ALK、ROS1融合基因及BRAF基因突变。结论：与亚洲人群相比,新疆维吾尔族肺癌患者EGFR突变率较低,K-ras突变率高,类似于欧美高加索人群的突变特点。     

非小细胞肺癌ROS1突变与EGFR突变及临床病理特征的关系

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中ROS1融合突变与表皮生长因子受体（EGFR）突变及临床病理特征的关系。方法 采用实时荧光定量PCR（QPCR）检测2014年12月至2017年12月收治的3487例中国西北地区NSCLC患者ROS1基因的突变情况，同时采用ARMS法检测ROS1基因突变患者的EGFR基因突变情况，分析ROS1和EGFR共突变患者的临床病理特征。结果 3487例NSCLC患者中，ROS1基因突变54例（1.5％）。ROS1基因突变与年龄、性别、吸烟史、病理类型和临床分期有关（P＜0.05）。54例ROS1融合基因突变患者中有3例（5.6％）同时存在EGFR基因突变，其中19外显子缺失突变（19-del）2例，L858R突变1例。3例ROS1突变均为突变体2型（R2）。结论 中国西北地区NSCLC患者ROS1融合基因突变率为1.5％，与EGFR基因突变可以共存。     

非小细胞肺癌十基因突变联合检测分析

目的：探讨运用扩增阻滞突变系统(Amplification Refractory Mutation System, ARMS)法检测EGFR、ALK、ROS1、RET、KRAS、NRAS、PIK3CA、BRAF、HER2和MET十基因在非小细胞肺癌的突变情况,分析其与临床病理的关系,探索十基因突变联合检测的临床应用价值。方法：收集2019年5月至2019年10月在四川省肿瘤医院病理确诊为非小细胞肺癌患者406例,其中石蜡包埋样本400例,细胞涂片6例,采取柱提法提取DNA和RNA,突变检测采用ARMS法。结果：非小细胞肺癌十基因联合检测的总突变频率为73.2%（297/406）,各驱动基因突变分布为：EGFR：51.0%（207/406)、KRAS：9.6%（39/406）、ALK融合：6.2%（25/406)、ROS1融合：2.5%（10/406）、RET融合 ：2.2%（9/406）、NRAS：0.2%（1/406）、PIK3CA：2.2% （9/406）、BRAF：1.0% （4/406）、HER2：2.2% （9/406）、MET 14外显子跳跃：0.7% （3/406）。肺腺癌EGFR突变频率高于肺鳞癌;女性患者EGFR与HER2 20ins突变频率高于男性,男性患者KRAS突变频率高于女性;年龄低于60岁的患者ROS1突变频率高于60岁以上的患者。十基因突变率在原发灶和转移灶之间无差异,冰冻后样本突变检出率高于其他类型样本。另外在30例样本中检出双突变,突变类型为18种,突变率达到7.4%;57%的双突变样本来源于初诊患者,没有观察到独特的组织病理特征。双突变患者在年龄和病理组织学分型上与单突变患者无差异,但易发生于女性患者。结论：ARMS法非小细胞肺癌十基因联合检测可一次获得更多基因突变信息,为分子靶向用药提供更加全面的指导信息,对于临床取材量少标本意义重大,多基因联合检测提供的共突变信息能够更全面地指导临床治疗。     

肺腺癌患者驱动基因表达及生存分析

目的 检测晚期肺腺癌患者肿瘤组织中驱动基因表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)突变和棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule associated protein like 4-anaplasiticlymphoma kinase,EML4-ALK)融合状态,并分析其与生存的相关性.方法 通过过扩增受阻突变系统(amplificationrefractory mutation system,ARMS) PCR方法检测74例晚期肺腺癌患者中EGFR基因突变状态,荧光原位杂交(fluo-rescence in situ hybridization,FISH)方法检测ALK基因融合状态,分析EGFR基因突变率与性别、吸烟史的相关性,EGFR基因突变和ALK基因融合对生存的影响.结果 肺腺癌患者中EGFR基因突变率分别为40.5％ (30/74),ALK基因融合6.8％ (5/74).EGFR基因外显子18、19、20、21的突变率分别为1.4％ (1/74)、20.3％ (15/74)、1.4％ (1/74)、17.6％ (13/74),肺腺癌患者中女性EGFR基因突变高于男性(P=0.007),但未见与吸烟史有明显相关(P =0.099).EGFR基因突变和ALK基因融合的患者接受靶向治疗后有明显的生存优势(P=0.007).结论 肺腺癌患者中EGFR基因19和21外显子存在较高的突变率,女性患者中尤为明显,针对驱动基因靶向治疗的患者有明显的生存优势.     

