下调SIRT6对肝癌干细胞干性维持的抑制作用

摘 要：［目的］ 探讨抑制SIRT6表达在肝癌干细胞干性维持中的作用及潜在机制。［方法］ 在不同肝癌细胞系中构建肝癌干细胞模型（Lv-Pnanog-GFP），利用流式细胞术分选出不同来源的肝癌干细胞，采用蛋白免疫印迹（Western blot，WB）和免疫细胞化学（immunocytochemistry，ICC）技术检测SIRT6蛋白在肝癌干细胞中的表达水平；构建SIRT6慢病毒短发卡RNA感染载体（shSIRT6）感染肝癌干细胞，采用WB技术检测shSIRT6的干扰效率；采用实时定量反转录聚合酶链反应（real-time PCR）检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的干性基因（Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44）mRNA的表达水平，ICC方法检测EpCAM蛋白的表达水平；采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷（EdU）试剂盒和细胞增殖活力（CCK8）试剂盒检测抑制SIRT6表达后肝癌干细胞的增殖能力；采用克隆形成和成球实验检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的自我更新能力；利用衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）试剂盒检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的衰老水平。［结果］ WB和ICC检测结果显示，Nanog阳性肝癌干细胞中SIRT6表达水平明显高于Nanog阴性肝癌细胞；real-time PCR检测结果显示，抑制SIRT6后，肝癌干细胞的干性基因（Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44）mRNA表达水平降低。与real-time PCR结果一致，ICC结果也表明，抑制SIRT6后，干性标志物EpCAM的蛋白表达水平降低（P<0.01）。细胞增殖检测结果进一步显示，抑制SIRT6，肝癌干细胞的增殖水平降低（P<0.05）。克隆形成实验和细胞成球实验结果显示，抑制SIRT6导致肝癌干细胞的克隆形成能力和成球能力一致性降低（P<0.01）。SA-β-Gal活性检测结果显示，抑制SIRT6后，肝癌干细胞的SA-β-Gal活性显著性提高（P<0.01）。［结论］肝癌干细胞高表达SIRT6，通过抑制SIRT6表达可诱导肝癌干细胞发生衰老，导致其干性标志物表达水平下降，增殖能力降低，肝癌干细胞克隆形成和成球能力下降。     

柴胡皂苷D通过抑制EMT和细胞干性抑制人结直肠癌细胞SW480的迁移和侵袭

目的:研究柴胡皂苷D（saikosaponin-D,SSD）对人结直肠癌细胞SW480迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨SSD抑制细胞迁移和侵袭的机制。方法:MTT检测SSD对细胞增殖的影响。划痕实验和Transwell迁移实验研究SSD对细胞迁移能力的影响。Transwell侵袭实验研究SSD对细胞侵袭能力的影响。Western-blot检测SSD对上皮间质转化（epithelial mesenchymal transformation,EMT）相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin和Vimentin）表达的影响。克隆球形成实验研究SSD对细胞干性的影响。结果:在划痕实验和Transwell迁移实验中,SSD显著抑制SW480的迁移能力（P<0.05）。在Transwell侵袭实验中,SSD显著抑制SW480的侵袭能力（P<0.05）。SSD处理后,细胞E-cadherin的表达增高,N-cadherin和Vimentin的表达降低（P<0.05）,同时SSD抑制SW480细胞克隆球的形成（P<0.05）。结论:柴胡皂苷D通过抑制EMT和细胞干性抑制人结直肠癌细胞SW480的迁移和侵袭。     

