黄杞苷下调PERK-ATF4信号通路改善肝硬化大鼠肝脏的作用

目的:探讨黄杞苷(Eng)调节蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)-转录激活因子4(ATF4)信号通路对肝硬化(HC)大鼠的肝保护作用。方法:随机选出10只大鼠作为对照组(NC组),其余大鼠构建HC大鼠模型，造模成功后随机平分为HC组、L-Eng组(10mg·kg^-1·d^-1)、M-Eng组(20mg·kg^-1·d^-1)、H-Eng组(40mg·kg^-1·d^-1)、H-Eng+CCT组(40mg·kg^-1·d^-1 Eng+2mg·kg^-1·d^-1 CCT020312),每组10只，持续3周。检测肝功能指标、肝组织病理学变化、α-SMA、Collagen表达以及EMT标志蛋白、PERK-ATF4通路蛋白表达。结果:NC组肝组织结构正常，染色清晰，无纤维化现象；HC组出现大面积坏死现象，大量淋巴细胞浸润，肝索排列杂乱，纤维增生以及假小叶形成；Eng处理后，淋巴细胞浸润现象减少...     

川陈皮素调节RIP1/RIP3/MLKL信号通路对慢性心力衰竭大鼠心肌坏死性凋亡的影响

目的 探究川陈皮素(Nob)调节受体相互作用蛋白激酶1/受体相互作用蛋白激酶3/混合谱系激酶样结构域蛋白(RIP1/RIP3/MLKL)信号通路对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌坏死性凋亡的影响及作用机制。方法 于2022年9月—2023年3月在南方医科大学中心实验室进行实验。建立大鼠CHF模型,将造模成功的75只大鼠按随机数字表法分为模型组(CHF组)、川陈皮素低剂量组(Nob-L组,7.5 mg·kg^-1·d^-1 Nob)、川陈皮素中剂量组(Nob-M组,15 mg·kg^-1·d^-1 Nob)、川陈皮素高剂量组(Nob-H组,30 mg·kg^-1·d^-1 Nob)和通路抑制剂Necrostatin-1组(Nec-1组,2.45 mg·kg^-1·d^-1 Nec-1),每组15只。另取15只大鼠作为假手术组(Sham组)只打开胸腔不进行结扎。干预28 d后,采用超声心动图检测左心室功能;酶联免疫吸附试验(ELISA...     

不同剂量腺嘌呤建立脾肾阳虚型慢性肾衰竭大鼠模型的实验研究

目的 比较不同剂量腺嘌呤灌胃对模型大鼠一般状态、生化指标及肾脏病理组织的影响,确定腺嘌呤灌胃制备脾肾阳虚型慢性肾衰竭(Chronic kidney disease, CRF)大鼠模型的最佳造模剂量。方法 将24只SD雄性大鼠随机分为正常组与模型组,模型组大鼠分为M1组、M2组和M3组,每组6只。正常组给予等量生理盐水灌胃,M1组以腺嘌呤150 mg·kg^-1·d^-1灌胃、M2组以腺嘌呤200 mg·kg^-1·d^-1灌胃,M3组以腺嘌呤300 mg·kg^-1·d^-1灌胃。连续干预3周,造模前及造模后每周检测肌酐(Serum creatinine, Scr)、尿素氮(Blood urea nitrogen, BUN)、24 h尿蛋白定量(24-hour urinary protein quantification, 24 h-UTP)水平,3周后取肾脏病理组织采用苏木-伊红(HE)和马松(Masson)染色法对大鼠肾脏组织病理学进行模型评估。结果 与正常组大鼠...     

