基于微透析结合UPLC的弩药微乳经皮给药后多成分皮肤药动学研究

目的 考察弩药微乳多成分在家兔皮肤组织中的药动学特征。方法 采用UPLC测定绿原酸、苯甲酰新乌头原碱、杠柳毒苷、新乌头碱质量浓度;采用增量法与减量法探究温度、灌流速度、质量浓度对探针回收率的影响,UPLC测定弩药微乳经皮给药后不同时间点透析液中多成分含量变化,并用DAS2.0软件处理数据。结果 升高温度,各成分探针回收率逐渐提高;流速越大,药物回收率越低,且回收率与探针周围药物质量浓度关系不大。弩药微乳中绿原酸、苯甲酰新乌头原碱、杠柳毒苷、新乌头碱在皮下组织中的药动学参数C_max分别为(3.24±0.36)(1.04±0.29)(4.78±2.15)(2.86±0.55)μg·mL^-1;AUC_0-∞分别为(52.42±30.84)(7.70±3.73)(42.23±13.93)(22.68±12.51)h·μg·mL^-1。结论 首次采用微透析在体实时取样技术,建立UPLC检测方法,对弩药微乳经皮给药后多成分皮肤药动学进行研究,为弩药微乳后续的考察及应用提供参考。     

盐酸贝那普利片及活性代谢物在中国健康受试者中的生物等效性研究

目的 评价空腹及餐后状态下单次口服盐酸贝那普利片受试和参比制剂的生物等效性。方法 将志愿者按照1:1的比例分配至T-R(受试制剂-参比制剂)和R-T(参比制剂-受试制剂)序列组;采用单中心、随机、开放、两周期、双序列、自身交叉、单次给药(空腹、餐后)的试验方法设计;采用高效液相-色谱串联质谱法测定血药浓度;使用WinNonlin软件的非房室模型对贝那普利主要药代动力学参数C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞进行分析;T_max采用非参数秩和检验。结果 空腹组受试制剂和参比制剂贝那普利的主要药代动力学参数如下：C_max分别为(207.86±70.77)ng·mL^-1和(205.20±70.37)ng·mL^-1;AUC_0-t分别为(168.91±36.03)h×ng·mL^-1和(170.23±38.37)h×ng·mL^-1;AUC_0-∞分别为(171.0...     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆甘草酸及其代谢物的浓度及药物动力学研究

目的 建立测定大鼠血浆中甘草酸及其代谢产物甘草次酸含量的超高效液相色谱-串联四极杆质谱(UPLC-MS/MS)方法，进行大鼠体内药物动力学研究。方法 采用ACQUITY UPLC BEH C₁₈(2.1 mm×150 mm, 1.7μm),以5 mmol/L乙酸铵(A)-乙腈(B)为流动相，梯度洗脱，流速0.3 mL/min,电喷雾离子源，负离子模式下，多反应监测(MRM)方式，以格列喹酮为内标；大鼠口服给药，取血后血样经甲醇沉淀蛋白，检测大鼠血药浓度。结果 甘草酸与甘草次酸血浆浓度在0.009 9～2.899 0μg/mL与0.040 0～26.890 0μg/mL范围内线性关系良好，方法学各项指标均符合要求。药动学参数甘草酸T_max为(1.83±0.41) h, C_max为(0.42±0.04)μg/mL,AUC_0-∞为(2.13±0.43) h·μg^-1·mL^-1,t_1/2为(16.74±8.45) h。代谢产物甘草次酸T     

注射用福沙匹坦双葡甲胺(150 mg)在中国健康受试者中单次给药的药代动力学研究

目的研究中国健康受试者单剂量静脉输注由江苏奥赛康药业有限公司生产的注射用福沙匹坦双葡甲胺后的血药浓度经时变化,估算相应的药代动力学参数。同时,评估注射用福沙匹坦双葡甲胺在中国健康受试者中的安全性。方法本研究采用单中心、单剂量、单次给药的研究设计,空腹条件下入组12例受试者,每人静脉输注注射用福沙匹坦双葡甲胺150 mg,静滴时间为(30±2)min。使用液相色谱-串联质谱技术测定人血浆中福沙匹坦及其代谢产物阿瑞匹坦的浓度,采用Phoenix公司的WinNonlin6.4药动学软件进行药动学计算。结果健康受试者静脉滴注(30±2)min福沙匹坦双葡甲胺(150 mg)后,血浆中福沙匹坦迅速达峰并很快消除。其主要药动学参数如下：T_max为0.333 h;C_max为4.316μg/mL;AUC_0-t为2.090 h·μg·mL^-1;AUC_0-∞为2.098 h·μg·mL^-1。福沙匹坦在体内迅速转化成阿瑞匹坦,其血药浓度在输注结束即达峰值。其主要药动学参数如下：...     

