白花蛇舌草注射液对鼻咽癌CNE-2细胞体外增殖抑制及凋亡作用的研究

摘 要：［目的］ 探讨白花蛇舌草注射液对鼻咽癌CNE-2细胞体外增殖抑制作用及凋亡机制。［方法］ MTT法检测白花蛇舌草注射液对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制率,Annexin-V-FITC/PI 双染法和Hoechst法检测细胞凋亡,Western blot法检测Bcl-2、Survivin、Bax、Caspase-3蛋白表达。［结果］ 不同浓度白花蛇舌草注射液对鼻咽癌CNE-2细胞具有抑制增殖作用,呈时间浓度依赖性（P＜0.05）。8ml/L白花蛇舌草注射液能明显诱导CNE-2细胞凋亡,与对照组相比,具有统计学意义（P＜0.05）。8ml/L白花蛇舌草注射液能诱导CNE-2细胞Bcl-2、Survivin蛋白表达降低、Bax及Caspase-3蛋白表达增加。［结论］ 白花蛇舌草注射液对鼻咽癌CNE-2细胞具有明显的体外增殖抑制作用,且呈时间浓度依赖性,其机制可能与诱导细胞凋亡,降低Bcl-2、Survivin蛋白表达,增加Bax及Caspase-3蛋白表达有关。     

重组人血管内皮抑素对肿瘤血管正常化时间窗的研究

摘 要：［目的］ 探讨重组人血管内皮抑素对小鼠胃癌移植瘤的血管正常化时间窗及其可能机制。［方法］ 建立50只MFC小鼠胃癌移植瘤模型,随机分成对照组与恩度（rh-ES）组：对照组小鼠尾静脉注射生理盐水（0.2ml/d）;恩度组小鼠尾静脉注射rh-ES［20mg/（kg·d）］,分别于治疗后 d1、d3、d5、d7、d9各处死5只小鼠。取出肿瘤,观察并测量各组肿瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线,采用免疫组化方法检测各组肿瘤组织中MVD、Collagen-Ⅳ、RGS5和HIF-1α表达情况。［结果］ rh-ES组较对照组肿瘤生长慢。rh-ES组在d5～9,CD34、RGS5、HIF-1α表达降低,Collagen-Ⅳ表达升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。［结论］ 恩度作用于胃癌小鼠,在第5～9d肿瘤微血管产生一个短暂趋于正常化时间窗,该时间窗内肿瘤细胞乏氧改善,可能与MVD、Collagen-Ⅳ、RGS5、HIF-1α有关。     

^125Ⅰ粒子对人结肠腺癌裸鼠皮下移植瘤的敏感性研究

目的探讨125Ⅰ粒子组织间植入对裸鼠皮下低分化结肠腺癌移植瘤的敏感性。方法应用人结肠癌HCT116细胞株及雄性BALB/c-nu裸鼠,建立人低分化结肠腺癌裸小鼠皮下移植瘤模型。荷瘤鼠随机分为125Ⅰ粒子治疗组（n=24）和对照组（n=24）。每3天观测裸鼠肿瘤生长情况,测量肿瘤长短径,计算肿瘤体积。每7天各处死治疗组及对照组一批裸小鼠,共4批。采用相对定量荧光RT-PCR检测HIF-1αmRNA表达,应用流式细胞术（FCM）PI单染法检测肿瘤细胞周期的再分布。结果 125Ⅰ粒子治疗组肿瘤体积明显缩小,瘤重减轻（P〈0.05）。第7、14、21、28天4个时间点治疗组HIF-1αmRNA的表达水平逐渐降低（P〈0.05）,对照组HIF-1αmRNA表达无明显改变（P≥0.05）,治疗组与对照组HIF-1αmRNA表达比较,差异有统计学意义（P〉0.05）。随着放射时间的延长,治疗组出现G2/M期细胞阻滞（P〈0.05）,G0/G1期、S期无明显改变（P〉0.05）。结论 125Ⅰ粒子近距离照射能够抑制HCT-116肿瘤细胞的生长,可能与125Ⅰ粒子近距离照射改变HCT116细胞周期分布并抑制肿瘤血管的新生有关。     