柚皮苷对更年期抑郁症模型小鼠绝望行为的影响及神经保护机制研究

目的：探究柚皮苷对更年期抑郁症模型小鼠海马雌激素受体及神经元细胞凋亡的影响。方法：采用双侧卵巢切除(ovariectomy,OVX)联合慢性不可预知温和性刺激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)法复制更年期抑郁症模型；将54只雌性昆明小鼠随机分为空白组、模型组(OVX+CUMS组)、假手术组(SHAM组)、雌二醇组(E₂组，20.090 mg·kg^-1·d^-1)、柚皮苷组(100 mg·kg^-1·d^-1)、柚皮苷+ICI182780组(100 mg·kg^-1·d^-1+0.075 mg·kg^-1·d^-1)，每组9只，连续给药21 d；采用悬尾实验和强迫游泳实验观察各组小鼠行为学变化；HE染色观察各组小鼠海马神经元细胞形态变化；免疫组化方法检测小鼠海马区ERα和ERβ阳性细胞表达；蛋白免疫印迹法检测小鼠海马区ERβ、GluR2、CAMKⅡ、NMDAR1...     

Sirtuins蛋白在双酚A诱导的雄性生殖系统损伤模型小鼠睾丸组织和GC-2细胞中的表达及其意义

目的：探讨Sirtuins (Sirt)蛋白家族在双酚A (BPA)诱导的雄性生殖系统损伤细胞和动物模型中的作用,阐明其对BPA诱导的雄性生殖系统损伤的影响。方法：40只昆明种小鼠随机分为对照组、低剂量BPA组(给予3 mg·kg^-1·d^-1 BPA)、中剂量BPA组(给予30 mg·kg^-1·d^-1 BPA)和高剂量BPA组(给予300 mg·kg^-1·d^-1 BPA),每组10只。低、中和高剂量BPA组小鼠采用玉米油(0.01 mL·g^-1)配成相应浓度BPA灌胃,对照组小鼠给予0.01 mL·g^-1玉米油。5周后,检测各组小鼠体质量、睾丸指数和附睾指数,计算机辅助精液分析(CASA)系统检测各组小鼠精子质量,HE染色观察各组小鼠睾丸组织形态表现,Western blotting法检测各组小鼠睾丸组织中Sirt1～Sirt7蛋白表达水平。小鼠GC-2细胞分为0、20、40和80μmol·L^-1     

哈萨克民族药柯孜木克颗粒对代谢综合征TGR5表达的调控作用

目的 探讨柯孜木克颗粒对喂养型代谢综合征大鼠肝脏组织TGR5蛋白表达的影响及改善代谢综合征的作用机制。方法 将29只雄性SD大鼠随机分为正常组(n=6)、模型组(n=3)、用药组[柯孜木克颗粒低剂量组(n=6)、柯孜木克颗粒中剂量组(n=5)、柯孜木克颗粒高剂量组(n=5)和二甲双胍组(n=4)]。正常组给予普通饲料,其余各组喂养高盐高脂高糖饲料,时间为8周。8周后用药组分别给予柯孜木克颗粒[低、中、高剂量分别为17.6、35.19、70.38 mg·kg^-1·d^-1]、盐酸二甲双胍悬浊液[3 mg·kg^-1·d^-1]灌胃干预,正常组和模型组以10 mg·kg^-1·d^-1生理盐水灌胃,1次·d^-1,连续给药4周。采用ELISA法检测动脉血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)水平,HE染色观察肝组织病理形态学变化,SP法免疫组织化学检测肝脏组织TGR5蛋白的表达。结果 与模型组(0.67±0.02)相比,柯孜木克颗粒低...     

三黄漱口液通过调节TLR4-NF-κB通路减轻大鼠牙周炎症状

目的 研究三黄漱口液治疗大鼠牙周炎的生物学机制。方法 将60只大鼠随机分成对照组、模型组、三黄漱口液给药组[低剂量组(4.48 g·kg^-1·d^-1),中剂量组(8.96 g·kg^-1·d^-1)、高剂量组(13.44 g·kg^-1·d^-1)]、甲硝唑组(0.02 g·kg^-1·d^-1)。采用丝线结扎联合10%蔗糖饮水建立牙周炎模型后,每天2次口腔黏膜涂布给药,空白组和模型组给予0.9%NaCl溶液,连续给药1个月后处死各组大鼠,取牙齿样本进行分析。使用ELISA试剂盒检测牙周组织匀浆中白细胞介素-8(IL-8)和白细胞介素-10(IL-10)的水平;Western blot法检测Toll样受体4(TLR4)和核因子-κB(NF-κB)的表达水平;采用HE染色法观察牙周组织病理学改变。结果 与模型组比较,三黄漱口液各剂量组牙周炎症状得到明显改善,HE染色显示炎症细胞浸润降低,成纤维细胞增生活跃;牙周组织内TLR4和...     