复方磺胺甲噁唑人体药动学与生物等效性研究

目的 研究单次空腹口服复方磺胺甲噁唑片在健康受试者体内的人体药代动力学特征和生物等效性。方法 试验采用单中心、随机、开放、单剂量、两制剂、两周期、两序列交叉设计,24例受试者分别空腹口服复方磺胺甲噁唑受试制剂T或参比制剂R。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测血浆中的磺胺甲噁唑和甲氧苄啶的血药浓度,用Phoenix WinNonlin 8.2软件计算药动学参数,评价两制剂生物等效性。结果 空腹试验受试制剂T和参比制剂R的磺胺甲噁唑C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别为(27.340±3.400)和(28.042±3.527)μg/mL、(375.2±38.7)和(371.5±35.4)h·μg/mL、(390.0±42.9)和(386.7±41.0)h·μg/mL;甲氧苄啶C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别为(0.845±0.198)和(0.838±0.144)μg/mL、(8.7±1.3)和(8.2±1.5)h·μg/mL、...     

一种新的基于微透析技术研究靶器官药代动力学方法

目的:采用微透析技术结合液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)研究金刚烷胺在大鼠纹状体细胞外液中的药代动力学(药动学)过程,探讨靶器官药动学研究方法。方法:SD大鼠(雄性,8~10周龄)行乌拉坦麻醉(1.0 g/kg)后,手术植入微透析探针于大鼠纹状体,以人工脑脊液恒速(2μL/min)灌注探针。灌注1 h后,腹腔注射盐酸金刚烷胺(1.0 mg/kg),注射后立即收集透析液样本,样本收集间隔时间为12 min,连续6 h。用LC-MS/MS法检测透析样本中金刚烷胺浓度,药物浓度-时间曲线及计算药动学参数用DAS软件拟合。结果:金刚烷胺在大鼠纹状体细胞外液中浓度-时间变化呈一室开放模型,其主要药动学参数T_(max)、C_(max)、t_(1/2)和AUC_(0-∞)为(1.78±0.59)h、(38.56±9.10)μg/L、(2.07±0.35)h和(591.84±278.39)μg/(L·h)。结论:本实验建立了一种基于微透析采样结合LC-MS/MS法研究金刚烷胺在大鼠纹状体细胞外液中药代动力学过程的实验方法,该方法操作简单、灵敏度高,为研究药物在靶器官中的药动学过程提供了方法学基础。     

克班宁贴剂在大鼠体内的药动学与药效学评价

目的 比较克班宁经皮和灌胃2种给药途径在大鼠体内的药动学差异性,评价克班宁贴剂经皮给药抗大鼠心律失常的效果,以及克班宁对钙离子通道的作用机制。方法 采用HPLC法测定大鼠血浆中克班宁的浓度;采用氯化钡(BaCl₂)致大鼠心律失常的模型观察克班宁经皮给药的抗心律失常效果,采用Whole Cell记录检测克班宁对钙通道电流的影响。结果 克班宁贴剂经皮给药(400 mg·kg^-1)的主要药动学参数为：AUC_0-∞=(204.500±170.496)mg·h·L^-1;T_max=(10.333±0.745)h;C_max=(1.968±0.147)mg·L^-1(n=6)。克班宁溶液灌胃给药(40 mg·kg^-1)的主要药动学参数为：AUC_0-∞=(26.980±6.672)mg·h·L^-1;T_max=(0.086±0.024)h;C_max...     

青藤碱在家兔体内的药代动力学研究

目的:建立高效液相色谱法测定青藤(Sinomenine)碱在家兔体内的血药浓度并研究其药动学.方法:6只家兔分别给予青藤碱45mg/kg灌胃,于给药后0.25h、0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、3.0h、4.0h、6.0h、8.0h、10.0h、12.0h分别取血2ml,采用高效液相色谱法检测血药浓度,3P97软件处理数据并进行药代动力学研究.结果:T1/2(Ka)为(0.31±0.26)h,T1/2(Ke)为(3.15±0.82)h,Tmax为(1.05±0.53)h,Cmax为(15.09±4.15)μg/ml,AUC0→00为(84.27±13.02)(μg·h)/L,AUC0→T为(78.29±13.46)(μg·h)/L.结论:家兔灌服青藤碱后药物吸收和消除快,达峰时间短,血药浓度高.     

