组蛋白去乙酰化酶抑制剂在HR阳性HER-2阴性晚期乳腺癌的研究进展

组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）是可调节表观遗传学改变的组蛋白修饰酶，在一些肿瘤中HDACs被异常激活，与肿瘤进展和耐药密切相关。HDAC抑制剂（HDAC inhibitor,HDACi）通过调节肿瘤细胞的表观遗传属性，靶向性控制肿瘤细胞增殖、调节肿瘤细胞周期及修复DNA损伤。HDACi可抑制多个乳腺癌致癌信号通路，从而有可能逆转激素受体（hormone receptor,HR）阳性HER-2阴性乳腺癌的治疗耐药。本文将对HDACi在HR阳性HER-2阴性晚期乳腺癌治疗方面进行综述，探讨其在乳腺癌治疗领域中的应用前景。     

HDAC抑制剂下调乳腺癌细胞系HER-2的表达及miRNA表达谱的变化

  目的  探讨组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）抑制剂下调乳腺癌HER-2的表达机制,为乳腺癌抗HER-2治疗提供新的实验依据。  方法  利用HDAC抑制剂处理HER-2阳性乳腺细胞,qPCR和Western检测HER-2基因和蛋白水平的变化,同时采用miRNA芯片筛选HDAC抑制剂相关的miRNA谱,qPCR验证miRNA表达变化。  结果  体外细胞实验证实HDAC抑制剂TSA和SAHA可下调乳腺癌细胞系HER-2的表达,TSA可下调BT474的HER-2基因表达,浓度为100 nmol时下调10.7%,浓度为200 nmol时下调38.9%（P < 0.05）。TSA对原代细胞HER-2基因表达无明显下调（P > 0.05）。SAHA对BT474中HER-2基因表达的影响,浓度5 μmol/L组下调93.9%（P < 0.05）,而1 μmol/L组无明显下调。SAHA对原代细胞HER-2基因表达下调较为明显,浓度1 μmol/L时下调92.7%,浓度5 μmol/L时下调87.1%。通过miRNA芯片筛选出7条miRNA,qPCR监测SAHA、TSA处理后,miR-762基因表达上调2.11倍。  结论  HDAC抑制剂可能通过miRNA表达谱改变介导下调乳腺癌HER-2的表达。      

组蛋白乙酰化修饰在基因表达调控中的作用机制

表观遗传学是指 DNA序列变化以外的可遗传的基因表达改变,这种影响基因转录活性而不涉及DNA序列改变的基因表达调控方式称为表观转录调控,组蛋白乙酰化修饰是基因表观转录调控的重要机制.组蛋白翻译后修饰所引起的染色质结构重塑在真核生物基因表达调控中发挥着重要的作用.组蛋白乙酰化主要由组蛋白乙酰化酶 （histone acetylases, HATs） 和组蛋白去乙酰化酶（ Histone deacetylases, HDACs） 催化完成,HATs 通过在组蛋白赖氨酸残基乙酰化,激活基因转录,而HDACs 使组蛋白去乙酰化,抑制基因转录.组蛋白乙酰化和去乙酰化与基因的表达调控密切相关,HATs和HDACs之间的动态平衡控制着染色质的结构和基因的表达,组蛋白乙酰化状态的失衡与肿瘤发生密切相关.最近有研究发现,肿瘤细胞的组蛋白大部分呈低乙酰化状态.组蛋白乙酰化修饰对基因表达调控及其在肿瘤发生发展中的作用具有重要意义.因此,基于细胞内组蛋白乙酰化调控机制设计开发抗肿瘤药物成为研究热点.组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以增强细胞内组蛋白乙酰化状态,从而改变肿瘤的生物学特性,而且去乙酰化酶抑制剂作用靶点是整个基因组而不是单个基因,所以去乙酰化酶抑制剂在肿瘤治疗中具有较好的应用前景.     