赫赛汀对鼻咽癌荷瘤裸鼠肿瘤生长影响的实验研究

目的：探讨赫赛汀（Herceptin）对HER-2/neu基因蛋白高表达的鼻咽癌荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响.方法：用鼻咽癌CNE-2Z细胞株接种于裸小鼠右腋下建立HER-2/neu基因蛋白高表达的裸鼠移植瘤模型.将已构建模型的裸鼠24只随机分为4组,每组6只,分别设阴性和阳性对照两组,Herceptin 10mg/kg和20mg/kg两实验组,以观察Herceptin对移植瘤体内生长的影响.结果：用Herceptin处理后的裸鼠移植瘤肿瘤体积均低于阴性对照组,其中10mg/kg剂量组与阴性对照组相比有统计学差异（P〈0.05）,但无量效关系;瘤重抑制率Herceptin 10mg/kg和20mg/kg分别为33.7%和23.3%,均未达到阳性标准;对裸小鼠生长无明显影响.结论：Herceptin对HER-2/neu基因过表达的鼻咽癌细胞株移植的荷瘤裸鼠肿瘤体内的生长具有一定的抑制作用,但效果并不满意.     

百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响

目的:探讨百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响。方法:雄性 BALB/c小鼠腋下注射肝癌H22细胞计数瘤液建立荷瘤模型,分为百合多糖组（100 mg/kg）、大蒜素组（40 mg/kg）、百合多糖低剂量+大蒜素组（50 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖中剂量+大蒜素组（100 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖高剂量+大蒜素组（150 mg/kg+40 mg/kg）、正常组、模型组和环磷酰胺组（30 mg/kg）。处理7 d后,观察小鼠的肿瘤重量,计算抑瘤率;胸腺、脾脏称重,计算胸腺指数和脾脏指数;ELISA法检测血清免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6水平及促血管生长因子VEGF水平。结果:大蒜素组、百合多糖中剂量+大蒜素组、百合多糖高剂量+大蒜素组抑瘤率分别为27.27%、34.68%和30.64%。百合多糖中剂量+大蒜素组和百合多糖高剂量+大蒜素组胸腺指数明显高于模型组(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-18水平(P<0.01)。百合多糖中剂量+大蒜素组TNF-α水平高于模型组(P<0.05)。百合多糖中剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-2水平(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组降低VEGF水平(P<0.05)。结论:百合多糖联合大蒜素能抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数,并促进小鼠分泌免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IL-2,减少分泌VEGF。     

CTX小剂量化疗在抗肺癌血管生成中的作用

目的：研究小剂量环磷酰胺（CTX）对肺癌血管生成的影响及其机制。方法：培养人肺腺癌A549细胞，建立裸鼠移植瘤模型，随机分为小剂量CTX组、大剂量CTX组和对照组进行化疗，观察裸鼠体重变化和抑瘤效果，免疫组化检测肿瘤微血管密度（MVD）、缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1 alpha，HIF-1α）和VEGF的表达。结果：小剂量组肿瘤生长缓慢，体重减轻等副作用明显小于大剂量组和对照组（P〈0．01或P〈0．05）；与大剂量组、对照组比较，小剂量组MVD、HIF-1α和VEGF表达均明显减少（P〈0．01），且小剂量组移植瘤中HIF-1α和VEGF、HIF-1α和MVD、VEGF和MVD之间均有相关性。结论：与大剂量组和对照组相比，小剂量CTX化疗组能更显著地抑制肺癌血管生成，抑瘤效果更明显，其机制可能与下调HIF-1α蛋白表达有关。     

雷帕霉素抑制人宫颈癌裸鼠移植瘤生长的作用及其机制北大核心CSCD

目的探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人宫颈癌HeLa裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其可能的机制。方法裸鼠皮下接种HeLa细胞,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为对照组、RAPA低剂量组(1.5 mg/kg)、RAPA高剂量组(4.5 mg/kg)。RAPA治疗过程中,检测肿瘤的体积、质量,免疫组织化学法及RT-PCR法检测低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1alpha,HIF-1α)mRNA、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)。结果 RAPA低剂量组、高剂量组肿瘤生长曲线均减缓;RAPA低剂量组及高剂量组裸鼠皮下移植瘤平均体积、重量与对照组比较显著减小(P<0.01);低剂量组与高剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。RAPA低剂量组及高剂量组VEGF蛋白、VEGF及HIF-1α含量、MVD与对照组比较显著减少(P均<0.01),低剂量与高剂量组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RAPA对裸鼠皮下移植瘤生长(体积、重量)具有明显的抑制作用,其可能机制是通过抑制HIF-1α的表达抑制VEGF的合成,进而抑制肿瘤组织的血管形成。     