汉黄芩苷抗糖尿病大鼠肾损伤及纤维化的机制研究

【目的】观察汉黄芩苷对糖尿病大鼠肾损伤及纤维化的治疗作用及机制。【方法】从50只大鼠中随机选取10只大鼠作为正常组常规饲养,剩余大鼠经6周高脂喂养后连续3 d单次腹腔注射链脲佐菌素30 mg/kg构建糖尿病模型。将建模成功的40只大鼠随机分为模型组,汉黄芩苷低、高剂量组和细胞周期素依赖蛋白激酶5(CDK5)抑制剂Roscovitine对照组,每组10只。汉黄芩苷低、高剂量组分别给予10、40 mg·kg^-1·d^-1汉黄芩苷腹腔注射,Roscovitine对照组给予Roscovitine 40 mg·kg^-1·d^-1腹腔注射,模型组和正常组给予腹腔注射等体积二甲基亚砜(DMSO),连续用药10周。给药期间,记录各组大鼠状态。给药10周后,应用全自动生化分析仪检测血清空腹血糖(FBG)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN),采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测尿白蛋白(Alb),苏木素-伊红(HE)染色法观察肾脏组织形态,Masson染色法评估肾间质病理情况,Western Blot法检测肾组织Ⅳ型胶...     

补中益气汤单用或联用益生菌合剂上调SP7、RUNX2提高脾虚证骨质疏松大鼠骨密度

【目的】探讨补中益气汤单用或联用益生菌合剂对脾虚证骨质疏松大鼠的治疗作用及机制。【方法】将40只SD大鼠随机分为补中益气汤组(4.46 g·kg^-1·d^-1)，联合组(补中益气汤4.46 g·kg^-1·d^-1、益生菌合剂6.98 g·kg^-1·d^-1)，益生菌合剂组(6.98 g·kg^-1·d^-1)以及模型组，每组10只。所有大鼠均给予皮下注射地塞米松磷酸钠注射液构建骨质疏松模型，同时联合给予番泻叶水煎液灌胃建立脾虚证模型。从实验开始到结束，每周记录大鼠体质量及一般情况。干预4周后，分离股骨进行骨密度(BMD)检测，Micro-CT骨扫描并计算骨小梁微观结构参数[骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁分离度(Tb.Sp)、体积分数(BV/TV)]，采用Western Blot法检测大鼠股骨骨组织SP7和RUNX2蛋白表达水平。【结果】与模型组比较，补中益气汤组、联合组及益生菌合剂组大鼠脾虚证症状明...     

补肺益肾组分方Ⅲ对大鼠实验性肺动脉高压的改善作用

目的：探讨补肺益肾组分方Ⅲ(ECC-BYPⅢ)对烟雾和细菌诱导的大鼠肺动脉高压(PH)的改善作用,初步阐明其作用机制。方法：SPF级SD大鼠随机分为对照组(n=9)和造模组(n=140)。对照组大鼠常规饲养,造模组大鼠给予香烟烟雾和克雷伯杆菌(Kp),制备PH模型。停止造模后,造模大鼠按照肺功能均匀的原则分为模型组(n=10)和低剂量(3.24 mg·kg^-1·d^-1,n=9)、中剂量(6.48 mg·kg^-1·d^-1,n=10)及高剂量(12.96 mg·kg^-1·d^-1,n=10) ECC-BYPⅢ组。给药大鼠按照组别每天分别给予相应剂量的ECC-BYPⅢ灌胃,对照组和模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃。连续给药4周。第29天检测各组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、收缩压(PASP)、舒张压(PADP)和右心肥大指数(RVHI)。取大鼠肺组织,部分采用苏木精-伊红(HE)染色,观察各组大鼠肺组织中肺小动脉周围炎症等病变;部分采用维多利亚蓝染色,测定各组大鼠肺...     