三阴性乳腺癌和组蛋白乙酰化调控的研究进展

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,在西方国家居女性恶性肿瘤发病率的首位,其中三阴性乳腺癌（triple—negative breast cancer,TNBC）的发病年龄轻,肿瘤直径较大,临床分期较晚,局部复发及远处转移率高,预后差,是近几年来比较受关注的乳腺癌类型。组蛋白的乙酰化和去乙酰化修饰影响到染色质重塑,在基因表达的表观遗传调控中扮演重要角色,研究证实TNBC的发生发展与组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDACs）有一定的相关性,组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitor,HDA．CI）靶向抑制HDAC,可以抑制乳腺癌细胞的增殖,增加其对化疗的敏感性,提示HDACI可能成为今后治疗TNBC的一个新的发展方向。     

组蛋白去乙酰化酶9在肿瘤中的作用

组蛋白去乙酰化酶9（histone deacetylase 9,HDAC9）属于组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylases,HDACs）Ⅱa亚型,在体内通过催化组蛋白3（H3）、组蛋白4（H4）和非组蛋白的去乙酰化,改变染色体的结构,调节基因的转录。研究表明HDAC9表达异常与肿瘤关系密切,但不同肿瘤中HDAC9的表达和功能不同,最终造成促癌或抑癌的相反结果,具体机制尚不明确。当前利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylases inhibitors,HDACIs）的表观遗传治疗已成为热点,研制特异性HDACIs并与化疗、放疗以及免疫治疗相结合已成为未来的方向,但靶向针对HDAC9的治疗研究非常有限。本文就HDAC9在肿瘤中的作用进行综述。      

美国ASCO年会拾贝：一种新型的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂OSU—HDAC42对HER-2阳性乳腺癌有抗肿瘤作用

组蛋白脱乙酰基酶抑制剂是一类新的抗肿瘤药物,可以通过过乙酰化热休克蛋白90（HSP90）,从而下调HER2表达。OSU-HDAC42是一种新型的口服类以生物利用性丁酸苯酯为基础的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。在2009年的美国ASCO年会上,Weng等报道了题名为“The antitumor effects of OSU—HDA（A2,a novel histone deacetylase inhibitor,in HER-2-positive breast cancer”的研究。该研究分析了OSU-HDAC42对于HSP90和HER-2的作用。该研究对象为BT474、SKBR3、MDA-MR-231和MCF-7乳腺癌细胞系,检测指标包括细胞活性、细胞周期、凋亡、HER-2表达与磷酸化以及HSP90的乙酰化水平。结果：经过72h治疗后,     

组蛋白去乙酰化酶4与乳腺癌关系的研究进展

近年来,随着表观遗传学研究的不断深入,研究者发现蛋白质翻译后修饰可调控肿瘤的发展过程,其中蛋白质乙酰化修饰是受组蛋白乙酰化/去乙酰化介导,二者通过组蛋白乙酰转移酶和组蛋白去乙酰化酶的动态精细调节,实现相互转化,对基因表达调控发挥重要作用。组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)是组蛋白去乙酰化酶Ⅱa类家族成员,可以使组蛋白发生去乙酰化、抑制基因的转录等。目前HDAC4表达异常已经在肝癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌和膀胱癌等多种恶性肿瘤中证实,并与肿瘤的发生发展密切相关。乳腺癌是女性最常见的实体瘤之一,HDAC4可通过多种途径参与乳腺癌细胞的增殖、侵袭、凋亡等。本文主要对HDAC4与乳腺癌关系的研究进行总结,以期为临床治疗乳腺癌分子作用靶点的应用前景和可能面临的挑战提供参考。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂在卵巢癌中的研究进展

摘 要：研究发现在基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表达发生的可遗传变化即表观遗传改变与卵巢癌的发生,发展密切相关。近年来,组蛋白去乙酰化酶抑制剂因主要抑制组蛋白去乙酰化酶功能,影响表观遗传改变,在卵巢癌细胞中具有抑制肿瘤生长、分化、促进癌细胞凋亡等作用备受关注。全文就组蛋白去乙酰化酶抑制剂在卵巢癌中的研究进展作一综述。     