罗格列酮对裸小鼠胃癌移植瘤细胞的抗增生及诱导分化作用

 目的 研究罗格列酮（ROS）对人胃癌MGC-803细胞裸小鼠移植瘤的抗增生和诱导分化作用，初步探讨其可能的机制。方法 随机分为未用药组（B组）、全反式维甲酸（ATRA）组（C组）、D1组（ROS 25 mg／kg）、D2组（ROS 50 mg／kg）、D3组（ROS 100 mg／kg）。用药后，观察移植瘤体积变化及计算抑瘤率；检测细胞周期及胃黏蛋白（Mucin 5AC）。结果 ROS能缩小瘤体体积，B组与未用药组比较差异有统计学意义（P＜0.01），且呈剂量依赖关系，D1、D2、D3组和C组差异无统计学意义（P＞0.05）；ROS使瘤细胞显示分化细胞的特征：细胞被阻滞于G0／G1期，S期细胞减少；Mucin 5AC表达增强。结论 ROS有一定的抑瘤作用，呈剂量依赖关系；ROS诱导胃癌移植瘤细胞分化，其机制可能是通过抑制癌细胞从G1期向S期过渡、降低细胞的增生能力、调控胃癌增生、分化相关基因表达实现的。     

ShRNA干扰FAP蛋白表达对小鼠Lewis肺癌生长的影响

摘 要：［目的］ 研究shRNA干扰成纤维细胞活化蛋白（FAP）表达对小鼠Lewis肺癌生长的影响并探讨可能的作用机制。［方法］ 建立C57雌鼠皮下移植瘤和肺转移瘤模型,随机分成3组：FAP-shRNA组、HK组、5%葡萄糖（5%GS）组,分别接受FAP-shRNA干扰质粒脂质体复合物、空载质粒脂质体复合物及5%葡萄糖水治疗。记录移植瘤大小、重量,肺转移瘤数目及肺湿重。检测各组FAP表达水平、肿瘤微血管密度、胶原纤维情况。［结果］ FAP-shRNA组小鼠皮下移植瘤生长较5%GS组和HK组缓慢。FAP-shRNA组的肺转移瘤结节数目和肺湿重均小于5%GS组和HK组。并且FAP-shRNA组FAP表达量下调,肿瘤微血管密度减少,Ⅰ型胶原蛋白表达增多,胶原纤维沉积增加且分布紊乱。［结论］ FAP-shRNA干扰质粒抗肿瘤作用可能是通过减少肿瘤血管生成,增加Ⅰ型胶原蛋白表达,最终改变肿瘤微环境而实现的。     

HIF-2α和Securin作为乳腺癌术后无瘤生存率预测指标的临床研究

摘 要：［目的］ 探讨缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）与securin在乳腺癌组织中的表达及其对无瘤生存率的意义。［方法］ 采用免疫组化SP法检测70例乳腺癌组织中HIF-2α和securin的表达,并分析其与乳腺癌临床疾病特征的关系及相关性。对患者进行无瘤生存期的随访,Kaplan Meier生存曲线分析HIF-2α和securin对无瘤生存期的意义。［结果］ 70例乳腺癌组织中 HIF-2α和securin阳性率、高表达率分别为30.0%（21/70）和34.3%（24/70）。Spearman相关分析表明,HIF-2α与securin的表达呈正相关（r=0.381,P=0.001）。Securin高表达和HIF-2α阳性与乳腺癌患者绝经情况、雌激素受体、孕酮受体、Her-2、淋巴结转移、ki67、TNM分期和肿瘤大小均无关（P>0.05）。Kaplan Meier生存曲线表明,HIF-2α阳性患者的无瘤生存期明显高于阴性患者。Cox模型多因素生存分析结果显示,HIF-2α是乳腺癌无瘤生存期的独立影响因素（P<0.05）。［结论］ HIF-2α和securin与乳腺癌的发生、发展密切相关,尤其是HIF-2α可能成为判断乳腺癌术后无瘤生存率的独立有效指标。     

