天然免疫检查点CD47-SIRPα在恶性肿瘤中的研究进展

针对CTLA-4/B7和PD-1/PD-L1的免疫检查点抑制剂现已广泛应用于临床,其他检查点抑制剂也正在开发中。CD47是广泛表达于正常细胞表面的蛋白质,在肿瘤细胞中呈过表达状态,其受体为髓系抑制性免疫受体SIRPα。阻断CD47与SIRPα之间的相互作用可增强巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬作用进而消灭肿瘤细胞。此外,越来越多的证据表明阻断CD47-SIRPα轴还可以增强抗原呈递细胞的功能,从而刺激T细胞介导的抗癌免疫。随着该领域研究的发展,CD47-SIRPα轴的临床应用将会是未来肿瘤免疫治疗的热点之一。     

CD47与淋巴瘤免疫治疗相关性的研究进展

CD47属于免疫球蛋白超家族成员,在人体多种细胞和组织上均有表达,但在肿瘤细胞上表达得更多,特别是在各种造血系统肿瘤中高表达.肿瘤细胞上表达的CD47与巨噬细胞上的信号调节蛋白α(SIRPα)结合抑制巨噬细胞对肿瘤的吞噬作用可导致肿瘤免疫逃逸.近年来CD47成为肿瘤研究的新热点,本文就CD47的结构与表达、CD47-S...     

CD47在胰腺癌组织中的表达及临床意义

目的 通过TCGA数据库及人类蛋白质谱数据库分析CD47表达、胰腺癌临床病理特征及患者总存活率之间的关系。通过GEPIA数据库进一步分析了CD47基因表达与免疫细胞浸润的关系。方法 在(TCGA)数据中初步筛选胰腺癌组织和癌旁正常组织中CD47的表达。应用蛋白质组学数据库(CPTAC)和人类蛋白质图谱数据库评估CD47蛋白的表达。应用(ROC)曲线评价CD47 mRNA表达对胰腺癌的诊断价值。采用多因素分析和Kaplan-Meier生存曲线分析CD47表达与临床病理参数和总生存期(OS)的关系。同时,使用GEPIA数据集探究CD47基因表达与免疫细胞浸润的关系。结果 胰腺癌组织中CD47表达明显高于癌旁正常组织。ROC曲线分析显示,以5.236为界值,CD47鉴别胰腺癌与癌旁对照的准确性、敏感性和特异性分别为97.0%、95.0%和91.8%。Kaplan-Meier生存分析显示,CD47高表达的胰腺癌患者预后比CD47低表达的患者差。单因素和多因素分析显示,CD47是胰腺癌患者的独立危险因素。相关分析表明,CD47的表达与肿瘤纯度和免疫浸润有关。结论 CD47表达缺失与胰腺癌的疾病进...     

CD47在淋巴瘤治疗中的研究进展

CD47作为一种跨膜蛋白,广泛分布于多种细胞,通过与巨噬细胞上信号调节蛋白α（SIRPα）结合,释放抑制信号,逃避巨噬细胞的吞噬。淋巴瘤细胞CD47表达上调是诱导免疫逃逸的重要机制之一,也是潜在的治疗靶点。文章就CD47诱导的免疫逃逸、靶向CD47的单克隆抗体和细胞免疫治疗等治疗手段在淋巴瘤治疗中的研究进展进行综述。     

CD47与淋巴瘤相关性的研究进展

淋巴瘤的发生与发展是许多因素共同作用的结果，其中免疫系统在其发展中也发生着重要的作用。CD47是高表达于淋巴瘤细胞表面的糖化跨膜蛋白，它与其配体抑制性受体信号调节蛋白（ SIRPα）结合后可抑制巨噬细胞的吞噬作用，产生免疫逃逸，从而促进淋巴瘤的发生与发展。本文阐述了CD47的结构、生理功能及相关的表达调控，并对CD47在淋巴瘤的预后及治疗中的作用进行了综述。     

CD47在输卵管癌中的表达及临床意义

目的:检测CD47在输卵管癌和正常输卵管组织中的表达,并探讨其临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测输卵管癌患者标本73例和正常输卵管标本31例中CD47的表达情况,分析其与输卵管癌患者临床病理参数的关系及其表达对患者预后的影响。结果:CD47以胞膜着色为主,亦有胞浆着色,CD47在输卵管癌高表达率为42.5％,明显低于正常输卵管组织的83.9％（P＜0.01）。生存曲线分析显示CD47阴性表达的输卵管癌患者死亡率增高（P＜0.05）。结论:CD47表达的减低可指导临床诊断原发性输卵管癌,且其表达减低与输卵管癌预后不良有关。     

