广州市健康人群携带的沙门菌噬菌体分型

沙门菌是引起食物中毒的重要致病菌之一 ,健康人携带的沙门菌是潜在的传染源。随着科学技术的发展 ,细菌学分型技术已不能满足传染源追踪和流行病学调查的需要。自1938年Craigie和颜春晖首先报道用Vi噬菌体进行伤寒沙门菌的分型以来 ,噬菌体的诊断及分型技术得到广泛的应用。国内有关从病人中分离的伤寒及鼠伤寒沙门菌的噬菌体分型的报道较多〔1～ 5〕,但对健康人携带的多种血清型沙门菌的噬菌体分型较少见。我们于 2 0 0 0年 8月～ 2 0 0 1年 7月对广州市健康体检从业人员中分离的沙门菌进行噬菌体分型。现将结果报告如下。1　材料与方法1…     

广州市荔湾区饮食及公共场所服务行业从业人员沙门菌带菌调查

目的 了解广州市荔湾区饮食及公共场所服务行业从业人员沙门菌携带状况.方法 2001-2005年对饮食及公共场所服务行业从业人员采集肛拭子进行增菌培养并鉴定.结果 5年共检测151 490人,检出沙门菌带菌者721例,平均带菌率为0.48%;721株沙门菌中有545株分属43个血清型,有176株不能分型.菌型以德尔卑、阿贡纳、肯塔基、鸭、斯坦利、山夫登堡、汤卜逊和婴儿血清型为主,8个血清型共检出370株,占检出总数的51.32%;第2、3季度分离的菌株占全部阳性数的75.45%.结论 广州市荔湾区饮食及公共场所从业人员的沙门菌带菌率处于较高水平,血清型较复杂,人群带菌率具有明显的季节性.     

应用分子血清分型技术鉴定抗原缺失沙门菌血清型

目的 利用液相芯片技术和全基因组测序2种分子血清分型技术,对抗原缺失血清型沙门菌进行血清分型.方法 采用玻片凝集法对3株沙门菌进行分型;提取沙门菌基因组DNA,采用液相芯片技术进行血清型分型;然后全基因组测序后组装草图,用SISTR预测沙门菌血清型.结果 3株沙门菌分离株,用传统玻片凝集法鉴定属于B群和E1群沙门菌,未...     

广州市2012年腹泻病人沙门菌血清学、耐药及PFGE分型分析

目的研究引起患者感染性腹泻的沙门菌的血清学分布、耐药特点及分子流行病学特征。方法对分离自广州市8所哨点医院腹泻病人粪便的沙门菌,用血清凝集实验确定血清型,用K-B纸片法检测对12种抗生素的敏感性,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌进行分子分型。结果从分离的205株沙门菌中,鼠伤寒沙门菌是主要的血清型,占43.4%,其次是肠炎沙门菌,占13.7%。在抗生素敏感性测试中,磺胺复合物耐药率最高,达66.8%;其次是氨苄西林,65.4%;对头孢吡肟和头孢噻肟也出现了耐药,分别为9.8%和9.3%。PFGE分型结果显示71株鼠伤寒沙门菌可分为47个PFGE型,28株肠炎沙门菌可以分为17个PFGE型。结论本研究表明引起腹泻沙门菌血清型以鼠伤寒和肠炎为主。PFGE分型较为分散。值得注意的是,对头孢类抗生素出现较高的耐药率,应当引起重视。     

广州市136株沙门菌耐药表型与分子分型研究

目的研究广州市2013年腹泻患者感染的沙门菌的血清型分布、耐药情况以及分子流行特征。方法用传统血清学方法鉴定沙门菌的血清型,并用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验,用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对斯坦利沙门菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和Ⅰ4,5,12:i:-沙门菌进行分子分型研究。结果 136株沙门菌被鉴定为29种血清型,数量居前三位的血清型为斯坦利沙门菌(19.9%)、肠炎沙门菌(15.4%)和鼠伤寒沙门菌(15.4%)。所有沙门菌菌株对四环素和萘啶酸耐药率最高,分别达到44.8%和39.7%,对环丙沙星的敏感率仅为19.9%;对头孢他啶、头孢噻肟和头孢曲松的耐药率均为7.4%。对3类及以上抗生素耐药的多重耐药菌有56(41.2%)株。27株斯坦利沙门菌和21株肠炎沙门菌分别可分为25个PFGE型和15个PFGE型。结论在广州市引起腹泻的沙门菌主要以斯坦利沙门菌、肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,分成多种PFGE型,呈高度散发。本地区沙门菌菌株的多重耐药现象严重,对于氟喹诺酮类和头孢类药物的耐药性升高。     

郑州市腹泻患者S.1,4,[5],12:i:-沙门菌和鼠伤寒沙门菌鉴定与分子分型

目的 对分离自郑州市腹泻患者的S.1,4,[5],12:i:-沙门菌和鼠伤寒沙门菌进行鉴定和分型,为防控沙门菌引起的突发公共卫生事件提供依据.方法 2020年收集郑州市22家哨点医院腹泻患者分离的沙门菌,采用玻片凝集法和双重PCR法进行血清分型;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型.结果 共纳入67株菌株,经玻片...     