SPAG6促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨抑制精子相关抗原6（sperm-associated antigen 6,SPAG6）对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:体外培养正常卵巢上皮细胞（NOE-71）和卵巢癌细胞（SKOV-3、OVCAR-3）,采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）实验检测细胞中SPAG6基因的表达。将4种潜在抑制SPAG6基因表达的“SPAG6-shRNA”质粒分别转染到SKOV-3细胞,RT-qPCR和Western blot实验筛选有效抑制SPAG6基因表达的细胞株;采用细胞计数法和平板克隆实验检测抑制SPAG6基因表达对卵巢癌细胞增殖的影响;运用细胞划痕实验和Transwell实验检测抑制SPAG6基因表达对细胞迁移和侵袭能力的影响;流式细胞实验检测抑制SPAG6基因表达对细胞周期的影响;免疫荧光实验和Western blot检测在SKOV-3细胞中抑制SPAG6表达对p27kip1分布的影响。结果:SPAG6基因在卵巢癌细胞SKOV-3和OVCAR-3中的表达均显著高于正常卵巢上皮细胞NOE-71,且在SKOV-3细胞中表达最强。RT-qPCR和Western blot实验显示2种“SPAG6-shRNA”质粒能够有效抑制SKOV-3细胞中SPAG6基因的表达;与对照组细胞相比,抑制SPAG6基因表达能够降低SKOV-3细胞的增殖,差异有统计学意义（P＜0.01）;平板克隆实验显示抑制SPAG6基因表达能降低SKOV-3细胞的克隆形成率,差异有统计学意义（P＜0.01）;细胞划痕实验和Transwell实验显示抑制SPAG6基因表达能够降低卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力（P＜0.01）;流式细胞实验显示抑制SPAG6基因表达能使细胞G0/G1期显著上调,S期显著下调(P＜0.01)。SKOV-3细胞中抑制SPAG6表达可降低细胞质中p27kip1的水平而增加细胞核中p27kip1的水平。结论:SPAG6促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

沉默Versican基因对鼠源性肝癌细胞株Hepa1-6体外增殖及迁移影响的研究

目的：检测Versican基因在鼠源性肝癌细胞的表达情况,观察沉默Versican基因对肝癌细胞增殖及迁移能力的影响。方法：采用Western blot技术检测鼠源性肝癌细胞株Hepa1-6中Versican的表达。构建沉默Ver-sican基因的shRNA质粒（shVCAN）稳定转染Hepa1-6,通过荧光显微镜观察shVCAN质粒转染效率,采用RT-PCR及Western blot技术检测Versican基因的沉默效率。CCK-8法检测稳定转染shVCAN质粒后Hepa1-6的增殖能力变化;划痕及Transwell实验检测稳定转染shVCAN质粒后Hepa1-6的迁移能力变化;免疫荧光及Western blot检测稳定转染shVCAN质粒后Hepa1-6上皮细胞-间质细胞转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白的表达情况。结果：鼠源性肝癌细胞株Hepa1-6中Versican蛋白呈阳性表达。荧光显微镜显示shVCAN质粒稳定转染Hepa1-6效率高;RT-PCR及Western blot显示,shVCAN质粒稳定转染Hepa1-6后,其内的Versican表达受到明显抑制。此外,shVCAN质粒稳定转染Hepa1-6后,其增殖及迁移能力降低,差异具有统计学意义（P＜0．05）。同时,免疫荧光及Western blot显示,shVCAN质粒稳定转染的Hepa1-6内,EMT相关蛋白E-cadherin的表达上调,N-cadherin的表达下调。结论：沉默鼠源性肝癌细胞株Hepa1-6内Versican基因的表达,其增殖及迁移能力均受到抑制,其部分机理可能与沉默Versican基因引发Hepa1-6内E-cadherin上调及N-cadherin下调有关。     

消癌平对肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响

 目的　研究不同质量浓度、不同作用时间消癌平注射液（XAP）对肝癌细胞Hepa1-6增殖和凋亡的影响。方法　以低、中、高剂量（10、20、30 mg／ml）的XAP作用肝癌细胞Hepa1-6 24、48、72 h,采用MTT比色法观察XAP对肝癌细胞Hepa1-6生长的抑制作用,HE染色光镜下观察细胞结构的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果　XAP对肝癌细胞Hepa1-6有明显的抑制效应,且具有时间、剂量依赖关系（P＜0.01）,光学显微镜下可见细胞形态趋向良性分化,流式细胞术检测,低、中、高剂量组XAP作用Hepa1-6细胞48 h后,均出现凋亡峰,凋亡率分别为（7.65±0.40）％、（11.26±1.09）％和（26.71±0.85）％,与对照组的（2.88±0.30）％相比,细胞凋亡率显著升高（P＜0.01）。结论　XAP对肝癌细胞Hepa1-6有明显的抑制效应,其抑制效应具有时间、剂量依赖性,其机制可能与抑制肝癌细胞DNA合成及诱导肝癌细胞凋亡有关。     