组蛋白乙酰化与白血病

  核心组蛋白N-末端的乙酰化修饰引起的染色质结构的改变在真核细胞基因表达调控中起重要作用,组蛋白乙酰化酶使染色质处于相对松散的结构可以促进基因的表达,组蛋白去乙酰化酶则使染色质结构致密抑制基因的表达。组蛋白乙酰化酶或去乙酰化酶功能紊乱导致的基因表达异常与白血病发生、发展密切相关。组蛋白去乙酰化酶抑制剂是一种新型的白血病化疗药物,体内和体外试验均显示组蛋白去乙酰化酶抑制剂能抑制白血病细胞增生,阻滞细胞周期,诱导肿瘤细胞分化和凋亡。     

表观遗传调控剂在乳腺癌治疗中的研究进展

近年来,随着对不同类型乳腺癌基因表达谱研究的深入,表观遗传调节剂用来调控乳腺癌异常表达基因而应用于临床。初步结果表明,DNA甲基转移酶和组蛋白去乙酰化酶抑制剂对不同类型的乳腺癌（包括耐药性乳腺癌）均有不同的治疗作用。本文从体外实验研究、临床试验方面,分别对将来可能应用于乳腺癌治疗的表观遗传调节剂进行综述。     

免疫组织化学法与荧光原位杂交技术检测861例乳腺癌HER-2表达的一致性分析

目的:对比免疫组织化学法(IHC)与荧光原位杂交技术(FISH)检测861例乳腺癌人类表皮生长因子受体2(HER-2)蛋白表达和基因状态的一致性。方法:参照《乳腺癌HER-2检测指南(2019版)》判读标准对乳腺癌石蜡组织采用IHC法及FISH法分别检测HER-2蛋白表达和HER-2基因状态,进行比较分析。结果:861例乳腺癌患者中,IHC HER-2（0/1+)和FISH(-)的一致率为97.1%（134/138）;IHC HER-2(2+)和FISH(+)的一致率为28.7%（188/655）;IHC HER-2(3+)和FISH(+)的一致率为98.5%（67/68）。两种检测方法的检测结果存在一致性,差异具有统计学意义(Kappa=0.137,P＜0.000 1）。结论:两种方法相结合,以便精准评价HER-2 检测结果指导靶向治疗。     

AKT2 is frequently upregulated in HER-2/neu-positive breast cancers and may contribute to tumor aggressiveness by enhancing cell survival

Amplification or overexpression of the HER-2/neu gene in breast cancers is associated with aggressive behavior and resistance to therapeutic regimens. The molecular mechanisms that contribute to therapeutic resistance/survival of HER-2/neu-overexpressing tumor cells have not been well defined. To determine if phosphatidylinositol 3-kinase/AKT signaling contributes to cell survival in HER-2/neu-positive breast cancers, we performed immunohistochemical analyses to evaluate expression of HER-2/neu and AKT in a series of 52 breast carcinomas. Elevated expression of HER-2/neu was found to correlate with overexpression of AKT2 protein and activation of AKT kinase. HER-2/neu-overexpressing breast cancer cell lines were resistant to apoptosis induced by UV treatment and hypoxia, which was suppressed in the presence of the phosphatidylinositol 3-kinase inhibitors LY294002 and wortmannin, indicating a link between AKT activation and stress resistance in HER-2/neu-overexpressing cells. These observations suggest that AKT signaling augments resistance to stress-induced apoptosis in breast cancer cells overexpressing HER-2/neu.     

乳腺癌组织中HER-2的表达与肿瘤超声声像图特征的相关性

目的:探讨乳腺癌组织中HER-2的表达与肿瘤超声声像图特征及其弹性硬度的相关性。方法:收集2016年5月至2019年5月于我院就诊并确诊的282例乳腺癌患者，采用免疫组化法检测HER-2的表达水平，所有乳腺癌均行常规超声及弹性超声检查。分析乳腺癌二维声像图、血流及弹性特征与HER-2表达的相关性，并比较它们在HER-2阳性和HER-2阴性组之间的差异。统计学方法采用Pearson相关性分析及卡方检验。结果:乳腺癌的声像图特征多呈现为形态不规则、边缘不光整，以后方衰减、微小钙化发生、血流分级0-2级、淋巴结转移、组织弹性硬为主。相关性分析显示，HER-2表达阳性与乳腺癌肿瘤边缘光整程度、肿瘤边界、后方衰减具有显著的正相关性（P＜0.05）。结论:HER-2阳性表达与乳腺癌患者的乳腺超声特征显著相关，可作为乳腺癌诊断的指标。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗乳腺癌的临床研究