沙门菌PCR-dHPLC基因分型方法建立

目的 建立沙门菌聚合酶链反应-变性高效液相色谱(PCR-dHPLC)基因分型方法.方法 采用16S ～23S rRNA内转录间隔(ITS)作为沙门菌分型目的基因,确定特异性扩增引物,进行PCR扩增,扩增产物经dHPLC分离,根据dHPLC图谱峰型差异进行分型,并与血清学和生化分型结果比较.结果 89株沙门菌共分为12个dHPLC型(D型);所有沙门菌均有1个相同色谱峰,克隆测序结果表明,其片断大小为600 bp,其他8种食源性致病菌对照株无此色谱峰,应为沙门菌16S～23S rRNA基因序列的特征性条带,分型结果与血清学差异较大,与生化分型结果有一定一致性.结论 所建立的沙门菌PCR-dHPLC基因分型方法具快速、操作方便、重复性好、成本低廉、高通量和自动化的特点.     

沙门菌血清分型和脉冲场凝胶电泳分子分型在流行病学调查中的应用

沙门菌造成的食物中毒和食源性疾病暴发是全球性的公共卫生问题.对人感染的沙门菌进行血清分型,进一步对同一血清型菌株进行脉冲场凝胶电泳分子分型,可以增强识别食源性疾病暴发的能力,发现暴发病例,掌握流行趋势,追溯感染源头.此文对沙门菌血清分型和脉冲场凝胶电泳分子分型的研究进展及应用作了综述.     

一起肠炎沙门菌食物中毒实验室检测及溯源分析

目的对一起沙门菌引起的食物中毒进行病原菌检测及溯源分型分析。方法常规分离沙门菌,对分离到的肠炎沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。结果 14名食物中毒学生标本检出肠炎沙门菌4株;57名食堂工作人员肛拭标本检出肠炎沙门菌6株、纽波特沙门菌1株;9份冷冻预包装食品中检出肠炎沙门菌1株。对11株肠炎沙门菌进行脉冲场凝胶电泳分型,学生、食堂工作人员检出的10株菌株PFGE条带完全一致,与1份冷冻预包装食品中检出的肠炎沙门菌的PFGE聚类分析的同源性为86%。结论这起食物中毒是由肠炎沙门菌引起,通过PFGE分型分析,本次食物中毒与预包装食品肠炎沙门菌污染无关联。PFGE可有效应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究。     

一起由维尔肖沙门菌引起的食物中毒事件的病原溯源

目的:运用基因分型技术对一起由维尔肖沙门菌引起的食物中毒进行溯源分析,探讨分子分型技术在沙门菌食物中毒中病原菌溯源和应用可能性。方法:采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)法对一起食物中毒事件中分离的11株维尔肖沙门菌进行基因分型和溯源性分析。结果:从病人肛拭中分离出的8株维尔肖沙门菌和引起该食物中毒的食物中分离的3株菌株都属于同一克隆。结论:此次食物中毒由同一株维尔肖沙门菌引起,PFGE分型技术可以直观的判断分离菌的亲缘关系,为流行病学调查和溯源提供可靠而实际的依据。     

2013年泰州市健康从业人员携带的沙门氏菌耐药状况以及分子分型研究

目的 了解泰州市健康从业人员携带的沙门氏菌血清型分布、耐药状况以及分子分型特性,为食源性沙门氏菌病的防治提供检测依据。方法 将2013年泰州市健康从业人员分离的58株沙门氏菌进行生化鉴定、血清学分型、药敏试验以及脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE)分子分型,并运用BioNumeries软件分析菌株之间的流行病学关系。结果 58株沙门氏菌分为8种血清型,主要以蒙德维的亚沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、德尔卑沙门氏菌为主。药敏试验表明,58株沙门氏菌对四环素和萘定酸耐药性最高;多重耐药谱显示耐2种抗生素及以上占39.66%,最高耐10种抗生素。PFGE结果表明,同一血清型的沙门氏菌有多个PFGE带型,相似度大于50.00%,且均有带型100.00%一致的菌株存在。结论 泰州市健康从业人员携带的沙门氏菌耐药谱广,耐药性较强;基因型呈多态分布,但具有流行相关性;各血清型都有100.00%同源菌株,应结合流行病学调查,做好预防控制工作。     