miR⁃145⁃5p靶向调控LOX基因对肝癌细胞侵袭和迁移的影响

目的 探讨miR-145-5p靶向调控LOX对肝癌细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法 收集2017年9月至2019年9月广西医科大学附属肿瘤医院肝胆外科手术切除的73例肝癌患者肿瘤组织及其配对癌旁正常组织,以及肝癌细胞系SMMC-7721、SK-Hep1,采用RT-PCR法检测组织中miR-145-5p和LOX的表达。分别将miR-145-5p慢病毒载体、LOX过表达质粒及LOX慢病毒沉默载体转染至肝癌细胞SMMC-7721或SK-Hep1,同时用LOX过表达质粒和过表达miR-145-5p慢病毒载体共转染SMMC-7721细胞,各转染组均设置相应阴性对照组及空白对照组;然后采用Transwell实验检测肝癌细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测LOX蛋白的表达水平;通过TargetScan数据库预测miR-145-5p的靶点,并利用Cluster Profiler包进行GO和KEGG富集分析。结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-145-5p在癌旁正常组织中的表达高于肝癌组织（4.196±2.288 vs 2.835±1.817,P<0.0001）;LOX在肝癌组织中的表达高于癌旁正常组织（12.17±1.369 vs 11.26±1.556,P<0.001）。Transwell检测结果显示,过表达LOX能促进肝癌细胞侵袭、迁移,敲低LOX则抑制肝癌细胞侵袭、迁移（均P<0.05）;过表达miR-145-5p能抑制肝癌细胞的侵袭、迁移能力,LOX过表达能逆转miR-145-5p对SMMC-7721细胞迁移和侵袭的抑制能力。TargetScan数据库预测显示,LOX是miR-145-5p的靶基因。Western blot检测结果显示,miR-145-5p能抑制LOX蛋白表达水平（P<0.001）。结论 miR-145-5p在肝癌组织中低表达,LOX则高表达,miR-145-5p可能通过负向调控LOX抑制肝癌细胞侵袭和迁移。     

中性粒细胞胞外诱捕网在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的研究进展

中性粒细胞作为血液循环中的一种静态细胞,在受到微生物侵袭时发挥吞噬及杀菌作用,中性粒细胞激活后形成一种特殊的网状结构-中性粒细胞胞外诱捕网（neutrophil extracellular traps,NETs）。NETs是一把双刃剑。正常情况下,NETs发挥清除病原微生物的作用,但NETs产生过量时,其则参与多种疾病的发展过程,如自身免疫性疾病、糖尿病、动脉粥样硬化、血管炎等疾病。此外,NETs还与多种恶性肿瘤的增殖、转移、预后等密切相关。本文将从NETs的形成及其对弥漫性大细胞淋巴瘤的影响进行综述。      

S100A6在胶质瘤组织中表达及对U87细胞增殖和侵袭力的影响

摘 要：［目的］ 探讨S100A6在胶质瘤组织中表达及对U87细胞增殖和侵袭力的影响。［方法］ 选取2017年3月至2019年3月在郑州大学第五附属医院择期行手术治疗的胶质瘤患者105例,利用实时荧光定量PCR技术检测胶质瘤和癌旁组织中S100A6基因表达,培养人胶质瘤U87细胞,根据转染物的不同将细胞分为siRNA-S100A6组、siRNA-对照序列组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术检测细胞中S100A6基因和蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力。［结果］ 胶质瘤组织中S100A6 mRNA相对表达量为1.95±0.16,癌旁组织中S100A6 mRNA相对表达量为1.33±0.13,两组差异有统计学意义（t=30.776,P<0.001）。与WHO分级Ⅰ～Ⅱ级相比,Ⅲ～Ⅳ级中S100A6mRNA表达量显著性升高（P<0.001）。与空白对照组和siRNA-对照序列组相比,siRNA-S100A6组细胞中S100A6 mRNA和蛋白表达量均降低（P均<0.001）,24h、48h、72h和96h细胞增殖活性被抑制（P<0.05）,划痕愈合率降低（P<0.001）,且侵袭细胞数显著性减少（P<0.001）。［结论］ S100A6在胶质瘤组织中呈高表达,且与胶质瘤恶性程度有关,特异性沉默U87细胞中S100A6基因表达可有效抑制细胞增殖,降低细胞迁移和侵袭能力。     