四川地区非小细胞肺癌患者EGFR基因突变分型与临床病理特征的相关性分析

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者EGFR基因突变状态及其与临床病理特征的关系。方法 收集2015年1月至2017年12月成都市第三人民医院确诊的NSCLC病理标本203例,其中石蜡切片113例,新鲜组织41例,胸腔积液49例。采用突变扩增阻滞系统（ARMS）-Taqman探针法检测EGFR基因外显子突变状态,分析其与临床病理特征的关系。采用Logistic回归分析影响NSCLC患者发生EGFR突变的因素。结果 203例NSCLC患者中,有97例检测到EGFR突变（47.8％）,其中TKIs药物敏感性突变82例（L858R突变44例,19-del突变35例,G719C/G719S突变1例,L861Q/S768I突变2例）,TKIs耐药性突变7例,另有8例为多位点突变。多位点突变中携带T790M突变率高（87.5%）,以男性、Ⅳ期、腺癌患者为主。EGFR突变主要发生在女性、无吸烟史、腺癌患者;19-del和L858R突变在女性中占的比例更高,分别为57.1％和54.5％,而其他突变类型在男性中占的比例更高（72.2％）。Logistic回归分析显示,无吸烟史患者的EGFR突变率更高（HR=4.146,95%CI：1.802～9.536）。结论 四川地区NSCLC患者EGFR基因突变以L858R和19-del突变为主,女性、无吸烟史、肺腺癌患者更易发生EGFR突变,吸烟状态是预测EGFR突变的独立因素。     

非小细胞肺癌BRAF突变及靶向治疗的研究进展

鼠类肉瘤病毒癌基因同源物B1（BRAF）基因是非小细胞肺癌（NSCLC）的驱动基因之一,在NSCLC中突变率为0.5％～4.9％,其中V600E突变类型占到一半以上。BRAF突变多见于女性、肺腺癌患者,亚裔人群中突变率相对较低。BRAF突变可与其他基因突变,如EGFR、K-Ras突变共存,但其临床意义尚不清楚。全球NSCLC患者数量庞大,尽管BRAF突变率在NSCLC中较低,低突变率基因及其靶向治疗的研究仍然相当重要。目前BRAF抑制剂治疗NSCLC正在临床试验中。本文就NSCLC中BRAF突变及靶向治疗的研究进展进行综述。     

存在驱动基因突变肺鳞癌患者的临床病理特征及预后分析

背景与目的表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）、间变淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase, ALK）以及KRAS基因是非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）常见的驱动基因。多项临床研究已证实,EGFR敏感突变及棘皮动物微管相关类蛋白4-间变淋巴瘤激酶（echinoderm microtubule-associated protein like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK）基因重排的晚期肺腺癌患者,一线治疗选择靶向药物优于化疗,其在总缓解率（overall response rate, ORR）、无进展生存期（progression-free survival, PFS）及生活质量方面均有明显优势。然而,在肺鳞癌患者中,目前尚无明确的基因检测位点及靶向药物来指导临床治疗。本研究旨在分析肺鳞癌患者EGFR、ALK以及KARS基因的突变状态,以及相关的临床病理特征,从而为今后的治疗提供相应指导。方法回顾性分析已行相关驱动基因检测的肺鳞癌患者90例,利用突变扩增阻滞系统（ampliifcation refractory mutation system, ARMS）的方法进行EGFR及KRAS基因检测,荧光原位杂交（fluorescencein situ hybridization, FISH）技术进行ALK基因融合检测。结果90例患者均进行了EGFR及KRAS基因检测,8例患者为EGFR基因突变（8.8%）;2例患者为KRAS基因突变（2.2%）;18例患者通过FISH方法进行了ALK基因融合检测,1例患者存在EML4-ALK基因融合（5.6%）。女性患者的EGFR基因突变率高于男性（P=0.022）。EGFR突变及野生型患者在病理分期（P=0.042）及分化程度（P=0.003）上均有差异。以胸膜为首发转移部位的EGFR突变患者比率高于EGFR野生型患者（P=0.013）。靶向治疗与化疗对EGFR突变患者的PFS无影响（P=0.607）。结论 ALK基因融合患者应用靶向治疗后可获得理想疗效。     