利用血液微透析技术进行青藤碱的药动学研究

【目的】探讨采用血液微透析技术研究青藤碱药动学的可行性和优越性。【方法】以大鼠为实验对象,青藤碱静脉内给药,采用微透析技术采血,高效液相色谱法分析,3印程序数据分析。【结果】青藤碱在大鼠体内的药动学过程为静注二室模型,分布相和消除相的半衰期分别为10．98min和44．71min。【结论】采用血液微透析技术进行青藤碱的药动学研究方法可行,与传统方法相比,具有明显的优势。     

前列腺素E1冻干脂微球在比格犬体内的药动学

目的 考察前列腺素E₁(PGE₁)冻干脂微球在比格犬体内的药动学特征,为其临床人体用药提供参考依据。方法 24只比格犬随机分为对照组和低、中、高剂量组,每组6只,分别静脉给予参比制剂"凯时"与20、32、64μg/dog的受试制剂PGE₁冻干脂微球,于不同时间点采集血样,采用LC-MS/MS法测定比格犬体内PGE₁的血药浓度。结果 比格犬静脉推注32μg/dog剂量的PGE₁冻干脂微球后,血浆中PGE₁的t_1/2为(7.5±3.7)min,t_max为(7.6±2.9)min,C_max为(105.0±40.4)ng/L,AUC_{(0~18 min)}为(933.1±359.0)ng·min/L,与参比制剂"凯时"间的差异无统计学意义(P>0.05);在低、中、高3个不同剂量下,PGE₁的AUC_{(0~18 min)}、C_max分别与剂量呈线性正相关,且性别差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 PGE₁冻干脂微球与其市售脂微球注射液"凯时"具有相同的药动学特征,不同剂量水平不影响其在比格犬体内的药动学过程。     

肝肠首过效应对五味子醇甲在大鼠体内生物利用度的影响

目的 以整体动物和肝肠首过代谢动物模型,考察五味子主要活性成分五味子醇甲在体内外的处置过程,探讨五味子醇甲低生物利用度的原因,为五味子的现代化开发提供必要的数据支撑.方法 首先研究不同剂量的五味子醇甲在整体动物(大鼠)体内的药动学过程;其后借助颈静脉和幽门静脉插管的首过代谢模型,研究肝脏、肠道在五味子醇甲体内转化过程中...     

LC-MS/MS法测定黄柏碱及其葡萄糖醛酸结合物在大鼠中的组织分布研究

目的 建立大鼠组织中黄柏碱(Phellodendrine, PHE)及其葡萄糖醛酸结合物黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(Phellodendrine-11-O-β-D-glucuronide, M1),黄柏碱-2,11-O-β-D-二葡萄糖醛酸苷(Phellodendrine-2,11-di-O-β-D-glucuronide, M2)的含量测定方法,考察PHE、M1和M2在各组织的分布特征。方法 正常SD大鼠以40 mg·kg^-1的剂量灌胃黄柏碱水溶液,于0.117、0.17、0.5、1、2、3、4 h处死,剪取心、肝、脾、肺、肾、脑、肌肉、胰腺和小肠。组织匀浆样品采用甲醇沉淀蛋白方法处理,以乌头碱为内标,ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈柱(150 mm×2.1 mm, 3.5μm)为色谱柱,0.1%甲酸水-甲醇为流动相梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1,柱温35℃,在电喷雾离子化和正离子多离子反应模式下,运用API4000⁺型三重四级杆质谱联用仪进行测定。结果 PHE、M...     

基于UPLC特征图谱及多成分同时定量的酒女贞子炮制工艺研究

目的 建立UPLC特征图谱和多成分同时定量的分析方法,为酒女贞子炮制过程质量评价提供依据.方法 采用AC-QUITY UPLC BEH Shield RP18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1,柱温为30℃,检测波长0～3 min为...     

ADI脂质纳米粒的制备表征及药动学研究

目的 制备并表征维生素E琥珀酸聚乙二醇酯(D-alpha-Tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS)修饰载精氨酸脱亚胺酶(arginine deiminase,ADI)磺丁基-β-环糊精脂质体纳米粒(TPSG modified ADI sulfobutyl-β...     

血清炎症因子和肺功能与OSAHS患者病情程度的相关性研究

  目的  探讨炎症因子和肺功能与阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea hypopnea syndrome, OSAHS)病情程度相关性,为临床治疗提供参考。  方法  选择浙江医院2018年3月—2020年3月收治的OSAHS患者179例;另选择同期健康体检者80例作为对照组。采用酶联免疫吸附法测定白介素(IL)-6、IL-18和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用肺功能仪测定潮气量(VT)、最大肺活量(VC_max)、用力肺活量(FVC)和第1秒用力呼气容积(FEV₁);采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)评价睡眠质量。  结果  血清IL-6、IL-18和TNF-α水平比较,轻中度组[(28.21±5.12)pg/mL、(22.35±4.12)ng/L和(187.46±37.23)ng/L]和重度组[(45.17±6.71)pg/mL、(42.10±5.62)ng/L和(297.42±30.19)ng/L]高于对照组[(11.82±3.27)pg/mL、(9.65±2.19)ng/L和(108.91±25.26)ng/L],均P < 0.05。VT、VC_max、FVC和FEV₁比较,轻中度组和重度组低于对照组(均P < 0.05)。IL-6、IL-18和TNF-α与重度OSAHS呈线性正相关,而VT、VC_max、FVC和FEV₁与重度OSAHS呈线性负相关。  结论  OSAHS患者存在炎症反应、肺功能下降,且与病情程度呈正相关。      