CD47与胰腺癌相关性的研究进展

CD47分子是一种高度糖化的跨膜蛋白,存在于所有组织的多种细胞表面上。近几年的研究表明,CD47分子与多种恶性肿瘤密切相关,在大部分肿瘤细胞中呈现高表达,它与特异性配体结合后,可对免疫细胞吞噬肿瘤细胞产生抑制作用,使其产生免疫逃逸,故可促进肿瘤的发生与发展。胰腺癌是常见的消化系统肿瘤,恶性程度极高,诊断、治疗困难,预后不理想。与其他肿瘤类似,胰腺肿瘤与人体免疫系统之间也存在一定相关性,但CD47与胰腺癌相关性的研究甚少,故本文将从CD47的分子结构、生理功能、表达情况及与胰腺癌的相关性进行综述,并对胰腺癌的免疫治疗进行总结和展望。     

整合素α6在宫颈癌中的表达及意义

目的：探讨整合素α6在宫颈癌中的表达及意义。方法：在20例宫颈浸润癌中整合素α6基因及其蛋白分别采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学（IHC）SP法进行检测。18例正常宫颈上皮、20例宫颈原位癌、55例宫颈浸润癌中（包括前20例宫颈浸润癌）,整合素α6蛋白的表达采用免疫组织化学SP法检测。结果：20例宫颈浸润癌中整合素α6mRNA和蛋白表达率无统计学差异（P〉0.05）。整合素α6在宫颈癌中的表达率明显低于正常宫颈组织（P〈0.001）,而宫颈浸润癌和宫颈原位癌组织之间无显著性差异（P〉0.05）。整合素α6表达与宫颈鳞癌临床分期、肿瘤大小、病理分级、宫颈浸润深度无相关（P〉0.05）,而与淋巴转移相关（P〈0.05）。结论：整合素α6可能通过改变宫颈癌细胞的粘附力而发挥促进宫颈癌发生发展及淋巴结转移的作用。     

整合素α6在宫颈癌中的表达及意义

目的:探讨整合素α6在官颈癌中的表达及意义.方法:在20例宫颈浸润癌中整合素α6基因及其蛋白分别采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组织化学(IHC)SP法进行检测.18例正常宫颈上皮、20例宫颈原位癌、55例宫颈浸润癌中(包括前20例宫颈浸润癌),整合素α6蛋白的表达采用免疫组织化学SP法检测.结果:20例宫颈浸润癌中整合素α6 mRNA和蛋白表达率无统计学差异(P>0.05).整合素α在宫颈癌中的表达率明显低于正常宫颈组织(P<0.001),而宫颈浸润癌和宫颈原位癌组织之间无显著性差异(P>0.05).整合素α6表达与宫颈鳞癌临床分期、肿瘤大小、病理分级、宫颈浸润深度无相关(P>0.05),而与淋巴转移相关(P<0.05).结论:整合素α6可能通过改变宫颈癌细胞的粘附力而发挥促进宫颈癌发生发展及淋巴结转移的作用.     

CD47在非小细胞肺癌中的表达及意义

摘 要： ［目的］ 通过检测CD47在非小细胞肺癌中的表达,了解CD47在非小细胞肺癌表达的意义及其与预后的相关性。［方法］ 采用免疫组化EnvisionTMplus法检测52例非小细胞肺癌患者癌及癌旁组织中CD47的表达,分析CD47与非小细胞肺癌患者临床病理参数及预后的关系。［结果］ CD47在非小细胞肺癌及癌旁组织中表达阳性率分别为80.8%(42/52),34.6%(18/52),癌组织CD47阳性率明显高于癌旁组织(P＜0.05)。CD47与非小细胞肺癌患者的临床分期、淋巴结转移相关(P＜0.05)。CD47阳性患者术后3年总体生存率低于阴性患者(χ2=4.314,P=0.038)。［结论］ CD47与非小细胞肺癌侵袭、转移和预后密切相关,有可能成为非小细胞肺癌的参考指标。     

表达SIRPα-Fc的基因-溶瘤腺病毒对胆管癌治疗作用的实验研究

目的:研究表达SIRPα-Fc融合基因的基因-溶瘤腺病毒SG655-SF对胆管癌的治疗作用。方法:将信号调节蛋白α(signal regulatory proteinα,SIRPα)突变体CV1与人Ig G1 Fc段融合(简称SF),构建SF编码序列(基因)。将SF基因插入条件增殖型腺病毒载体SG655,构建基因-溶瘤腺病毒SG655-SF。重组病毒经鉴定正确后,经扩增、滴度测定,感染293细胞。Western blot检测外源基因的表达情况。间接免疫荧光检测293细胞表达的SF蛋白对胆管癌细胞的结合能力。噻唑蓝(MTT)法测定病毒对胆管癌细胞的杀伤作用。建立人类胆管细胞癌裸鼠移植瘤模型,用SG655-SF治疗,观察疗效。取肿瘤组织进行切片检查,验证其抗肿瘤作用。结果:成功构建SF表达框、基因-溶瘤腺病毒SG655-SF。SG655-SF感染293细胞后,能高效表达SF蛋白。293细胞表达的SF蛋白能有效结合CD47高量表达的胆管癌细胞株EH-CA1-T、EHCA1-Y。SG655-SF能有效杀伤胆管癌细胞。SG655-SF可以有效抑制肿瘤在裸鼠体内生长。肿瘤组织切片检查提示有肿瘤坏死和病毒浸润。结论:基因-溶瘤腺病毒SG655-SF具有良好的抗胆管癌活性。     