非小细胞肺癌中c-Met、EGFR、K-Ras和EML4-ALK基因的检测分析

的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中肝细胞生长因子受体（c-Met）基因扩增与临床病理特征的关系以及分析c-Met与EGFR、K-Ras和EML4-ALK驱动基因的相关性。方法 采用荧光原位杂交技术（FISH）检测108例NSCLC患者的c Met基因扩增情况,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测EML4-ALK融合基因及c-Met基因表达量,聚合酶链扩增反应（PCR）及直接测序法检测EGFR和K-Ras基因突变情况,并分析c-Met基因与临床病理特征的关系及其与EGFR、K-Ras和EML4-ALK驱动基因的关系。结果 NSCLC中c-Met基因扩增率为1.85％,其在吸烟和非吸烟患者中扩增率分别为2.94％和1.35％;腺癌c-Met基因扩增率为1.23％,鳞癌未发现c-Met基因扩增;仅Ⅰ期和Ⅲ期中分别有1例c-Met基因扩增。NSCLC中EGFR、K-Ras基因突变及EML4-ALK融合基因的阳性率分别为42.59％、5.56％和12.04％。结论 FISH法对c-Met基因扩增检出率与qRT-PCR检测的c-Met基因表达水平基本一致;c-Met基因扩增与EGFR、K-Ras突变及EML4-ALK融合基因之间几乎是不共存的,c-Met扩增与NSCLC患者年龄、性别、吸烟状态、肿瘤组织类型及临床分期无关。     

基于cSMART技术检测ctDNA驱动基因突变指导非小细胞肺癌精准治疗的疗效研究

目的  探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）基于环化单分子扩增和重测序技术（cSMART）检测循环肿瘤DNA（ctDNA）驱动基因突变，并指导其治疗的疗效。方法 选取2016年7月至2018年12月于辽宁省肿瘤医院治疗的NSCLC患者107例，采用cSMART技术检测患者血清中EGFR，ALK，KRAS，BRAF，PIK3CA，ERBB2，ROS1，RET和MET  共9种ctDNA驱动基因的突变情况。每2~4个治疗疗程后评估9种ctDNA驱动基因突变分布，并基于NCCN指南和9种基因检测结果指导患者用药。将生存信息完整且完成后续治疗的57例NSCLC患者，按照是否遵循指导方案治疗，分为规范治疗组（n=39）和非规范治疗组（n=18），比较其疗效。 结果 基于cSMART技术检测ctDNA 9种驱动基因突变78例，无突变28例。驱动基因突变的78例患者中，单基因突变27例，双基因突变24例，3基因突变11例，4基因突变5例，5基因突变5例。106例NSCLC患者无突变26人次，累计突变160人次，其中EGFR突变61人次，ALK突变11人次（包括ALK融合和点突变），TP53和KRAS突变分别为54人次和26人次，罕见突变PIK3CA发生基因突变5人次， BRAF、MET和ERBB2发生基因突变各1人次。规范治疗组患者的中位无进展生存期较非规范治疗组患者长（10.0个月vs 5.5个月，χ2=6.420，P=0.011）。结论 基于cSMART技术测定ctDNA识别NSCLC驱动基因突变简便、无创，其中EGFR及ALK为NSCLC常见驱动突变，针对其进行靶向治疗疗效较好。     

ALK融合基因阳性的晚期非小细胞肺癌靶向治疗进展

近十年来，晚期非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）在治疗方面出现重大的模式转变。关键致癌性突变（如驱动基因突变和染色体重排）的存在，使得靶向治疗相比传统的细胞毒性化学疗法显示出更高的敏感性。2007年间变性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）基因与棘皮动物微管相关蛋白样-4（echinoderm microtubule-associated protein-4，EML4）基因融合突变首次在NSCLC患者中被发现。随后研究证实，ALK-EML4融合突变阳性的NSCLC（ALK+NSCLC）显示出对克唑替尼治疗的敏感性。随着后续一系列靶向治疗新药的研发，将ALK+NSCLC靶向治疗推向高潮。本综述回顾ALK+NSCLC的分子生物学发病机制、流行病学特征及检测方法，汇总其抑制剂的重要临床试验结果，并解读ALK+NSCLC抑制剂耐药机制及合并脑转移的最新研究进展。     