人参皂苷Rg1对重症急性胰腺炎大鼠心脏损伤的保护作用及其机制

目的：探讨人参皂苷Rg1对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠心脏损伤的保护作用,阐明其相关分子机制。方法：SD大鼠随机分为对照组、模型组和Rg1处理组,每组6只。对照组大鼠开腹后闭腹;模型组大鼠开腹后逆行向胆胰管内注射5%牛磺胆酸钠（0.15μL·kg-1）诱导SAP; Rg1处理组大鼠术前30 min经尾静脉注射Rg1 (4 mg·kg-1),制备SAP模型;对照组和模型组大鼠术前30 min尾静脉注射生理盐水。酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、内毒素、内皮素1 (ET-1)、白细胞介素1β (IL-1β)水平及肌酸激酶MB (CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)和淀粉酶活性。超声成像系统检测各组大鼠心率（HR）、左室收缩末期内径（LVDs）和左室舒张末期内径（LVDd）,并计算左室短轴缩短率（FS）。Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶（NOX） 2、NOX4、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(p-ERK1/2)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）蛋白表达水平。结...     

健脾化瘀祛痰法对apoA-Ⅰ/AMPK/CPT1A信号通路介导的脂肪酸β氧化改善血脂异常的调控作用及其机制

目的 探讨健脾化瘀祛痰法对高脂血症大鼠血脂异常的影响,基于载脂蛋白AⅠ（apoA-Ⅰ）/单磷酸腺苷激活蛋白激酶（AMPK）/ 肉毒碱棕榈酰转移酶ⅠA（CPT1A）信号通路阐明其分子机制。 方法 32只大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组（给予1.575 mg·kg^－1·d^－1辛伐他汀）和化瘀祛痰方（HYQTP）组（给予13.846 mg·kg^－1·d^－1化瘀祛痰方药物）,每组8只。空白对照组大鼠给予正常饮食,模型组、辛伐他汀组和HYQTP组大鼠给予高脂饲料,建立高脂血症大鼠模型。8周后,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠灌胃相应药物;空白对照组和模型组大鼠给予等体积生理盐水。全自动生化分析仪检测各组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）水平,HE染色观察各组大鼠肝组织病理形态表现,油红O染色观察各组大鼠肝组织脂质沉积情况,检测各组大鼠肝组织中TG水平,ELISA法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ、B族Ⅰ型清道夫受体（SR-B1）和CPT1A mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肝组织中高密度脂蛋白受体（SR-B1）、AMPK、磷酸化AMPK（p-AMPK）和CPT1A蛋白表达水平。 结果 与空白对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-c水平升高（P<0.05）,HDL-c水平降低（P<0.05）;肝组织中TG水平升高（P<0.05）;肝细胞出现明显肿胀,体积增大;并且可见明显红色脂滴分布;肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）,p-AMPK/AMPK比值降低（P<0.05）;与模型组比较,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠血清TC、TG 和 LDL-c水平降低（P<0.05）,HDL-c水平升高（P<0.05）;肝组织中TG水平降低（P<0.05）;肝细胞肿胀明显减轻,脂滴分布明显减少,肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）,p-AMPK/AMPK比值升高（P<0.05）。 结论 健脾化瘀祛痰法能够改善高脂血症大鼠血脂异常,减轻肝脏损伤及脂质沉积,其作用机制可能与调控apoA-1/AMPK/CPT1A信号通路促进大鼠脂肪酸β氧化有关。     

Urantide对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉组织中c-Jun氨基末端激酶表达的影响及其意义