CD47在肿瘤中的表达及治疗应用

近年来研究发现,CD47通过上调在肿瘤细胞表面的表达来影响肿瘤的生长与转移,同时,其表达上调预示临床预后较差;而CD47单抗可通过激活适应性免疫及直接介导细胞凋亡等机制抑制肿瘤生长.此外,CD47还具有调节血液系统和胃肠道系统正常组织细胞的放射性损伤修复作用,有望成为肿瘤治疗的新靶点.     

FOXP3在宫颈癌组织中的表达及意义

目的:研究FOXP3在不同程度宫颈病变组织中的表达水平,探讨其在宫颈癌发生、发展过程中发挥的作用。方法:对不同程度宫颈病变组织采用免疫组化法检测FOXP3蛋白的表达情况,分析FOXP3在宫颈癌组织中的表达差异与临床病理参数之间的关系。结果:FOXP3在宫颈癌组织中表达率明显高于宫颈上皮内瘤样病变及慢性宫颈炎组,差异具有统计学意义（P<0.05）。FOXP3在宫颈癌组织中存在的表达差异与肿瘤细胞的分化程度及临床分期呈明显负相关,与淋巴结转移情况无明显的相关性。结论:FOXP3蛋白在宫颈癌组织中的表达明显增加,提示FOXP3表达增加促使宫颈癌细胞发生肿瘤逃逸、对促进宫颈癌的形成发挥重要作用。     

CD46 CD55 CD59在结肠癌组织中的表达及意义

目的：检测CD46、CD55、CD59在结肠癌组织中的表达情况,分析其与结肠癌临床病理参数间的相关性及意义。方法：选取有详细性别、年龄、组织分化、病理分期、肿瘤部位、组织类型资料的组织芯片标本,包括121 例结肠癌和121 例癌旁结肠组织,均为2004年10月至2006年6 月第四军医大学西京消化病医院胃肠外科手术切除标本。应用免疫组织化学改良二步法分别检测CD46、CD55、CD59的表达情况。结果：CD46、CD55及CD59在结肠癌组织中的阳性表达率均显著高于对应的癌旁组织（P < 0.001）。 CD46表达水平与性别、年龄、组织分化、TNM 病理分期、肿瘤位置、病理组织类型均无关（P > 0.05）。 CD55、CD59的表达水平与性别、年龄、肿瘤位置、病理类型无关（P > 0.05）,而与组织分化、TNM 病理分期有关（P < 0.05）。 其表达强度阳性率中低分化组明显高于高分化组（P < 0.05）。 TNM 分期中Ⅲ、Ⅳ期患者肿瘤病理组织强阳性表达率高于Ⅰ、Ⅱ期阳性表达率,两者比较有统计学意义（P < 0.05）。 结论：CD46、CD55及CD59在结肠癌组织中高表达,特别是CD55、CD59的表达与肿瘤分化、病理分期相关,提示三者表达水平与结肠癌生物学行为密切相关。     

CD44v6基因在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨CD44v6基因在宫颈癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:用免疫组织化学S-P法,检测56例宫鳞癌,32例宫颈腺癌中CD44v6蛋白的表达情况并分析相关的临床病理因素。结果:CD44v6表达与宫颈癌组织学类型无关;无论宫颈腺癌或鳞癌,淋巴结转移组中CD44v6阳性表达明显高于无淋巴结转移组（P<0.05）;CD44v6表达与宫颈癌临床分期、病理分级、病灶大小无关（P>0.05）。结论:CD44v6在宫颈癌淋巴结转移及癌细胞分化过程中可能起着重要作用,对早期预测癌细胞的转移潜能、判断宫颈癌预后具有一定的临床意义。     