Overcoming erlotinib resistance with tailored treatment regimen in patient‐derived xenografts from naïve Asian NSCLC patients

Overall benefits of EGFR‐TKIs are limited because these treatments are largely only for adenocarcinoma (ADC) with EGFR activating mutation. The treatments also usually lead to development of resistances. We have established a panel of patient‐derived xenografts (PDXs) from treatment naïve Asian NSCLC patients, including those containing “classic” EGFR activating mutations. Some of these EGFR‐mutated PDXs do not respond to erlotinib: LU1868 containing L858R/T790M mutations, and LU0858 having L858R mutation as well as c‐MET gene amplification, both squamous cell carcinoma (SCC). Treatment of LU0858 with crizotinib, a small molecule inhibitor for ALK and c‐MET, inhibited tumor growth and c‐MET activity. Combination of erlotinib and crizotinib caused complete response, indicating the activation of both EGFR and c‐MET promote its growth/survival. LU2503 and LU1901, both with wild‐type EGFR and c‐MET gene amplification, showed complete response to crizotinib alone, suggesting that c‐MET gene amplification, not EGFR signaling, is the main oncogenic driver. Interestingly, LU1868 with the EGFR L858R/T790M, but without c‐met amplification, had a complete response to cetuximab. Our data offer novel practical approaches to overcome the two most common resistances to EGFR‐TKIs seen in the clinic using marketed target therapies.     

山东地区非小细胞肺癌分子靶向治疗驱动基因表达情况及临床特征分析

背景与目的分子生物学靶向治疗已逐渐成为非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）的一个重要治疗手段,本研究通过分析山东地区NSCLC多种驱动基因表达情况及临床病理特征,为筛选分子靶向治疗目标人群提供理论依据。方法采用荧光探针PCR法检测表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）、棘皮动物微管相关蛋白4-间变性淋巴瘤激酶（echinoderm microtubule-associated protein-like 4-anaplastic lymphoma kinase, EML4-ALK）、肉瘤致癌因子-受体酪氨酸激酶（ROS proto-oncogene 1, receptor tyrosine kinase, ROS1）、鼠类肉瘤病毒癌基因（Kirsten rat sarcoma viral oncgene, KARS）基因表达情况,回顾性分析阳性病例的临床病理特征。结果 EGFR基因突变阳性率为36.70%,主要为19、21外显子突变,突变人群主要为女性、腺癌、不吸烟患者,组间差异有统计学意义。EML4-ALK融合基因重排阳性率为9.37%。人群特征主要为60岁以下不吸烟人群,组间差异有统计学意义,基因突变与病理类型和性别间无明显差异。ROS1融合基因重排阳性率为3.67%,均为60岁以下患者,组间差异有统计学意义。23份病例标本开展KRAS基因检测,阳性标本数2例,阳性率为8.70%。2份阳性标本均为60岁以上病例,男女各占1例,病理类型均为腺癌,均无吸烟史。此外,未发现有两种基因同时突变的病例。结论 EGFR、EML4-ALK、ROS1、KARS基因在NSCLC患者中存在较高的突变率,且具有不同的人群特征,在选择靶向治疗人群中具有重要意义。     

c-MET通路和抑制剂在非小细胞肺癌中的研究进展

c-MET被认为是继表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变和间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因融合之后,非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)又一个重要的驱动基因.MET的激活包括突变、扩增和蛋白质过表达,是NSCLC潜在的治疗靶点,并提示与预后相关.临床证据表明,MET既可以作为肺癌的原发致癌驱动基因,也是EGFR靶向治疗获得性耐药的原因之一.本文主要对c-MET通路在NSCLC中的活性形式及治疗的研究进展进行综述.     