LncRNA SNHG6调控miR-186表达对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制

目的:研究SNHG6通过调控miR-186表达对人肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化（EMT）的影响。方法:通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测57名肝癌患者癌组织和肝癌细胞系中SNHG6和miR-186的表达;双荧光素酶报告实验验证SNHG6和miR-186的靶向调控关系;将SNHG6的小干扰RNA（si-SNHG6组）、阴性无意义对照序列（si-con组）、si-SNHG6与anti-miR-186抑制剂（si-SNHG6+anti-miR-186组）、si-SNHG6与miR-186抑制物阴性对照（si-SNHG6+anti-miR-con组）,均以脂质体法转染至肝癌HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖;Transwell检测肝癌细胞迁移和侵袭;Western blot实验检测肝癌细胞CDK4、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9及EMT的标志物（E-cadherin、N-cadherin和Vimentin）表达。结果:与癌旁正常组织或正常肝细胞相比,SNHG6在肝癌患者和肝癌细胞系中的表达升高,而miR-186表达降低,两者存在负相关性。与si-con组比较,si-SNHG6组HepG2细胞活力明显下降,迁移和侵袭细胞数明显减少,CDK4、Cyclin D1、MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达增加。SNHG6靶向负调控miR-186表达,抑制miR-186表达可部分逆转下调SNHG6对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。结论:下调SNHG6可能通过负调控miR-186表达和调控细胞EMT过程抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭。     

喹唑啉类PAK4小分子抑制剂CWS-6抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探究喹唑啉类PAK4小分子抑制剂CWS-6对胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭等方面的作用。方法:CCK8检测CWS-6对胰腺癌细胞增殖的影响；流式细胞术检测CWS-6对胰腺癌细胞周期分布的影响；细胞划痕实验检测CWS-6对胰腺癌细胞迁移的影响；Transwell实验检测CWS-6对胰腺癌细胞侵袭的影响；激光扫描共聚焦显微（Confocal）实验检测CWS-6对胰腺癌细胞微丝的影响；Western blotting实验检测CWS-6对胰腺癌细胞PAK4激酶的活化及其下游与迁移侵袭相关蛋白表达的影响。结果:CWS-6对胰腺癌细胞的增殖以及周期影响不明显；在5 μmol/L时对胰腺癌细胞的迁移及侵袭能力有显著的抑制作用；CWS-6对PAK4激酶的活性以及PAK4下游的细胞骨架相关靶蛋白的表达有抑制作用。结论:CWS-6是通过抑制PAK4激酶的活性来抑制细胞增殖以及通过影响PAK4下游细胞骨架相关蛋白抑制微丝的解聚从而抑制胰腺癌细胞的迁移及侵袭能力。     

脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移的抑制作用及相关机制研究

目的:探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭及迁移能力以及细胞周期、细胞凋亡的影响。方法:选取宫颈癌细胞系SiHa,利用不同浓度脂肪抑制素进行培养。通过MTT实验、平板克隆形成实验、Transwell实验及流式细胞术检测实验分别检测脂肪抑制素对宫颈癌细胞增殖、克隆形成能力、侵袭/迁移能力以及细胞周期/细胞凋亡的影响,探究脂肪抑制素对宫颈癌细胞的抗肿瘤作用。结果:MTT实验显示,脂肪抑制素对SiHa细胞的增殖/生长具有明显抑制作用,存在时间和剂量依赖性(P＜0.05);根据细胞增殖率得出72 h时SiHa细胞的IC50为16.98 μmol/L。平板克隆形成实验显示,脂肪抑制素明显降低了SiHa细胞的克隆形成能力,具有剂量依赖性（P＜0.01）。Transwell实验显示,脂肪抑制素也明显降低SiHa细胞侵袭/迁移能力,具有剂量依赖性（P＜0.001）。流式细胞术检测实验显示,较高浓度脂肪抑制素可诱导宫颈癌细胞SiHa的细胞周期停滞在G2/M期,促进其细胞凋亡（P＜0.05）。结论:脂肪抑制素对宫颈癌细胞具有明显抗肿瘤作用,可作为宫颈癌治疗的新药物。     