RNA干扰技术裸鼠体内沉默缺氧诱导因子1α的表达对宫颈癌的抑瘤效应

目的 观察体内沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达后对宫颈癌的抑瘤效应,并探讨其可能的机制.方法 将实验用宫颈癌Siha细胞分为空白对照组(转染空载体)、无关对照组(转染无关对照质粒)和实验组(稳定转染pU-HIF-1α-shRNA的真核表达载体),接种裸鼠,建立裸鼠荷瘤模型,观测HIF-1α-shRNA对裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用.采用免疫组化SP法和Western blot 法,检测HIF-1α和葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)蛋白在肿瘤组织中的表达.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测HIF-1α、GLUTI和己糖激酶Ⅱ(HKⅡ)mRNA的表达.采用酶显色法,检测肿瘤组织中的乳酸含量.采用原位末端标记(TUNEL)法,检测细胞凋亡.结果 实验组裸鼠肿瘤的生长速度较空白对照组和无关对照组明显减慢(P＜0.05).接种50 d后处死裸鼠,实验组裸鼠的肿瘤重量为(1.90±0.28)g,也明显轻于空白对照组[(2.95±0.77)g]和无关对照组[(2.54±0.56)g,P＜0.01].实验组肿瘤组织中HIF-1α mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.45±0.04和1.25±0.92,GLUT1mRNA和蛋白的相对表达量分别为0.32±0.02和1.25±0.48,均明显低于空白对照组和无关对照组(均P＜0.05).实验组中HK Ⅱ mRNA和乳酸的含量均明显低于空白对照组和无关对照组(均P＜0.05),但凋亡细胞数较空白对照组和无关对照组明显增多(均P＜0.01).结论 以HIF-1α为靶点的基因治疗,可通过下调靶基因GLUT1和HKⅡ的表达来降低宫颈癌Siha细胞的糖酵解水平,促进肿瘤细胞凋亡,从而发挥抑制宫颈癌生长的作用.     

靶向递送携带HIF-2α siRNA的阳离子脂质体抑制肾透明细胞癌生长

目的:探索靶向缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)的阳离子脂质体-siRNA复合物（liposome-siRNA,Lipo-siRNA）是否可以有效干扰HIF-2α的表达并抑制肾透明细胞癌的生长。方法:使用ZetaSizer Nano及电镜鉴定Lipo-siRNA,荧光显微镜观察脂质体介导的siRNA转染786-O细胞的情况,CCK-8检测Lipo-siRNA对786-O细胞的抑制能力,Western blot检测Lipo-siRNA对HIF-2α表达的影响,活体成像检测Lipo-FAM-siRNA的体内转染情况,裸鼠皮下移植瘤模型检测Lipo-siRNA对肿瘤生长的抑制情况。结果:Zata电位、粒径大小及电镜观测结果均表明Lipo-siRNA构建成功;荧光显微镜观察表明脂质体可以有效介导FAM-siRNA对786-O细胞的转染（P＜0.05）;CCK-8实验表明Lipo-siRNA可以显著沉默HIF-2α表达（P＜0.01）并抑制786-O细胞的增殖（P＜0.05）;活体成像结果显示Lipo-siRNA可以显著富集于肿瘤部位（P＜0.001）;裸鼠皮下移植瘤模型显示Lipo-siRNA可以有效降低肿瘤组织中HIF-2α的表达（P＜0.05）,并抑制肿瘤生长（P＜0.05）。结论:携带靶向HIF-2α siRNA的阳离子脂质体可以在裸鼠体内外水平显著干扰HIF-2α的表达,抑制肾透明细胞癌细胞的生长,具有治疗肾透明细胞癌的潜力。     

HIF-1α对人结直肠癌细胞裸小鼠成瘤性的影响

背景与目的:目前对于中晚期结直肠癌患者尚无统一有效的治疗方法,探索影响结直肠肿瘤发生、发展的因子,有利于提高老年患者的治疗效果.通过裸小鼠移植瘤实验探究缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)对人结直肠癌细胞增殖及成瘤性的影响.方法:采用RNA干扰技术下调HIF-1α的...     