组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors,HDACIs）作为第一个成功用于癌症治疗的表观遗传学相关药物,能够有效解除对抑癌基因转录的阻滞,已成为极具潜力的抗癌药物。近年来,HDACIs在乳腺癌治疗领域中的临床研究逐渐开展,已有个别HDACIs在大型临床研究中表现出较强的抗癌活性。本文针对HDACIs在乳腺癌治疗领域开展的临床研究作一综述,有利于临床医师更好的了解HDACIs在乳腺癌治疗中的现状与进展。     

MACC1表达与乳腺癌临床病理学特征相关性的Meta分析

目的:探讨MACC1表达与乳腺癌临床病理学特征的相关性。方法:检索2020年05月13日前发表于PubMed、Cochrane Library等数据库中关于MACC1表达与乳腺癌的相关性研究，依次通过浏览标题、摘要和全文进行文献筛选，由2名研究者对符合纳入标准的文献进行Meta分析。结果:经筛选后采纳8项研究，共收集乳腺癌组织911例及癌旁正常组织429例。Meta分析结果示:MACC1在乳腺癌组织中阳性表达显著高于癌旁正常组织（OR=10.14，95%CI 5.32~19.32，P＜0.000 01）。MACC1在乳腺癌组织中阳性表达与肿瘤大小、远处转移、HER-2表达阳性、组织学分级显著相关，与ER、PR表达水平、患者是否绝经无统计学差异。结论:MACC1在乳腺癌中阳性表达明显高于癌旁正常组织，MACC1与肿瘤大小、组织学分级、远处转移及HER-2过表达相关，提示MACC1可作为乳腺癌患者预后不良的指标，尤其在HER-2型乳腺癌中有更重要的意义。     

The role of HER-2 oncoprotein in drug-sensitivity in breast cancer (review).

Overexpression of human epidermal growth factor receptor-2 (HER-2) oncoprotein is an important prognostic factor associated with a poor prognosis in breast cancer. Although treatment with trastuzumab, an anti-HER-2 antibody, increases drug-sensitivity in vitro and in vivo, the role of HER-2 oncoprotein in drug-sensitivity is still uncertain. The present work discusses the clinical significance of the HER-2 oncoprotein in drug-sensitivity in breast cancer based on previous clinical and basic results and reviews the current concept of HER-2 oncoprotein in drug-sensitivity. Introduction of HER-2 oncoprotein in vitro induces resistance to several anticancer drugs, including taxanes, cisplatin (CDDP) and 5-fluorouracil (5-FU) in breast cancer cells. The acquisition of drug-resistance by introduction of the HER-2 gene, however, depends on the cell type, because transfection of the HER-2 gene per se does not necessarily induce resistance to the same drugs in all types of breast cancer cells. In clinical studies, patients with HER-2 overexpression responded better to an anthracycline-based regimen than patients with low HER-2 expression, and their overall survival was also superior. In contrast, a correlation between the response to a cyclophosphamide + methotrexate + 5-FU regimen and overexpression of HER-2 is not certain. Taxanes responsiveness in patients with HER-2 oncoprotein overexpression was superior in patients with low HER-2 expression. Treatment with trastuzumab increased drug-sensitivity to anthracyclines, CDDP, and taxanes, but not to 5-FU, in breast cancer cells. Although the mechanism(s) by which trastuzumab enhances drug-sensitivity is not fully understood, modulation of the signal transduction pathways leading to apoptosis, such as down-regulation of the anti-apoptotic protein, Bcl-2, might be an important target to increase drug-sensitivity in breast cancer. HER-2 overexpression can be a good indicator for the selection of aniticancer drugs, especially for anthracycline containing regimens. To modulate HER-2-targeting therapy, the mechanism(s) by which trastuzumab enhances drug-sensitivity requires elucidation at the molecular level, including determination of other factors that influence drug-sensitivity, leading to a more promising treatment for individual patients receiving combination therapy with trastuzumab and anticancer drugs for breast cancer.     