预知子提取物增敏奥沙利铂诱导结肠癌HCT116细胞凋亡的研究

目的 探讨预知子提取物增敏奥沙利铂(OXA)诱导结肠癌HCT116细胞凋亡的作用及机制,为减少OXA毒副作用发生的临床应用提供研究基础.方法 将预知子乙酸乙酯萃取成分进行中压柱层析分离,并进行抗肿瘤药效筛选,获取活性部位B14,并进一步分离和鉴定该活性部位成分;运用MTT法检测B14、OXA及二者联用对HCT116的增...     

妊娠期糖尿病患者血清25羟维生素D3及血脂水平分析

  目的  观察妊娠期糖尿病(GDM)患者体内血清25羟维生素D₃[25(OH)D₃]水平,探讨其对糖脂代谢水平的影响。  方法  选取2018年5月—2019年12月金华市人民医院产科收治的306例孕妇为研究对象, 检测其血清25(OH)D₃水平及血糖、血脂相关指标, 根据口服葡萄糖耐量试验(OGTT)试验结果将孕妇分为妊娠期糖尿病组(74例)和正常妊娠组(232例), 比较2组孕妇血清25(OH)D₃水平, 分析血清25(OH)D₃水平与GDM的相关性,并比较妊娠期糖尿病患者不同亚组间的妊娠结局。  结果  妊娠期糖尿病组患者血清25(OH)D₃水平为(55.20±0.06)nmol/L, 低于正常妊娠组的(64.92±1.10)nmol/L(P＜0.05);妊娠期糖尿病组患者血糖及血脂相关指标水平均高于正常妊娠组,进一步分析相关性发现血清25(OH)D₃水平与空腹血糖(FPG)、TC、TG呈负相关(均P＜0.05);正常血清25(OH)D₃水平的妊娠期糖尿病患者孕周为(39.20±0.16)周, 高于体内缺乏25(OH)D₃的患者[(36.67±0.51)周], 且新生儿体重大于体内缺乏25(OH)D₃的患者[(3.72±0.15)kg vs.(3.07±0.12)kg, P＜0.05]。  结论  妊娠期糖尿病患者25(OH)D₃水平低于正常妊娠孕妇, 且与FPG、TC、TG等糖脂代谢参数指标存在显著关联,若体内缺乏25(OH)D₃可能会影响妊娠结局。      

岗松中二氢黄酮的分离、绝对构型的确定及细胞毒活性

目的 研究岗松(Baeckeafrutescens)中黄酮类成分,并评价其细胞毒活性.方法 利用正反相硅胶柱色谱、MCI柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20及半制备型高效液相等分离技术进行分离,根据MS、NMR及ORD与ECD计算等方法鉴定结构及其绝对构型;MTT法测定了对4种人类肿瘤细胞株的细胞毒活性.结果...     

大鼠骨髓间充质干细胞最适培养基的筛选

  目的  探讨不同培养基对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)生长的影响,筛选对大鼠BMSCs生长较适宜的培养基。  方法  采用全骨髓差速贴壁分离法从SD大鼠股骨和胫骨分离BMSCs,分别选用DMEM-LG、α-MEM、DMEM/F12三种培养基分离培养大鼠BMSCs。倒置相差显微镜下观察不同培养基对大鼠BMSCs形态均一化程度、克隆形成时间与第14天克隆形成数量、第1次传代时间、细胞增殖率以及细胞贴壁率等的影响;流式细胞术鉴定并观察不同培养基对大鼠BMSCs表面抗原表达的影响。  结果  与其他两组相比,体外DMEM-LG培养基培养的大鼠BMSCs形态均一、克隆形成时间和第1次传代时间短、克隆形成数量多达(14±2)个、细胞贴壁率高达(47.0±2.8)%;同时,BMSCs进入对数生长期仅需4 d,且平均增殖率最高,单位时间内平均扩增数量最多,3 d总扩增数量达(2.2~2.7)×105 mL-1;采用DMEM-LG、α-MEM、DMEM/F12三种培养基分离培养的细胞均为大鼠BMSCs,且不同培养基对大鼠BMSCs表面抗原表达无明显影响。  结论  DMEM-LG培养基较适合大鼠BMSCs的生长。