目的：探讨Urantide对动脉粥样硬化（AS）大鼠胸主动脉组织中c-Jun氨基末端激酶（JNK）mRNA和蛋白表达的影响,阐明其防治AS的分子机制。方法：采用腹腔注射维生素D₃（VitD₃）联合高脂特制饲料饲养方法建立大鼠AS模型,同时设对照组。建模成功的150只AS模型大鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、Urantide 3 d组、Urantide 7 d组和Urantide 14 d组,每组30只。辛伐他汀组大鼠灌胃给予辛伐他汀,连续14 d;Urantide 3、7和14 d组大鼠经尾静脉注射Urantide,分别连续3、7和14 d。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清学指标,HE染色观察大鼠胸主动脉组织病理形态表现,免疫组织化学染色、qRT-PCR和Western blotting法检测大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平。结果：与对照组比较,AS模型组大鼠血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白（LDL）水平均升高（P<0.05）,高密度脂蛋白（HDL）水平降低（P<0.05）。HE染色,模型组大鼠胸主动脉组织中泡沫细胞形成,中膜弹性纤维断裂以及钙化形成;与模型组比较,辛伐他汀组和Urantide组大鼠胸主动脉病理改变明显改善。免疫组织化学染色,对照组大鼠胸主动脉组织中JNK阳性颗粒微量表达;与对照组比较,模型组大鼠胸主动脉组织中JNK阳性表达强度明显增加（P<0.05）;与模型组比较,辛伐他汀组和不同时间Urantide组大鼠胸主动脉组织中JNK阳性表达强度明显降低（P<0.05）。qRT-PCR和Western blotting法检测,与对照组比较,模型组大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,辛伐他汀组和不同时间Urantide组大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与辛伐他汀组比较,不同时间Urantide组大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平进一步降低（P<0.05）。结论：Urantide可改善AS大鼠胸主动脉的病理损伤,其机制可能与抑制JNK信号通路的表达有关。     

丝胶对高糖所致足细胞损伤和JNK信号通路的影响

目的：探讨丝胶对高糖所致足细胞损伤时c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路相关蛋白的表达及足细胞凋亡的影响,阐明丝胶的保护作用及其可能机制。方法：分化成熟的条件永生化小鼠足细胞随机分为正常对照组(含5.5 mmol·L^-1葡萄糖的培养基)、高渗对照组(含5.5 mmol·L^-1葡萄糖+24.5 mmol·L^-1甘露醇的培养基)、高糖组(含30.0 mmol·L^-1葡萄糖的培养基)、低浓度丝胶组(含30.0 mmol·L^-1葡萄糖+150.0 mg·L^-1丝胶的培养基)、中浓度丝胶组(含30.0 mmol·L^-1葡萄糖+300.0 mg·L^-1丝胶的培养基)和高浓度丝胶组(含30.0 mmol·L^-1葡萄糖+600.0 mg·L^-1丝胶的培养基)。采用光学倒置显微镜观察各组足细胞形态表现,实时荧光定量PCR (RT-q PCR)法检测各组足细胞中裂孔膜蛋白(Nephri...     