BMI-1通过激活PI3K/Akt信号通路促进裸鼠体内淋巴瘤生长的机制研究

目的:探讨原癌基因BMI-1对裸鼠体内淋巴瘤生长的影响及潜在分子机制。方法:培养鼠源淋巴瘤细胞FOX-NY,并对细胞进行BMI-1沉默和过表达处理,以及联合PI3K/Akt抑制剂处理。CCK-8法检测各组细胞增殖情况。通过腋窝下接种鼠源淋巴瘤细胞FOX-NY、沉默BMI-1的FOX-NY(BMI-1--FOX-NY)、过表达BMI-1的FOX-NY(BMI-1+-FOX-NY)建立裸鼠淋巴瘤动物模型。裸鼠分为:对照组、质粒空载组、BMI-1--FOX-NY组、BMI-1+-FOX-NY组。对裸鼠体重、肿瘤体积和质量等指标进行检测。采用PCR技术测定裸鼠体内BMI-1 mRNA表达。采用苏木精-伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理学情况。采用免疫组化染色和蛋白印迹检测裸鼠瘤体BMI-1、p-PI3K、p-Akt蛋白表达。结果:和空载组相比,BMI-1-组细胞增殖能力显著降低,BMI-1+组细胞增殖能力显著升高。和BMI-1+组细胞相比,BMI-1+-Miltefosine组细胞增殖能力显著降低。与空载组比较,BMI-1--FOX-NY组裸鼠体重显著降低(P＜0.001)、肿瘤体积显著减小(P＜0.001)、肿瘤组织病理学显著改善,瘤体BMI-1 mRNA水平显著降低(P＜0.001)、瘤体BMI-1、p-PI3K、p-Akt蛋白水平显著降低(P＜0.001)。反之,BMI-1+-FOX-NY组裸鼠体重显著增加(P＜0.01)、肿瘤体积显著增加(P＜0.01,P＜0.001)、肿瘤组织病理学显著恶化,瘤体BMI-1 mRNA水平显著升高(P＜0.001)、瘤体BMI-1、p-PI3K、p-Akt蛋白水平显著升高(P＜0.01,P＜0.001)。结论:BMI-1在淋巴瘤组织中表达显著升高,BMI-1可以促进DLBCL的生长并激活PI3K/Akt信号通路。     

lncRNA-miR210HG在非小细胞肺癌发生中的作用机制

目的:探讨lncRNA-miR210HG在非小细胞肺癌（NSCLC）发生中的作用机制。方法:收集2017年01月至2020年01月我院收治确诊的54例NSCLC患者的癌组织与癌旁组织,采用生物信息学在线程序预测lncRNA-miR210HG的潜在靶标miRNA,双荧光素酶实验检测NCI-H1650 NSCLC细胞中lncRNA-miR210HG和miRNA210的相互作用,qRT-PCR检测肺癌组织中lncRNA-miR210HG、miRNA210、HIF-1α、VEGF的mRNA表达水平,NCI-H1650 NSCLC细胞分别转染miRNA210类似物及抑制物后,采用qRT-PCR检测细胞水平lncRNA-miR210HG、HIF-1α与VEGF的mRNA表达。结果:lncRNA-miR210HG与miRNA210间存在互补结合序列,野生型lncRNA-miR210HG和miRNA210的荧光素酶活性低于对照组（P＜0.01）,且lncRNA-miR210HG与miRNA210的靶向结合是通过其3'-UTR区。NSCLC组织中lncRNA-miR210HG、miRNA210、HIF-1α（P＜0.001）及VEGF（P＜0.01）的mRNA表达水平均较癌旁组织中高,差异有统计学意义。NSCLC组织中lncRNA-miR210HG表达与miRNA210表达呈负相关。细胞实验发现,miRNA210过表达后,HIF-1α、VEGF、lncRNA-miR210HG的mRNA表达水平均下降,其中lncRNA-miR210HG、HIF-1α与对照组相比差异有统计学意义（lncRNA-miR210HG:P＜0.05;HIF-1α:P＜0.01）,miRNA210被抑制后,HIF-1α、VEGF、lncRNA-miR210HG的mRNA表达水平均较对照组升高,且差异均有统计学意义（lncRNA-miR210HG:P＜0.01;HIF-1α:P＜0.05;VEGF:P＜0.01）。结论:lncRNA-miR210HG 3'-UTR区通过与miRNA210的靶向结合,从而调控下游HIF-1α、VEGF的mRNA表达,可能参与了NSCLC的发生、发展。     