GBX2过表达促进人宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移及侵袭

[摘要] 目的：探讨GBX2 基因在人宫颈癌SiHa 细胞增殖和侵袭转移中的作用及其机制。方法：应用质粒转染技术,分别将过表达GBX2 基因重组质粒pCMV6-entry-GBX2（实验组）及空载体质粒pCMV6-entry（阴性对照组）转染到宫颈癌SiHa 细胞中,用WST-1 法、集落形成实验、流式细胞术分别检测转染细胞的增殖、集落形成和细胞周期,用划痕愈合实验、Transwell 实验检测细胞的迁移、侵袭能力,用ELISA 法检测细胞培养上清中IL-6 的表达水平,用WB检测EMT相关蛋白的表达变化并探讨其可能的作用机制。结果：与SiHa/pCMV6 组相比,上调GBX2 表达后：（1）SiHa/GBX2 组细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力明显增强（均P<0.01）,G0/G1 期的细胞比例减少、S期与G2/M期的细胞比例增加（均P<0.01）;（2）SiHa/GBX2 组细胞EMT相关蛋白上皮钙黏蛋白表达水平下降,神经钙黏蛋白、波形蛋白和snail 表达水平上调（均P<0.01）;（3）SiHa/GBX2 组细胞培养上清中IL-6 的表达水平明显增高（P<0.01）;（4）SiHa/GBX2 组细胞STAT3 磷酸化水平增强,并能被STAT3 抑制剂S31-201 抑制（P<0.01）。结论：GBX2可能通过IL-6/STAT3 通路诱导宫颈癌SiHa 细胞EMT,从而促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

miR-374 a对肺腺癌细胞增殖与侵袭迁移的影响

目的 探究分析miR-374a对非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭、迁移等生物学行为能力的影响.方法 采用RT-PCR检测miR-374a在正常肺上皮细胞CCD-8L及非小细胞肺癌细胞A549、H1975中的表达情况.采用miR-374a mimic和miR-374a inhibitor转染非小细胞肺癌细胞A549、H1975...     

miR-6775-3p在乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响

背景与目的：微小RNA（microRNA,miRNA）与肿瘤的发生、发展过程密切相关。探讨miR-6775-3p在乳腺癌细胞系中的表达及其对乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法：通过实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）检测4种乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-468和BT-549中miR-6775-3p的表达水平,选取miR-6775-3p表达水平最低的乳腺癌细胞系过表达miR-6775-3p后,采用细胞计数试剂盒（cell counting kit-8,CCK-8）法检测细胞的增殖情况,同时采用transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞迁移和侵袭能力的变化。通过RTFQ-PCR和蛋白［质］印迹法（Western blot）检测miR-6775-3p过表达的乳腺癌细胞系中细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4（cyclin-dependent protein kinase 4,CDK4）和CDK6,以及侵袭转移标志物基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）17和MMP24 mRNA以及蛋白的表达变化。结果：RTFQ-PCR结果显示,乳腺癌细胞系MDA-MB-453中miR-6775-3p的表达最低,在MDA-MB-453细胞中转染miR-6775-3p mimics后,miR-6775-3p的表达水平明显升高（P<0.001）。CCK-8实验结果显示,MDA-MB-453细胞过表达miR-6775-3p后,细胞的增殖能力明显降低（P<0.01）。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,MDA-MB-453细胞过表达miR-6775-3p后,细胞的迁移（P<0.001）和侵袭能力（P<0.01）明显降低。RTFQ-PCR和Western blot实验结果显示,CDK4、CDK6及MMP17、MMP24的mRNA表达和蛋白水平均显著降低（P<0.01）。结论：miR-6775-3p可能抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