原发性肺鳞癌中EGFR和ALK基因突变的临床研究北大核心

目的:探讨赣南地区原发性肺鳞癌患者EGFR和ALK基因突变的特点,科学指导此类患者优选靶向用药。方法:入组73例原发性肺鳞癌病例,采用ARMS-PNA技术检测EGFR基因第18、19、20、21外显子突变,应用不平衡法检测其中60例病例的ALK融合基因,回顾性分析EGFR和ALK基因突变患者的临床病理特征。结果:EGFR基因突变8例,阳性率为10.96%(8/73),4例为L858R突变,3例为19del突变,1例为G719X突变。女性患者突变率(66.67%,2/3)明显高于男性患者(8.57%,6/70)(P=0.030),EGFR基因突变在高龄(≥60岁)、进展期(N_(1-3)、Ⅲ+Ⅳ期)患者中相对较高,但差异无统计学意义(P>0.05)。EGFR基因突变与吸烟史、T分期以及肿瘤分布位置均无相关性(P>0.05);ALK融合基因表达2例,阳性率3.33%(2/60),与患者性别、年龄、吸烟史、TNM分期及肿瘤分布类型等各临床病理特征均无相关性(P>0.05);未发现EGFR和ALK基因共存突变病例。结论:赣南地区原发性肺鳞癌患者EGFR和ALK基因突变率相对不高,EGFR基因突变以L858R和19del突变为主,且好发于女性患者,可能是患者病情进展的预测因子之一。     

老年晚期非小细胞肺癌患者ＥＧＦＲ基因的突变研究

目的　探讨老年晚期非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者ＥＧＦＲ基因突变情况及其与临床病理特征之间的关系。方法　采用ＰＣＲ扩增和实时荧光ＰＣＲ技术分析ＮＳＣＬＣ中ＥＧＦＲ基因第１９和２１号外显子的突变情况。结果　８６例老年ＮＳＣＬＣ酪氨酸激酶域存在体细胞突变２５例（２９.１％）,其中第１９号外显子的缺失突变为１３例（１５.１％）,第２１号外显子的替代突变为１２例（１４.０％）。肺腺癌、肺泡癌的突变率为３６.４％（２４／６６）,高于鳞癌的６.３％（１／１６）;女性患者突变率为４８.３％（１４／２９）,高于男性患者的１９.３％（１１／５７）;非吸烟患者的突变率为４３.９％（１８／４１）,高于长期吸烟者的１５.６％（７／４５）。结论 中国老年ＮＳＣＬＣ患者ＥＧＦＲ基因酪氨酸激酶区第１９和２１外显子的突变特征与肺癌总体患者类似,与年龄关系不大,突变率以腺癌、女性及非吸烟者较高。老年ＮＳＣＬＣ患者同样可以通过基因检测获得ＴＫＩ治疗预测信息。     

非小细胞肺癌组织MET和EGFR基因扩增与预后相关性分析

目的：探讨非小细胞肺癌（non-smfllleelllungcancer,NSCLC）患者中肝细胞生长因子受体（MET）基因和表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR）基因扩增与临床病理特征及预后的关系。方法：回顾分析唐山市协和医院（48例）和唐山市人民医院（109例）2001—01—2007—01手术切除的NSCLC石蜡包埋标本157例。应用荧光原位杂交（fluorescenceinsituhybridization,FISH）检测NSCLCMET、EGFR基因扩增情况,并结合临床病理资料进行统计分析。应用SPSS16．0进行统计分析,Kaplan-Meier模型分析中住生存期（overallsurvival,0S）,Log—rank检验比较生存曲线,多因素分析采用Cox回归模型。结果：157例NSCLC患者标本中,EGFR基因扩增70例（44．6％）。EGFR基因扩增与年龄、性别、吸烟状态、组织类型和TNM分期无关,P〉0．05。157例NSCLC患者标本中,MET基因扩增25例（15．9％）。EGFR扩增患者MET扩增率为22．9％,高于无EGFR扩增患者MET扩增率10．3％,P=0．033。MET基因扩增与年龄、性别、吸烟状态、组织类型和TNM分期无关,P〉0．05。Kaplan-Meier生存分析显示,I＋Ⅱ期中位生存期为51个月,明显高于Ⅲ＋Ⅳ期中位生存期29个月,P=0．001。EGFRFISH阳性患者中位0s为33个月与EGFRFISH阴性患者中位0s39个月比较,差异无统计学意义,P=0．495。METFISH阳性患者中位0S为29个月,低于METFISH阴性患者37个月,P=0．044。患者0s与病理类型、年龄、性别和吸烟状态无相关性,P〉0．05。多因素分析显示,临床分期、MET基因扩增与OS有关（相对危险度为12．573、6．892,P值分别为0．015、0．018）。结论：临床Ⅲ＋Ⅳ期和MET基因扩增NSCLC患者预后不良,EGFR基因扩增与NSCLC患者预后无关。