葡萄籽原花青素提取物对糖尿病牙周炎大鼠牙周组织炎症的缓解作用及其对牙周组织中TLR4和NF-κB表达水平的影响

目的 探讨葡萄籽原花青素提取物（GSPE）对糖尿病牙周炎大鼠牙周炎症的改善作用,并阐明其作用机制。 方法 40只雄性SD大鼠随机分为对照组、糖尿病牙周炎模型组（模型组）、低剂量（100 mg·kg^－1）GSPE组和高剂量（200 mg·kg^－1）GSPE组,每组10只,除对照组外,其他各组大鼠采用牙周结扎法联合一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病牙周炎模型。模型建立成功后,低和高剂量GSPE组大鼠分别按100和200 mg·kg^－1GSPE灌胃给药,对照组和模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃,每天1次,连续8周。观察大鼠一般情况和血糖水平变化,采用HE染色观察各组大鼠牙周组织病理形态表现,测量各组大鼠牙槽骨吸收量,采用相关试剂盒检测各组大鼠牙周组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平, Western blotting法检测各组大鼠牙周组织中Toll样受体4（TLR4）和核因子κB（NF-κB）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,模型组大鼠出现明显“三多一少”症状,血糖水平明显升高（P<0.05）,牙周结缔组织中炎性细胞浸润,牙周组织损伤,牙槽骨吸收量明显增加（P<0.05）,牙周组织中SOD和CAT活性明显降低（P<0.05）,ROS和MDA水平明显升高（P<0.05）,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高（P<0.05）,牙周组织中TLR4和NF-κB蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,低和高剂量GSPE组大鼠一般情况均明显好转,血糖水平明显降低（P<0.05）,牙周组织损伤明显减轻,牙槽骨吸收量减少（P<0.05）,牙周组织中SOD和CAT活性明显升高（P<0.05）,ROS和MDA水平明显降低（P<0.05）,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低（P<0.05）,牙周组织中TLR4和NF-κB 蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与低剂量GSPE组比较,高剂量GSPE组大鼠牙周组织中SOD和CAT活性明显升高（P<0.05）,ROS和MDA水平明显降低（P<0.05）,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低（P<0.05）,牙周组织中TLR4和NF-κB 蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 GSPE可改善糖尿病牙周炎大鼠牙周组织炎症,其作用机制与调节牙周组织中TLR4/NF-κB信号通路有关。     

黄芪对大黄诱导大鼠腹泻的治疗作用及其机制

目的：探讨黄芪对于大黄诱导腹泻大鼠肠道炎症、肠道屏障和肠道菌群的治疗作用,并阐明其可能的作用机制。方法：50只大鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组(2.468 g·kg^-1参苓白术散)、低剂量(1.35 g·kg^-1)黄芪组和高剂量(2.70 g·kg^-1)黄芪组,每组10只。采用大黄灌胃结合饮食不节复制大鼠腹泻模型,检测各组大鼠体质量、粪便含水量和腹泻评分;HE染色观察各组大鼠结肠组织病理形态表现,Western blotting法检测各组大鼠结肠组织中蛋白酶激活受体2 (PAR-2)、磷酸化p38 (p-p38)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)、闭锁蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、Toll样受体4 (TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 (TRAF6)、髓样分化因子88 (MyD88)和核因子κB (NF-κB)蛋白表达水平;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清中胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素1β(I...     