HER-3基因表达对HER-2阳性型乳腺癌细胞放射敏感性的影响及作用机制

目的:探讨人表皮生长因子受体-3（human epidermal growth factor receptor-3,HER-3）表达对HER-2阳性型乳腺癌细胞放射敏感性的影响。方法:使用慢病毒颗粒感染HER-2阳性型乳腺癌细胞系（AU-565、SKBR-3）构建HER-3基因敲低细胞系模型,蛋白质印迹法（Western blot）及实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测感染的效率。克隆形成实验测定不同组别乳腺癌细胞放射增敏效果。将HER-3敲低组与对照组细胞分别给予X线照射（6 Gy,6 MV,源皮距100 cm）,流式细胞术测定不同组别细胞凋亡率以及细胞周期分布的变化。免疫荧光法检测细胞辐射后不同时间段的γH2AX焦点数,评估辐射后DNA损伤情况,蛋白质印迹法检测细胞周期调控相关蛋白CyclinB1的表达。结果:克隆形成实验结果显示,HER-3敲低组乳腺癌细胞放射敏感性增强。流式细胞术结果显示,HER-3敲低后,HER-2阳性型乳腺癌细胞辐射后凋亡率明显增加,细胞周期G2期分布比例提高。免疫荧光结果显示,HER-3敲低后,HER-2阳性型乳腺癌细胞γH2AX焦点数目在辐射后先增加后降低,较对照组峰值更高,降低时趋势更慢,提示HER-3敲低可增强辐射诱导的DNA损伤,减少DNA修复。蛋白质印迹法结果显示,细胞周期相关驱动蛋白CyclinB1表达降低。结论:HER-3基因敲低后一方面增加了HER-2阳性型乳腺癌细胞辐射后DNA的损伤并减缓其修复能力,促进细胞凋亡;另一方面通过下调细胞周期蛋白CyclinB1的表达,增加G2期细胞分布,提升了放射敏感性。     

上皮-间质转换在乳腺癌新辅助化疗耐药中的作用

目的:探讨上皮-间质转换标记物 E-cadherin 和Vimentin在乳腺癌新辅助化疗耐药患者中的表达及与HER-2的关系。方法:收集我院行乳腺癌改良根治术患者75例,其中经临床和病理诊断为对新辅助化疗耐药的患者32例,所有患者均手术切除病灶并行病理检查,采用免疫组化二步法检测上皮-间质转换标记物 E-cadherin 和Vimentin的表达水平。结果:乳腺癌耐药组Vimentin表达水平增加,而 E-cadherin表达下降,组间比较差异具有统计学意义（P＜0.05）;在43例HER-2阳性组织中,Vimentin表达水平增加,E-cadherin降低,与HER-2阴性表达组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）;进一步采用spearman相关分析显示,HER-2与 E-cadherin蛋白表达呈负相关（r=-0.336,P=0.031）,而与Vimentin表达呈正相关（r=0.587,P=0.004）。结论:在乳腺癌新辅助化疗耐药患者中,特别是HER-2阳性患者,可能存在上调Vimentin的表达、下调 E-cadherin的表达促进上皮-间质转换而促使耐药的发生。     

应用荧光原位杂交法检测乳腺癌石腊样本中HER-2 基因的扩增

 目的 探讨荧光原位杂交法（Fluorescence in situ hybridization，FISH）检测乳腺癌HER-2基因扩增在临床病理诊断及分子靶向治疗中应用的可能性。方法 用FISH技术和免疫组化（Immunohisto—chemistry，IHC）技术检测50例乳腺导管癌石蜡包埋标本并比较两种方法的结果以及与临床病理的关系。结果 16／50例HER-2蛋白表达阳性，其中强阳性5例，中度阳性9例，弱阳性2例；11／50（22％）例乳腺癌标本FISH技术检测HER-2基因扩增阳性，其中5／5为免疫组化HER-2蛋白强阳性病例；6／9为中度阳性病例，其中1例为17号染色体多倍体与HER-2基因扩增。HER-2基因扩增与蛋白表达与乳腺癌转移有关（P〈0．05）。结论 FISH技术可稳定地检测用IHC确定的HER-2蛋白阳性乳腺癌中HER-2基因的扩增状况，并用于临床赫赛汀分子靶向治疗病例的筛选。