α-硫辛酸对青光眼模型大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及其机制

目的探讨α-硫辛酸对青光眼模型大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用及其机制。方法选取SPF级雄性SD大鼠60只,取30只大鼠,选右眼为实验眼,采用烙闭表层巩膜静脉的方法制作大鼠青光眼模型。将造模成功的大鼠随机分为两组:青光眼对照组和青光眼硫辛酸组,每组各15眼。另取30只大鼠,右眼行假手术操作,术后随机分为两组:正常眼压对照组和正常眼压硫辛酸组,每组各15眼。于造模第3周末,正常眼压硫辛酸组和青光眼硫辛酸组大鼠腹腔注射α-硫辛酸150 mg·kg^-1。分别于造模前、造模后第1周末、第2周末、第3周末、第4周末、第5周末、第6周末应用手持式眼压计测量并记录大鼠双眼眼压。分别用相应测试盒检测丙二醛(MDA)和活性氧簇(ROS)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。通过TUNEL法检测RGC凋亡情况,通过免疫组织化学法检测视网膜Caspase-3蛋白表达情况。应用GraphPadPrism6软件作图,采用SPSS 20.0统计软件分析所有数据。结果造模后3周末开始腹腔注射α-硫辛酸,青光眼硫辛酸组大鼠右眼眼压在造模后4周、5周、6周...     

实验性青光眼视网膜神经节细胞p53基因表达的检测

目的　检测不同眼压状态下实验性青光眼视网膜神经节细胞(RGCs)p53基因的表达。方法　家兔16只,任选1眼作实验,另眼对照2%甲基纤维素0.10～0.15ml前房注射制做高眼压模型,根据眼压值低中高不同对动物进行分组分期取材石蜡切片免疫组化染色检测p53蛋白的表达情况采用计算机图像分析技术对RGCs密度进行定量分析。结果　凋亡率高低依次为眼压较低组(1.86%)>眼压中等升高组(0.93%)>眼压较高组(0.53%)>对照组(0.05%)(P<0.01)。结论　与前人对POAG患者的研究。结果　相反,在眼压急速升高的模型眼中,凋亡主要发生在实验的早期     

洛美利嗪对糖尿病早期大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的： 探讨洛美利嗪(lomerizine,LOM)对糖尿病早期大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)凋亡的保护作用及其机制。

方法： SD大鼠随机分为对照组(CON)、糖尿病组(DM)及洛美利嗪组(LOM),每组40只大鼠。DM和LOM组链脲佐菌素(STZ)按60mg/kg一次性腹腔注射诱导糖尿病模型,CON组给予等量无菌柠檬酸钠溶液腹腔注射。LOM组于糖尿病鼠模型成模后,每日予LOM 60mg/kg灌胃,CON组和DM组采用等量生理盐水灌胃。于第4,8,12wk分别行HE、透射电镜、TUNEL检测RGCs的凋亡情况,同时采用激光共聚焦显微镜检测RGCs内钙离子的浓度。

结果：(1)形态学观察：随病程延长,逐渐出现RGCs数量减少、细胞排列紊乱的病理改变。透射电镜下可见DM组RGCs出现不同阶段的凋亡征象,且随病程延长逐渐加重。LOM组与同期DM组对比,在第8,12wk时RGCs凋亡征象减弱。(2)TUNEL检测：CON组大鼠视网膜神经节细胞层未见凋亡细胞。DM组4wk时视网膜神经节细胞层偶见TUNEL 阳性细胞,并随病程延长逐渐增多,凋亡指数与同期CON组比较明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。LOM 组8,12wk时,与同期DM组比较,染色阳性的RGCs明显减少,凋亡指数明显下降,差异显著(P<0.01)。(3)激光共聚焦显微镜钙离子浓度检测：DM组与同期CON组比较：DM组8,12wk 的RGCs内钙离子荧光染色强度明显升高,有显著差异(P<0.01)。LOM组与同期DM组比较：LOM 组8,12wk的RGCs内钙离子荧光染色强度明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。