参红补血颗粒对气滞血瘀型血管内皮功能障碍小鼠血管内皮的保护作用及其机制

目的 探讨参红补血颗粒（SBG）对气滞血瘀型血管内皮功能障碍（VED）模型小鼠血管内皮的保护作用和对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子（MyD88）、核因子 κBp65（NF-κB p65）及细胞间黏附分子1（ICAM-1）蛋白表达水平的影响,阐明其相关作用机制。 方法 将60只昆明小鼠随机分为正常对照组、VED组、阳性对照组（0.62 g·kg^－1·d^－1 血府逐瘀胶囊）、低剂量SBG（3 g·kg^－1·d^－1）组、中剂量SBG（6 g·kg^－1·d^－1）组和高剂量SBG（9 g·kg^－1·d^－1）组,每组10只。除正常对照组外,其他各组小鼠采用冰水浴游泳法构建气滞血瘀型VED模型,连续给药造模21 d。观察各组小鼠行为表现,血液流变仪检测各组小鼠全血黏度,苏木精-伊红（HE）染色观察各组小鼠肺和胸主动脉组织病理形态表现,ELISA法检测各组小鼠血清血管性血友病因子（vWF）、血栓调节蛋白（TM）、ICAM-1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平,试剂盒检测各组小鼠血清一氧化氮（NO）水平和胸主动脉组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）及超氧化物歧化酶（SOD）活性。体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs）,分为正常对照组,叔丁基过氧化氢（TBHP）组,低、中和高剂量SBG组,除正常对照组外,其他4组HUVECs采用TBHP诱导HUVECs建立氧化损伤模型,采用MTT法检测各组HUVECs存活率,Western blotting法检测各组HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平。 结果 与正常对照组比较,VED组小鼠抓力值和自主活动次数明显降低（P<0.05）, 全血黏度明显升高（P<0.05）; 与VED组比较,阳性对照组和低、中及高剂量SBG组小鼠抓力值均明显升高（P<0.05）,小鼠全血黏度明显降低（P<0.05）,阳性对照组和高剂量SBG组小鼠自主活动次数明显升高（P<0.05）。HE染色,与正常对照组比较,VED组小鼠肺组织出现明显的毛细血管扩张和淤血,并且组织伴有大量炎性细胞浸润;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠肺泡壁毛细血管扩张和淤血的程度减轻,炎性细胞浸润数量明显减少,并呈剂量依赖性;与正常对照组比较,VED组小鼠胸主动脉内壁结构紊乱,出现缺损和脱落;与VED组比较,阳性对照组和不同剂量SBG组小鼠血管内膜的脱落损伤情况改善,内膜相对完整。与正常对照组比较,VED组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显升高（P<0.05）,血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显降低（P<0.05）;与VED组比较,阳性对照组和高剂量SBG组小鼠血清vWF、TM、ICAM-1、TNF-α和IL-6水平明显降低（P<0.05）,血清NO水平以及动脉组织中GSH-Px和SOD活性明显升高（P<0.05）。与正常对照组比较,TBHP组HUVECs存活率明显降低（P<0.05）,HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平升高（P<0.05）;与TBHP组比较,高剂量SBG组HUVECs存活率明显升高（P<0.05）,HUVECs中TLR4、MyD88、NF-κB p65和ICAM-1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。 结论 SBG可通过抑制氧化应激,缓解炎症反应,达到保护气滞血瘀型VED小鼠血管内皮的作用。     

川芎嗪对肾结石模型大鼠肾组织氧化损伤的改善作用

目的 探讨川芎嗪（TMP）对肾结石模型大鼠肾组织氧化损伤的改善作用,阐明其可能的作用机制。 方法 健康雄性SD大鼠40只,随机分为对照组、模型组、TMP组和阳性对照组,经预实验后,除对照组外其余各组大鼠采用乙醛酸盐原液80 mg·kg^－1腹腔注射构建肾结石大鼠模型,同时TMP组大鼠采用盐酸TMP注射液100 mg·kg^－1腹腔注射,阳性对照组大鼠采用肾石通颗粒3.12 g·kg^－1灌胃,对照组大鼠采用0.9%氯化钠注射液2.5 mL·kg^－1腹腔注射,连续用药10 d。取各组大鼠肾组织切片,Von Kossa染色和HE染色观察各组大鼠肾组织中钙盐沉积情况和病理形态表现,检测各组大鼠肾组织中丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。Western blotting法检测各组大鼠肾组织中核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素氧合酶1（HO-1）及NAD（P）H醌：氧化还原酶1（NQO1）蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,模型组大鼠肾组织Von Kossa染色可见明显的钙盐沉积,结晶量化分级评分明显升高（P<0.01）,HE染色可见肾组织细胞出现明显的病理损伤,肾组织中MDA水平明显升高（P<0.01）,SOD和GSH-Px活性明显降低（P<0.01）,肾组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与模型组比较,TMP组和阳性对照组大鼠肾组织Von Kossa染色可见钙盐沉积,结晶量化分级评分明显降低（P<0.05）,HE染色可见肾组织细胞病理损伤减轻,肾组织中MDA水平明显降低（P<0.01）,SOD和GSH-Px活性明显升高（P<0.05）,肾组织中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 肾结石可引起大鼠肾组织氧化应激损伤,导致肾组织中氧化应激指标改变和Nrf2/抗氧化反应原件（ARE）信号通路蛋白表达水平变化,TMP干预处理后可激活该信号通路,从而发挥对肾组织氧化应激损伤的改善作用。     