CD47基因mRNA在人恶性胸膜间皮瘤中的表达及意义

目的:分析CD47基因mRNA在MPM细胞和组织中的表达,并评价其与MPM患者临床病理特征及预后的关系。方法:采用RT-qPCR分析人正常胸膜间皮LP9细胞系和MPM细胞系NCI-H28（上皮样型）、NCI-H2052（肉瘤样型）、NCI-H2452（双相混合型）中CD47基因mRNA表达量;采用RT-qPCR检测12例MPM组织及配对正常胸膜组织中CD47基因mRNA表达量。通过Oncomine数据库对非瘤组织与MPM组织中CD47基因的表达差异进行分析。利用TCGA数据库对CD47基因mRNA表达量与MPM临床病理特征的相关性进行分析。构建Kaplan-Meier模型探讨CD47基因mRNA表达量对MPM患者预后的影响。利用cBioportal在线工具对CD47与MPM肿瘤标志物基因的表达进行相关性分析。结果:RT-qPCR检测和Oncomine数据库检索发现,与配对正常胸膜细胞和组织相比,MPM细胞和组织中CD47基因mRNA的表达量均呈现显著的增加（P＜0.01）。CD47基因表达量与MPM患者肿瘤类型相关（P＜0.05）。CD47基因表达量与MPM患者总生存率和无疾病进展生存率均无显著关联（Logrank P＞0.05）。Cox多因素分析表明,非上皮性型肿瘤是导致MPM患者预后不良的独立危险因素（P＜0.05）。CD47基因表达与EFEMP1、MSLN和CALB2基因的表达具有显著正相关（P＜0.01）。结论:CD47基因mRNA在MPM细胞和组织中均呈现显著增高,其表达量与MPM患者的肿瘤类型相关,但CD47基因mRNA表达量与MPM患者预后之间无显著关联。     

靶向CD47 抗肿瘤治疗的研究进展

[摘要] CD47 是细胞表面高度糖化的穿膜蛋白，是一种“别吃我”信号，可与信号调节蛋白α（SIRPα）等形成CD47-SIRPα 抑制信号复合体，从固有免疫和适应性免疫两方面同时逃避机体的免疫监视。研究发现，CD47 在血液肿瘤和多种实体瘤中高表达，通过与巨噬细胞上的SIRPα 配体结合，启动一系列抑制性的信号转导而躲避吞噬，其高水平表达既能促进肿瘤细胞的生长又能促进肿瘤细胞的转移。通过抗CD47 抗体阻断CD47-SIRPα 信号通路，达到抑制肿瘤细胞的免疫逃逸，增强巨噬细胞的吞噬作用和适应性免疫应答，是免疫治疗肿瘤的新途径。目前，国内外开展了越来越多靶向CD47-SIRPα 的药物或抗体的基础研究和临床试验，有望从抗体分子设计和重组蛋白等方面解决靶向CD47 抗肿瘤治疗时发生的贫血和输液相关不良反应等问题。本文就CD47 的分子结构与生理功能、CD47-SIRPα 表达调控机制、CD47 抗肿瘤治疗研究现状以及靶向CD47 导致的相关生物安全性问题和解决方案等方面进行综述，为CD47新靶点的基础研究和临床应用提供参考。     

抗CD47单克隆抗体制备及其促巨噬细胞吞噬作用鉴定

目的:制备可识别肿瘤细胞表达CD47蛋白的抗CD47单克隆抗体,并鉴定其抗肿瘤作用。方法:利用BL21(DE3)原核表达系统表达CD47胞外段蛋白,利用Ni-NTA层析纯化表达蛋白。免疫BALB/c小鼠,制备并筛选分泌抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞株。利用正辛酸-硫酸铵沉淀方法纯化抗CD47单抗。利用流式细胞术检测纯化抗体的活性。利用巨噬细胞与肿瘤细胞共培养试验,检测抗CD47单抗的抗肿瘤作用。结果:表达并纯化了CD47胞外段蛋白,筛选到了分泌抗CD47单克隆抗体的杂交瘤细胞株—7D4,流式细胞术检测结果显示,抗体具有结合肿瘤细胞的活性,但是对不同肿瘤类型细胞的结合效率存在差异。巨噬细胞与肿瘤细胞共培养试验发现,利用抗体封闭肿瘤细胞CD47信号后,可以增强巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬作用。结论:抗CD47单抗—7D4可以促进巨噬细胞的吞噬作用,具有潜在应用价值。     

CD44V6,PCNA在宫颈癌中的表达及与淋巴结转移相关性分析

目的：研究细胞粘附分子在肿瘤细胞的增殖,浸润,转移过程中的作用,其中ＣＤ４４分子是较受关注的。方法：采用免疫组化方法,检测ＣＤ４４变异体单抗及增殖细胞核抗原在宫颈浸润癌及转移癌中的表达,发现两者在宫颈癌发生及淋巴结转移中呈明显过表达,阳性率分别是７８．９５,８４．２５。结果 ：ＣＤ４４Ｖ６与肿瘤转移密切相关,发生淋巴结转移的宫颈原发癌组织同时伴有细胞增殖活性明显增高。