结论：LOM对糖尿病大鼠早期RGCs的凋亡具有保护作用。     

叔丁基对苯二酚对糖尿病大鼠视网膜的保护作用及其机制研究

目的　探讨叔丁基对苯二酚（tert-Butylhydroquinone,tBHQ）对糖尿病大鼠视网膜的保护作用及其机制,为DR防治提供新靶点。方法　18只雄性SD大鼠随机分成3组:正常组、糖尿病组（高脂高糖饮食）和tBHQ干预组（高脂高糖饮食中加入质量分数1%tBHQ）,后两组饮食干预4周后建立糖尿病大鼠模型,饮食干预3个月后处死各组大鼠。采集大鼠空腹血用于测定生化和胰岛素相关指标,HE染色观察大鼠视网膜各层组织变化,使用miRNA表达谱芯片测量大鼠视网膜差异性miRNA,实时定量PCR验证特定miRNA在3组大鼠视网膜的表达水平,分析差异性miRNA的相关通路。结果　tBHQ干预组［（15.073±7.079）mmol·L^-1］较正常组［（7.635±1.421）mmol·L^-1］空腹血糖升高（P<0.05）,较糖尿病组［（22.331±1.824）mmol·L^-1］降低（P<0.05）。tBHQ干预组［（47.961±15.256）μU·L^-1］血清胰岛素较正常组［（78.090±20.974）μU·L^-1］减少,而较糖尿病组［（17.533±3.959）μU·L^-1］增多（均为P<0.01）。HE染色结果示,糖尿病组大鼠视网膜出现严重水肿,各层结构不清,tBHQ干预组视网膜改变相对轻微。与糖尿病组大鼠相比,tBHQ干预组视网膜中miR-325-3p（>2.0倍）和miR-551b-3p（>1.5倍）上调,miR-652-3p（>2.0倍）下调。实时定量PCR验证miR-325-3p和miR-551b-3p为差异性miRNA,靶基因预测分析示miR-325-3p可介导21条信号通路。结论　tBHQ可能通过miR-325-3p介导的信号通路对2型糖尿病大鼠视网膜起保护作用。     

视网膜神经节细胞的保护和修复

视网膜神经节细胞(RGCs)的进行性死亡是许多视网膜和视神经疾病发展到最后的必经之路。长期以来一直认为，由于抑制性环境的存在，视神经损伤后不能再生和修复，现在研究证实，在特定的条件下，尽管RGCs的胞体或轴突受损，仍能免于死亡，而且变性的轴突能再生，并能与靶组织建立突触联系。对RGCs的保护和修复的研究进展作一综述。     

黄芪注射液对体外培养视网膜神经节细胞的保护作用

目的 视神经由视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)轴突构成,一旦损伤难以再生,视神经保护是治疗视神经疾病的关键,本研究拟评价黄芪注射液的视神经保护作用.方法 体外培养RGCs,采用谷氨酸作为细胞凋亡诱导剂建立RGCs凋亡模型,并用不同浓度黄芪注射液加入细胞培养基进行干预,分别用MTT和流式细胞检测的方法进行细胞存活率及细胞凋亡相关检测.结果 黄芪注射液加入DMEM-F12培养基共培养RGCs 24 h后,MTT检测结果示终浓度为(0.10～0.40)×103g·L-1时黄芪注射液均可促进RGCs存活,其中0.20×103g·L-1、0.30×103g·L-1浓度促生长作用最好(P=0.040、0.005,n=10),谷氨酸浓度为3.2 mmol·L-1时可造成理想的RGCs凋亡模型,0.20×103g·L-1黄芪注射液可促进谷氨酸损伤的RGCs存活(P=0.08,n=10)并减少其细胞凋亡率(P=0.36,n=4).结论 黄芪注射液作为视神经保护中药制剂对RGCs具有一定保护作用,黄芪对RGCs的保护作用很可能跟抑制谷氨酸兴奋性毒性作用有关.     