沉默UHRF1对人食管癌细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用及其机制探讨

目的:探讨沉默食管癌细胞泛素样含PHD和环指域1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,UHRF1)基因对裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及可能机制。方法:将 20只雌性裸鼠随机分为 4组:空载组(NC)、空载+照射组(NC+IR)、沉默UHRF1组(shUHRF1)、沉默UHRF1+照射组(shUHRF1+IR),每组5只,于裸鼠皮下接种Eca109食管癌细胞,构建裸鼠移植瘤模型。成瘤22天(肿瘤直径8 mm左右)开始给予放射线照射,1次2 Gy,共5次,每3 d测量1次移植瘤的最大径(a)和最短径(b),计算肿瘤体积(ab2/2),2周后处死裸鼠称量瘤体质量;采用TUNEL法检测各组移植瘤组织中细胞凋亡情况;Western blot检测各组移植瘤组织中UHRF1蛋白的表达情况;免疫组化方法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路关键蛋白的表达。结果:shUHRF1组、NC+IR 组以及shUHRF1+IR组中肿瘤体积的增加率均小于NC组(P＜0.05),其中shUHRF1+IR组较shUHRF1组、NC+IR组更能抑制移植瘤的生长;shUHRF1组、NC+IR组、shUHRF1+IR组UHRF1蛋白的表达均较NC组下降,其中shUHRF+IR组 UHRF1蛋白表达量下降水平高于其余两组(P＜0.05);shUHRF1组、NC+IR组、shUHRF1+IR 组肿瘤组织内均可观察到肿瘤细胞的凋亡,其中shUHRF1+IR 组肿瘤细胞凋亡率明显高于其余两组（P＜0.05）;与NC组相比,shUHRF1组、NC+IR组、shUHRF1+IR 组PTEN蛋白表达水平上调,p-AKT、p-mTOR的蛋白表达下降,其中shUHRF1+IR 组PTEN提高水平,p-AKT、p-mTOR的下降水平明显高于shUHRF1组及NC+IR组(P＜0.05)。结论:沉默UHRF1基因可以增加人食管癌细胞裸鼠移植瘤的放射敏感性,该作用可能与促进肿瘤细胞凋亡和抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路活性有关。     

c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探讨c-Myc在人胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:免疫组化和qRT-PCR检测胃癌组织及其癌旁组织中c-Myc的表达;qRT-PCR和Western blot检测人胃黏膜细胞GES-1和人胃癌细胞HGC-27、AGS、SGC-7901中c-Myc的表达;HGC-27细胞转染siRNA-NC和siRNA-c-Myc。48 h后,CCK-8检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测细胞低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、CXC亚家族受体4（cysteine X cysteine receptor 4,CXCR4）和基质细胞衍生因子（stromal cell derived factor-1,SDF-1）蛋白表达。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中c-Myc mRNA表达和免疫组化评分升高（P＜0.05）。与GES-1组相比,HGC-27组、SGC-7901组和AGS组中c-Myc mRNA和蛋白表达均升高（P＜0.05）。与siRNA-NC组相比,siRNA-c-Myc组细胞在24 h、48 h和72 h增殖能力减弱（P＜0.05）,G0/G1期细胞比例升高（P＜0.05）,G2/M和S期细胞比例降低（P＜0.05）,迁移细胞数和侵袭细胞数减少（P＜0.05）,HIF-1α、CXCR4和SDF-1蛋白表达降低（P＜0.05）。结论:敲低c-Myc可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导细胞周期阻滞,该作用可能是通过抑制HIF-1α/CXCR4通路实现的。     