miR-526b-3p通过靶基因TNKS2调控肝癌细胞增殖、侵袭、迁移的分子机制探讨

目的:探讨miR-526b-3p对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其潜在的作用机制。方法:运用qRT-PCR检测人肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、BEL-7402和正常肝细胞L02中miR-526b-3p和TNKS2的mRNA表达水平。建立miR-526b-3p过表达和TNKS2抑制表达的HepG2细胞株,采用MTT法检测细胞增殖活力,Transwell小室检测细胞的迁移及侵袭能力,Western blot检测TNKS2蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因分析法验证miR-526b-3p可能的靶基因。结果:与正常肝细胞L02相比,肝癌细胞HepG2、SMMC-7721及BEL-7402中miR-526b-3p的表达显著降低（P<0.05）,TNKS2的表达显著升高（P<0.05）。过表达miR-526b-3p或抑制表达TNKS2均可抑制HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭（P<0.05）。TNKS2是miR-526b-3p的靶基因。过表达TNKS2可部分逆转过表达miR-526b-3p对HepG2细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论:miR-526b-3p可通过下调TNKS2的表达,从而抑制肝癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力。     

DDX17基因表达下调对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨 DDX17基因在非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的中的作用。方法：采用慢病毒介导的 shRNA,下调非小细胞肺癌 A549细胞中 DDX17的表达,实时荧光定量 PCR 和 Western blot 验证下调效果。CCK －8和平板克隆实验检测细胞增殖能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell 实验检测细胞侵袭能力变化。结果：DDX17－shRNA 可有效下调非小细胞肺癌 A549细胞中 DDX17蛋白和 mRNA 的表达。DDX17表达下调后,A549细胞的增殖受到抑制,24、48、72小时细胞增殖能力较对照组分别降低23％、42％和59％。细胞克隆形成数目较对照组明显减少,两组细胞克隆数目分别为75±9和30±6。细胞迁移速率较对照组降低,两组迁移率分别为（49．4±7．4）％和（17．8±3．7）％。细胞侵袭数目较对照组明显减少,两组细胞24小时侵袭数目分别为89．7±13．2和30．0±5．7。结论：DDX17表达下调可显著抑制非小细胞肺癌 A549的增殖、迁移和侵袭。     

Raf激酶抑制蛋白对HepG2肝癌细胞生物学特性影响的研究

目的 Raf激酶抑制蛋白(RKIP)是磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族的重要成员,近来的一些研究表明RKIP基因的蛋白产物在人类肝癌组织中表达显著下调.本研究旨在探讨RKIP基因对于肝癌细胞增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及浸润转移能力等恶性表型的影响,以初步阐明其功能意义.方法 将RKIP基因插入载体pcDNA3.1构建PC-RKIP真核表达载体.脂质体转染肝癌细胞系HepG2建立稳定转染细胞系(Hep-RKIP),而后使用生长曲线法、平板克隆形成实验法、流式细胞仪,细胞迁徙实验法等方法分析稳定表达株相关生物学特性变化.同时设立空载体转染组和空白细胞组为对照.结果 与转染pcDNA3.1空载体及空白HepG2肝癌细胞相比,转染PC- RKIP载体的稳定表达细胞株生长有显著减慢,后两组之间亦无显著差异,平板克隆形成实验结果显示PC- RKIP转染组平均克隆形成率显著低于其它两组(P<0.05),细胞周期检测显示PC- RKIP转染组处于G0/G1期的细胞比例显著高于未处理的HepG2 细胞和转染 pcDNA 3.1空载体的HepG2细胞(P<0.05),而处于G2-M期的细胞比例显著均低于其它两组(P<0.05),其它各期细胞比例均无显著差异.流式细胞仪法检测细胞凋亡结果显示PC-RKIP转染组调亡比例为6.4%左右,显著高于对照组(P<0.05).细胞迁徙实验结果提示PC-RKIP转染组穿膜率与其它两组相比显著降低(P<0.05).结论 RKIP基因可能具有抑制细胞生长增殖及分裂作用,同时可影响细胞周期及细胞凋亡,对肝癌细胞侵袭转移能力可能有一定抑制作用,对抑制细胞恶性表型有一定意义.     

剪接因子SF3b6通过MAPK信号通路促进胃癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨剪接因子3b亚基6(splicing factor 3b subunit6,SF3b6)对胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等的影响及其作用机制.方法:通过组织芯片检测SF3b6在胃癌和癌旁组织中的表达,采用WB和qPCR检测SF3b6在正常永生化胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞系(HGC27、AGS、BGC8...