雷帕霉素对缺氧损伤视网膜神经节细胞的保护作用及其机制

背景 研究表明雷帕霉素(Rapa)可延缓人大脑细胞的衰老,改善大鼠局灶性脑缺血时脑组织代谢活动,对中枢神经细胞具有保护作用.视神经和视网膜神经节细胞(RGCs)属于中枢神经组织,但Rapa是否可对外伤后RGCs具有保护作用尚不清楚. 目的 探讨Rapa对氯化钴(CoCl2)诱导的缺氧损伤大鼠RGCs的保护作用,并探讨其可能的作用机制,为外伤性视神经病变(TON)的治疗提供新的思路.方法 用含体积分数10％胎牛血清的DMEM培养基培养大鼠RGC-5细胞,倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态学变化.将细胞分为正常对照组及50、100、200、400和600 μmol/L CoCl2组,于细胞培养后24 h和48 h采用细胞生长分析系统检测各组细胞存活率.采用200 μmol/L CoCl2处理细胞以诱导建立RGC-5细胞缺氧损伤模型,然后将培养的细胞分为正常对照组、模型对照组和不同浓度Rapa干预组,Rapa干预组在缺氧模型细胞培养液中添加Rapa使其终浓度分别为0.1、0.4、1.6和6.4μmol/L,处理细胞24 h.采用细胞生长分析系统检测各组细胞的存活率;采用AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测各组细胞凋亡率;采用JC-1染色技术检测各组细胞线粒体跨膜电位(△ψm)的变化;采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞促凋亡基因bax mRNA的相对表达量. 结果 200 μmol/L CoC12作用RGC-5细胞后24 h细胞相对存活率为(70.51±5.00)％,与正常对照组的(100.00±3.29)％比较,差异有统计学意义(P＜0.01),成功构建细胞缺氧损伤模型.正常对照组、模型对照组和0.1、0.4、1.6、6.4 μmol/L Rapa干预组细胞存活率的总体比较差异有统计学意义(F=167.904,P=0.000),其中0.1μmol/L Rapa干预组细胞存活率明显高于模型对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).正常对照组、模型对照组和0.1μmol/L Rapa干预组细胞凋亡率分别为25.4％、37.7％和25.3％,细胞线粒体膜电位分别下降了0.4％、6.3％和1.4％.正常对照组、模型对照组和0.1 μmol/L Rapa干预组细胞中baxmRNA相对表达量分别为1.01±0.21、3.52±0.30和1.66±0.20,总体比较差异有统计学意义(F=88.034,P=0.000),其中模型对照组细胞中bax mRNA相对表达量均明显高于正常对照组和0.1μmol/L Rapa干预组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 Rapa可对CoC12诱导的缺氧RGC-5细胞发挥保护作用,其主要作用机制是下调细胞中促凋亡分子bax的表达,并提高RGC-5细胞存活率.     

糖尿病大鼠早期视网膜神经节细胞凋亡机制的探讨

目的：探讨糖尿病大鼠模型早期视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)凋亡的机制。

方法：SD大鼠60只,随机分为对照组(CON)及糖尿病组(DM),糖尿病组一次性腹腔注射1% STZ诱发糖尿病鼠模型,两组于第4,8,12wk分别行HE、透射电镜及TUNEL法检测RGCs的凋亡情况,并应用激光共聚焦显微镜检测RGCs内钙离子浓度的变化。

结果：糖尿病组第8wk开始出现RGCs数量减少、细胞排列紊乱的病理改变,第12wk更为明显。糖尿病组透射电镜下可见第4wk时RGCs出现线粒体肿胀; 第8wk时RGCs内肿胀的线粒体更为明显、数目增多,染色质边集于核膜周边,部分细胞体积缩小、细胞器减少; 第12wk时出现RGCs体积变小,甚至出现细胞核断裂。TUNEL阳性RGCs最早于糖尿病组第4wk时出现,随病程延长凋亡的阳性细胞逐渐增多,凋亡指数与同期对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。糖尿病组第8,12wk时RGCs内钙离子浓度明显高于同期对照组,差异显著(P<0.01); 糖尿病组第8wk与第12wk比较,升高差异亦有统计学意义(P<0.05)。