长沙市2起肠炎沙门菌食物中毒事件的病原鉴定与溯源

目的 对2起食物中毒事件沙门菌分离株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）和耐药分析,追踪溯源并为疫情防控提供依据。方法 采集患者粪便和剩余食物按照相应标准进行致病菌的分离和鉴定,对分离出的沙门菌使用PFGE分子分型进行同源性分析,药敏试验分析沙门菌的耐药情况。结果 2起食物中毒,分别检出4株（来自病人）和12株（11株来自病人、1株来自食品）沙门菌,血清学鉴定为肠炎沙门菌。2起事件的分离株电泳图谱仅有一个条带的差异（相似值96.3%）,高度同源。对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林三种抗生素由敏感到耐药。结论 此2起食物中毒事件由同一PFGE型别肠炎沙门菌引起,且有耐药性加强趋势,应重点关注。     

贵州省动物性食品中沙门菌耐药及分子特征相关性研究

目的 了解贵州省动物性食品中沙门菌的耐药和分子型别特征及二者相关性,为我省食源性沙门菌感染及防控提供科学依据。方法 对贵州省9个市(州)2017—2021年市售动物性食品中分离的146株沙门菌进行血清学分型,采用微量肉汤稀释法测定菌株对15种抗生素的耐药性,脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)和多位点序列分型(multi-locus sequence typing, MLST)对菌株进行分子分型。结果 146株沙门菌分出27种血清型,以鼠伤寒(31/146,21.2%)、德尔卑(26/146,17.8%)、肠炎沙门菌(16/146,11.0%)为优势血清型。146株菌耐药率为79.5%(116/146),多重耐药率达60.3%(88/146),共有72种耐药谱。对氨苄西林、四环素耐药率分别达61%、64.4%。129株菌经PFGE共分出52个聚类76种带型,相似度在53.5%～100%,146株菌经MLST共检出29种ST型,以ST40(26/146,17.8%)、ST34(17/146,11.6%)、ST11(16/146、1...     

Salmonella Derby clonal spread from pork

The genetic diversity of the Derby serotype of Salmonella enterica in Spain was examined by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Out of 24 identified PFGE profiles, a major clone was detected in 19% of strains from humans, 52% from food, and 62% from swine. This clone (clone 1) was isolated from pork products, suggesting swine as its source.     

自贡市2007-2010年鼠伤寒沙门菌感染的脉冲场凝胶电泳分析

目的 回顾性分析自贡市2007-2010年分离到的沙门菌菌株,评估分子分型技术在食源性传染病暴发识别和处置中的价值。 方法 对自贡市2007-2010年从食品和腹泻患者中分离的沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验,用 BioNumerics软件分析菌株之间的相似度。 结果 55株沙门菌中,来源于2007-2008年的10个腹泻患者粪便和2008年的15个皮蛋中的25株鼠伤寒沙门菌菌株PFGE带型相似度为100%,均为P9带型。 结论 感染鼠伤寒沙门菌的皮蛋是导致自贡市2007-2008年10名患者腹泻暴发的污染源,为快速准确识别食源性疾病暴发并及时溯源、控制,应在食品安全监测中普及PFGE等分子分型技术。     

一起罗米他沙门菌引起大学生食物中毒的病原学调查

目的 对某高校发生的一起食物中毒开展流行病学调查及病原学检索和溯源,探讨其中毒原因、传染源、传播途径。方法 对相关病例的流行病学特征进行调查,同时对腹泻病原进行检索,对病原菌进行生物学特征研究,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE) 技术进行分子流行病学溯源。结果 有流行病学相关病例15例,共分离出9株罗米他沙门氏菌(Salmonella romita,6,7:e,h:1,5),其中4株来自病例,1株来自从业人员,4株来自可疑食品西红柿汤汁。9株菌的生化表型、血清型及药敏试验结果一致,PFGE 条带聚类分析显示菌株属于同一克隆。结论 本起食物中毒由罗米他沙门菌引起,PFGE分型技术实现了对不同样品来源的罗米他沙门菌溯源。     