黄芪甲苷对低氧诱导小鼠血管损伤的保护作用及其机制

目的：探讨黄芪甲苷（ASⅣ）对低氧诱导的小鼠血管损伤的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法：60只雄性健康昆明小鼠随机分为对照组,低氧组,低、中和高剂量（40、80和120 mg·kg-1） ASⅣ组。低氧组和不同剂量ASⅣ组小鼠在低氧舱（氧浓度10%）中饲养,连续4周,低、中和高剂量ASⅣ组小鼠于低氧第2天灌胃给药,连续4周。离体血管环实验检测各组小鼠血管张力,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组小鼠血清中白细胞介素6 (IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,免疫组织化学法检测各组小鼠胸主动脉组织中骨膜蛋白（POSTN）阳性细胞率,Western blotting法检测各组小鼠胸主动脉组织中POSTN、细胞间黏附分子1 (ICAM-1)、血管细胞黏附分子1 (VCAM-1)和磷酸化核因子κB (p-NF-κB) p65蛋白表达水平。结果：与对照组比较,低氧组小鼠乙酰胆碱（Ach）最大舒张率明显降低（P<0.01）;与低氧组比较,低剂量ASⅣ组小鼠Ach最大舒张率差异无统计学意义（P>0.05）,中和高剂量ASⅣ组小鼠Ach最大舒张率明显升高（P<0.0...     

丙泊酚后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及其机制

目的 探讨丙泊酚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能的改善作用及其对脑线粒体损伤的保护作用,阐明其作用机制。 方法 24只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丙泊酚后处理组,每组8只。模型组和丙泊酚后处理组大鼠采用结扎颈动脉法建立大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血再灌注模型,丙泊酚后处理组大鼠于再灌注即刻股静脉输注20 mg·kg^－1·h^－1丙泊酚2 h,假手术组和模型组大鼠给予等量生理盐水。各组大鼠于再灌注24 h后进行神经功能缺损评分,采用HE染色法观察各组大鼠海马组织病理形态表现,采用相关试剂盒检测各组大鼠海马组织中氧化应激相关因子活性和水平,采用活性氧（ROS）荧光探针检测各组大鼠脑海马组织中ROS水平,采用TUNEL法检测各组大鼠海马组织中TUNEL阳性细胞率,采用Western blotting法检测各组大鼠海马组织中线粒体裂变、融合和生物发生相关蛋白及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯氧化酶4（Nox4）和核因子E2相关因子2（Nrf2）蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组大鼠海马组织中Nrf2蛋白表达水平。 结果 与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高（P<0.05）,大鼠海马组织病理损伤明显,海马组织中超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和总抗氧化力（T-AOC）水平明显降低（P<0.01）,丙二醛（MDA）和ROS水平及TUNEL阳性细胞率明显升高（P<0.05）,动力相关蛋白1（DRP1）、裂变蛋白1（Fis1）、Nox4和Nrf2蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,视神经萎缩症蛋白1（OPA1）、线粒体融合蛋白2（Mfn2）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（PGC-1α）和线粒体转录因子 A（TFAM）蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与模型组比较,丙泊酚后处理组大鼠神经功能缺损评分明显降低（P<0.05）,大鼠海马组织病理损伤明显改善,大鼠海马组织中SOD及GSH-Px活性和T-AOC水平明显升高（P<0.05）,MDA 水平、ROS水平和TUNEL阳性细胞率明显降低（P<0.05）,DRP1、Fis1和Nox4蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,OPA1、Mfn2、PGC-1α、TFAM和Nrf2蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 丙泊酚后处理可抑制脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织细胞凋亡和氧化应激,促进线粒体融合和生物发生并抑制线粒体裂变,改善大鼠神经功能损伤,其机制可能与调控Nox4/Nrf2信号通路有关。