结论：糖尿病早期出现了视网膜神经节细胞的凋亡,其机制可能与细胞内钙离子浓度升高有关。     

黄芪多糖对急性高眼压诱导大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

背景青光眼患者视神经保护的问题日益引起关注。黄芪多糖（APS）是黄芪的主要活性成分,可增加再生神经蛋白的表达并促进损伤的周围神经修复,但其对视网膜神经节细胞（RGCs）再生作用的研究少见报道。目的探讨APS对急性高眼压状态下RGCs的保护作用。方法采用抽签法将40只SPF级sD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量APS组和高剂量APS组,每组各10只。低剂量APS组和高剂量APS组大鼠自实验开始每日分别给予APS500mg／kg、2000mg／kg（均溶于2．5ml生理盐水）灌胃,模型对照组仅给予2．5ml生理盐水灌胃,正常对照组不做任何处理。用药2周后,除正常对照组外,其余3个组均抽取0．2ml房水继而单眼前房注射等体积甲基纤维素使眼压升高至22mmHg（1mmHg=0．133kPa）以上制作急性高眼压模型。造模后5d,过量麻醉法处死动物,摘除该眼球制作视网膜石蜡切片,常规组织病理学观察视网膜的形态结构变化,采用免疫组织化学法检测caspase-3蛋白在大鼠视网膜中的表达,采用TUNEL染色法观察和计算各组大鼠RGCs的凋亡率。ImageProPlus5．1软件测量各组大鼠视网膜厚度和神经纤维层厚度。结果大鼠成模后5d,模型对照组、低剂量APS组和高剂量APS组大鼠的眼压均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义（t=-8．900、-10．700、-11．300,P〈0．01）。正常对照组大鼠视网膜形态正常;模型对照组大鼠视网膜水肿,细胞排列紊乱;低剂量APS组视网膜可见空泡样变性,但视网膜细胞排列较模型对照组整齐,视网膜水肿减轻;高剂量APS组视网膜水肿较明显。低剂量APS组视网膜厚度、外颗粒层及视神经纤维层厚度值均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义（t=-23．700、-14．770、-11．640,P〈0．01）,但高剂量APS组外颗粒层及视神经纤维层厚度与模型对照组比较差异均无统计学意义（t=-0．780、-0．460,P〉0．05）。低剂量APS组大鼠caspase-3蛋白阳性RGCs百分比及RGCs凋亡百分率均明显低于模型对照组（caspase-3蛋白：F=87．710,P=0．001;RGCs凋亡：F=272．840,P〈0．01）,差异均有统计学意义（t=-11．700、-8．600,P〈0．01）,高剂量APS组与模型对照组比较caspase-3蛋白阳性RGCs百分比及RGCs凋亡百分率的差异均有统计学意义（t=-7．900、-6．400,P〈0．05）。结论500mg／kgAPS可有效抑制急性高眼压模型大鼠的视网膜水肿及RGCs的凋亡率,对急性高眼压大鼠的RGCs有保护作用。     

Neurotoxic effects of trypan blue on rat retinal ganglion cells

To facilitate the peeling of internal limiting membrane or epiretinal membrane in vitreoretinal surgery, trypan blue (TB) and indocyanine green (ICG) have been used. However, the cytotoxicity of these dyes have been concerned. The aim of this study was to investigate the neurotoxic effects of TB on rat retinal ganglion cells (RGCs) and compare the effect of TB with ICG. Rat RGCs were purified by a two-step immunopanning procedure. In short-time exposure experiments, purified RGCs cultured for 3 days were exposed to 600 mgL(-1) TB, 1500 mgL(-1) TB and 1500 mgL(-1) ICG for 10 sec to 30 min. The number of viable RGCs was counted after 12 hr in culture. In long-time exposure experiments, purified RGCs were cultured for 3 days in TB solutions ranging from 2 to 800 mgL(-1) or in ICG solutions at concentrations from 2 to 250 mgL(-1). Then the number of viable cells was counted. Exposure to 600 mgL(-1) TB, 1500 mgL(-1) TB and 1500 mgL(-1) ICG for short time from 10 sec to 30 min caused a time-dependent damage to RGCs. There was no significant difference in cytotoxicity to RGCs between TB and ICG in short-time exposure. In long-time exposure, TB as well as ICG showed neurotoxic effect on RGCs in a dose-dependent manner. Fifty percentage inhibitory concentration (IC50) of TB to RGCs was calculated as 115 mgL(-1), while that of ICG was 33 mgL(-1). In conclusion, TB induced neurotoxic effect on RGCs in a dose- and time-dependent manner. During the short-time exposure in surgery, there is likely no difference in neurotoxic effect on RGCs between TB and ICG. However, once the dyes are left in the eyes after surgery, TB may show less toxicity on RGCs than ICG.     

高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞的影响研究

目的 探讨高糖条件下miR-615-5p对人视网膜内皮细胞(hRECs)迁移能力、成管能力、愈合能力的影响及其机制.方法 取对数生长期的hRECs,将细胞分为低糖(LG)组、高糖(HG)组、miR-615-5p模拟物(mimic)组、miR-615-5p模拟物阴性对照(mi-nc)组、miR-615-5p抑制剂(inh...     