衡阳市生畜肉及熟肉制品中沙门菌血清型、分子分型及耐药性研究

目的 了解2021年衡阳市生畜肉及熟肉制品中沙门菌污染状况,分析沙门菌血清型分布、分子分型特征及耐药情况。 方法 采集衡阳市各县区生畜肉及熟肉制品样品,依照GB4789.4进行沙门菌分离鉴定和血清分型;采用美国临床和实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)推荐的微量肉汤稀释法进行药物敏感试验;用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)进行分子分型,结果用BioNumerics软件聚类分析。 结果 从52份生畜肉中检出18株沙门菌,检出率为34.62%(18/52),52份熟肉制品中检出3株沙门菌,检出率为5.77%(3/52);21株沙门菌可分为7个血清型,其中伦敦沙门菌42.86%(9/21)和罗森沙门菌19.05%(4/21)占主要优势;21株沙门菌均对亚胺培南(IPM)和多粘菌素E(CT)敏感,对萘啶酸(NAL)、头孢噻肟(CTX)、头孢西丁(CFX)、头孢他啶(CAZ)敏感度均达90.00%以上,对四环素(TET)、氨苄西林(AMP)、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(SXT)耐药达50.00%以上,多重耐药严重,最常见的耐药谱为四环素-氨苄西林-甲氧苄啶/磺胺甲噁唑(TET-AMP-SXT),耐药率为52.38%;21株沙门菌PFGE聚类分析相似度为48.20%,罗森、伦敦沙门菌带型最为集中,但鼠伤寒沙门菌呈现多样性;各带型与耐药谱之间未见明显相关。 结论 衡阳市生畜肉及熟肉制品沙门菌污染及耐药问题严重,血清型分布广泛,同一血清型大部分菌株PFGE型可聚集成簇。     

食品中沙门氏菌血清及PFGE分型研究

目的了解吉林省食品中分离的沙门氏菌血清型与脉冲场凝胶电泳（PFGE）基因分型,探索沙门氏菌的分子多态性。方法将从市售鸡肉、鸡胴体、中式凉拌菜及婴儿配方奶中分离出的10株沙门氏菌进行血清学分型、PFGE分子分型,BioNumerics version软件分析比较同源性。结果 10株沙门氏菌血清型分别为4株肠炎沙门氏菌,3株里定沙门氏菌,2株阿贡纳沙门氏菌和1株雷摩沙门氏菌。PFGE聚类分型结果主要分为4型：1型4株,相似度超过95%;2型3株,又分2个亚型,亚型间的相似度为78%;3型2株,相似度为100%;4型1株。结论吉林省食品中沙门氏菌具有不同血清学及PFGE型别,相同来源和血清型的菌株PFGE型别显示高度同源性。     

脉冲场凝胶电泳在一起慕尼黑沙门菌食源性暴发中的应用研究

目的 脉冲场凝胶电泳(PFGE)在食源性疾病病原菌诊断中的应用.方法 采集19例患者和18名厨师的肛拭子、9份自制冷饮、2份井水以及5例患者的急性期和恢复期血清.同时采集未发病学生大便10份,血清5份,作为正常人对照.用传统的方法进行致病菌的分离和表型鉴定,对所分离的菌株参照美国疾病预防控制中心(CDC)的实验方法用PFGE进行DNA分子分型,使用BioNumerics软件进行聚类分析.方法 从19份食物中毒患者肛拭子中分离出14株慕尼黑沙门菌、从9份可疑食物中分离出3株慕尼黑沙门菌、从18名厨师肛拭子中分离出7株慕尼黑沙门菌,所分离菌株生化结果一致、耐药性相同,患者恢复期血清比急性期血清对所分离的菌株抗体有4倍以上增长.23株分离株的PFGE型完全一致.结论PFGE能直观判断肠道致病菌的亲缘关系,及时确定传染源、传播途径和流行范围,是有效控制食源性疾病大面积暴发的早期预警手段.     

不同来源肠炎沙门菌的溯源研究

目的:应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对不同来源的肠炎沙门菌进行分子分型,为政府部门修订相关的卫生法规提供了重要科学依据。方法:采用限制性内切酶Xba I,对广州地区2009-2011年间从业人员健康体检和食物中毒中检出的36株肠炎沙门菌进行PFGE分子分型,用BioNumerics Version 4.0软件(复选Dice相关系数和UPGMA方法)进行聚类分析。结果:36株肠炎沙门菌PFGE图谱显示菌株之间密切相关,相似度在88.8%～100%。结论:从业人员健康体检和食物中毒分离的肠炎沙门菌菌株之间存在较高分子水平的同源性,提示健康带菌从业人员是沙门菌食物中毒不可忽视的污染源。