CS-TPGS-b-(PCL-ran-PGA)纳米粒递送HIF-1α siRNA联合顺铂对鼻咽癌裸鼠移植瘤影响研究

目的 乏氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)增强抗肿瘤药物敏感性研究在国内外已有诸多报道.本研究拟探讨纳米聚合物壳聚糖-聚乙二醇1 000维生素E琥珀酸酯-聚乙内酯-聚乙醇酸[d-α-tocopheryl polyethylene glycol 1 000 succinate-b-poly(ε-caprolactone-ran-glycolide),CS-TPGS-b-(PCL-ran-PGA),简称CNP]包载HIF-1α小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)联合顺铂(cisplatin,DPP)对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的影响.方法 皮下接种CNE-2细胞建立人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,应用随机数字表法分磷酸盐缓冲液组(Control)、单纯纳米粒组(CNP,200 μg/kg)、单纯顺铂组(DPP,100 μg/kg)、单纯纳米粒联合顺铂组(CNP 200 μg/kg+DPP 100 μg/kg)、载HIF-1α siRNA纳米粒组(CNP-siRNA,200 μg/kg)和载HIF-1α siRNA纳米粒联合顺铂组(CNP-siRNA 200μg/kg+DPP 100μg/kg)6组.每组5只,腹腔注射3d1次,共7次.干预过程中3d测量1次肿瘤体积,治疗22d后拉颈处死裸鼠,称取瘤质量,计算抑瘤率;利用蛋白质印迹与RT-PCR检测移植瘤中HIF-1α和多重耐药基因-1/P糖蛋白(multidurg resistance gene 1/P-glycoprotein,MDR-1/P-gp)基因蛋白表达水平,HE染色观察各组肿瘤组织病理形态改变.结果 与Control组相比,CNP组抑瘤率为18.32％,DPP组为37.59％,CNP-siRNA组为43.32％,CNP+ DPP组为47.64％,CNP-siRNA+ DPP组为70.21％.其中CNP-siRNA+DPP组抑瘤效果最为显著,与其他治疗组相比,差异有统计学意义,F=253.511,P＜0.001.在HIF-1α mRNA表达上,与Control组相比,CNP组mRNA表达量为0.89±0.04,DPP组为0.99±0.02,CNP-siRNA组为0.95±0.02,CNP+ DPP组为0.35±0.04,CNP-siRNA+DPP组为0.15±0.07.CNP-siRNA+ DPP组mRNA抑制效果最为显著,与其他组相比,差异有统计学意义,F=351.194,P＜0.001.蛋白质印迹结果亦显示,CNP-siRNA+ DPP组中HIF-1α蛋白条带宽度明显低于其余各实验组,MDR-1/P-gp表达水平表现出与HIF-1α基因蛋白表达相似的实验结果.HE结果表明,CNP-siRNA+ DPP组能够显著促进肿瘤细胞坏死及凋亡.结论利用CNP纳米聚合物递送HIF-1α siRNA联合DDP能够有效下调肿瘤细胞HIF-1α及MDR 1/P-gp基因蛋白表达,抑制肿瘤生长,促进肿瘤细胞坏死凋亡.新型纳米聚合物CNP作为递送siRNA的有效载体,在肿瘤基因靶向治疗中具有较高的应用前景.     

125I粒子植入联合放射治疗对A549裸鼠移植瘤生长及HIF-1表达的影响

 【摘要】　目的　研究125I粒子植入联合放射治疗对A549裸鼠移植瘤生长及乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响。方法　应用裸鼠建立肺腺癌A549移植瘤模型,待平均瘤体积达到（300±50）mm3时40只裸鼠随机分成4组（每组10只）,对照组 ：不做任何处理;单纯放射治疗组 ：第1天予单次外照射,6 MV-X线,10 Gy;125I粒子植入组 ：肿瘤中心植入1枚活度27.75 MBq的125I粒子;放疗加125I粒子植入组（联合治疗组）：第1天在肿瘤中心植入1枚活度27.75 MBq的125I粒子的同时予单次外照射,6MV-X线,10 Gy。治疗后共观察15 d,绘制肿瘤生长曲线,测量各组肿瘤体积并计算抑瘤率,分别用免疫组织化学及蛋白免疫印迹方法测定HIF-1α的表达。结果　治疗第8天起,瘤体积联合治疗组（209±21）mm3与对照组（322±30）mm3相比差异有统计学意义（t＝46.4,P＝0.000）。第15天后,单纯放射治疗组、125I粒子植入组、联合治疗组抑瘤率依次为45.9 %、44.4 %、69.4 %,联合治疗组与单纯放射治疗组比较差异有统计学意义（t＝52.03,P＝0.000）,联合治疗组与125I粒子植入组比较差异有统计学意义（t＝53.98,P＝0.000）,单纯放射治疗组和125I粒子植入组相比,差异无统计学意义（t＝0.591,P＝0.596）。联合治疗组与其他各组相比HIF-1α改变差异均无统计学意义（P＝0.342）。结论　放射治疗联合125I粒子植入能显著抑制转染人类肺腺癌A549裸鼠移植肿瘤的生长,但未抑制肿瘤细胞HIF-1α的表达。