蓝光对人视网膜色素上皮细胞增殖的影响和机制研究

目的:研究蓝光对人视网膜色素上皮细胞增殖能力的影响,并初步探讨其可能机制.方法:利用35W白色冷光灯加用蓝色滤光片建立蓝光损伤体外培养的RPE细胞模型,蓝光控制波长在470~520nm,光照强度控制为2000Lx左右,光照时间控制为24~96h,利用CCK-8法检测RPE细胞的增殖能力,利用real-time PCR技术检测RPE细胞中miR-103的含量.结果:与对照组相比,蓝光照射组的RPE细胞的增殖能力减弱;蓝光照射组的RPE细胞内的miR-103含量较对照组增加;miR-103过表达时,RPE细胞的增殖能力减退,降低miR-103的表达时,细胞增殖能力增强;降低miR-103的表达能够减弱蓝光对RPE细胞增殖的抑制作用.结论:蓝光通过上调miR-103抑制RPE细胞的增殖,miR-103可能成为治疗年龄相关性黄斑变性等视网膜变性疾病治疗的新靶点.     

视网膜神经节细胞无血清上清培养液诱导大鼠视网膜干细胞的分化

目的　探讨视网膜神经节细胞无血清上清培养液对视网膜干细胞分化的影响。方法　分离大鼠视网膜干细胞和视网膜神经节细胞;采用免疫荧光法鉴定体外培养的大鼠视网膜干细胞与视网膜神经节细胞,视网膜干细胞以Nestin抗体进行鉴定,视网膜神经节细胞以Thy-1抗体进行鉴定;以视网膜神经节细胞无血清上清培养液培养视网膜干细胞,以不加入条件培养液培养的视网膜干细胞为对照组,收集分化细胞,采用qPCR法检测Nestin、Pax6、Thy-1及Brn-3的基因表达。结果　培养的视网膜干细胞Nestin抗体染色阳性,视网膜神经节细胞Thy-1抗体染色阳性。培养视网膜干细胞72 h后,与对照组相比,无血清上清培养液组细胞Nestin和PAX6基因相对表达量降低,差异均有统计学意义（均为P<0.000 1）;Thy-1和Brn-3基因相对表达量升高,差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　视网膜神经节细胞无血清上清培养液能够诱导视网膜干细胞分化为视网膜神经节样细胞。     

miR-96-5p靶向FOXO4对高糖诱导的大鼠视网膜血管内皮细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨微小RNA-96-5p(miR-96-5p)对高糖诱导的大鼠视网膜血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。

方法：体外培养SD大鼠视网膜血管内皮细胞(RRVEC)进行实验,将细胞分为对照组(NG)、高糖组(HG),收集高糖诱导的细胞,分别或共同转染miR-96-5p模拟物(mimic)、无义miRNA(miR-NC)、FOXO4 siRNA(si-FOXO4)、FOXO4阴性对照序列(si-NC)、pcDNA-FOXO4、pcDNA。分别采用qRT-PCR与Western blotting检测miR-96-5p与FOXO4的表达; MTT法检测细胞增殖活性; 流式细胞仪检测细胞凋亡率; 双荧光素酶报告实验验证miR-96-5p的靶基因; Western blotting检测细胞中CyclinD1、p21、p27、Bcl-2、Bax、cleaved-caspased-3蛋白表达。

结果：高糖处理后,RRVEC中miR-96-5p、CyclinD1、Bcl-2表达水平均显著降低,而FOXO4、p21、p27、Bax、cleaved-caspased-3表达水平显著升高,抑制细胞增殖活性,促进细胞凋亡; miR-96-5p过表达与抑制FOXO4表达后CyclinD1、Bcl-2表达水平显著升高,抑制p21、p27、Bax、cleaved-caspased-3表达,增强细胞增殖能力,抑制细胞凋亡; 双荧光素酶报告实验证明,FOXO4是miR-96-5p的靶基因; FOXO4过表达可逆转miR-96-5p过表达对高糖诱导的RRVEC增殖和凋亡的作用。

结论：miR-96-5p通过靶向FOXO4以抑制高糖诱导的大鼠视网膜血管内皮细胞凋亡并促进细胞增殖。     

藏红花素对视网膜缺血再灌注损伤小鼠视网膜神经节细胞的保护作用及其机制研究

目的　研究藏红花素对视网膜缺血再灌注损伤（RIRI）小鼠视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用及其机制。方法　将144只C57BL/6小鼠随机分为3组:假手术组、模型组、藏红花素治疗组。模型组和藏红花素治疗组小鼠建立RIRI模型,藏红花素治疗组小鼠造模前30 min腹腔注射50 mg·kg^-1藏红花素。RIRI后14 d,视网膜铺片染色比较各组小鼠RGC密度差异。RIRI后24 h,HE染色比较各组小鼠视网膜内层厚度差异。于RIRI后不同时间点（0 h、3 h、6 h、9 h、12 h、15 h）取各组小鼠视网膜组织,通过多重基因定量分析系统检测NLRP3、ASC、Caspase-1、白细胞介素-1β（IL-1β） mRNA的表达变化。RIRI后6 h和12 h取各组小鼠视网膜组织,Western blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β蛋白的表达,ELISA检测IL-1β蛋白的含量,并对比分析。结果　小鼠RIRI后14 d,视网膜铺片染色结果显示,藏红花素治疗组较模型组小鼠RGC密度增加约18.5%（P<0.05）。RIRI后24 h,HE染色结果显示,藏红花素治疗组小鼠视网膜内层厚度较模型组显著降低（P<0.01）。多重定量分析系统检测结果显示,RIRI后6 h、9 h及12 h,藏红花素治疗组小鼠视网膜组织中Caspase-1以及IL-1β mRNA表达较模型组均显著降低（均为P<0.05)。Western blot检测结果显示,藏红花素治疗组小鼠视网膜组织中Caspase-1以及IL-1β蛋白表达较模型组均显著降低（均为P<0.05)。RIRI后6 h、12 h,模型组小鼠视网膜组织中NLRP3、ASC mRNA和蛋白表达与假手术组相比无显著变化（均为P>0.05)。ELISA检测结果进一步证实,RIRI后6 h和12 h,藏红花素治疗组小鼠视网膜组织中IL-1β蛋白含量较模型组均显著降低（均为P<0.05)。结论　藏红花素通过抑制Caspase-1和IL-1β表达保护RIRI小鼠RGC。     

银杏叶提取物联合灯盏细辛对视网膜神经节细胞的保护作用

目的:探讨银杏叶提取物联合灯盏细辛对兔慢性高眼压模型视网膜神经节细胞的保护作用。方法:采用α-糜蛋白酶(0.2mL)(2667.2μkat)注入家兔眼后房,造成实验性慢性高眼压。将造模成功的32只家兔随机分为4组,每组8只,分别给予以下治疗:银杏叶提取物150mg/kg(银杏叶组);灯盏细辛150mg/kg(灯盏细辛组);银杏叶提取物联合灯盏细辛皆灌胃,1次/d银杏叶提取加灯盏细辛(联合用药组);不做任何治疗(模型对照组)。4wk后各组分别进行视网膜神经节细胞凋亡检测正常视神经节细胞计数和光镜观察视网膜各层病理改变。结果:每组均可观察到阳性细胞,正常神经节细胞计数最多为联合用药组(889.00±40/mm2)、最少为模型对照组(581±24/mm2),P<0.01,光镜下模型对照组视网膜各层结构最紊乱,联合用药组视网膜各层组织最完整。结论:银杏叶提取物联合灯盏细辛能阻止高眼压导致视网膜神经节细胞发生凋亡。     

高良姜素对青光眼大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的 研究高良姜素对青光眼大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用。方法 取48只SD大鼠随机分为对照组、对照+高良姜素组、高眼压组和高眼压+高良姜素组,每组12只(12眼)。对照+高良姜素组和高眼压+高良姜素组大鼠接受高良姜素滴眼液治疗,对照组和高眼压组大鼠则接受相同剂量二甲基亚砜溶剂滴眼。于造模后第0～28天监测大鼠眼压,并于造模后第28天处死大鼠,收集各组大鼠右眼球,并采用HE染色观察大鼠视网膜形态变化,采用免疫组织化学染色分析各组大鼠视网膜中GFAP、Toll样受体4(TLR4)和NOD样受体3(NLRP3)表达。从4只4 d龄大鼠视网膜中分离RGC,分为空白组、光气组和CoCl₂+高良姜素组。光气组和光气+高良姜素组RGC与200μmol·L^-1 CoCl₂一起孵育48 h,光气+高良姜素组RGC中加入20μmol·L^-1高良姜素干预48 h。收集各组细胞,采用流式细胞术和Western blot检测RGC的凋亡率及相关蛋白的相对表达情况,并采用ELISA检测空白组、光气组和光气+高良姜素...